Normas Internacionales de Información Financiera Aplicación de la NIC-23 costos por préstamos de las NIIF Integrales en la empresa Artes Imprimere,S.A. en el periodo 2017

El presente seminario de graduación se enfocó en la aplicación de la NIC 23 Costos por préstamos de las NIIF Integrales, es de interés por la poca información e inexistencias de seminarios en la universidad. Se definió de forma apropiada el registro contable conforme esta norma y brindando un análisis de los resultados de la comparación de la NIC 23 con Sección 25. Debido a la necesidad de llevar las finanzas de sus negocios ordenado, segregado y con medidas de valor, se crean los Principios de Contabilidad Generalmente Aceptados, posteriormente surgen las Normas Internacionales de Información Financiera gracias al comercio internacional, esto genera cambios en la práctica contable. Las NIIF Integrales en la NIC 23 Costos por préstamos, se basa en la capitalización de los gastos incurridos por los prestamos los cuales pueden ser intereses, comisiones, mantenimiento de valor, entre otros, cuando sean generados por la adquisición, construcción o producción de un activo que generen beneficios económicos futuros y se midan con fiabilidad. Cesará su capitalización una vez sea un activo apto listo para el uso al que sea destinado. Existen normas que tienen estrecha relación con las NIC 23 Costos por préstamos, a como son las NIC 2 Existencias de inventario, NIC 16 Propiedad, planta y equipo, NIC 17 Arrendamientos y NIC 39 Instrumentos financieros, los cuales brindan información adicional para la comprensión de la norma y su aplicación. Las normas NIC 23 Costos por préstamos de las NIIF Integrales y Sección 25 de NIIF para PYMES fueron aplicadas en la empresa ARTES IMPRIMERE, S.A., en el período 2017 con el mismo caso práctico para determinar el impacto económico que generan en los registros contables

Familial Combined Hyperlipidemia (FCH) Patients with High Triglyceride Levels Present with Worse Lipoprotein Function Than FCH Patients with Isolated Hypercholesterolemia

Lipoprotein characteristics were analyzed in familial combined hyperlipidemia (FCH) patients before and after statin treatment. Twenty-six FCH patients were classified according to the presence (HTG group, n = 13) or absence (normotriglyceridemic (NTG) group, n = 13) of hypertriglyceridemia. Fifteen healthy subjects comprised the control group. Lipid profile, inflammation markers, and qualitative characteristics of lipoproteins were assessed. Both groups of FCH subjects showed high levels of plasma C-reactive protein (CRP), lipoprotein-associated phospholipase A2 (Lp-PLA2) activity and apolipoprotein J. Statins reverted the increased levels of Lp-PLA2 and CRP. Lipoprotein composition alterations detected in FCH subjects were much more frequent in the HTG group, leading to dysfunctional low-density lipoproteins (LDL) and high-density lipoproteins (HDL). In the HTG group, LDL was smaller, more susceptible to oxidation, and contained more electronegative LDL (LDL(-)) compared to the NTG and control groups. Regarding HDL, the HTG group had less Lp-PLA2 activity than the NTG and control groups. HDL from both FCH groups was less anti-inflammatory than HDL from the control group. Statins increased LDL size, decreased LDL(-), and lowered Lp-PLA2 in HDL from HTG. In summary, pro-atherogenic alterations were more frequent and severe in the HTG group. Statins improved some alterations, but many remained unchanged in HTG

Comparison of Plasma Lipoprotein Composition and Function in Cerebral Amyloid Angiopathy and Alzheimer’s Disease

