Nutritional Status, Socioeconomic Level, and Quality of Life in Non-Institutionalized Elderly Individuals

Trabalho Final do Mestrado Integrado em Medicina apresentado à Faculdade de MedicinaIntroduction: Given the growing impact of demographic changes and the high prevalence of older adults at risk of malnutrition in Portugal, a study was conducted with the aim of characterizing the nutritional status of the non-institutionalized Portuguese geriatric population, stratifying this population by socioeconomic status, and assessing the impact of these factors on self-perceived quality of life. Methods: A cross-sectional observational study was carried out using a survey administered opportunistically, both in person and digitally (via Google Forms), following analysis of its internal consistency. The survey included items from the MNA-SF, the ISEF.Pt, the EQ5D-5L, and demographic questions on sex and age group (65–74 years; 75–84 years; over 85 years). Descriptive and inferential statistical analyses were performed using parametric tests, as the variables under study followed a normal distribution. Results: Descriptive analysis of the MNA-SF indicated that most of the sample had a BMI ≥ 23 kg/m², no recent changes in diet, no weight loss or acute illness in the previous three months, full mobility, and no self-reported neuropsychological conditions. The internal consistency and intraclass correlation coefficient of this scale were found to be weak. Pearson correlations between the MNA-SF and the remaining variables showed that poorer socioeconomic status and lower self-perceived quality of life were associated with worse nutritional status. Additionally, women and individuals with more disadvantaged socioeconomic backgrounds reported poorer quality of life. Discussion: The findings were consistent with existing literature. However, some limitations should be considered: the inadequate suitability of the MNA-SF for the current Portuguese geriatric population regarding BMI, given the high prevalence of overweight and obesity; and the geographic selection bias of the sample, which consisted predominantly of individuals from urban areas in the North and Centre of Portugal. Further research is warranted to address these limitations. Conclusion: It was possible to establish a correlation between the nutritional status and socioeconomic level of the selected sample of the non-institutionalised Portuguese geriatric population and their self-perceived quality of life. Nevertheless, the quality of the tools used to assess nutritional status should be improved and better adapted to this population.Introdução: Dado o crescente impacto da evolução demográfica e a elevada prevalência de idosos em risco de malnutrição em Portugal, realizou-se um estudo com o objetivo de caracterizar o estado nutricional da população geriátrica portuguesa não institucionalizada, estratificar esta mesma população quanto à socioeconomia e avaliar o impacto destes fatores na autoperceção da qualidade de vida. Métodos: Realizou-se estudo observacional transversal através de um Inquérito, aplicado de modo oportunista presencial e digitalmente (via Google Forms), após análise da sua consistência interna. O Inquérito foi composto pelas questões do MNA-SF, do ISEF.Pt, do EQ5D-5L e caracterização quanto ao sexo e faixa etária (65 a 74 anos; 75 a 84 anos; mais de 85 anos). Realizou-se análise estatística descritiva e inferencial com testes paramétricos, dada a normalidade das variáveis em estudo. Resultados: Da análise descritiva do MNA-SF, verificou-se que a amostra apresentava maioritariamente IMC ≥ 23 kg/m 2 , ausência de alterações na dieta, perda ponderal ou doença aguda nos 3 meses prévios, mobilidade total e ausência de patologia neuropsicológica autoidentificada. A consistência interna e o coeficiente de correlação intraclasse desta escala demonstraram-se fracos. Das correlações de Pearson entre o MNA-SF e as restantes variáveis, obteve-se que quanto pior o nível socio-económico e a Qdv autopercecionada, mais deficitário é o estado nutricional. Verificou-se ainda que os indivíduos do sexo feminino e aqueles com níveis socio-económicos mais desfavorecidos apresentaram pior autoperceção da Qdv. Discussão: Os resultados obtidos corroboraram a literatura encontrada. No entanto, o presente estudo apresenta, como limitações: a parca adequação da escala MNA-SF à atual população geriátrica portuguesa na componente IMC, dado a elevada prevalência de sobrepeso e obesidade nesta população; e o viés de seleção geográfica da amostra, composta sobretudo por indivíduos de áreas urbanas do Norte e Centro de Portugal, sendo relevante desenvolver estudos futuros sobre esta temática, de modo a colmatar a limitações encontradas. Conclusão: Foi possível correlacionar o estado nutricional e o nível socio-económico da amostra selecionada da população geriátrica portuguesa não institucionalizada com a autoperceção da qualidade de vida. Contudo, a qualidade dos instrumentos utilizados para avaliar o estado nutricional deve ser melhorada e adaptada

Orthodontic Methods for Correction of the Curve of Spee: Systematic Review with Meta-Analysis

