Reasearch of anticancer peptide from Meretrix meretrix Linnaeus

癌症是当前危害人类健康和生命最为严重的的主要常见病、多发病之一。在中国，癌症已经取代心血管疾病成为死亡率最高的疾病，是名副其实的“头号杀手”。从天然生物中筛选出能与癌症发生、发展、形成等过程中各调节靶点特异结合的活性成分，已成为寻找抗癌药物的新热点，也是我国“十一五”期间的生物医药研究的重点方向之一。相比于传统抗癌药物毒副作用大、特异性差、易产生抗性等缺点，生物来源的抗癌活性多肽具有多功能性、功能反应灵敏性、稳定性、高营养价值且低毒副作用、无抗原性、结构简单易于合成等优点。文蛤(MeretrixMeretrixLinnaeus)不仅肉质鲜美、营养丰富，而且具有很高的药用价值。据报道文蛤具有清热...Cancer is one of the most dangerous diseases of human being. In nowadays, it has the highest mortality in place of blood vessel disease in china and is worthy of the name of “the first killer”. Many researches were reported that the anticancer component from natural organism could combine with special regulation target during the course of growth, develop and malignance of cancer. Screening out th...学位：理学博士院系专业：生命科学学院生物化学与生物技术系_生物化学与分子生物学学号：B20032601

胃癌细胞SGC-7901双向电泳系统的建立及优化

文蛤抗癌活性多肽对多种癌细胞有抑制效应,具有良好的药物开发前景.双向电泳技术的进步为药物的开发提供了理想的技术平台.我们通过对胃癌细胞SGC-7901总蛋白双向电泳技术的建立以及初步优化对一些环节如样品处理的方法、上样量的选择、电泳参数的设置、凝胶浓度和SDS凝胶电泳染色方法等进行了优化得到了分辨率较好的胃癌细胞的蛋白图谱,为进一步的文蛤抗癌多肽抑制胃癌细胞作用的蛋白组学研究提供实验工作的基础

文蛤多肽粉对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及免疫调节作用

将文蛤肉以复合胰蛋白酶酶解,经喷雾干燥工艺得到了文蛤多肽粉,研究文蛤多肽粉对肝癌细胞的抑制作用和对昆明种小鼠的急性毒理作用和免疫调节作用,结果显示文蛤多肽粉对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721具有明显的杀伤作用,使细胞变形以至破裂从而抑制癌细胞的生长,抗肿瘤作用明显;文蛤多肽粉给药组的胸腺指数和脾脏指数较空白对照组明显升高,提示文蛤多肽粉能促进小鼠胸腺和脾脏的生长发育,增强免疫力

文蛤抗癌多肽抑制肝癌细胞SMMC-7721差异蛋白质组分析

为了研究文蛤抗癌多肽对肝癌细胞抑制作用的蛋白表达差异,寻找并鉴定差异蛋白质,探讨多肽抑制肝癌细胞的作用机理,本文通过双向电泳、考马斯亮蓝染色、M elan ie 4双向软件分析、质谱技术(MALD I-TOF-MS)和数据库检索分析多肽作用SMMC-7721后的差异蛋白质.利用差异蛋白质组方法分析了抗癌多肽对肝癌细胞SMMC-7721抑制后的蛋白变化,找到差异点并进行了质谱鉴定(MALD I-TOF-MS).结果表明,通过对差异蛋白功能的分析,推测抗癌多肽可能引起了肝癌细胞的凋亡,为进一步的抗癌多肽抑制肝癌细胞作用的研究提供了理论基础