Malaltia d'Alzheimer; Apolipoproteïnes; Angiopatia amiloide cerebralEnfermedad de Alzheimer; Apolipoproteínas; Angiopatía amiloide cerebralAlzheimer’s disease; Apolipoproteins; Cerebral amyloid angiopathyCerebral amyloid angiopathy (CAA) refers to beta-amyloid (Aβ) deposition in brain vessels and is clinically the main cause of lobar intracerebral hemorrhage (ICH). Aβ can also accumulate in brain parenchyma forming neuritic plaques in Alzheimer’s disease (AD). Our study aimed to determine whether the peripheral lipid profile and lipoprotein composition are associated with cerebral beta-amyloidosis pathology and may reflect biological differences in AD and CAA. For this purpose, lipid and apolipoproteins levels were analyzed in plasma from 51 ICH-CAA patients (collected during the chronic phase of the disease), 60 AD patients, and 60 control subjects. Lipoproteins (VLDL, LDL, and HDL) were isolated and their composition and pro/antioxidant ability were determined. We observed that alterations in the lipid profile and lipoprotein composition were remarkable in the ICH-CAA group compared to control subjects, whereas the AD group presented no specific alterations compared with controls. ICH-CAA patients presented an atheroprotective profile, which consisted of lower total and LDL cholesterol levels. Plasma from chronic ICH-CAA patients also showed a redistribution of ApoC-III from HDL to VLDL and a higher ApoE/ApoC-III ratio in HDL. Whether these alterations reflect a protective response or have a causative effect on the pathology requires further investigation.This research was funded by Instituto de Salud Carlos III (co-financed by the European Regional Development Fund FEDER “Una manera de hacer Europa”), grant numbers PI13/00364, PI16/00471, PI14/01134 and PI17/00275. A.R.-U. was funded by Instituto de Salud Carlos III predoctoral contract FI17/00031. The Neurovascular Research Laboratory is part of the INVICTUS+ network, ISCIII, Spain [RD16/0019/0021]. J.L.S.-Q. is a member of the CIBER of Diabetes and Metabolism (CIBERDEM), ISCIII, Spain. M.H.-G. is supported by the Miguel Servet programme, ISCIII, Spain [CPII17/00010]. A.R.-U., N.P., S.B. and J.L.S.-Q. are members of the Quality Research Group 2017-SGR-1149 from Generalitat de Catalunya. A.R.-U., N.P., S.B. and J.L.S.-Q. are members of the Group of Vascular Biology from the Spanish Atherosclerosis Society

Subcutaneous Administration of Apolipoprotein J-Derived Mimetic Peptide -[113-122]apoJ Improves LDL and HDL Function and Prevents Atherosclerosis in LDLR-KO Mice

Mimetic peptides are potential therapeutic agents for atherosclerosis. -[113-122]apolipoprotein (apo) J (-[113-122]apoJ) is a 10-residue peptide that is predicted to form a class G* amphipathic helix 6 from apoJ; it shows anti-inflammatory and anti-atherogenic properties. In the present study, we analyzed the effect of -[113-122]apoJ in low-density lipoprotein receptor knockout mice(LDLR-KO) on the development of atherosclerosis and lipoprotein function. Fifteen-week-old female LDLR-KO mice fed an atherogenic Western-type diet were treated for eight weeks with -[113-122]apoJ peptide, a scrambled peptide, or vehicle. Peptides were administered subcutaneously three days per week (200 µg in 100 µL of saline). After euthanasia, blood and hearts were collected and the aortic arch was analyzed for the presence of atherosclerotic lesions. Lipoproteins were isolated and their composition and functionality were studied. The extent of atherosclerotic lesions was 43% lower with -[113-122]apoJ treatment than with the vehicle or scramble. The lipid profile was similar between groups, but the high-density lipoprotein (HDL) of -[113-122]apoJ-treated mice had a higher antioxidant capacity and increased ability to promote cholesterol efflux than the control group. In addition, low-density lipoprotein (LDL) from -[113-122]apoJ-treated mice was more resistant to induced aggregation and presented lower electronegativity than in mice treated with -[113-122]apoJ. Our results demonstrate that the -[113-122]apoJ peptide prevents the extent of atherosclerotic lesions, which could be partially explained by the improvement of lipoprotein functionality

Human hepatic lipase overexpression in mice induces hepatic statosis and obesity through promoting hepatic lipogenesis and chite adipose tissue lipolysisi and fatty acid uptake