Trabalho Final do Mestrado Integrado em Medicina Dentária apresentado à Faculdade de MedicinaIntroduction: The development of the curve of Spee is related to various factors, namely skeletal morphological variations, variations in the growth of orofacial structures, changes in the chronology of tooth eruption, mandibular sagittal relationship, overbite, and the development of the neuromuscular system. The literature describes various orthodontic methods for its correction. However, the stability of this treatment is controversial and several factors have been mentioned that can interfere with the effectiveness of orthodontic methods. Knowledge of the effectiveness of the various approaches is crucial due to the significant impact that the curve of Spee can have on occlusion and oral function.Objective: To carry out a systematic review in order to synthesize the available scientific evidence on the effectiveness of the orthodontic methods for correcting the curve of Spee.Materials and Methods: The systematic review protocol was registered on the PROSPERO platform (CRD42024512212). The review was conducted according to the Cochrane and PRISMA guidelines. For its development, a standardized search was performed across different databases (PubMed via MEDLINE, Cochrane Library, Embase and Web of Science) and grey literature. The risk of bias was assessed using Faggion Jr.'s guidelines for in vitro and in silico studies of dental materials and the Cochrane tool for clinical studies.Results: The initial search yielded a total of 693 studies. After removing duplicates and excluding articles based on reading the title and abstract as well as full-text reading, a total of 40 studies were obtained. Of these, 21 studies were included in the quantitative analysis that assessed the effectiveness of conventional braces, conventional braces with extractions and invisible aligners. The main orthodontic methods used to correction the curve of Spee are nickel-titanium, stainless steel, and beta-titanium orthodontic archwires using the continuous archwire technique and the segmented archwire technique, with or without the incorporation of reverse curve archwires, as well as invisible aligners and tooth extractions combined with fixed multibracket appliances. With regard to the risk of bias, most of the in vitro studies presented a high risk of bias, randomised studies with high or low risk while most of the non- randomised studies presented a moderate to high risk of bias.Conclusion: Despite the heterogeneity of the included studies, curve of Spee correction can be achieved using various methods: conventional appliances, conventional appliances combined with extractions and aligners. The choice of method varies according to the patient's treatment objectives.Introdução: O desenvolvimento da curva de Spee relaciona-se com diversos fatores, tais como: variações morfológicas esqueléticas, variações do crescimento das estruturas orofaciais, alterações da cronologia da erupção dentária, relação sagital mandibular, overbite e desenvolvimento do sistema neuromuscular. Na literatura são descritos vários métodos ortodônticos para a sua correção. No entanto, a estabilidade deste tratamento é controversa, sendo referidos diversos fatores que podem interferir com a eficácia dos métodos ortodônticos. O conhecimento sobre a eficácia dos diversos métodos é fundamental devido ao impacto significativo que a curva de Spee pode ter na oclusão e na função oral.Objetivo: Realização de uma revisão sistemática de forma a sintetizar a evidência científica disponível sobre a eficácia dos métodos ortodônticos disponíveis para a correção da curva de Spee.Materiais e Métodos: O protocolo da revisão sistemática foi registado na plataforma PROSPERO (CRD42024512212). A revisão foi desenvolvida segundo as diretrizes da Cochrane e PRISMA. Para a sua elaboração, foi realizada uma pesquisa padronizada em diferentes bases de dados (PubMed via MEDLINE, Cochrane Library, Embase e Web of Science) e literatura cinzenta. O risco de viés foi avaliado através das orientações de Faggion Jr. para estudos in vitro e in sílico de materiais dentários e a ferramenta da Cochrane para estudos clínicos.Resultados: Da pesquisa inicial, resultaram um total de 693 estudos. Após remoção dos duplicados e exclusão dos artigos com base na leitura do título e resumo bem como leitura integral dos mesmos, obtiveram-se um total de 40 estudos. Destes, 21 estudos foram incluídos na análise quantitativa que avaliou a eficácia dos aparelhos convencionais, aparelhos convencionais com extrações e alinhadores invisíveis. Os principais métodos ortodônticos utilizados para correção da curva de Spee são arcos ortodônticos níquel-titânio, aço inoxidável e beta-titânio pela técnica de arco contínuo e pela técnica de arco segmentado, com ou sem incorporação de arcos de curva reversa, bem como alinhadores invisíveis e extrações dentárias combinadas com aparatologia fixa multibrackets. No que concerne ao risco de viés, a maioria dos estudos in vitro apresentaram um alto risco de viés, os estudos randomizados um risco alto ou baixo enquanto que, a maioria dos estudos não randomizados, apresentaram um risco de viés moderado a elevado.Conclusão: Apesar da heterogeneidade dos estudos incluídos, a correção da curva de Spee pode ser nivelada com recurso a diversos métodos, como aparelhos convencionais, aparelhos convencionais combinados com extrações e alinhadores. A escolha do método a utilizar varia conforme os objetivos de tratamento

Sépsis neonatal tardia – o estado da arte

Trabalho Final do Mestrado Integrado em Medicina apresentado à Faculdade de MedicinaNeonatal late-onset sepsis (LOS), a systemic infection manifesting after 72 hours of life, remains a major mortality and morbidity cause in neonates, particularly in preterm and very-low-birth-weight infants. Most LOS cases are hospital-acquired infections. They are usually caused by gram-positive bacteria, namely Coagulase-negative Staphylococcus. However, the epidemiology of LOS changes over time and varies significantly between the different healthcare centers.Given the severity and associated complications of LOS, it is crucial to have high clinical suspicion to promptly begin empirical antimicrobial therapy suitable to the local epidemiology. Nevertheless, clinical presentation can range from nonspecific or subtle symptoms to septic shock and multiorgan dysfunction, making early suspicion of LOS challenging. Blood culture is the gold standard method to diagnose LOS. However, this method has several technical limitations. Thus, the investigation for an ideal biomarker that allows an early diagnosis of LOS has become an area of interest, such as molecular diagnostic tools like PCR, sequencing methods, and mass spectrometry.While it is crucial to early diagnose and treat LOS, it is also important not to overuse antimicrobials to combat antibiotic resistance.A combination of vancomycin and gentamicin for seven to ten days is, nowadays, in the majority of neonatal intensive care units, the proposed empirical antimicrobial therapy in cases of LOS suspicion.The actual focus is on prevention, including simple measures like hand hygiene protocols, the use of aseptic techniques during invasive procedures, and the investment in breast milk feeding, all of which are of extremely importance to decreasing the incidence of LOS.This work aims to review the current knowledge about LOS, covering epidemiology, pathophysiology, clinical profile, risk factors, prognosis and complications, diagnostic methods, treatment, and prevention. Furthermore, it is intended to constitute a valuable resource for healthcare professionals in their efforts to combat this challenging medical condition. Lastly, this master’s thesis allowed the development of an algorithm to guide clinicians in decision-making in cases of LOS suspicion.A sépsis neonatal tardia (LOS), uma infeção sistémica que se manifesta após 72 horas de vida, mantém-se uma das principais causas de mortalidade e morbilidade em recém-nascidos, especialmente em prematuros e de muito baixo peso ao nascimento.A maioria dos casos de LOS resulta de infeções adquiridas em meio hospitalar. São frequentemente causadas por bactérias gram-positivas, nomeadamente Staphylococcus coagulase negativa. No entanto, a epidemiologia da LOS muda ao longo do tempo e varia significativamente entre diferentes centros de cuidados de saúde. Dada a sua gravidade e as complicações associadas, é crucial que exista uma elevada suspeita clínica para que se inicie prontamente a terapêutica antibiótica empírica adequada à epidemiologia local. Contudo, a apresentação clínica pode variar desde sintomas inespecíficos ou subtis até choque sético e disfunção multiorgânica, tornando difícil a suspeita precoce de LOS. A hemocultura é o método gold standard para o diagnóstico de LOS. No entanto, este método tem várias limitações técnicas. Assim, a investigação de um biomarcador ideal que permita um diagnóstico precoce tornou-se uma área de interesse, como ferramentas de diagnóstico molecular, tais como PCR, métodos de sequenciamento e espectrometria de massa.Embora seja crucial diagnosticar e tratar a LOS precocemente, é igualmente importante não utilizar antibióticos em excesso a fim de combater as resistências antimicrobianas. Uma combinação de vancomicina e gentamicina durante sete a dez dias é, atualmente, na maioria das unidades de cuidados intensivos neonatais, o tratamento antimicrobiano empírico proposto em casos de suspeita de LOS.O foco atual está na prevenção, incluindo medidas simples como protocolos de higiene das mãos, o uso de técnicas assépticas durante procedimentos invasivos e o investimento na alimentação com leite materno, todas elas de extrema importância para diminuir a incidência de LOS.Esta revisão narrativa tem como objetivo rever o estado atual do conhecimento sobre LOS, abrangendo epidemiologia, fisiopatologia, apresentação clínica, fatores de risco, prognóstico e complicações, métodos de diagnóstico, tratamento e prevenção. Além disso, pretende-se que constitua um recurso valioso para os profissionais de saúde nos seus esforços para combater esta desafiadora condição clínica. Por fim, esta tese de mestrado permitiu o desenvolvimento de um algoritmo que permitirá orientar os médicos na sua tomada de decisão em casos de suspeita de LOS

