Producción, purificación y caracterización de tres hexosaminidasas lisosomales recombinantes en pichia pastoris

La deficiencia o alteración de una proteina homopolimérica o heteropolimérica en el organismo puede causar una de cientos de enfermedades monogénicas conocidas. Las N-acetilhexosaminidasas, lisosomales, son un grupo de enzimas poliméricas formadas por subunidades codificadas por genes diferentes HEXA y HEXB formando tres isoenzimas diferentes: un heteropolímero HexA (ap), y dos homopolímeros HexB y HexS (pp y aa respectivamente). Tay Sachs y Sandhoff, o gangliosidosis GM2, son producidas por la alteración en la actividad de Hex-A o Hex-B respectivamente. Hasta el momento estos trastornos lisosomales no tienen una terapia aprobada, sin embargo, la terapia de reemplazo enzimàtico (TRE) se ha venido estudiando como una posible alternativa viable para este tipo de enfermedades. A la fecha las enzimas aprobadas para TRE han sido enzimas coexpresadas a partir de un solo gen, y han sido obtenidas generalmente en células de mamífero. Sistemas de expresión como los microorganismos han sido evaluados debido a su facilidad de cultivo, su mayor rendimiento de producción y su costo relativamente menor al que genera la producción de enzimas recombinantes en células de mamífero con fines terapéuticos. Las levaduras tienen la capacidad de realizar modificaciones postraduccionales semejantes a las humanas, una ventaja que se debe tener en cuenta para cumplir con los requerimientos mínimos necesarios de pureza y funcionalidad biológica de una enzima nativa. En este estudio las enzimas Hex-A, Hex-B y Hex-S fueron producidas en la levadura metilotrófica Pictiia pastoris, empleando genes optimizados para su expresión. El péptido señal nativo fue retirado, y se mantuvo la señal de secreción (a-Factor) de Saccharomyces cerevísiae. Los genes se subclonaron en el plásmido pPIC9K independientemente. La producción de las enzimas recombinantes se evaluó en muestras extracelulares. En cultivos a 1,65 L las actividades específicas más altas fueron 12.624 U mg'1 para rhHex-A, 10.343 ü mg'1 para rhHex-B y 14.606 U mg'1 para rhHex-S. Estas enzimas recombinantes mostraron estabilidad al ser incubadas a 4 y 37°C durante 48 horas, a pH entre 4,0 y 5,0 y a incubación en suero humano. Todas las proteínas recombinantes fueron internalizadas por líneas celulares HEK293 y fibroblastos normales en cultivo, posiblemente mediada por diferentes vías endocíticas y por receptores de manosa y manosa-6-fosfato. Fue posible visualizar el tráfico intracelular mediante microscopía confocal. Estos resultados mostraron el potencial tanto de P. pastoris GS115 para la producción de proteínas diméricas recombinantes como de las hexosaminidasas lisosomales recombinantes obtenidas en este trabajo como posibles herramientas terapéuticas para ser usadas en TRE.Deficiency or alteration of homopolymeric or heteropolymeric proteins in the body can cause one of hundreds of monogenic diseases known. The lysosomal,N-acetylhexosaminidases.are a group of proteins encoded by two different genes HEXA and HEXB forming three different polymeric isoenzymes, one heteropolymer HexA (ap), and two homopolymers Hex-B and Hex-S (aa and pp respectively). Tay Sachs and Sandhoff, or GM2 gangliosidoses, are caused by alteration in the activity of Hex-A or B respectively. At this moment these lysosomal disorders have not approved therapy, however, enzyme replacement therapy (ERT) could be an available alternative that has been studied for these diseases. To date enzymes approved for TRE have been co-expressed from a single gene, and have generally been obtained in mammalian cells. Other expression systems such as microorganisms have been evaluated because are easy to manipulate and growth, have higher production yields, and are relatively cheaper than mammalian cells production of therapeutic proteins. Yeasts have the ability to perform postranslational human-like modifications, which are an advantageous to meet the minimum requirements of purity and biological function of the native enzyme. In this study, Hex-A, Hex -B and Hex-S enzymes were produced in the methylotrophic yeast Pichia pastoris using optimized expression genes. The native signal peptide was removed, and had secretion signal (a-factor) of Saccharomyces cerevisiae. The genes were sub-cloned into plasmid pPIC9K independently. The production of recombinant enzymes was evaluated in extracellular samples. The highest specific activities obtained from cultures at 1.65 L were 12,624 U mg'1 rtiHex-A, 10,343 U mg'1 rhHex-B and 14,606 U mg'1 rhHex-S. These recombinant enzymes showed stability at 4 and 37°C during 48 h of incubation, at pH between 4,0 and 5,0 and incubation in human serum. All recombinant proteins were internalized by cultured cells, HEK293 and normal fibroblasts, possibly mediated by endocytic pathways and different mannose and mannose 6-phosphate receptors. It was possible to visualize intracellular trafficking by confocal microscopy. These results show the potential of P. pastoris GS115 for producing recombinant dimeric proteins and the potential of recombinanr hexosaminidases as therapeutic tools for use in ERT.Doctor en Ciencias BiológicasDoctorad

