Prevalência de anticorpos contra Neospora caninum e Toxoplasma gondii no município de Poconé, estado de Mato Grosso, Brasil

Tis study evaluated the presence of Neospora caninum and Toxoplasma gondii antibodies in 320 domestic dogs living in urban and rural areas of the municipality of Poconé, located in the Pantanal wetlands of the state of Mato Grosso, Brazil. Anti-N. caninum (cut-of point 50) and anti-T. gondii (cut-of point 16) antibodies were detected by means of immunofuorescence assays (IFA), using NC-Bahia and RH strains as antigens, respectively. Anti-N. caninum antibodies were detected in 69 (21.56%; 95% CI: 17.27%-26.56%) dogs, 31 (44.93%) of which lived in urban areas and 38 (55.07%) in rural areas, and endpoint titers ranged from 50 to 3200. Anti-T. gondii antibodies were found in 132 (41.25%; 95% CI: 35.84%-46.87%) dogs, 58 (43.94%) from urban areas and 74 (56.06%) from rural areas, and endpoint titers ranged from 16 to 8192. A total of 33 dogs (10.3%) (12 urban and 21 rural animals) reacted to both agents (P <0.05). Tis study showed a higher prevalence of anti-T. gondii compared to anti-N. caninum antibodies in the dogs living in the Pantanal region, suggesting that both protozoans circulate in the studied region. Tis information is relevant, in view of its implications for animal and public health.Este estudo avaliou a presença de anticorpos contra N. caninum e T. gondii em 320 cães domésticos das áreas urbana e rural do município de Poconé, no estado do Mato Grosso, região pantaneira do Pantanal. A Reação de Imunofuorescência Indireta (RIFI) foi utilizada para detectar anticorpos anti-N. caninum (ponto de corte igual a 50) e anticorpos anti-T. gondii (ponto de corte igual a 16) utilizando as cepas NC-Bahia e RH como antígenos, respectivamente. Anticorpos anti-N. caninum foram detectados em 69 (21,56%; IC 95%: 17,27%-26,56%) cães, dos quais 31 (44,93%) eram da área urbana e 38 (55,07%) eram da área rural e os títulos variaram entre 50 a 3200. Em relação aos anticorpos contra T. gondii 132 (41,25%; IC 95%: 35,84%-46,87%) cães foram sororeagentes sendo que 58 (43,94%) eram da área urbana e 74 (56,06%) da área rural e os títulos variaram entre 16 a 8192. Um total de 33 (10,31%) (12 cães urbanos e 21 cães rurais) cães reagiram para ambos os agentes testados pela RIFI (P <0,05). Este estudo mostrou uma maior ocorrência de anticorpos contra T. gondii em relação a N. caninum nos cães avaliados, mostrando que na região do Pantanal há circulação desses importantes protozoários. Essa informação é relevante dada sua importância para a saúde animal e pública

Levantamento sorológico e molecular de patógenos transmitidos por carrapatos em cães do Norte do Brasil

O estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência de anticorpos anti-Rickettsia spp. e anti-Ehrlichia canis, bem como a detecção molecular de DNA de Babesia vogeli, Ehrlichia spp. e Hepatozoon spp. em cães do município de Ji-Paraná, estado de Rondônia, norte do Brasil. Para tanto, foram analisadas 177 amostras de soro e sangue por meio reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e reação em cadeia pela polimerase (PCR), respectivamente. Um total de 8,47 (15/177) cães foram sororreativos para pelo menos uma espécie de Rickettsia, com títulos finais variando de 64 a 1.024. Os títulos finais mais elevados foram observados para Rickettsia parkeri e Rickettsia rhipicephali. Além disso, anticorpos anti-E. canis foram detectados em 24,29% (43/177) das amostras de soro testadas, com títulos finais variando de 80 a 2.560. Dentre as amostras de sangue analisadas molecularmente, 5,65% (10/177), 22,03% (39/177) e 48,02% (85/177) estavam infectados por B. vogeli, E. canis e Hepatozoon canis, respectivamente. Neste trabalho, fornecemos evidências sorológicas de Rickettsia spp., e E. canis além disso, confirmamos a ocorrência de DNA de B. vogeli, E. canis e H. canis em cães da área rural do estado de Rondônia. região oeste da Amazônia brasileira

Pitiose gastrointestinal canina: relato de caso no Pantanal brasileiro a partir de uma abordagem diagnóstica

