Metabolómica de compuestos bioactivos: nuevos desarrollos metodológicos y aplicaciones

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Química Física Aplicada. Fecha de lectura: 14-09-2017Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 14-03-201

Accelerated aging of onion seeds (Allium cepa L.) submitted to saturated salt solution

The objective of the present study was to evaluate the methodology of the accelerated aging test to evaluate the physiological potential of onion seeds, as well as verify the possibility of using unsaturated and saturated solutions of sodium chloride (NaCl) as an option for water uptake control in seeds during the test without reducing sensitivity. Five lots of onion seeds were tested for germination, seedling emergence, emergence speed and accelerated aging (periods of 24, 48, 72, or 96 hours, with or without the use of a saturated saline solution of NaCl). The use of unsaturated and saturated solutions of NaCl reduced water absorption by onion seeds during the accelerated aging test, resulting in a less pronounced rate of deterioration, and less drastic and more uniform results. The 48 hour treatment with unsaturated and saturated NaCl solutions is an option for use because it promotes a better classification of the onion seed lots at different vigor levels

Actividad antifúngica in vitro de extractos acuosos de bagazo de olivo (Olea europaea L.) frente a hongos causantes de candidiasis, dermatofitosis y esporotricosis en humanos y animales

As infecções fúngicas tem se tornado cada vez mais frequentes nos últimos anos. Destacam-se as dermatofitoses, esporotricoses e candidoses. Em função da resistência aos fármacos disponíveis e tendo em vista diversificar o âmbito farmacêutico, realizou-se o estudo a partir do bagaço de O. europaea. Estudos relacionados à oliveira não abordam o bagaço que representa potencial alternativa econômica devido a suas toneladas descartadas pela indústria. Objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil sensibilidade in vitro de isolados fúngicos frente extratos aquosos de bagaço de O. europeae. Testar toxicidade celular dos extratos utilizados e determinar presença e quantidade dos compostos fenólicos (oleuropeína e hidroxitirosol). Não foi observado atividade antifúngica desses extratos aquosos diante dos isolados de dermatófitos e Sporothrix brasiliensis. Dos isolados de Candida spp. testados para susceptibilidade, dois foram sensíveis ao extrato de decocção do bagaço a partir da concentração 50 mg/ml de DEC 10’. Na toxicidade da decocção do bagaço de oliveira, observou-se concentrações a partir de 12,5 mg/ml permitiram que pelo menos 50% das células MDBK se mantivessem viáveis. As concentrações de 3,13 até 0,78 mg/ml foram seguras, pois ocorreu 100% de viabilidade celular. Dos compostos (CLAE) hidroxitirosol variou a concentração de 8 x10-4 a 34 x10-4 mg/ml em INF 10’ e de 11 x10-4 a 81 x10-4 mg/ml em DEC 10’. Para oleuropeína, os extratos DEC 10’ variaram sua concentração de 87 x10-3 a 7 x10-3 mg/ml, já para INF 10’ os valores foram de 23 x10-3 mg/ml a não detectado em algumas variedades.Fungal infections have become