Minimally Invasive Non-Surgical Regenerative Periodontal Treatment: A Systematic Review and Case Series

Trabalho Final do Mestrado Integrado em Medicina Dentária apresentado à Faculdade de MedicinaBackground and Objectives: Periodontal regeneration, traditionally performed through surgical procedures, has been the preferred treatment for intraosseous defects. However, the investigation and application of less invasive non-surgical regenerative techniques, such as minimally invasive non-surgical treatment (MINST), are now imperative. This systematic review aims to evaluate the efficacy of non-surgical regenerative treatment in intraosseous defects, using clinical and radiographic parameters, as well as patient-centered outcomes, complemented by a demonstrative clinical case series. Materials and Methods: The PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-analyses) guidelines were followed. The search strategy included PubMed, EMBASE, Cochrane library, LILACS databases. Only randomized clinical trials (RCTs) and case series testing minimally invasive non-surgical treatments used for the treatment of isolated intra-bony defects with minimum follow-up of 6 months were assessed. Results: Four RCTs, with follow-up times from 6 months to 2 years, and two case series with 1 and 5-year re-evaluations, were included, corresponding to a total of 180 treated defects. The MINST technique achieved significant results in periodontal probing depth reduction, gain in clinical attachment and radiographic bone fill, with less tissue trauma, maintenance of gingival architecture, and shorter intraoperative time. The evaluation of patient-centered parameters indicated high satisfaction and low postoperative discomfort. Limitations identified included the lack of evaluation of the defect morphology and location and the limited number of radiographic data. Conclusion: The MINST technique demonstrated comparable efficacy to minimally invasive surgical treatment for infraosseous defects, with promising clinical and radiographic results, stable over time, along with high patient satisfaction.Introdução: A regeneração periodontal através de técnicas cirúrgicas tem sido o tratamento preconizado para defeitos infraósseos. Atualmente, a investigação e aplicação de técnicas regenerativas não cirúrgicas menos invasivas, como tratamento não cirúrgico minimamente invasivo (MINST), afiguram-se como essenciais. Esta revisão sistemática objetiva explorar a eficácia do tratamento regenerativo não cirúrgico minimamente invasivo em defeitos infraósseos em pacientes com periodontite, comparativamente às técnicas regenerativas cirúrgicas minimamente invasivas, em termos de parâmetros periodontais clínicos, radiográficos e desfechos centrado no paciente e com uma avaliação pós-operatória mínima de 6 meses, complementado por uma série de casos clínicos demonstrativos. Materiais e Métodos: As diretrizes PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-analyses) foram seguidas. A estratégia de busca incluiu as bases de dados PubMed, EMBASE, Cochrane Library e LILACS. Apenas foram incluídos ensaios clínicos randomizados (RCTs) e séries de casos que testaram tratamentos não cirúrgicos minimamente invasivos (MINST) para o tratamento de defeitos infraósseos isolados, com um acompanhamento mínimo de 6 meses. Resultados: Foram incluídos quatro RCTs, com períodos de avaliação de 6 meses a 2 anos e duas séries de casos clínicos com reavaliação a 1 e 5 anos, o que corresponde a um total de 180 defeitos tratados. A técnica MINST demonstrou resultados significativos na redução da profundidade de sondagem periodontal, no ganho na inserção clínica e no preenchimento ósseo radiográfico do defeito, com menor trauma tecidular, manutenção da arquitetura gengival e menor tempo intraoperatório. A avaliação de parâmetros centrados no paciente indicou alta satisfação e baixo desconforto pós-operatório. Foram identificadas limitações como a falta de avaliação da morfologia e localização dos defeitos e o número reduzido de estudos com dados radiográficos. Conclusão: A técnica MINST demonstrou eficácia comparável ao tratamento não cirúrgico minimamente invasivo em defeitos infraósseos, com resultados clínicos e radiográficos promissores e estáveis ao longo do tempo associados a uma elevada satisfação dos pacientes