Human hepatic lipase (hHL) is mainly localized on the hepatocyte cell surface where it hydrolyzes lipids from remnant lipoproteins and high density lipoproteins and promotes their hepatic selective uptake. Furthermore, hepatic lipase (HL) is closely associated with obesity in multiple studies. Therefore, HL may play a key role on lipid homeostasis in liver and white adipose tissue (WAT). In the present study, we aimed to evaluate the effects of hHL expression on hepatic and white adipose triglyceride metabolism in vivo. Experiments were carried out in hHL transgenic and wild-type mice fed a Western-type diet. Triglyceride metabolism studies included β-oxidation and de novo lipogenesis in liver and WAT, hepatic triglyceride secretion, and adipose lipoprotein lipase (LPL)-mediated free fatty acid (FFA) lipolysis and influx. The expression of hHL promoted hepatic triglyceride accumulation and de novo lipogenesis without affecting triglyceride secretion, and this was associated with an upregulation of Srebf1 as well as the main genes controlling the synthesis of fatty acids. Transgenic mice also exhibited more adiposity and an increased LPL-mediated FFA influx into the WAT without affecting glucose tolerance. Our results demonstrate that hHL promoted hepatic steatosis in mice mainly by upregulating de novo lipogenesis. HL also upregulated WAT LPL and promoted triglyceride-rich lipoprotein hydrolysis and adipose FFA uptake. These data support the important role of hHL in regulating hepatic lipid homeostasis and confirm the broad cardiometabolic role of HL

Comparison of Plasma Lipoprotein Composition and Function in Cerebral Amyloid Angiopathy and Alzheimer’s Disease

Cerebral amyloid angiopathy (CAA) refers to beta-amyloid (Aβ) deposition in brain vessels and is clinically the main cause of lobar intracerebral hemorrhage (ICH). Aβ can also accumulate in brain parenchyma forming neuritic plaques in Alzheimer's disease (AD). Our study aimed to determine whether the peripheral lipid profile and lipoprotein composition are associated with cerebral beta-amyloidosis pathology and may reflect biological differences in AD and CAA. For this purpose, lipid and apolipoproteins levels were analyzed in plasma from 51 ICH-CAA patients (collected during the chronic phase of the disease), 60 AD patients, and 60 control subjects. Lipoproteins (VLDL, LDL, and HDL) were isolated and their composition and pro/antioxidant ability were determined. We observed that alterations in the lipid profile and lipoprotein composition were remarkable in the ICH-CAA group compared to control subjects, whereas the AD group presented no specific alterations compared with controls. ICH-CAA patients presented an atheroprotective profile, which consisted of lower total and LDL cholesterol levels. Plasma from chronic ICH-CAA patients also showed a redistribution of ApoC-III from HDL to VLDL and a higher ApoE/ApoC-III ratio in HDL. Whether these alterations reflect a protective response or have a causative effect on the pathology requires further investigation

Proceedings of the Thirteenth International Society of Sports Nutrition (ISSN) Conference and Expo

Meeting Abstracts: Proceedings of the Thirteenth International Society of Sports Nutrition (ISSN) Conference and Expo Clearwater Beach, FL, USA. 9-11 June 201

D-[113–122]apoJ mimetic peptide as a therapy against atherosclerosis. In vitro and in vivo approaches