frequently in recent years. Dermatophytosis, sporotrichosis and candidiasis stand out. Due to the resistance to available drugs and with a view to diversifying the pharmaceutical field, the study was carried out using the bagasse of O. europaea. Studies related to olive trees do not address bagasse, which represents a potential economic alternative to its discarded tons by the industry. The objective of this work was to evaluate the in vitro sensitivity profile of fungal isolates against aqueous extracts of O. europeae bagasse. To test the cellular toxicity of the extracts and to determine the presence and amount of the main phenolic compounds. No antifungal activity of these aqueous extracts was observed against the isolates of dermatophytes and Sporothrix brasiliensis. The Candida spp. tested for in vitro susceptibility, two were sensitive to bagasse decoction extract from a concentration of 50mg/ml of DEC 10'. In the toxicity of the olive pomace decoction, concentrations from 12.5 mg/ml allowed at least 50% of the MDBK cells to remain viable. Concentrations from 3.13 to 0.78 mg/ml were safe, as 100% cell viability occurred. Of the hydroxytyrosol (HPLC) compounds, the concentration varied from 8 x10-4 to 34 x10-4 mg/ml in INF 10' and from 11 x10-4 to 81 x10-4 mg/ml in DEC 10'. For oleuropein, the DEC 10' extracts varied their concentration from 87 x10-3 to 7 x10-3 mg/ml, while for INF 10' the values were from 23 x10-3 mg/ml to not detected in some varieties.Las infecciones fúngicas se han vuelto cada vez más frecuentes en los últimos años. Destacan las dermatofitosis, esporotricosis y candidiasis. Debido a la resistencia a los fármacos disponibles y con el fin de diversificar el campo farmacéutico, el estudio se realizó utilizando bagazo de O. europaea. Los estudios relacionados con el olivo no abordan el bagazo, que representa una potencial alternativa económica por sus toneladas descartadas por la industria. El objetivo de este trabajo fue evaluar el perfil de sensibilidad in vitro de aislados fúngicos frente a extractos acuosos de bagazo de O. Europeae. Testar la toxicidad celular de los extractos utilizados y determinar la presencia y cantidad de los principales compuestos fenólicos. No se observó actividad antifúngica de estos extractos acuosos frente a los aislados de dermatofitos y Sporothrix brasiliensis. De la Candida spp. probados para susceptibilidad in vitro, dos fueron sensibles al extracto de decocción de bagazo a partir de una concentración de 50 mg/ml de DEC 10'. En la toxicidad de la decocción de orujo de oliva, concentraciones a partir de 12,5 mg/ml permitieron que al menos el 50% de las células MDBK permanecieran viables. Las concentraciones de 3,13 a 0,78 mg/ml fueron seguras, ya que se produjo una viabilidad celular del 100%. De los compuestos de hidroxitirosol (HPLC), la concentración varió de 8 x10-4 a 34 x10-4 mg/ml en INF 10' y de 11 x10-4 a 81 x10-4 mg/ml en DEC 10'. Para la oleuropeína, los extractos de DEC 10' variaron su concentración de 87 x10-3 a 7 x10-3 mg/ml, mientras que para INF 10' los valores fueron de 23 x10-3 mg/ml hasta no detectarse en algunas variedades