Desafios na orquestração e federação de clusters de múltiplos clientes

Dissertação de Mestrado em Engenharia Informática apresentada à Faculdade de Ciências e TecnologiaThe growing need for efficient urban management has given rise to the concept of "Smart Cities". Ubiwhere is a company that offers platforms to municipal governments, including the Urban Platform, which leverages data collection and analysis to enhance decision-making. Four years after the launch of the Urban Platform, Ubiwhere faced challenges when it received multiple clients for the service. The company recognized the importance of refining how the infrastructure was functioning as well as how it was being deployed, managed, and monitored. This dissertation aims to address these issues by implementing an infrastructure based on multi-clusters, utilizing the Kubernetes environment. However, implementing such an infrastructure poses challenges in the management and deployment areas. In order to overcome these challenges, we implemented a multi-cluster configuration within Kubernetes, comprising a management cluster tailored to address specific administrative needs. Using Terraform, we orchestrated the provisioning of multiple Kubernetes clusters, with one designed as the management cluster. Within this management cluster, various tools and services were deployed to streamline operations, including Argo CD for continuous deployment and delivery, as well as monitoring services such as UptimeKuma, Thanos with Prometheus for infrastructure monitoring, Loki for log aggregation and OpenCost for overseeing core infrastructure and external APIs. These services collectively ensured comprehensive oversight in terms of uptime, metrics, logging, and cost monitoring, enabling effective management of the entire ecosystem.A necessidade crescente de uma gestão urbana eficiente deu origem ao conceito de "Smart Cities". A Ubiwhere é uma empresa que oferece plataformas aos governos municipais, incluindo a Plataforma Urbana, que aproveita a recolha e análise de dados para melhorar a tomada de decisões. Quatro anos após o lançamento da Plataforma Urbana, a Ubiwhere enfrentou diversos desafios quando recebeu vários clientes para o serviço. A empresa reconheceu a importância de refinar a forma como a infraestrutura estava a funcionar, bem como a forma como estava a ser implementada, gerida e monitorizada. Para ultrapassar estes desafios, implementámos uma configuração de vários clusters no Kubernetes, incluindo um cluster de gestão adaptado para responder a necessidades administrativas específicas. Utilizando o Terraform, orquestrámos o aprovisionamento de vários clusters Kubernetes, com um concebido para cluster de gestão. Neste cluster de gestão, foram implementadas várias ferramentas e serviços para simplificar as operações, incluindo o Argo CD para implementação e entrega contínuas, bem como serviços de monitorização como o UptimeKuma, o Thanos com o Prometheus para monitorização da infraestrutura, o Loki para agregação de registos e o OpenCost para supervisionar a infraestrutura central e as API externas. Estes serviços asseguraram coletivamente uma supervisão abrangente em termos de tempo de funcionamento, métricas, registo e monitorização de custos, permitindo uma gestão eficaz de todo o ecossistema

A Small Tribute to the Dead Dream

Trabalho de Projeto do Mestrado em Escrita Criativa apresentado à Faculdade de LetrasA Small Tribute to the Dead Dream is an autofictional theater project steeped in nostalgia, fear, and the insecurity of being an immigrant in dark times. The play engages with various works of literature, like Morte e Vida Severina by João Cabral de Melo Neto, and music as tells the story of Pedro Rosario, a married Brazilian immigrant and teacher living in Portugal, who finds himself entangled in the bureaucracies of becoming a legalized citizen and increasingly concerned with the small prejudices he witnesses, like the linguistic prejudice in the workplace, or the difficulty of getting a job because of his brazilian nationality. After a difficult adaptation to the country, its language, and his job, the protagonist feels increasingly out of place, especially with the rise of the far-right, violence, and xenophobia, transforming the country into a new dictatorship, the New Republic. The story then moves towards a dark and melancholicending. In addition to the play, the project also undertakes a critical analysis of the creative process behind the play, uncovering the essential elements that shaped this fictional construction. It aims to discuss the literary creation of autofiction in a theatrical piece that seeks to break away from the limiting standards of literary genres. Furthermore, it examines the use of parody and intertextuality, and the breaking of pre-established norms. Finally, the project will also address issues of immigration, xenophobia, and the rise of hate speech, particularly from the far-right, in Portugal.Pequeno Tributo ao Sonho Morto é um projeto de peça teatral autoficcional banhada na saudade, no medo e na insegurança de ser imigrante em tempos sombrios. A peça dialoga com diversas obras da literatura, como Morte e Vida Severina de João Cabral de Melo Neto, e da música e conta a história de Pedro Rosario, um professor, casado, imigrante brasileiro vivendo em Portugal, que se vê afundado nas burocracias para se tornar cidadão legalizado e cada vez mais preocupado com as pequenas demonstrações preconceituosas presenciadas, como o preconceito linguístico no local de trabalho ou a dificuldade de conseguir emprego por ser brasileiro. Após uma dificultosa adaptação ao país, à língua e ao emprego, o protagonista sente-se cada vez mais deslocado, principalmente com o crescimento da extrema-direita, da violência e da xenofobia que transformam o país em uma nova ditadura, a Nova República. A história caminha, então, para um final sombrio e melancólico. Além da peça, o projeto também empreende em uma análise crítica da incursão criativa da peça, desvendando os elementos essenciais que deram forma a essa construção ficcional. Pretende-se discutir a criação literária de autoficção em uma peça teatral que tenta fugir dos padrões limitantes dos gêneros literários. Além disso, analisa-se a utilização da paródia e da intertextualidade e da quebra dos padrões pré-estabelecidos. Por fim, será também discutida a questão da imigração, da xenofobia e do crescimento do discurso de ódio, principalmente da extrema-direita, em Portugal

Chronic Pain-Related Stigma Among Health Care Professionals: Contributions to its assessment and understanding