A pitiose é causada por um organismo aquático semelhante a um fungo (Pythium insidiosum) e considerada um importante problema de saúde pública, pois pode afetar animais e humanos. Este artigo relata um caso de pitiose gastrointestinal em um cão. O paciente ficou internado por quatro dias, período em que o animal recebeu tratamento de suporte e sintomático. No entanto, o tratamento aplicado não teve sucesso e o quadro clínico do cão piorou, culminando com a morte. Exames de imagem complementares, como radiografia e ultrassonografia, bem como exames hematológicos, foram realizados durante o período de internação. O diagnóstico definitivo foi feito na autópsia, pois as características macroscópicas e microscópicas sugeriam a presença de granuloma intestinal e acentuada enterite necrótica multifocal supurativa. Além disso, a avaliação histológica revelou estruturas morfológicas compatíveis com P. insidiosum. Além disso, a nested PCR foi realizada e mostrou amplificação parcial (105 pb) da região ITS1 do gene ribossomal de P. insidiosum.Pythiosis is caused by an aquatic fungus-like organism (Pythium insidiosum). It is considered an important public health issue as it can affect both animals and humans. This paper reports a case of gastrointestinal pythiosis in a dog. The patient was hospitalized for four days, during which the animal received supportive and symptomatic treatment. But the applied treatment was unsuccessful and the dog’s clinical condition worsened, culminating in death. Complementary imaging tests such as radiography and ultrasonography, as well as hematological tests, were performed during the hospitalization period. The definitive diagnosis was reached in the postmortem as macroscopic and microscopic characteristics suggested the presence of intestinal granuloma and accentuated multifocal suppurative necrotic enteritis. Additionally, the histological evaluation revealed morphological structures compatible with P. insidiosum. Also, the results of nested PCR performedshowed partial amplification (105 bp) of the ITS1 region of the ribosomal gene of P. insidiosum

Detecção molecular de Hepatozoon canis e Babesia canis vogeli em cães domésticos de Cuiabá, Brasil

The objective of this study was to report for the first time infection by Hepatozoon spp. and Babesia spp. in 10 dogs from the city of Cuiabá, State of Mato Grosso, central-western Brazil. A pair of primers that amplifies a 574 bp fragment of the 18S rRNA of Hepatozoon spp., and a pair of primers that amplifies a 551 bp fragment of the gene 18S rRNA for Babesia spp. were used. Six dogs were positive for Babesia spp., and 9 were positive for Hepatozoon spp. Co-infection of Babesia spp. and Hepatozoon spp. was seen in 5 dogs. Sequenced samples revealed 100% identity with B. canis vogeli, and H. canis. This is the first molecular detection of H. canis in domestic dogs from Cuiabá. Additionally, it is described for the first time the presence of B. canis vogeli circulating among dogs in Cuiabá.O objetivo deste estudo foi relatar pela primeira vez a infecção por Hepatozoon spp. e Babesia spp. em cães domésticos provenientes da cidade de Cuiabá, estado de Mato Grosso. Foram utilizados pares de primers que amplificam um fragmento de 574 pb do gene 18S rRNA de Hepatozoon spp., e 551 pb do gene 18S rRNA para Babesia spp. Dos 10 cães amostrados, 6 apresentaram-se positivos para Babesia spp., e 9 foram positivos para Hepatozoon spp. pela PCR. Co-infecção entre Babesia spp. e Hepatozoon spp. ocorreu em 5 cães. As amostras revelaram 100% de identidade com B. canis vogeli, e as amostras que foram positivas para Hepatozoon spp. foram 100% idênticas a H. canis. Esta é a primeira identificação molecular de H. canis em cães domésticos em Cuiabá. Adicionalmente, descrevemos pela primeira vez a presença de B. canis vogeli circulando entre cães em Cuiabá.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

Ehrlichia canis DNA in domestic cats parasitized by Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.) ticks in Brazil - case report

Ectoparasites can transmit pathogens, including bacteria such as Ehrlichia sp., which trigger infectious diseases in domestic animals. Little is known about the epidemiology of feline ehrlichiosis, although several studies have focused on elucidating the pathogenesis and transmission of this disease. This paper presents the first mutual infection by Ehrlichia sp. between a domestic cat and a Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.) tick removed from the animal. The cat and tick were tested by Polymerase Chain Reaction (PCR) to detect the dsb gene, and the analyzed sequences revealed samples 100% identical to E. canis. Based on this report, we discussed the importance of cats as E. canis reservoirs s and their position in the cycle of transmission between dogs and cats in Brazil.Os ectoparasitos são capazes de transmitir patógenos incluindo algumas bactérias, como a Ehrlichia sp., causando doenças em animais domésticos. Pouco se conhece sobre a epidemiologia da erliquiose felina, embora alguns estudos já tenham sido realizados para elucidar a sua patogenia e transmissão. Este trabalho relata a primeira infecção mútua por Ehrlichia sp. entre um felino doméstico e o carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.) removido deste animal. Ambos foram testados pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) para detectar o gene dsb, e as sequências analisadas confirmaram amostras 100% idênticas à E. canis. Baseado neste relato é discutida a importância dos gatos como vetores de E. canis e sua posição no ciclo de transmissão de carrapatos entre cães e gatos no Brasil