Metabolómica de compuestos bioactivos: nuevos desarrollos metodológicos y aplicaciones

Memoria presentada por Tanize dos Santos Acunha para optar al grado de Doctora en Biología y Ciencias de la Alimentación por la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias: Departamento de Química Física Aplicada. Trabajo realizado en el Instituto de Investigación en Ciencias de la Alimentación (CIAL).[EN]: The completion of the human genome sequence led to the ―post-genomic era‖ that has made possible a better understanding of many biological processes through the development of the so-called "omics technologies". The main omics technologies developed so far have been genomics, transcriptomics, proteomics and metabolomics. However, the suffix "-omics" is being used more and more in other fields in parallel to our growing knowledge about the huge possibilities of these omics technologies. In this sense, Foodomics has recently been defined as a new discipline that studies the food and nutrition domains through the application of advanced omics technologies to improve consumer’s well-being, health, and confidence. Foodomics offers a holistic approach to the study of food and/or their effects at molecular level. This PhD Thesis presents new methodological developments for metabolomics based on different analytical techniques, such as capillary electrophoresis (CE), liquid chromatography (LC) and gas chromatography (GC) coupled to mass spectrometry (MS), as well as several applications in Foodomics. The Thesis is divided into six chapters, Chapter 1 presents as Introduction a broad vision of the objective topic of this Doctoral Thesis, as well as its main theoretical fundamentals, and Chapter 2 describes the main objectives within the scope of this PhD work. Chapter 3 contains four articles related to the development of new methodologies by means of CE and CE-MS and their application in Foodomics. The potential of CE and CE-MS for the analysis of important compounds in the area of food science is reviewed in the first (Capillary Electrophoresis in Food and Foodomics) and second (CE-MS in Food Analysis y Foodomics) article of this Chapter 3. In addition, it includes a detailed experimental and methodological description of the use of CE-MS in Foodomics. In the third article of Chapter 3 (Potential of prodendronic polyamines with modulated segmental charge density as novel coating for fast and efficient analysis of peptides and basic proteins by CE and CE-MS) the use of a new family of polymers has been investigated as capillary coatings for the analysis of peptides and basic proteins by CE-UV and CE-MS. Four different polymers have been evaluated, a homopolymer based on 2-(3-(bis(2(diethylamino)ethyl)amino) propanamido)ethyl methacrylate (TEDETAMA), and three copolymers that randomly incorporate TEDETAMA together with neutral units of N-(2-hydroxypropyl) methacrylamide (HPMA) at different molar percentages. The coatings based on TEDETAMA prevent protein and peptide interactions onto the capillary wall, and they have also demonstrated the ability to reverse the electroosmotic flow. Among the polymers studied, poly-(TEDETAMA-co-HPMA) 50:50 copolymer has the ability to separate peptides and proteins in short migration times and with good resolution. Moreover, the method developed with this capillary coating has also shown to be effective for the analysis of lysozyme in commercial cheese samples. The fourth article of Chapter 3 (Anionic metabolite profiling by capillary electrophoresis–mass spectrometry using a noncovalent polymeric coating. Orange juice and wine as case studies) is focused on the development of an new analytical strategy for anionic metabolite profiling by CE-MS using the TEDETAMA-co-HPMA (50:50) copolymer as capillary coating to reverse and stabilize the electroosmotic flow. The use of this cationic capillary coating allows the analysis of anionic metabolites in a short migration time, with good reproducibility and high separation efficiency. Chapter 4 addresses the development of a metabolomic approach to evaluate the toxicity of three bioactive compounds from rosemary (namely, the diterpenes carnosic acid, carnosol and rosmanol) on an in vitro model of human liver cells (HepaRG). In order to maximize the coverage of the analyzed metabolome, an analytical multiplatform based on GC-MS and LC-MS has been used. The combination of the results of the different analytical platforms enhances the number of identified metabolites that show a significant different expression in HepaRG cells after treatment with the aforementioned rosemary diterpenes. In Chapter 5 a general discussion is presented and in Chapter 6 the main conclusions from this PhD work are summarized. Finally, the Appendix section presents three research articles that have been published in collaboration with Dr. Guillaume L. Erny, of the University of Porto, whilst developing this PhD Thesis.