Trabalho Final do Mestrado Integrado em Medicina apresentado à Faculdade de MedicinaIntroduction: Chronic pain (CP) is a complex experience with significant impact on quality of life. However, it is often poorly understood, underestimated, and stigmatized. The stigma associated with CP, also present among healthcare professionals, remains poorly understood and has the potential for a negative impact on healthcare delivery. It is important to have instruments that allow for its rigorous assessment and exploration of its determinants, enabling the development of specific interventions aimed at its mitigation.Objectives: (1) To validate the adapted Portuguese versions of the WHO-HP and SSCI-8 scales; (2) To understand and compare the levels of stigma associated with chronic pain (CPS) and mental illness (MI) among family physicians; (3) To explore the relationship between levels of CPS/MI and sociodemographic and professional variables.Materials and Methods: 398 family physicians (79% female) completed a questionnaire with sociodemographic questions; 229 (57.5%) responded to the adapted versions of the Opening Minds Scale for Health Care Providers (OMS-HC) and the Stigma Scale for Chronic Illness 8-item (SSCI-8) for chronic pain and healthcare professionals, respectively; 169 (42.5%) responded to the Portuguese version of the OMS-HC.Results: The adapted Portuguese versions of OMS-HC-CP and SSCI-8 showed good construct validity and internal consistency. Younger physicians with less professional experience had higher scores in CPS evaluation by the SSCI-8 scale. Variables such as gender and previous personal experience with the disease were less relevant in explaining the level of CPS. Comparison of levels of MI and CPS, through the WHO-HP scale, showed higher levels of MI, in its total score and in the Social Distance dimension, but no significant difference in the Attitudes and Disclosure/Help-Seeking dimensions.Discussion: The adapted OMS-HC and SSCI-8 scales can be used to assess CPS in healthcare professionals. The presence of higher levels of CPS in younger physicians with less professional experience reflects greater discomfort/guilt in dealing with patients with CP. Comparison of CPS and MI levels showed that, despite physicians presenting higher levels of MI, there are dimensions where there is no significant distinction between both, suggesting that CP can elicit perceptions potentially as negative as MI. Therefore, it will be important to implement measures to reduce this stigma.Introdução: A dor crónica (DC) é uma experiência complexa, com impacto significativo na qualidade de vida. Contudo, é frequentemente mal compreendida, subestimada e estigmatizada. O estigma associado à DC, também presente nos profissionais de saúde, continua mal compreendido e apresenta um potencial impacto negativo nos cuidados assistenciais. Importa dispor de instrumentos que o permitam avaliar de forma rigorosa e explorar os seus determinantes, permitindo o desenvolvimento de intervenções específicas e direcionadas à sua mitigação.Objetivos: (1) validar as versões portuguesas adaptadas das escalas OMS-HC e SSCI-8; (2) conhecer e comparar os níveis de estigma associados à dor crónica (EDC) e à doença mental (EDM) nos médicos de família; (3) explorar as relação entre os níveis de EDC/EDM e variáveis sociodemográficas e profissionais.Métodos: 398 médicos de família (79% do sexo feminino) preencheram um formulário com questões sociodemográficas; 229 (57.5%) responderam às versões adaptadas das escalas Opening Minds Scale for Health Care Providers (OMS-HC) e Stigma Scale for Chronic Ilness 8-item (SSCI-8) para a dor crónica e para profissionais de saúde, respectivamente; 169 (42.5%) responderam à versão portuguesa da OMS-HC.Resultados: As versões portuguesas adaptadas da OMS-HC-DC e SSCI-8 apresentaram boas validades de construto e consistência interna. Médicos mais novos e com menos experiência profissional apresentaram pontuações mais elevadas na avaliação do EDC pela escala SSCI-8. Variáveis como o género e a experiência pessoal prévia com a doença mostraram-se menos relevantes para explicar o nível de EDC. A comparação dos níveis de EDM e EDC, através da escala OMS-HC, mostrou a ocorrência de níveis mais elevados de EDM, na sua pontuação total e na dimensão Distanciamento Social, mas sem diferença significativa nas dimensões Atitudes e Revelação/Procura de ajuda.Discussão: As escalas OMS-HC e SSCI-8 adaptadas podem ser usadas para avaliar o EDC nos profissionais de saúde. A presença de níveis mais elevados de EDC nos médicos mais novos e com menos experiência profissional traduz maior desconforto/sensação de culpa a lidar com doentes com DC. A comparação dos níveis de EDC e EDM mostrou que, apesar dos médicos apresentarem níveis mais elevados de EDM, existem dimensões em que não há uma distinção significativa de ambos, sugerindo que a DC pode suscitar percepções potencialmente tão negativas como a DM. Assim, será importante implementar medidas para reduzir este estigma

‘O Absoluto Movimento de Tornar-se’: Sociedade Civil e o Direito Internacional nas Lutas Palestina e Saarauí por Libertação Nacional