Configuración de los vínculos erótico-afectivos en las redes sociales el caso Tinder

La presente investigación tuvo como objetivo identificar la configuración de los vínculos erótico-afectivos dentro de las nuevas redes virtuales, para ello se tomó el caso de Tinder, una aplicación para teléfonos inteligentes diseñada con la pretensión de generar nuevas conexiones entre las personas. Para esto, se realizó una revisión teórica alrededor de diversas temáticas concernientes a las interacciones que se presentan en este tipo de espacios, como lo son la construcción de los vínculos en el mundo virtual, la representación del yo y sus múltiples identidades en los perfiles de las redes, y por último los discursos de seducción que se generan en la aplicación. Se produjo una etnografía web y diversas entrevistas en profundidad a hombres y mujeres universitarios que usaban frecuentemente la aplicación para de esta manera conocer sus experiencias y opiniones frente al tema. Y, finalmente a partir de los resultados se llevó a cabo una discusión de la información recogida que permitirá hacer aportes a investigaciones futuras.The present research aimed to identify the configuration of erotic-affective links within the new virtual networks, for it was taken the social network tinder , which is a Smartphone application designed to generate new connections between people. For this, was done a theoretical review about several topics concerning the interactions that occur in these kinds of spaces, such as the links that are constructed in the virtual world, the self-representation and its multiple identities network profiles, and finally the seduction speeches that are generated in these spaces. Also, were created web ethnography and several depth interviews for university men and women who frequently used the application to know about their experiences and opinions regarding the topic. And, finally with the results was conducted an analysis of the information collected that will allow to make contributions for future researches.Psicólogo (a)Pregrad

Análisis del proceso de reconstrucción de la(s) memoria(s) histórica(s) en el marco de la política de restitución. Estudio de caso del municipio de La Palma (Cundinamarca)

173 páginasThe role of memory in judicial settings produces truths; In the case of Land Restitution, the memories of the victims are equivalent to social evidence. During this process, the victims' stories are complemented with institutional records and the information collected in the field work, carried out by the Unit as evidence to fail the sentences. These memories are key to the integral reparation, which includes within the orders of the sentences a series of economic and symbolic benefits, with which they transform their lives. In the case of La Palma, the stories have been used to identify land abandonment patterns, given the fear imparted by irregular groups, as their inhabitants were forced to move to neighboring municipalities , the return and the economic impulse that gave them the technical support and the estate plan agreed with the Unit. Likewise, their stories propase strategies to strengthen other reparatiÓn programs in the future, in which new generations are included, from social innovation initiatives, where agricultural products are harvested and processed with value proposals, to reduce the gap between The rural and urban world.El papel de la memoria en los escenarios judiciales produce verdades; para el caso de la Restitución de tierras las memorias de las víctimas son equivalentes a pruebas sociales. Durante este proceso los relatos de las víctimas son complementados con registros institucionales y la información recaudada en el trabajo de campo, realizado por la Unidad como acervo probatorio para fallar las sentencias. Estas memorias son claves para la reparación integral, que incluye dentro de las órdenes de las sentencias una serie de beneficios económicos y simbólicos, con los cuales transforman sus vidas. Para el caso de La Palma, los relatos han sido empleados para identificar patrones de abandono de predios, ante el miedo impartido por los grupos irregulares, como sus habitantes se vieron obligados a desplazarse a municipios aledaños, el retorno y el impulso económico que les brindó el acompañamiento técnico y el plan de finca concertado con la Unidad. De igual manera, sus relatos proponen estrategias para fortalecer a futuro otros programas de reparación, en los cuales se incluya a las nuevas generaciones, desde iniciativas de innovación social, donde se cosechen y procesen productos agrícolas con propuestas de valor, para reducir la brecha entre el mundo rural y urbano.Magíster en Gerencia para el DesarrolloMaestrí

Estrategias lúdicas de aprendizaje para mejorar los procesos de lectoescritura en los niños y niñas de grado transición del Instituto San Ignacio de Loyola