[ES]: La secuenciación del genoma humano ha dado lugar a la llamada "era post-genómica" en la cual se plantea una visión integral de los procesos biológicos que se ha visto reflejada en el desarrollo de las denominadas "tecnologías ómicas". Las principales tecnologías ómicas desarrolladas durante los últimos años son la genómica, la transcriptómica, la proteómica y la metabolómica. Sin embargo, el sufijo "ómica" se está aplicando a n merosas ramificaciones y disciplinas que se están estableciendo a medida que se obtiene un mayor conocimiento de las múltiples posibilidades que dichas tecnologías ómicas presentan. En este sentido, la Alimentómica (también conocida como Foodomics) ha sido recientemente definida como una nueva disciplina, que haciendo uso de las técnicas ómicas (principalmente transcriptómica, proteómica y metabolómica), permite abordar de una forma global aspectos relacionados con la bioactividad, calidad, seguridad y trazabilidad de los alimentos e investigar la relación existente entre los alimentos y la salud. La Alimentómica ofrece un enfoque holístico de la investigación en alimentos y/o de los efectos a nivel molecular asociados a los mismos. En esta Tesis Doctoral se presentan nuevas aproximaciones metodológicas para el desarrollo de herramientas metabolómicas utilizando diferentes técnicas analíticas, como la electroforesis capilar (CE), la cromatografía de líquidos (LC) y la cromatografía de gases (GC) acopladas a espectrometría de masas (MS), así como sus aplicaciones en aproximaciones relacionadas con la Alimentómica. La memoria está dividida en seis capítulos, en el Capítulo 1 se presenta como Introducción una amplia visión de la temática objetivo de esta Tesis Doctoral, así como sus fundamentos teóricos más importantes, y en el Capítulo 2 se describen los principales objetivos del trabajo realizado. El Capítulo 3 contiene cuatro Trabajos relacionados con el desarrollo de nuevas metodologías mediante CE y CE-MS y su aplicación en Alimentómica. En el primero (Capillary Electrophoresis in Food and Foodomics) y en el segundo (CE-MS in Food Analysis y Foodomics) de los trabajos contenidos en el Capítulo 3, se describe el potencial de las técnicas CE y CE-MS para el análisis de compuestos importantes en el área de la ciencia de los alimentos y se incluye una detallada descripción experimental y metodológica del uso de CE-MS para el análisis alimentómico. En el tercer trabajo del Capítulo 3 (Potential of prodendronic polyamines with modulated segmental charge density as novel coating for fast and efficient analysis of peptides and basic proteins by CE and CE-MS) se investiga el uso de una nueva familia de polímeros como recubrimientos adsorbidos físicamente a la pared del capilar para el análisis de péptidos y proteínas básicas por CE-UV y CE-MS. En concreto, se investigan diferentes recubrimientos poliméricos basados en un homopolímero de 2-(3(bis(2(dietilamino)etil)amino)propanamido)etil metacrilato (TEDETAMA) y tres copolímeros de TEDETAMA, estos últimos sintetizados con unidades neutras de N-(2-hidroxipropil) metacrilamida (HPMA) en diferentes porcentajes molares. Además de prevenir las interacciones de proteínas y péptidos con la pared interna del capilar, los polímeros de TEDETAMA también permiten invertir el flujo electroosmótico. Entre los polímeros investigados, el recubrimiento capilar con TEDETAMA-co-HPMA (50:50) presenta la capacidad de separar péptidos y proteínas en tiempos cortos de migración y con buena resolución. Además, el método desarrollado con este recubrimiento polimérico permite el análisis de proteínas básicas, como la lisozima, en muestras de alimentos como el queso. El cuarto trabajo del Capítulo 3 (Anionic metabolite profiling by capillary electrophoresis–mass spectrometry using a noncovalent polymeric coating. Orange juice and wine as case studies) está dirigido al desarrollo de una nueva estrategia analítica para el análisis del perfil metabólico de aniones por CE-MS, empleando un recubrimiento capilar con el copolímero TEDETAMAco-HPMA (50:50) con la finalidad de invertir y estabilizar el flujo electroosmótico. El empleo del mencionado copolímero como recubrimiento capilar catiónico permite la separación de metabolitos aniónicos en tiempos de análisis cortos y con alta reproducibilidad y eficacia. En el Capítulo 4 se desarrolla una aproximación metabolómica para evaluar el efecto de los compuestos bioactivos de romero, ácido carnósico, carnosol y rosmanol, en un modelo in vitro de células de hígado humano (HepaRG). Con el fin de maximizar la cobertura del metaboloma analizado, se ha empleado una aproximación metabolómica multiplataforma basada en GC-MS y LC-MS. La combinación de los resultados de las diferentes plataformas analíticas permite aumentar el número de metabolitos identificados y evaluar su expresión significativamente diferente en células HepaRG tras el tratamiento con los mencionados diterpenos de romero. En el Capítulo 5 se presenta una discusión general y en el Capítulo 6 se recogen las conclusiones finales de los principales trabajos realizados en esta Tesis Doctoral. Además, se incluyen como anexos a la memoria tres artículos de investigación que han sido realizados en colaboración con el Dr. Guillaume L. Erny, de la Universidade do Porto, durante el período de desarrollo de esta Tesis Doctoral.Me gustaría agradecer a Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) por la beca concedida durante los cuatro años de tesis.Peer reviewe