Tese de Doutoramento em Relações Internacionais - Política Internacional e Resolução de Conflitos apresentada à Faculdade de EconomiaThis thesis offers an analysis of the strategies of Palestinian and Saharawi civil society actors through the discussion of the practice of self-determination and the use of international law. It identifies the challenges faced by actors in a precarious situation in a system of nation-states, and the tactics they have adopted. It thus contributes to the study of violent conflicts and their causes, reflecting on the effects of the non-implementation of self-determination in suspending chances for an emancipatory peace.In particular, this thesis analyzes the role of civil society actors in Palestine and Western Sahara’s struggles for national liberation from Israel and Morocco, in protracted conflicts structured by prolonged military occupation and settler-colonialization. The research adopts a historical-materialist approach to the study of oppression and resistance to inquire into the limitations and opportunities found in liberal frameworks of international relations and international law. The thesis shows that Palestinians and Saharawis resist in multifaceted forms, as national liberation movements, states in the making, and civil society, as subjects in international history, through struggle. As a result of empirical analysis, the thesis conceptualizes emancipatory diplomacy and prefigured self-determination as these actors’ strategies and praxis in both resisting colonization and occupation, and mitigate the effects of the protraction of their plights, particularly as sustained in the convergence between the colonizers and world powers through different kinds of interventions. Part of these strategies, also their uses of recognition and legitimacy are paramount in the analysis, as discursive strategies aiming at building up solidarity and concrete support. The study stems from critical research committed with the abolition of structures and relations of oppression through a Marxist project for emancipation. Empirical research is done through semi-structured interviews and the participant observation of the engagement of civil society actors in the UN Human Rights Council and the refugee camps in Algeria and Lebanon, in 2017 and 2018. Results are triangulated with the analysis of documents elaborated by these actors and of UN reports and resolutions on their specific cases, using discourse analysis to identify the main challenges and arguments in the emancipatory strategy.The thesis seeks to understand the reasons and challenges of Palestinian and Saharawi actors in their mobilization and use of international law for national liberation; identify the normative and institutional limitations found by these actors in the course of their struggles, and alternatives to these limitations; contribute to the critique of structures and dynamics that sustain these conflicts and prevent self-determination and peace; conduct a qualitative comparison that is underexplored between two similar cases under an internationalist perspective of solidarity; contribute to debates on strategy and tactics in national liberation movements and other contemporary emancipatory movements; promote critical Marxist approaches to International Relations and International Law as alternatives to hegemonic paradigms and discuss paths for a just peace and emancipation.Esta tese oferece uma análise das estratégias dos atores da sociedade civil palestina e saarauí por meio da discussão da prática da autodeterminação e do uso do direito internacional. A tese identifica os desafios enfrentados pelos atores em uma situação precária em um sistema de estados-nação e as táticas que eles adotaram. Assim, contribui para o estudo de conflitos violentos e suas causas, refletindo sobre os efeitos da não implementação da autodeterminação na suspensão de chances de uma paz emancipatória.Em particular, esta tese analisa o papel dos atores da sociedade civil nas lutas da Palestina e do Saara Ocidental pela libertação nacional de Israel e Marrocos, em conflitos prolongados estruturados por ocupação militar prolongada e colonização de colonos. A pesquisa adota uma abordagem histórico-materialista para o estudo da opressão e resistência para investigar as limitações e oportunidades encontradas em estruturas liberais de relações internacionais e direito internacional. A tese mostra que palestinos e saarauís resistem em formas multifacetadas, como movimentos de libertação nacional, estados em formação e sociedade civil, como sujeitos na história internacional, por meio da luta.Como resultado da análise empírica, a tese conceitua a diplomacia emancipatória e a autodeterminação prefigurada como estratégias e práxis desses atores tanto na resistência à colonização quanto à ocupação, e mitiga os efeitos da prorrogação de suas dificuldades, particularmente como sustentadas na convergência entre os colonizadores e as potências mundiais por meio de diferentes tipos de intervenções. Parte dessas estratégias, também seus usos de reconhecimento e legitimidade são primordiais na análise, como estratégias discursivas visando construir solidariedade e apoio concreto.O estudo decorre de uma pesquisa crítica comprometida com a abolição de estruturas e relações de opressão por meio de um projeto marxista de emancipação. A pesquisa empírica é feita por meio de entrevistas semiestruturadas e observação participante do engajamento de atores da sociedade civil no Conselho de Direitos Humanos da ONU em Genebra e nos campos de refugiados na Argélia e no Líbano, em 2017 e 2018. Os resultados são triangulados com a análise de documentos elaborados por esses atores e de relatórios e resoluções da ONU sobre seus casos específicos, usando análise de discurso para identificar os principais desafios e argumentos na estratégia emancipatória.A tese busca compreender as razões e os desafios dos atores palestinos e saarauís na sua mobilização e no uso do direito internacional para a libertação nacional; identificar as limitações normativas e institucionais encontradas por esses atores no curso das suas lutas e as alternativas a essas limitações; contribuir para a crítica de estruturas e dinâmicas que sustentam esses conflitos e impedem a autodeterminação e a paz; conduzir uma comparação qualitativa pouco explorada entre dois casos semelhantes sob uma perspectiva internacionalista de solidariedade; contribuir para debates sobre estratégia e tática em movimentos de libertação nacional e outros movimentos emancipatórios contemporâneos; promover abordagens marxistas e críticas às Relações Internacionais e ao Direito Internacional como alternativas aos paradigmas hegemônicos e discutir caminhos para uma paz justa e emancipatória.Universidade de Coimbra - Fundo de Apoio aos Estudantes de Doutoramento da Escola de Estudos Avançados