Els pèptids mimètics són potencials agents terapèutics per a la prevenció de l’aterosclerosi. D- [113-122] apoJ és un pèptid de classe G * de 10 residus de l’apolipoproteïna J (apoJ); posseeix propietats antiinflamatòries i anti-aterogèniques. Això ens ha portat a estudiar el seu efecte sobre el procés d’agregació in vitro i in vivo de partícules de les lipoproteïnes de baixa densitat (LDL), el qual és un esdeveniment d’hora en l’evolució de l’aterosclerosi. També analitzem l’efecte d’aquest pèptid en ratolins knockout de el receptor de lipoproteïnes de baixa densitat (LDLR-KO) sobre el desenvolupament de l’aterosclerosi i la funció de les lipoproteïnes. Per als estudis in vitro, les partícules de LDL en presència o absència de l’pèptid D- [113-122] apoJ es van incubar a 37 ° C amb esfingomielinasa (SMASA) o es van deixar afegir espontàniament a temperatura ambient. El procés d’agregació es va analitzar mitjançant cromatografia d’exclusió per mida (SEC), electroforesi en gel de gradient natiu (GGE), absorbància a 405 nm, dispersió dinàmica de llum (DLS) i microscòpia electrònica de transmissió (TEM). A més, es va emprar dicroisme circular per determinar canvis en l’estructura secundària de apoB. El pèptid D- [113-122] apoJ va inhibir l’agregació de LDL tant induïda per SMASA com espontània en una proporció equimolar de pèptid D- [113-122] apoJ a apoB-100. Tots els mètodes van mostrar que aquest pèptid retardava la progressió de l’agregació de LDL induïda per SMASA en temps d’incubació prolongats i no es va observar cap efecte de D- [113-122] apoJ sobre l’estructura secundària de apoB. Els experiments d’unió van mostrar que aquest pèptid presenta baixa afinitat per la LDL nativa, però s’uneix fàcilment a la LDL durant les primeres etapes d’agregació. Per als estudis in vivo, ratolins LDLR-KO alimentats amb una dieta aterogènica de tipus occidental es van tractar per via subctánea (tres dies a la setmana) durant vuit setmanes amb pèptid D- [113-122] apoJ, un pèptid scramble o un vehicle . A l’acabar el tratamento i després de l’eutanàsia, es va extreure sang i es va estudiar l’arc aòrtic a la recerca de lesions ateroscleròtiques. Es van aïllar les lipoproteïnes i es va analitzar la seva composició i funcionalitat. Es va observar que l’àrea de les lesions ateroscleròtiques va ser un 43% menor amb el tractament amb D- [113-122] apoJ que amb el vehicle o scramble. El perfil lipídic va ser similar entre els grups, però la lipoproteïna d’alta densitat (HDL) dels ratolins tractats amb D-[113-122] apoJ tenia una major capacitat antioxidant i una major capacitat per promoure el eflux de colesterol que el grup control . A més, la lipoproteïna de baixa densitat (LDL) de ratolins tractats amb D-[113-122] apoJ va ser més resistent a l’agregació induïda i presentar menor electronegativitat que en els ratolins tractats amb D-[113-122] apoJ. Aquests resultats demostren que el pèptid D- [113-122] apoJ no només prevé l’agregació de LDL induïda per SMASA in vitro i in vivo, sinó que també prevé l’extensió de les lesions ateroscleròtiques en models de ratolins, el que podria explicar-se parcialment per la millora de la funcionalitat de les lipoproteïnes. Els nostres resultats obren la possibilitat de l’ús d’aquest pèptid mimètic com a eina terapèutica davant l’arteriosclerosi.Los péptidos miméticos son potenciales agentes terapéuticos para la prevención de la aterosclerosis. D- [113-122] apoJ es un péptido de clase G* de 10 residuos de la apolipoproteína J (apoJ); posee propiedades antiinflamatorias y anti-aterogénicas. Esto nos ha llevado a estudiar su efecto sobre el proceso de agregación in vitro e in vivo de partículas de las lipoproteínas de baja densidad (LDL), el cual es un evento temprano en la evolución de la aterosclerosis. También analizamos el efecto de este péptido en ratones knockout del receptor de lipoproteínas de baja densidad (LDLR-KO) sobre el desarrollo de la aterosclerosis y la función de las lipoproteínas. Para los estudios in vitro, las partículas de LDL en presencia o ausencia del péptido D- [113-122] apoJ se incubaron a 37 ° C con esfingomielinasa (SMasa) o se dejaron agregar espontáneamente a temperatura ambiente. El proceso de agregación se analizó mediante cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), electroforesis en gel de gradiente nativo (GGE), absorbancia a 405 nm, dispersión dinámica de luz (DLS) y microscopía electrónica de transmisión (TEM). Además, se empleó dicroísmo circular para determinar cambios en la estructura secundaria de apoB. El péptido D- [113-122] apoJ inhibió la agregación de LDL tanto inducida por SMasa como espontánea en una proporción equimolar de péptido D- [113-122] apoJ a apoB-100. Todos los métodos mostraron que este péptido retardaba la progresión de la agregación de LDL inducida por SMasa en tiempos de incubación prolongados