Detection of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in Semen of Naturally Infected Rams

Background: Neospora caninum and Toxoplasma gondii are closely related cyst-forming apicomplexan parasites identified as important causes of reproductive failure in cattle. Moreover, abortion cases attributed to N. caninum and T. gondii infection have been occasionally reported in sheep. Due to the relatively scarce information on the molecular detection of N. caninum in the semen of naturally infected rams, this study aimed to detect parasitic DNA in fresh semen samples and in frozen extended semen straws from male sheep from artificial inseminations centers in Southern Brazil.Materials, Methods & Results: Semen samples of 38 rams from artificial insemination centers were evaluated. Eleven rams were naturally infected (seropositive for anti-N. caninum and/or anti-T. gondii IgG) and were selected for fresh semen collection. We tested all the samples for the closely related protozoan T. gondii to detect a possible cross-reaction and co-infection, due to the close similarity with N. caninum. The indirect fluorescent antibody test was used to detect IgG antibodies in the 11 serum samples from rams. Fresh semen samples were collected from 11 rams on days 1, 50, 55, and 58 using an artificial vagina and ewe in estrus. Other 27 rams had their frozen extended semen straws analyzed. A total of 20 fresh semen samples and 27 frozen extended semen straws samples were used to detect the presence of N. caninum and T. gondii DNA by polymerase chain reaction (PCR). Nc-5 and B1 genes were used as target regions to detect N. caninum and T. gondii DNA, respectively. The presence of N. caninum DNA was confirmed in the third collection of a fresh semen sample of one seropositive ram. T. gondii DNA was detected in a fresh semen sample of one seropositive ram. The DNA sequences of 186 bp from N. caninum (GenBank accession: MH806393) and 492 bp from T. gondii (GenBank accession: MH793503) were obtained by sequencing, and analysis revealed 99% and 100% identity, respectively, compared with other sequences deposited at GenBank. N. caninum and T. gondii DNAs were not detected in any of the 27 frozen extended semen straws used for artificial insemination.Discussion: This study demonstrated the presence of N. caninum and T. gondii DNA in fresh semen samples of naturally infected rams. The non-detection of N. caninum and T. gondii DNA in frozen semen samples of rams could be due to the dilution that was used to prepare the semen straws (GGL diluent and 5% glycerol), since fresh semen samples were not diluted prior to the test. Moreover, in our study, the volume of frozen semen samples (0.25 mL) used for PCR was lower than the volume of sediment obtained from fresh semen (0.5 mL), and the fresh semen centrifugation to obtain the sediment may have grouped the tachyzoites, increasing the sensitivity of the technique employed. No high IgG serological titers were detected in the rams at the time they were eliminating the parasite through fresh semen. The final titer of anti-N. caninum and anti-T. gondii IgGs in serum was 1:100, suggesting chronic infection. It is suggested that a new parasite elimination pathway is occurring among rams used for reproduction, due to the presence of N. caninum and T. gondii DNA in fresh semen samples from seropositive animals. Although the detection of genomic DNA of N. caninum and T. gondii in semen does not necessarily imply the presence of infectious stages of the parasites and does not determine their viability, these results demonstrate the need for further studies. Our study also indicates the need to reinforce preventive measures for sheep in artificial insemination centers until the risks are evaluated, by performing serological examinations with anti-N. caninum and anti-T. gondii antibodies, for instance, to select the rams that will be used for breeding

Misdiagnosis of canine monocytic ehrlichiosis: why do we still risk animal lives?