The role of ageing in polyglutamine-induced neurodegeneration. A study in Machado-Joseph disease models

Tese no âmbito do Doutoramento em Biologia Experimental e Biomedicina, no ramo de Biotecnologia e Saúde, apresentada ao Instituto de Investigação Interdisciplinar da Universidade de CoimbraMachado-Joseph disease (MJD) or Spinocerebellar Ataxia Type 3 (SCA3) is an autosomal dominantly-inherited neurodegenerative disorder characterized by the pathological expansion of the CAG trinucleotide tract within the coding sequence of the ATXN3/MJD1 gene, conferring a toxic gain-of-function to the resulting mutant ataxin-3 protein. It belongs to the polyglutamine group of diseases, being the most common dominantly-inherited ataxia worldwide. The mutant protein leads to neuronal dysfunction and neurodegeneration in specific brain regions, with symptoms manifesting at midlife. Despite the significant research advances over the last years, the molecular mechanisms involved in MJD are still unclear and no treatment able to modify disease progression is available to patients. Ageing is the major risk factor for neurodegenerative disorders, being associated with the occurrence and progression of Alzheimer’s, Huntington’s and Parkinson’s disease, among others. Nuclear lamins and other proteins that are linked to homeostasis, have been shown to be altered not only in normal ageing, but also in neurodegenerative diseases. Furthermore, progerin, a mutated form of lamin A/C, responsible for the premature and accelerated ageing phenotype of Hutchinson-Gilford Progeria Syndrome, constitutes a good model to study specific ageing characteristics. The main aim of this project was to investigate the role of ageing in MJD. In the first part of the work, detailed in chapter 2, we investigated the presence of age-related markers in MJD cellular (patient fibroblasts, N2a cells) and mouse models (transgenic and lentiviral models). A decrease in the protein levels of Lamins B1 and C, together with decreased Zmpste24 (involved in the maturation of lamin A) mRNA and protein levels was observed in the different MJD models. Moreover, we also observed nuclear circularity abnormalities, a hallmark of ageing, in the N2a MJD model, suggestive of an age-related phenotype. These results suggest that ageing might have a relevant role in MJD pathogenesis. To address the role of ageing in MJD degeneration, as detailed in chapter 3, we overexpressed progerin in a relevant brain area (the striatum) of a MJD lentiviral mouse model. Progerin overexpression aggravated MJD neuropathology, increasing loss of DARPP-32 expression, along with increased number of ubiquitinated aggregates. A tendency to increase the number of pyknotic nuclei was also seen, together with a significant increase in reactive astrogliosis. Taking all the above-mentioned evidences into account, we may infer that ageing may play an important role aggravating MJD pathogenesis and associated neuroinflammation. Finally, in chapter 4, having in mind that accelerating ageing aggravated the MJD- associated neuropathology, we further investigated whether this could be rescued by blocking progerin expression and delaying ageing in transgenic mice that recapitulates HGPS - Lmna G609G/ G609G, using the same strategy for the striatal MJD lentiviral model described in chapter 3, but using a shRNA targeting Lmna/progerin transcripts’ 3’UTR, together with mutant ataxin-3 lentiviral-induced expression. In this part of the work we were not able to detect any change in DARPP-32 depleted volume among the hemispheres as well as no alteration in mutant ataxin-3 aggregated protein levels. Given that the downregulation of progerin levels in this transgenic mouse model was limited, further studies are necessary to draw conclusions from this study In summary, this thesis provides strong evidences that ageing may have a relevant role in MJD, aggravating its associated neuropathological features. Delaying ageing, might be a possible strategy to delay neurodegeneration associated to MJD, a strategy for which more studies are needed.A doença de Machado-Joseph (DMJ) ou Ataxia Espinocerebelosa de Tipo 3, é uma doença neurodegenerativa hereditária, autossómica dominante, caracterizada pela expansão patológica das repetições do trinucleótido CAG na região codificante do gene ATXN3/ MJD1, dando origem a uma proteína mutada, ataxina-3, com um ganho de função tóxico. Pertence ao grupo de doenças poliglutamínicas e é a ataxia hereditária dominante mais comum em todo o mundo. A proteína mutada leva a uma disfunção neuronal e neurodegenerescência em regiões específicas do cérebro, com sintomas que se manifestam na idade adulta. Apesar dos avanços científicos significativos nos últimos anos, os mecanismos moleculares envolvidos na DMJ ainda não estão totalmente esclarecidos e nenhum tratamento capaz de modificar a progressão da doença, está disponível para os doentes. O envelhecimento é o principal factor de risco para doenças neurodegenerativas, estando associado à ocorrência e progressão das doenças de Alzheimer, Huntington e Parkinson, entre outras. Já foi, no entanto, descrito que as laminas nucleares e outras proteínas que estão ligadas à sua homeostase, estão alteradas não só no envelhecimento fisiológico, mas também em doenças neurodegenerativas. Além disso, a progerina, uma forma mutada de lamina A/C, responsável pelo fenótipo de envelhecimento prematuro e acelerado da Síndrome de Progeria de Hutchinson-Gilford (SPHG), permite estabelecer um bom modelo para estudar características específicas do envelhecimento. O principal objetivo deste projeto foi então investigar o papel do envelhecimento na DMJ. Na primeira parte do trabalho, detalhada no capítulo 2, investigámos a presença de marcadores associados ao envelhecimento em modelos celulares de DMJ (fibroblastos de doentes, células N2a) e modelos de murganho (modelos transgênico e lentiviral). Foram detectados níveis de proteína diminuídos das laminas B e C, juntamente com a diminuição dos níveis de mRNA e proteína da zmpste24 (envolvida na maturação da lamina A) nos diferentes modelos de DMJ. Por fim, também foram observadas irregularidades na circularidade nuclear, uma hallmark do envelhecimento, no modelo de N2a da DMJ, sugestivo de um fenótipo relacionado ao envelhecimento, resultados que indicam que o envelhecimento poderá ter um papel relevante na patogénese da DMJ. Na segunda parte deste projecto, no capítulo 3, o objectivo foi investigar o papel do envelhecimento na degenerescência associada à DMJ, sobre-expressando a progerina em regiões do cérebro relevantes (estriado) no modelo lentiviral da DMJ no murganho. A progerina agravou a neuropatologia associada à DMJ, aumentando a perda da expressão de DARPP-32, e simultaneamente promovendo o aumento do número de agregados ubiquitinados. Foi também observada uma tendência para aumento do número de núcleos picnóticos, juntamente com um aumento significativo na astrogliose reactiva. Tendo em consideração todas as evidências mencionadas, podemos inferir que o envelhecimento poderá ter um papel importante no agravamento da patogénese associada à DMJ, incluindo a neuroinflamação. Finalmente, no capítulo 4, após concluirmos que a aceleração do envelhecimento agravou a neuropatologia associada à DMJ, quisemos investigar se esse efeito poderia ser resgatado/revertido, bloqueando a expressão de progerina, desta forma retardando o envelhecimento em murganhos transgénicos que recapitulam o SPHG - Lmna G609G/ G609G. Para o efeito, recorremos ao modelo lentiviral estriatal de DMJ descrito no capítulo 3, mas neste caso, em conjunto com a indução da expressão ataxina-3 mutada silenciámos a Lmna / progerina com shRNAS codificados por vectores lentivirais. Nesta parte do trabalho, não foi possível detectar qualquer alteração no volume de perda de DARPP-32 entre os hemisférios dos animais, nem alteração nos níveis de proteína agregada de ataxina-3. Dado que a redução dos níveis de progerina no modelo transgénico de SPHG foi limitada serão necessários mais estudos para se poderem tirar conclusões sobre esta parte do trabalho. Em resumo, nesta tese apresentamos fortes evidências de que o envelhecimento poderá ter um papel relevante na DMJ, agravando as suas características neuropatológicas associadas, pelo que retardar o envelhecimento, poderá ser uma estratégia possível para atrasar a neurodegenerescência associada à DMJ

Desenvolvimento de nanoplataformas carregadas com gemcitabina para terapia avançada e dirigida do cancro pancreático