y no se observó ningún efecto de D- [113-122] apoJ sobre la estructura secundaria de apoB. Los experimentos de unión mostraron que este péptido presenta baja afinidad por la LDL nativa, pero se une fácilmente a la LDL durante las primeras etapas de agregación. Para los estudios in vivo, ratones LDLR-KO alimentados con una dieta aterogénica de tipo occidental se trataron por vía subctánea (tres días a la semana) durante ocho semanas con péptido D- [113-122] apoJ, un péptido scramble o un vehículo. Al finalizar el tratamento y después de la eutanasia, se extrajo sangre y se estudió el arco aórtico en busca de lesiones ateroscleróticas. Se aislaron las lipoproteínas y se analizó su composición y funcionalidad. Se observó que el área de las lesiones ateroscleróticas fue un 43% menor con el tratamiento con D- [113-122] apoJ que con el vehículo o scramble. El perfil lipídico fue similar entre los grupos, pero la lipoproteína de alta densidad (HDL) de los ratones tratados con D- [113-122] apoJ tenía una mayor capacidad antioxidante y una mayor capacidad para promover el eflujo de colesterol que el grupo control. Además, la lipoproteína de baja densidad (LDL) de ratones tratados con D- [113-122] apoJ fue más resistente a la agregación inducida y presentó menor electronegatividad que en los ratones tratados con D- [113-122] apoJ. Estos resultados demuestran que el péptido D- [113-122] apoJ no solo previene la agregación de LDL inducida por SMasa in vitro e in vivo, sino que también previene la extensión de las lesiones ateroscleróticas en modelos de ratones, lo que podría explicarse parcialmente por la mejora de la funcionalidad de las lipoproteínas. Nuestros resultados abren la posibilidad del uso de este péptido mimético como herramienta terapéutica frente la arteriosclerosis.Mimetic peptides are potential therapeutic agents for atherosclerosis prevention. D-[113–122]apolipoprotein (apo) J (D-[113–122]apoJ) is a 10-residue class G* peptide from apolipoprotein J(apoJ); it possesses anti-inflammatory and anti-atherogenic properties. This prompted us to study its effect on the in vitro and in vivo aggregation process of low-density lipoprotein (LDL) particles, an early event in the evolution of atherosclerosis. We also analyzed the effect of this peptide in low-density lipoprotein receptor knockout mice (LDLR-KO) on the development of atherosclerosis and lipoprotein function. For in vitro studies, LDL particles in presence or absence of D-[113–122]apoJ peptide were incubated at 37 °C with sphingomyelinase (SMase) or were left to aggregate spontaneously at room temperature. The aggregation process was analyzed by size-exclusion chromatography (SEC), native gradient gel electrophoresis (GGE), absorbance at 405 nm, dynamic light scattering (DLS), and transmission electronic microscopy (TEM). Additionally, circular dichroism was employed to determine changes in the secondary structure of apoB. At an equimolar ratio of D-[113–122]apoJ peptide to apoB-100, D-[113–122]apoJ inhibited both SMase-induced or spontaneous LDL aggregation. All methods showed that this peptide retarded the progression of SMase-induced LDL aggregation at long incubation times. No effect of D-[113–122]apoJ on apoB secondary structure was observed. Binding experiments showed that this peptide presents low affinity for native LDL but it binds readily to LDL during the first stages of aggregation. For in vivo studies, female LDLR-KO mice fed an atherogenic Western-type diet were treated for eight weeks with D-[113–122]apoJ peptide, a scrambled peptide, or vehicle. Peptides were dispensed subcutaneously three days per week. After euthanasia, blood was collected and the aortic arch was studied for the presence of atherosclerotic lesions. Lipoproteins were isolated and their composition and functionality were analyzed. The area of atherosclerotic lesions was 43% lower with D-[113–122]apoJ treatment than with the vehicle or scramble. The lipid profile was similar between groups, but the high-density lipoprotein (HDL) of D-[113–122]apoJ-treated mice had a higher antioxidant capacity and increased ability to promote cholesterol efflux than the control group. Moreover, low-density lipoprotein (LDL) from D-[113–122]apoJ-treated mice was more resistant to induced aggregation and presented lower electronegativity than in mice treated with D-[113–122]apoJ. These results demonstrate that D-[113–122]apoJ peptide not only prevents in vitro and in vivo SMase-induced LDL aggregation but also prevents the extent of atherosclerotic lesions in mice models, which could be partially explained by the improvement of lipoprotein functionality. Our results open the possibility for the use of this mimetic peptide as a therapeutic tool.Universitat Autònoma de Barcelona. Programa de Doctorat en Bioquímica, Biologia Molecular i Biomedicin