Este proyecto de investigación tuvo como objetivo el uso de estrategias lúdicas encaminadas para mejorar los procesos de lectoescritura de los niños y niñas de grado transición. El marco teórico nos muestras lo importante que son los procesos de lectoescritura en los niños al iniciar su formación académica de esta manera se estimula la capacidad de aprender a diferenciar el lenguaje escrito del oral. Todos estos procesos unidos con la ayuda de la lúdica y la didáctica que permitieron innovar, mostrando un nuevo mundo de enseñanza y conocimientos a los niños. Para el diseño de estrategias lúdicas de aprendizaje se tuvo como referencia la aplicación de tres tipos de encuestas: estudiantes, padres de familia y docentes. Estas tienen como propósito reunir información que nos permita identificar las principales causas que llevan a los estudiantes a presentar dificultades en el aprendizaje de la lectoescritura y posteriormente desarrollar una propuesta pedagógica que fortalezca estas debilidades

Diseño de instrumentos y análisis de factores asociados a la ideación suicida en el ámbito escolar

Proyecto de InvestigaciónDiseño de un instrumento cuyo objetivo es identificar la relación significativa que hay entre algunos factores asociados: pensamientos positivos y negativos en relación con la vida, Bullying, desempeño académico negativo, consumo de sustancias, autoimagen negativa, y relaciones de familia positiva y el nivel de riesgo suicida que se encuentra en el ámbito educativo de diferentes niveles de formación (educación básica, educación media y educación superior). El cuestionario se aplicó a una muestra de 300 estudiantes hombres y mujeres de distintos niveles educativos.52 p.1. RESUMEN 2. ANTECEDENTES TEORICOS Y EMPIRICOS 3. JUSTIFICACIÓN Y PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 4. OBJETIVOS 5. VARIABLES 6. MÉTODO 7. RESULTADOS 8. DISCUSIÓN 9. REFERENCIASPregradoPsicólog

La mujer en posparto: un fenómeno de interés e intervención para la disciplina de enfermería

Introducción: El posparto constituye un fenómeno de interés para la disciplina de enfermería, y ostenta una trayectoria histórica desde el inicio de las prácticas de cuidado; es una etapa determinante para la mujer por la complejidad que deriva el proceso de convertirse en madre. El objetivo del artículo es reconocer y analizar las necesidades de la mujer en pos parto, como base para la  construcción de herramientas para la planeación del cuidado y auto cuidado de la diada, que fomenten la activación del rol maternal y la disminuyan de la morbi-mortalidad materno- perinatal; a parir de la revisión sistemática e integrativa de literatura científica. Materiales y Métodos: Revisión de bases de datos LILACS, PUBMED, SciELO, SCOPUS, SCIENCE DIRECT, EBSCO; Para guiar la revisión de artículos se formuló la siguiente pregunta ¿Cuáles son los productos científicos relacionados con las necesidades de la mujer en pos parto, que lleven a la construcción de intervenciones de enfermería? Resultados: Se seleccionaron 70 artículos y se realizó la lectura exploratoria para la selección de textos para el análisis; La muestra final de esta revisión fueron 50 artículos  citados en el estudio. Discusión y Conclusiones: Enfermería como profesión, debe estructurar  intervenciones sustentadas en teoría disciplinar que permitan actuar sobre las necesidades de la mujer en pos parto a partir del apoyo social que  hace referencia a la cantidad de ayuda que recibe realmente, la satisfacción que produce esa ayuda y las personas (enfermería) que la proporcionan, el cual permitirá brindar cuidado humanizado, individual, personalizado de reciprocidad a la mujer ,recién nacido, pareja y/o familia como medio para disminuir la morbi-mortalidad al mejorar su calidad de vida.Palabras clave: Puerperio, Cuidado de Enfermería, Cuidado Domiciliario. (Fuente: DeCS BIREME).Cómo citar este artículo: Moreno C, Rincón T, Arenas YM, Sierra D, Cano ÁP, Cárdenas DL. La mujer en  posparto: un fenómeno de interés e intervención para la disciplina de enfermería. Rev Cuid. 2014; 5(2): 739-47. http://dx.doi.org/10.15649/cuidarte.v5i2.8