Metabolic variability in peppers (Capsicum spp.): featuring capsaicinoids by HPLC/FL/MS/MS.

Pepper cultivation in Brazil, is of major importance, for economic and social aspects. In addition, Brazil is considered an important genetic diversity center of Capsicum pepper. However, much of this variability is been lost due to crop substitution or in consequence of rural exodus. With the objective of keeping, characterizing and finding sources of biotic and abiotic resistance, Embrapa has active Capsicum germplasm collections. For instance, in order to have these accessions of the collection available for breeding programs they need to be properly characterized. In this context, this work had the objective of characterizing pepper accessions regarding their physico-chemical characteristics and specialized metabolite content. The parameters evaluated were pH, soluble solids content, total titratable acidity, color, phenolic compound content, carotenoid content, antioxidant potential and capsaicinoid content. For capsaicinoid content evaluation, a method for sample preparation and analysis by CLAE-FL was optimized and validated and compunds confirmed for UHPLC-MS/MS. The data presented here shows large variation among genotypes, demonstrating the potential of this Capsicum collection to be used in breeding programs for the development of cultivars Among the accessions, three that stood out the content of functional compounds by group of compounds were: P119, P302 and P189 with a high content of phenolic compounds between 225.16 and 243.47 mg acid equivalent galic/100 grams; P287, P50 and P25, with higher antioxidant potential between 2.71 and 3.03 mmol equivalent Trolox/100mg; P269, P280 and P179, with a high content of carotenoids between 53.42 and 54.11 equivalent mg ß-caroten/100 grams, and the genotypes P120, P246 and P236 with high levels of capsaicinoids between 6132.00 and 19543.70 mg/100g. capsaicinoid content were identified. Capsaicinoid evaluation using UHPLC-MS/MS allowed for the unequivocal confirmation of the identity of the compunds and permitted the dentification of other capsaicinoids including nonivamide, nordihydrocapsaicin, homocapsaicin and homodihydrocapsaicin in Capsicum spp. extracts.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESNo Brasil, o cultivo de pimentas é de grande importância, tanto pelas características de rentabilidade quanto pela importância social. Além disso, o país é considerado um importante centro de diversidade genética de pimentas do gênero Capsicum. Entretanto, grande parte dessa variabilidade está sendo perdida pela substituição de cultivos ou em consequência do êxodo rural. Com o objetivo de conservar, caracterizar e encontrar fontes de resistência a estresses bióticos e abióticos, a Embrapa mantém bancos ativos de germoplasma de Capsicum. Contudo, para que os genótipos conservados nos bancos de germoplasma se tornem disponíveis aos programas de melhoramento genético, os mesmos devem ser devidamente caracterizados. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo caracterizar acessos de pimentas (Capsicum spp.) quanto às características físicoquímicas e ao teor de metabólitos especializados. Para avaliação de capsaicinoides, um método de preparo de amostra e de quantificação por CLAE-FL foi otimizado e validado e os compostos foram confirmados por UHPLC-MS/MS. Os dados obtidos evidenciaram a ampla variabilidade dos frutos de pimentas, demonstrando o potencial uso da coleção do Banco Ativo de Germoplasma de Capsicum da Embrapa Clima Temperado para o melhoramento genético. Dentre os acessos avaliados, os três que mais se destacaram quanto ao teor de compostos funcionais por grupo de compostos foram: P119, P302 e P189 com elevado teor de compostos fenólicos entre 225,16 e 243,47 mg equivalente de ácido gálico/100 gramas em base úmida; P287, P50 e P25, com maior potencial antioxidante entre 2,71 e 3,03 mmol equivalente Trolox/100mg em base úmida; P269, P280 e P179, com elevado teor de carotenoides entre 53,42 e 54,11 equivalente mg de ß-caroteno/100 gramas em base úmida; e os genótipos P120, P246 e P236 com elevado teor de capsaicinoides entre 6132,00 e 19543,70 mg/100g em base seca. A avaliação dos capsaicinoides pela técnica UHPLC-MS/MS permitiu a confirmação inequívoca dos compostos avaliados por CLAE-FL e possibilitou a identificação de outros capsaicinoides incluindo nonivamida, nordihidrocapsaicina, homocapsaicina e homodihidrocapsaicina também presentes no extratos de Capsicum