D-[113-122]apoJ mimetic peptide as a therapy against atherosclerosis. In vitro and in vivo approaches

Els pèptids mimètics són potencials agents terapèutics per a la prevenció de l'aterosclerosi. D- [113-122] apoJ és un pèptid de classe G * de 10 residus de l'apolipoproteïna J (apoJ); posseeix propietats antiinflamatòries i anti-aterogèniques. Això ens ha portat a estudiar el seu efecte sobre el procés d'agregació in vitro i in vivo de partícules de les lipoproteïnes de baixa densitat (LDL), el qual és un esdeveniment d'hora en l'evolució de l'aterosclerosi. També analitzem l'efecte d'aquest pèptid en ratolins knockout de el receptor de lipoproteïnes de baixa densitat (LDLR-KO) sobre el desenvolupament de l'aterosclerosi i la funció de les lipoproteïnes. Per als estudis in vitro, les partícules de LDL en presència o absència de l'pèptid D- [113-122] apoJ es van incubar a 37 ° C amb esfingomielinasa (SMASA) o es van deixar afegir espontàniament a temperatura ambient. El procés d'agregació es va analitzar mitjançant cromatografia d'exclusió per mida (SEC), electroforesi en gel de gradient natiu (GGE), absorbància a 405 nm, dispersió dinàmica de llum (DLS) i microscòpia electrònica de transmissió (TEM). A més, es va emprar dicroisme circular per determinar canvis en l'estructura secundària de apoB. El pèptid D- [113-122] apoJ va inhibir l'agregació de LDL tant induïda per SMASA com espontània en una proporció equimolar de pèptid D- [113-122] apoJ a apoB-100. Tots els mètodes van mostrar que aquest pèptid retardava la progressió de l'agregació de LDL induïda per SMASA en temps d'incubació prolongats i no es va observar cap efecte de D- [113-122] apoJ sobre l'estructura secundària de apoB. Els experiments d'unió van mostrar que aquest pèptid presenta baixa afinitat per la LDL nativa, però s'uneix fàcilment a la LDL durant les primeres etapes d'agregació. Per als estudis in vivo, ratolins LDLR-KO alimentats amb una dieta aterogènica de tipus occidental es van tractar per via subctánea (tres dies a la setmana) durant vuit setmanes amb pèptid D- [113-122] apoJ, un pèptid scramble o un vehicle . A l'acabar el tratamento i després de l'eutanàsia, es va extreure sang i es va estudiar l'arc aòrtic a la recerca de lesions ateroscleròtiques. Es van aïllar les lipoproteïnes i es va analitzar la seva composició i funcionalitat. Es va observar que l'àrea de les lesions ateroscleròtiques va ser un 43% menor amb el tractament amb D- [113-122] apoJ que amb el vehicle o scramble. El perfil lipídic va ser similar entre els grups, però la lipoproteïna d'alta densitat (HDL) dels ratolins tractats amb D-[113-122] apoJ tenia una major capacitat antioxidant i una major capacitat per promoure el eflux de colesterol que el grup control . A més, la lipoproteïna de baixa densitat (LDL) de ratolins tractats amb D-[113-122] apoJ va ser més resistent a l'agregació induïda i presentar menor electronegativitat que en els ratolins tractats amb D-[113-122] apoJ. Aquests resultats demostren que el pèptid D- [113-122] apoJ no només prevé l'agregació de LDL induïda per SMASA in vitro i in vivo, sinó que també prevé l'extensió de les lesions ateroscleròtiques en models de ratolins, el que podria explicar-se parcialment per la millora de la funcionalitat de les lipoproteïnes. Els nostres resultats obren la possibilitat de l'ús d'aquest pèptid mimètic com a eina terapèutica davant l'arteriosclerosi.Los péptidos miméticos son potenciales agentes terapéuticos