生物材料表面微納結構對成骨相關細胞的影響

生物醫用材料表面性能,包括表面形貌與化學組成,對誘導骨組織形成并形成骨整合具有重要作用。細胞行為對基底表面形貌和組成的依賴性決定了設計不同功能表面的重要性。作者小組多年來從事生物材料表面微納結構相關研究。在微圖形方面,結合微加工和磁控濺射技術制備出的羥基磷灰石微溝槽;采用溶膠-凝膠與復制微模塑相結合的方法制備了TiO2微圖形;采用掩模曝光電化學微加工技術和噴射電化學微加工技術,在鈦基底上制備多孔微圖形;通過轉移微模塑法與自組裝技術相結合,得到殼聚糖與牛血清蛋白復合微圖形。在納米結構方面,采用電化學陽極氧化處理,獲得一定管徑和管長的二氧化鈦納米管。在微納多級結構方面,結合高壓微弧氧化和低壓陽極氧化制備了微納多級結構鈦表面。除了考慮微納結構單獨效應之外,還考慮了微納結構化與生物功能化的協同效應,即在具有微納結構的生物材料表面通過層層自組裝等手段進行生物化學修飾。最后通過成骨相關細胞培養實驗及體內植入實驗,考察各試樣的生物活性。研究表明,微米尺度表面促進骨細胞粘附、增殖、分化等,而納米尺寸結構以及微納多級結構對細胞功能具有進一步促進作用。微納結構化與表面功能化修飾存在有協同效應。這些研究結果為微納米技術應用于人體植入研究提供了新方向。Surface properties including topography and chemistry are of great significance in deciding the response of tissue to implants. Our group has been engaged in researches on micro/nano structured biomaterial surfaces for a long time. This article reviews our series works on osteogenetic cells behavior on biomaterial surfaces with micro-and nano-structures. For micro-patterns, hydroxyapatite microgrooves were prepared by combining micro-fabrication technology and magnetron sputtering technology; TiO2 micropatterns were obtained by combining sol-gel and replica molding; Micro-patterned Ti substrates were prepared by using a through mask electrochemical micromachining and a jet electrochemical micromachining technology; chitosan/bovine serum albumin micropatterns were prepared on functionalized Ti surfaces by micro-transfer molding combined with self-assembly. For nanostructures, titania nanotubes with various diameters and lengths were prepared by a electrochemical anodic oxidation treatment. For micro-nano hierarchical structures, titania micropores modified with nanotubes were obtained by high voltage micro-arc oxidation and low voltage anodization. In addition to considering the effects of micro-nano structure alone, the synergistic effects of struturalization and biofunctionalization of biomaterial surfaces were investigated, which were realized through layer-by-layer self-assembly and other means of biochemical modification on micro/nano structured surfaces. Finally, in vitro osteogenetic cell culture and in vivo study were conducted to investigate the biological activity of various sample. The results indicate that micro-scale topographical features promote cell adhesion, bone ingrowth and the formation of mechanical interlocking between the implant surfaces and bone tissue. The nano-scale features, including nanotubes, nanofibers and nanodots, can generate preferential interactions with a biological system at protein and cellular levels, such as cell proliferation, differentiation, and gene expression. The micro/nano hierarchical surface structures further enhance cell activity. The micro/nano structures and biofuctionalization with biomolecules and biofilms have synergistic effects on cell behaviors. These studies provide a potential new direction for the application of micro/nano technology on implant surface modification

文蛤多肽对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

研究了文蛤多肽对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用,结果表明,经5.0μg/mL文蛤多肽处理的体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721)生长缓慢,倍增时间延长,细胞生长抑制率达89.4%;处理后的癌细胞形态发生明显改变,处于G0/G1期的细胞明显增多,而S期和M期细胞减少,出现明显的凋亡峰,凋亡率为22.3%.实验结果表明,文蛤多肽能有效地抑制体外培养肝癌细胞的增殖活动,可通过改变肝癌细胞的形态及细胞周期而明显抑制细胞的增殖

文蛤抗癌多肽对N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

从文蛤体中分离纯化得到了抗癌多肽,研究该多肽对N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响,结果显示文蛤抗癌多肽对该酶有明显的抑制作用.在本文中,我们将深入地研究其抑制作用机理和抑制效应类型,结果表明:随着文蛤多肽加入量的增大,该酶活力呈指数下降,测得导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)为112.9μg/cm3,该多肽对酶的抑制作用是一种可逆过程,抑制机理表现为混合型抑制类型,对游离酶(E)的抑制常数(KI)和酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为77.03和697.44μg/cm3,说明文蛤抗癌多肽与游离酶的结合导致酶活力的丧失,明显的强于对酶-底物络合物的抑制效应,底物的存在对该酶被文蛤抗癌多肽抑制作用起了保护作用

文蛤多肽粉的成分分析

以文蛤肉为原料,采用复合胰蛋白酶酶解,通过喷雾干燥工艺得到文蛤多肽粉.根据检验标准GB1519.3-2003食品急性毒性试验中最大耐受剂量法,对清洁级KM小鼠无毒害作用,作用后小鼠均健康无异常反应,解剖无明显病变,其LD50>15 g/kg体质量.对文蛤多肽粉组成成分进行分析,测定了其总氮、蛋白质、氨基酸、总糖、还原糖、脂肪、灰分及Na、K、Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Cd、Ag、Pb等金属元素的含量.应用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱法(MALD I-TOF)分析了文蛤多肽粉分子量的分布范围.结果表明,该文蛤多肽粉中蛋白质、氨基酸和对人体有益的金属元素含量丰富,对人体有害的重金属含量都大大低于国家食品检验标准的安全剂量,氨基酸种类齐全;多肽分子量均小于5 200 u,其中分子量小于1 000 u的多肽占总多肽含量的69.03%