Effect pruning time on yield and quality of blueberry fruit

et al.[PT]: As pequenas frutas, como o mirtilo (Vaccinium spp.), apresentam propriedades nutricionais e alto potencial antioxidante. Práticas de manejo como a época de poda podem provocar diferentes respostas nas plantas, devido a alterações nas condições climáticas a que as plantas estarão expostas durante seu período reprodutivo. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da poda seca sobre a produção e atributos de qualidade dos frutos de mirtileiro, cultivares Clímax, Bluegem e Powderblue, nas condições da mesorregião de Pelotas, RS. Foram utilizadas plantas adultas de mirtileiro (Vaccinium spp.) de pomar comercial, localizado no município de Morro Redondo, RS. Plantas em diferentes parcelas foram submetidas a podas em duas datas: poda 1 em 10 de julho de 2012 e a poda 2 em 10 de agosto de 2012. Frutos colhidos no estadio de maturação completa foram avaliados quanto a produção, teor de sólidos solúveis (SS), acidez total titulável (ATT), pH, cor (°Hue), teor de compostos fenólicos totais, teor de antocianinas totais e potencial antioxidante. A época da poda seca influenciou de forma significativa a produção e os atributos de qualidade dos frutos de mirtilo. A poda, quando realizada na época 1, ocasionou maior produção, entretanto foi na época de poda 2 que as cultivares apresentaram maior teor de compostos fenólicos. As cultivares Bluegem e Powderblue apresentaram ainda maior potencial antioxidante e maior teor de antocianinas.[EN]: Small fruit such as blueberry (Vaccinium spp.) present nutraceutical properties and elevated antioxidant potential. Cultural practices such as pruning time can promote various responses in the plants due to the changed environmental conditions that the plants are exposed during their reproductive period. The objective of this study was to evaluate pruning time on production and fruit quality attributes of cultivars Clímax, Bluegem and Powderblue, cultivated in the mesorregion of Pelotas, RS. Adult blueberry plants (Vaccinium spp.) of a commercial orchard, located in Morro Redondo, RS were utilized. Plants of different parcels were submitted to one pruning at different time: pruning 1, in July 10th 2012 and pruning 2 in August 10th 2012. Fruit harvested at the full ripe stage were evaluated for production, soluble solids content (SSC), total titratable acidity (TTA), pH, color (ºHue), total phenolic content, total anthocyanin content and antioxidant potential. Pruning time significantly influenced production and quality attributes of blueberry fruit. Pruning 1 lead to higher production, however, plants pruned at time 2 showed higher phenolic content and cultivars Bluegem and Powderblue also had higher antioxidant potential and higher anthocyanin content.Ao CNPq, pela concessão da bolsa de doutorado.Peer reviewe

Chemical composition and structural characterization of contrasting colors of soybean seed coats

Os tegumentos desempenham importante função de proteção às sementes, e podem apresentar características diferenciais entre os genótipos de soja. O objetivo do trabalho foi determinar a composição química e analisar a estrutura interna dos tegumentos de genótipos de soja com cores contrastantes, assim como avaliar a absorção de água destas sementes. Foram testados quatro genótipos sendo dois de tegumento preto (linhagens IAC e TP) e dois de tegumento amarelo (cultivares BMX Potência RR e CD 202). Inicialmente, as sementes dos quatro genótipos foram multiplicadas, na safra 2012/2013, em casa de vegetação, na Embrapa Clima Temperado - Estação Experimental Terras Baixas. Após a colheita, as sementes ficaram armazenadas, sob condições controladas, durante cinco meses. Depois desse período, junto à UFPel, se determinou a concentração de compostos fenólicos, potencial antioxidante, antocianinas, carotenóides e lignina dos tegumentos. Também se analisou a estrutura interna destes, por meio de cortes anatômicos, sendo a documentação dos resultados realizada pela captura de imagens em microscópio, na Esalq-USP. Por fim, a absorção de água das sementes também foi avaliada, por um período de quarenta e duas horas de embebição. O delineamento foi o inteiramente casualizado, com cinco repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey, ao nível de 5% de probabilidade; com exceção da caracterização estrutural, que constou apenas da análise de imagens. Os dados de embebição foram submetidos à análise de regressão. As concentrações de compostos fenólicos, potencial antioxidante, antocianinas, carotenóides e lignina são maiores nos genótipos de tegumento preto. Esses possuem a camada paliçádica e as células em ampulheta mais espessas em comparação aos genótipos de tegumento amarelo, sendo a camada paliçádica, também, mais lignificada nos tegumentos pretos. A absorção de água das sementes é dependente das condições em que as sementes se formaram, variando entre genótipos, independente da coloração do seu tegumento e da concentração de lignina. Seed coats provide protection to seeds and present differential traits between soybean genotypes. The aim of this study was to determine the chemical composition and analyze the internal coat structure of soybean genotypes with contrasting seed coat color, as well as to evaluate the rate of water absorption by seeds. Four genotypes were tested: two genotypes with black seed coat (IAC and TP lines) and two genotypes with yellow seed coat (BMX Potência RR and CD 202 cultivars).The seeds of the four genotypes were grown during the 2012/0213 crop season, in a greenhouse at the Embrapa Clima Temperado - Estação Experimental Terras Baixas. After the harvest, the seeds were stored in controlled conditions for five months. After this period, concentration of phenolic compounds, antioxidant potential, anthocyanins, carotenoids, and lignin in seed coats were determined at the Universidade Federal de Pelotas. Internal coat structure was examined on anatomical slides and documented with image capturing software using a microscope at the Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de São Paulo. Finally, water absorption of contrasting seeds was evaluated at 42 hours of imbibition. Experimental design was completely randomized with five replicates. Data were subjected to analysis of variance and the means were compared by Tukey’s test, at 5% probability level. Coat structure was characterized by the image analysis. Imbibition data were subjected to regression analysis. The concentration of phenolic compounds, antioxidant potential, anthocyanins, carotenoids, and lignin are higher in black coated genotypes. Their palisade layer and hourglass cells are thicker and the former are more lignified in black seed coats compared to yellow seed coats. The water gain by the seeds is dependent on the conditions in which the seeds were formed and varied between genotypes, independent of coat coloration and lignin concentration