para la prevención de la aterosclerosis. D- [113-122] apoJ es un péptido de clase G* de 10 residuos de la apolipoproteína J (apoJ); posee propiedades antiinflamatorias y anti-aterogénicas. Esto nos ha llevado a estudiar su efecto sobre el proceso de agregación in vitro e in vivo de partículas de las lipoproteínas de baja densidad (LDL), el cual es un evento temprano en la evolución de la aterosclerosis. También analizamos el efecto de este péptido en ratones knockout del receptor de lipoproteínas de baja densidad (LDLR-KO) sobre el desarrollo de la aterosclerosis y la función de las lipoproteínas. Para los estudios in vitro, las partículas de LDL en presencia o ausencia del péptido D- [113-122] apoJ se incubaron a 37 ° C con esfingomielinasa (SMasa) o se dejaron agregar espontáneamente a temperatura ambiente. El proceso de agregación se analizó mediante cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), electroforesis en gel de gradiente nativo (GGE), absorbancia a 405 nm, dispersión dinámica de luz (DLS) y microscopía electrónica de transmisión (TEM). Además, se empleó dicroísmo circular para determinar cambios en la estructura secundaria de apoB. El péptido D- [113-122] apoJ inhibió la agregación de LDL tanto inducida por SMasa como espontánea en una proporción equimolar de péptido D- [113-122] apoJ a apoB-100. Todos los métodos mostraron que este péptido retardaba la progresión de la agregación de LDL inducida por SMasa en tiempos de incubación prolongados y no se observó ningún efecto de D- [113-122] apoJ sobre la estructura secundaria de apoB. Los experimentos de unión mostraron que este péptido presenta baja afinidad por la LDL nativa, pero se une fácilmente a la LDL durante las primeras etapas de agregación. Para los estudios in vivo, ratones LDLR-KO alimentados con una dieta aterogénica de tipo occidental se trataron por vía subctánea (tres días a la semana) durante ocho semanas con péptido D- [113-122] apoJ, un péptido scramble o un vehículo. Al finalizar el tratamento y después de la eutanasia, se extrajo sangre y se estudió el arco aórtico en busca de lesiones ateroscleróticas. Se aislaron las lipoproteínas y se analizó su composición y funcionalidad. Se observó que el área de las lesiones ateroscleróticas fue un 43% menor con el tratamiento con D- [113-122] apoJ que con el vehículo o scramble. El perfil lipídico fue similar entre los grupos, pero la lipoproteína de alta densidad (HDL) de los ratones tratados con D- [113-122] apoJ tenía una mayor capacidad antioxidante y una mayor capacidad para promover el eflujo de colesterol que el grupo control. Además, la lipoproteína de baja densidad (LDL) de ratones tratados con D- [113-122] apoJ fue más resistente a la agregación inducida y presentó menor electronegatividad que en los ratones tratados con D- [113-122] apoJ. Estos resultados demuestran que el péptido D- [113-122] apoJ no solo previene la agregación de LDL inducida por SMasa in vitro e in vivo, sino que también previene la extensión de las lesiones ateroscleróticas en modelos de ratones, lo que podría explicarse parcialmente por la mejora de la funcionalidad de las lipoproteínas. Nuestros resultados abren la posibilidad del uso de este péptido mimético como herramienta terapéutica frente la arteriosclerosis.Mimetic peptides are potential therapeutic agents for atherosclerosis prevention. D-[113-122]apolipoprotein (apo) J (D-[113-122]apoJ) is a 10-residue class G* peptide from