Canine Monocytic Ehrlichiosis (CME) is a tick-borne disease caused by Ehrlichia canis that manifests as acute, chronic, or subclinical forms without specific clinical symptoms. This disease is diagnosed using clinical and laboratory findings (blood smears, molecular techniques, and serology). This study aimed to demonstrate the occurrence of false-positive results for Ehrlichia spp. in veterinary clinical practice. Seventy dogs with positive blood smears before treatment for Ehrlichia spp. subjected to doxycycline and imidazole treatment were analyzed using hematological examination, polymerase chain reaction (PCR), and indirect immunofluorescence assay. PCR analysis identified no samples positive for E. canis according to PCR analysis, while serological techniques showed a frequency of 51.4% in dogs with antibodies (IgG) against Ehrlichia spp. There was a correlation between hyperproteinemia and titers > 10,240. Nonspecific changes occurred in 24.3% (17/70) of the patients with CME, such as anemia, leukopenia, and thrombocytopenia. The results indicated that the blood count and blood smear analysis were insufficient for diagnosis and that positive serological results associated with hematological changes suggestive of ehrlichiosis in dogs can be incorrectly assigned by a veterinarian, putting animals at risk.A Erliquiose Monocítica Canina (EMC) é uma doença transmitida por carrapatos causada pela Ehrlichia canis, apresentando formas aguda, crônica ou subclínica, sem sintomatologia clínica específica. O diagnóstico da doença é baseado na associação entre achados clínicos e laboratoriais (esfregaços de sangue, técnicas moleculares e sorologia). O objetivo deste estudo foi demonstrar a ocorrência de resultados falso-positivos para Ehrlichia spp. na prática clínica veterinária. Neste contexto, 70 cães com esfregaços sanguíneos positivos, antes do tratamento, para Ehrlichia spp. submetidos ao tratamento com doxiciclina e/ou imizol foram analisados por exame hematológico, testados por reação em cadeia da polimerase (PCR) e por ensaio de imunofluorescência indireta. Não houve a detecção de amostras positivas para E. canis pela análise de PCR, enquanto as técnicas sorológicas mostraram uma frequência de 51,4% de cães com anticorpos (IgG) contra Ehrlichia spp. Houve correlação entre hiperproteinemia e títulos > 10.240. 24,3% (17/70) apresentaram alterações inespecíficas que ocorreram na EMC, como anemia, leucopenia e trombocitopenia. Os resultados indicaram que o hemograma e a análise do esfregaço sanguíneo não foram suficientes para completar o diagnóstico em cães. No entanto, resultados sorológicos positivos associados a alterações hematológicas sugestivas de erliquiose em cães podem ser erroneamente atribuídos pelo veterinário, o que pode colocar em risco a vida dos animais

Soroprevalência e fatores de risco associados à soropositividade para Ehrlichia canis em cães do semiárido da Paraíba

Aiming to determine the seroprevalence of Ehrlichia canis infection, as well as to identify risk factors associated to the seropositivity, a serological survey was conducted in 109 dogs assisted at the Hospital Veterinário/Centro de Saúde e Tecnologia Rural (CSTR)/Universidade Federal de Campina Grande (UFCG), Campus de Patos, Paraíba State, Northeastern Brazil. Serological diagnosis of ehrlichiosis was performed by the indirect fluorescent antibody test (IFAT) and sera presenting antibody titers >; 40 were considered positive. Of the 109 samples, 72.5% were positive (95% CI = 63.1% - 80.6%). Animals that had contact with other dogs (odds ratio = 3.59; 95% CI = 1.41 - 9.12), contact with ponds (odds ratio = 8.39; 95% CI = 1.01 - 69.87) or with free access to the street (odds ratio = 6.24; 95% CI = 1.28 - 30.39) were more exposed to the risk of infection.Com o objetivo de determinar a soroprevalência da infecção por Ehrlichia canis, bem como identificar fatores de risco associados à soropositividade, foi realizado um inquérito sorológico em 109 cães atendidos no Hospital Veterinário/Centro de Saúde e Tecnologia Rural (CSTR)/Universidade Federal de Campina Grande(UFCG), Campus de Patos, Estado da Paraíba. O diagnóstico sorológico da erliquiose foi realizado por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e as amostras que apresentaram títulos de anticorpos >; 40 foram consideradas positivas. Das 109 amostras, 72,5% foram positivas (IC 95% = 63,1% - 80,6%). Animais que tiveram contato com cães (odds ratio = 3,59; IC 95% = 1,41 - 9,12), contato com açudes (odds ratio = 8,39; IC 95% = 1,01 - 69,87) ou com algum acesso à rua (odds ratio = 6,24; IC 95% = 1,28 - 30,39) estiveram mais expostos ao risco de infecção

Rural area of the Brazilian Pantanal wetlands associated with the occurrence of anti-Leishmania spp. antibodies in dogs