Intensidade de poda na produção e na qualidade dos frutos de mirtileiro

[PT]: O mirtileiro possui frutos com alto potencial antioxidante e nutracêutico. Este potencial pode ser influenciado pela severidade da poda nas plantas, principalmente em função do impacto na produção e dos efeitos do aumento da radiação solar incidente sobre os frutos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da intensidade da poda seca sobre a produção e os atributos de qualidade dos frutos de mirtileiro das cultivares Clímax, Bluegem e Powderblue, produzidas na mesorregião de Pelotas-RS. Para tal, foi conduzido um experimento no município de Morro Redondo-RS, durante a safra de 2012/2013, sendo utilizadas as cultivares grupo >Rabbiteye>, Clímax, Bluegem e Powderblue. A poda foi realizada em três níveis de remoção de ramos: normal, média e leve, no dia 20 de julho de 2012. A intensidade de poda seca exerceu influência sobre a produção e o teor de fitoquímicos dos frutos de mirtileiros. A produção das plantas submetidas a poda leve foi maior que as submetidas a poda média e normal, sendo o mesmo observado em relação ao teor de compostos fenólicos das cvs. Bluegem e Powderblue, enquanto para o teor de antocianinas, a intensidade de poda teve efeito distinto sobre os atributos de qualidade físico-química das diferentes cultivares.[EN]: Blueberry plants possess fruit with high antioxidant and nutraceutical potential. This potential can be influenced by pruning severity, especially due to the impact in production and the effects of increased solar radiation on the fruit. The objective of the present study was to evaluate the effect of dry pruning intensity on the production and quality attributes of blueberry fruit from cultivars, Clímax, Bluegem and Powderblue, produced in the mesoregion of Pelotas, RS. For such, an experiment was conducted in Morro Redondo, RS during the growing season 2012/2013, using cultivars of the "Rabbiteye" group, Clímax, Bluegem and Powderblue. Pruning was performed at three intensity, normal, average e light levels on July 20th 2012. Dry pruning intensity influenced production and phytochemical content of blueberry fruit. The production of plants applied the light intensity pruning was higher than the production of plants applied medium and normal intensity, the same was observed in relation to the phenolic content of cv. Bluegem and Powderblue. For anthocyanin content, and other quality attributes pruning intensity had a distinct effect on the quality attributes of the different cultivars.Os autores agradecem ao Programa de Pós-graduação em Agronomia (PPGA - UFPel) e ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), pela concessão da bolsa de Doutorado do primeiro autor.Peer Reviewe