apolipoprotein J(apoJ); it possesses anti-inflammatory and anti-atherogenic properties. This prompted us to study its effect on the in vitro and in vivo aggregation process of low-density lipoprotein (LDL) particles, an early event in the evolution of atherosclerosis. We also analyzed the effect of this peptide in low-density lipoprotein receptor knockout mice (LDLR-KO) on the development of atherosclerosis and lipoprotein function. For in vitro studies, LDL particles in presence or absence of D-[113-122]apoJ peptide were incubated at 37 °C with sphingomyelinase (SMase) or were left to aggregate spontaneously at room temperature. The aggregation process was analyzed by size-exclusion chromatography (SEC), native gradient gel electrophoresis (GGE), absorbance at 405 nm, dynamic light scattering (DLS), and transmission electronic microscopy (TEM). Additionally, circular dichroism was employed to determine changes in the secondary structure of apoB. At an equimolar ratio of D-[113-122]apoJ peptide to apoB-100, D-[113-122]apoJ inhibited both SMase-induced or spontaneous LDL aggregation. All methods showed that this peptide retarded the progression of SMase-induced LDL aggregation at long incubation times. No effect of D-[113-122]apoJ on apoB secondary structure was observed. Binding experiments showed that this peptide presents low affinity for native LDL but it binds readily to LDL during the first stages of aggregation. For in vivo studies, female LDLR-KO mice fed an atherogenic Western-type diet were treated for eight weeks with D-[113-122]apoJ peptide, a scrambled peptide, or vehicle. Peptides were dispensed subcutaneously three days per week. After euthanasia, blood was collected and the aortic arch was studied for the presence of atherosclerotic lesions. Lipoproteins were isolated and their composition and functionality were analyzed. The area of atherosclerotic lesions was 43% lower with D-[113-122]apoJ treatment than with the vehicle or scramble. The lipid profile was similar between groups, but the high-density lipoprotein (HDL) of D-[113-122]apoJ-treated mice had a higher antioxidant capacity and increased ability to promote cholesterol efflux than the control group. Moreover, low-density lipoprotein (LDL) from D-[113-122]apoJ-treated mice was more resistant to induced aggregation and presented lower electronegativity than in mice treated with D-[113-122]apoJ. These results demonstrate that D-[113-122]apoJ peptide not only prevents in vitro and in vivo SMase-induced LDL aggregation but also prevents the extent of atherosclerotic lesions in mice models, which could be partially explained by the improvement of lipoprotein functionality. Our results open the possibility for the use of this mimetic peptide as a therapeutic tool

Electronegative LDL induces MMP-9 and TIMP-1 release in monocytes through CD14 activation: Inhibitory effect of glycosaminoglycan sulodexide

Electronegative LDL (LDL(-)) is involved in atherosclerosis through the activation of the TLR4/CD14 inflammatory pathway in monocytes. Matrix metalloproteinases (MMP) and their inhibitors (tissue inhibitors of metalloproteinase [TIMP]) are also crucially involved in atherosclerosis, but their modulation by LDL(-) has never been investigated. The aim of this study was to examine the ability of LDL(-) to release MMPs and TIMPs in human monocytes and to determine whether sulodexide (SDX), a glycosaminoglycan-based drug, was able to affect their secretion