Tese de Doutoramento em Ciências Farmacêuticas apresentada à Faculdade de FarmáciaPancreatic cancer (PC) is currently one of the most challenging human malignancies worldwide with its incidence and mortality projected to rise in the next years. The lack of early diagnosis, together with poor prognosis, high rate of tumor relapse and pathological complexity vastly undermine its therapy success and patient survival. Although treatment options include mainly surgery in localized staged PC, together with chemotherapy, in most cases PC is detected at advanced stage and tumor resection is not available; and chemotherapy faces serious challenges on account of lack of effectiveness, severe systemic toxicity, lack of specificity, stability and tumor biodistribution, accelerated clearance and to the emergence of multidrug resistant phenotype in PC cells. Micelles consist of versatile size-tunable core-shell nanoparticles with a hydrophobic core and water-soluble shell widely employed for improved solubilization, stability and pharmacokinetic profile of poorly water-soluble drugs. Additionally, they are highly tunable colloidal systems enabling preferential accumulation in tumors by enhanced permeability and retention (EPR) effect, thus improving PC targeting and drug biodistribution, and reducing off-target systemic toxicity. Micelles are generally prepared by self-assembly of amphiphilic polymers of biocompatible features, some of them including additional and attractive bioactive activities, namely anticancer, multidrug resistance reversal and antioxidant properties. Vitamin E (VE)-based building blocks display relevant features as tailor-made structural units to build hydrophobic prodrug conjugate systems and also posing as suitable micellar drug delivery systems, showing enhanced biocompatibility, FDA-approval status and anticancer activity, such as VE succinate (VES) and D-α-tocopheryl polyethylene glycol (PEG) 1000 succinate (TPGS). Recently, cell membrane-coated nanosystems have been described to prolong blood circulation of nanoparticle cores, avoid immune clearance and provide selective targeting features in in vivo models of disease, including in PC. Cancer cell membrane-coated nanoparticle cores display additional tumor targeting attributes by a homotypic mechanism, and expose relevant surface markers to engage in immunomodulation strategies. In this Thesis, antimetabolite gemcitabine (GEM) was selected as cytotoxic agent widely used in PC therapy, and further conjugated with hydrophobic anticancer agent VES to assemble VES-GEM conjugate and enable further encapsulation in micelles and achieving GEM micellar nanoformulation. The VES-GEM conjugate was encapsulated in micelles composed of FDA-approved, biocompatible and biofunctional polymers, namely triblock copolymers poly (ethylene oxide) poly (propylene oxide)-poly (ethylene oxide) (Pluronic® F68 and Pluronic® F127), graft copolymer polyvinyl caprolactam-polyvinyl acetate-polyethylene glycol (Soluplus®), and VE-based PEGylated polymer TPGS. The formulations were prepared with green methodology and characterized regarding morphology, size, surface charge, polydispersity index, drug release profile, stability, purification methods, haemolytic activity, in vitro cytotoxicity and cellular internalization. Furthermore, selected VES-GEM loaded TPGS and Soluplus® micelles were explored as templates for coating with PC cell membranes extracted from BxPC3 cell line and the systems were analysed regarding their size, surface charge, polydispersity index, morphology and co-localization. The results presented in this Thesis demonstrate that VES-GEM-loaded micelles comprise adequate systems for GEM delivery to PC achieving high GEM encapsulation and drug loading, enhanced GEM stability, notorious controlled release profile for long-lasting anticancer activity, strong cytotoxic activity in PC cell line and considerable cellular internalization. The modification with PC cell membranes yielded strongly negatively-charged hybrid systems potentially mimicking – even if partially – the surface of native PC cells and exhibit promise towards development of biomimetic hybrid micelle-based systems for cutting-edge innovative PC therapies.O cancro do pâncreas (CP) é atualmente uma das neoplasias humanas mais difíceis de tratar em todo o mundo, prevendo-se que a sua incidência e mortalidade aumentem nos próximos anos. A falta de diagnóstico precoce, juntamente com o mau prognóstico, a elevada taxa de recidiva do tumor e a complexidade patológica, prejudicam grandemente o sucesso da sua terapia e a sobrevivência dos doentes. Embora as opções de tratamento incluam principalmente a cirurgia no CP em estadio localizado, juntamente com a quimioterapia, na maioria dos casos o CP é detetado em fase avançada e a ressecção do tumor não é possível; e a quimioterapia enfrenta sérios desafios devido à falta de eficácia, à presença de toxicidade sistémica grave, bem como à falta de especificidade, estabilidade e biodistribuição tumoral e eliminação acelerada, aliada ao aparecimento de um fenótipo multirresistente. As micelas são nanopartículas versáteis de tamanho ajustável, com um núcleo hidrofóbico e uma periferia solúvel em água, amplamente utilizadas para melhorar a solubilização, a estabilidade e o perfil farmacocinético de fármacos pouco solúveis em água. Além disso, são sistemas coloidais altamente sintonizáveis que permitem a acumulação preferencial em tumores através de um efeito de permeabilidade e retenção (EPR), melhorando assim o direcionamento para o CP e a biodistribuição dos fármacos e reduzindo a toxicidade sistémica. Estes sistemas são geralmente preparados por auto-montagem de polímeros anfifílicos com características biocompatíveis, alguns dos quais incluem atividades bioactivas atrativas adicionais, nomeadamente propriedades anticancerígenas e de reversão da resistência a múltiplos fármacos, bem como propriedades antioxidantes. As unidades estruturais à base de vitamina E (VE) apresentam características relevantes para a preparação de sistemas hidrofóbicos de pró-fármacos e também como sistemas micelares adequados para administração de fármacos, e evidenciam uma maior biocompatibilidade, estatuto de aprovação pela FDA e atividade anticancerígena, como é o caso do succinato de VE (VES) e o succinato de D-α-tocoferil polietilenoglicol (PEG) 1000 (TPGS). Recentemente, foi reportado que o revestimento de nanopartículas por membranas celulares é passível de prolongar a circulação sanguínea da nanopartícula encapsulada, evitar a depuração pelo sistema imunitário e proporciona características seletivas de direcionamento em modelos in vivo de doenças, incluindo no CP. As nanopartículas revestidas com membranas oriundas de células cancerígenas apresentam atributos adicionais de direcionamento para o tumor através de um mecanismo homotípico e expõem marcadores de superfície relevantes para participar em estratégias de imunomodulação. Nesta tese, o fármaco antimetabolito gemcitabina (GEM), amplamente utilizado na terapia de CP na forma de solução injetável sob o nome comercial Gemzar®, foi selecionado como agente citotóxico e posteriormente conjugado com o agente anticancerígeno hidrofóbico VES para obter o conjugado VES-GEM e maximizar a encapsulação da GEM em micelas e obter uma nanoformulação micelar de GEM. O conjugado VES-GEM foi encapsulado em micelas compostas por polímeros biocompatíveis e biofuncionais aprovados pela FDA, nomeadamente copolímeros tribloco poli(óxido de etileno) poli(óxido de propileno)-poli(óxido de etileno) (Pluronic® F68 e Pluronic® F127), copolímero ramificado polivinil caprolactamo-polivinil acetato-polietilenoglicol (Soluplus®) e polímero PEGilado TPGS à base de VE. As formulações foram preparadas com recurso a uma tecnologia green e caracterizadas quanto à morfologia, tamanho, carga de superfície, índice de polidispersão, perfil de libertação do fármaco, estabilidade, métodos de purificação, atividade hemolítica, citotoxicidade e internalização celular. Além disso, as micelas de TPGS e Soluplus® carregadas com VES-GEM foram exploradas como modelos para revestimento com membranas celulares de PC extraídas da linha celular BxPC3, e os sistemas foram analisados quanto ao seu tamanho, carga superficial, índice de polidispersão, morfologia e co-localização. Os resultados apresentados nesta tese permitiram demonstrar que as micelas carregadas com VES-GEM constituem sistemas adequados para a administração de GEM num contexto de CP, alcançando uma elevada encapsulação de GEM e carga de fármaco, juntamente com maior estabilidade da GEM, notório perfil de libertação controlada para uma atividade anticancerígena de longa duração, significativa atividade citotóxica em linha celular e CP e considerável internalização celular. A modificação das micelas usando membrana celular proveniente de CP possibilitou a obtenção de sistemas híbridos fortemente carregados negativamente, com potencial habilidade de mimetização – mesmo que parcialmente – no que toca à superfície de células de CP, revelando-se promissores para o desenvolvimento de sistemas híbridos biomiméticos baseados em micelas para terapias inovadoras de ponta para o CP.FC