Peces de la cuenca del río Amazonas en Colombia: Región de Leticia

La presente lista se elaboró con base en el material que se encuentra depositado en la colección ictiológica del Instituto de Ciencias Naturales de la Universidad Nacionalde Colombia (ICN-MHN). El área de estudio corresponde al ámbito geográfico de la zona sur del Trapecio Amazónico, entre las poblaciones de Leticia y Puerto Nariño. La mayor parte del material examinado fue colectado en los arroyos selváticos La Arenosa, Yahuarcaca, y Tacana; en la laguna de Yahuarcaca y en el río Amazonas, todo esto en desarrollo del programa de investigación «Peces de la región de Leticia, Amazonia colombiana», cuyos resultados están consignados en: Arbeláez (2000), Prieto(2000), Vejarano (2000), Santos (2000), Arce y Sánchez (2002), Castellanos (2002), Gutiérrez (2003), Ramírez (2004), Rodríguez (2004), Gutiérrez (2004), Arbeláez et al. (2004) y Arroyave (2005). En menor proporción corresponde a las colecciones depositadas por Ramírez (1986) y Prada (1987) provenientes del Parque Nacional Natural Amacayacu, y por Jiménez (1994) de gramalotes flotantes del río Amazonas en Leticia. En total se examinaron aproximadamente 25,000 especímenes que comprenden cerca de 3,000 lotes numerados y catalogados en la colección. Los listados taxonómicos de todas las anteriores investigaciones fueron actualizados y el estatus taxonómico de las especies se revisó con base en Reis et al. (2003) y para el caso de la subfamilia Cetopsinae de acuerdo con Vari et al. (2005

Gestos, tecnologías y sociedades: Tendencias y emergencias en tiempos de pospandemia

La tecnología hace parte de la humanidad como el medio con el cual la sociedad externaliza, apropia y articulasu existencia con los territorios y otras especies. Su fuerza instrumental responde a unas adaptaciones que en el último siglo han consolidado una relación de interdependencia con la aparatología al tiempo que se han modificado ritmos, lenguajes y formas de concebir la realidad. La tecnología se ha convertido en un agente inherente de la sociedad, y es uno de los factores que afecta y cambia el comportamiento humano y las dinámicas sociales, muestra de esto se evidenció en la pandemia del Coronavirus. Periodo en donde el Estado, la industria, la salud, la educación, etc., reinventaron sus procesos para dar continuidad a la estructura de la vida cotidiana

Reforma tributaria Ley 1819 de 2016

La reforma tributaria y en el sistema tributario de Colombia son temas que deben ser de importancia para todos los ciudadanos de esta nación; por lo cual el propósito de este capítulo es dar a conocer de una manera clara algunas de las razones por las cuales Colombia necesitaba modernizar, estructurar y transformar su sistema tributario; al igual que la propuestas planteadas en el informe final presentado por la Comisión de Expertos para la Equidad y Competitividad Tributaria al Ministro de Hacienda y Crédito Público en Diciembre del año 2015. El presente artículo da a conocer el contexto en el cual surge la última reforma tributaria Ley 1819 del 2016, según la Comisión de Expertos para la Equidad y Competitividad, para una mejor comprensión de la misma es importante conocer detalladamente su origen, quien conformó la comisión, quienes fueron los encargados de plantear las propuestas, cuáles fueron sus aportes para la nueva reforma tributaria la cual se implementa actualmente en el país.The tax reform and the tax system of Colombia are issues that should be important for all citizens of this nation; Therefore, the purpose of this chapter is to present in a clear manner some of the reasons why Colombia needed to modernize, structure and transform its tax system; as well as the proposals raised in the final report presented by the Committee of Experts on Tax Equity and Competitiveness to the Minister of Finance and Public Credit in December 2015. This article discloses the context in which the latest tax reform Law 1819 of 2016, according to the Committee of Experts for Equity and Competitiveness, for a better understanding of it is important to know in detail its origin, who formed the commission , who were responsible for proposing the proposals, what were their contributions to the new tax reform which is currently implemented in the [email protected]@campusucc.edu.c

Wildlife trading: a conflictive relationship between human and fauna

This study re analyzes the participation of bioethical issues involved in the conflicts that come out from the relationship between humans and wildlife, as a consequence of the smuggling in Colombia. This proposal of theoretical approach characterizes the trade of wildlife in the country. It also describes and analyzes some of the problems associated with this activity. The results showed that there is a lack of knowledge regarding ecosystem elements as well as the existing legislation in this matter. This causes an inappropriate use of the biotic resources. This study also found that the trade of goods from wildlife derived resources can contribute to have a more sustainable environment and to improve the living conditions of the communities involved. To obtain these benefits, it is necessary to develop strategies where the different participants get together and come out with an educational and joint plan that targets preventive measures.It is further proposed that the humanity is directly responsible for safeguarding and the proper use of wildlife, thus, ethical responsibility and authority in this regard should be shared by the human groups affected, as wells as the governmental institutions. This attitude aims to harmonize the conflictive relationship between humans and the biological resources, since this may be the only way to maintain ecosystemic balance and thereby protect the human communities associated. This approach will lead to the preservation of diversity not only in biological but also in cultural terms. Finally, we propose that an ethical intervention of current and future professionals is required, so they can make joint decisions in which the non-human world is also considered.</p