Neste trabalho foi realizada uma avaliação sobre a presença de anticorpos anti-Leishmania infantum chagasi em cães domésticos das áreas urbanas e rurais da região do Pantanal brasileiro usando técnicas sorológicas. Um total de 429 cães foram amostrados em três áreas do bioma do Pantanal, incluindo os municípios de Poconé, Santo Antônio de Leverger e Barão de Melgaço, em Mato Grosso, e o município de Corumbá, em Mato Grosso do Sul. A reação de imunofluorescência indireta (RIFI) foi utilizada para detectar anticorpos (ponto de corte de 40) de Leishmania infantum chagasi como antígeno. Devido à possibilidade de reação cruzada entre as espécies do gênero Leishmania, as amostras positivas na RIFI para L. infantum chagasi foram também avaliadas na RIFI utilizando L. amazonensis e L. braziliensis como antígenos. As amostras positivas na RIFI para L. infantum chagasi foram avaliadas utilizando o ensaio de imunoadsorção ligado à enzima (ELISA). Os resultados mostraram a presença de anticorpos contra L. infantum chagasi em 23 (5,36%; IC 95%: 3,50% -8,05%) cães e pelo menos um cão soro-reativo foi encontrado em todos os municípios avaliados neste estudo. Os títulos de anticorpos variaram de 40 a 5.120 e todas as amostras positivas na RIFI foram positivas no ELISA. Entre os 23 cães positivos, nove também reagiram para L. amazonensis e L. braziliensis. A ocorrência de anticorpos anti-L. infantum chagasi em cães foi maior nas áreas rurais (7,06%) do que nas áreas urbanas (2,50%) (P < 0,05). Com base neste estudo, concluímos que cães de áreas rurais do Pantanal tiveram contato com espécies de Leishmania, o que é uma informação relevante, dada a sua importância para a saúde pública.An evaluation was made of the presence of anti-Leishmania infantum chagasi antibodies in domestic dogs from the urban and rural areas of Brazil’s Pantanal wetland region using serological techniques. A total of 429 dogs were sampled in three areas of the Pantanal biome, including the municipalities of Poconé, Santo Antônio de Leverger, and Barão de Melgaço, in the state of Mato Grosso, and in the municipality of Corumbá, in the state of Mato Grosso do Sul. The immunofluorescence assay (IFA) was used to detect antibodies (cut-off point 40) using Leishmania infantum chagasi antigen. Because of the possibility of cross-reactivity between species of the genus Leishmania, samples that were positive in the IFA against L. infantum chagasi were also tested by IFA in the same conditions, using L. amazonensis and L. braziliensis antigens. IFA-positive samples to L. infantum chagasi were also evaluated using Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). The results showed the presence of antibodies against L. infantum chagasi in 23 (5.36%; 95% CI: 3.50%-8.05%) dogs and at least one seroreactive dog was found in each of the municipalities evaluated in this study. Antibody titers ranged from 40 to 5,120, and all IFA positive samples were positive in the ELISA. Among the 23 positive dogs, nine were also were seroreactive for L. amazonensis and L. braziliensis antigens. The occurrence of anti- L. infantum chagasi antibodies in dogs was higher in rural areas (7.06%) than in urban areas (2.50%) (P < 0.05). Based on this study, we concluded that dogs from rural areas of the Pantanal wetlands were in contact with Leishmania species, which is relevant information given their importance to public health

INFECÇÃO POR MORBILLIVIRUS CANINO EM ONÇA PARDA (Puma concolor) NO ESTADO DE MATO GROSSO, BRASIL – RELATO DE CASO

Infecções de felídeos não-domésticos com vírus de carnívoros domésticos são relatadas em todo o mundo. O Morbillivirus canino (CDV) pode determinar diversas alterações clínicas e patológicas em cães domésticos e animais silvestres. Os felídeos selvagens são susceptíveis ao CDV e quando infectados podem desenvolver sinais clínicos neurológicos, respiratórios e gastrointestinais. A pressão da agricultura, indústria e urbanização fragmentou o habitat das onças pardas (Puma concolor) no Brasil tornando-a uma espécie ameaçada de extinção. Mesmo em ambientes adequados, estes felinos enfrentam uma variedade de ameaças, como a caça furtiva da própria espécie e de suas presas. Declínios nas populações de felinos selvagens causadas por doenças infecciosas foram relatados e as taxas de morbidade e mortalidade do CDV verificadas nos felídeos podem ser diversas. Baseando-se na ausência de dados sobre a ocorrência desta virose em onças pardas em Mato Grosso, este trabalho relata infecção natural pelo CDV em duas onças pardas no munícipio de Cuiabá diagnosticado por meio de RT-PCR e microscopia eletrônica. Os animais foram internados e apresentaram sinais clínicos de broncopneumonia aspirativa, que após tratamento estabelecido apresentaram melhora e cura clínica