Subconjuntos funcionales de astrocitos en el núcleo accumbens

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de Lectura: 31-01-2025Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 31-07-2026To fully understand how information is processed in the brain, we need techniques able to specifically target and control the activity of those elements involved, including astrocytes. These cells are key elements of brain circuits involved in regulating different aspects of neuronal and synaptic physiology. However, they have been traditionally overshadowed by the emphasis on neuronal activity when regulating behavior, being relegated to supporting elements. Unlike neurons, organized into ensembles that encode different brain representations, astrocytes have long been considered a homogeneous population. Taking into account that recent research has started to evidence their rich heterogeneity, the main goal of this doctoral thesis is to understand to which extent astrocytes are functionally specialized into distinct subsets within the same brain region. To address this, nucleus accumbens (NAc) circuits have been dissected. The NAc is an important integrator center in which converge for instance different glutamatergic signals coming primarily from the medial prefrontal cortex (mPFC), basolateral amygdala (Amyg), and ventral hippocampus (vHipp). Using mice as experimental model, astrocytic calcium activity within the NAc has been studied by a combination of multidisciplinary experimental and analytical methods, including i) tool implementation to identify and manipulate functionally-specific astrocytes; ii) calcium imagining recordings in astrocytes, ex vivo in acute slices and in vivo with fiber photometry; iii) spatial analysis methods for mapping astrocytic activation; iv) patch-clamp electrophysiological recordings ex vivo and in vivo with custom probes; v) optogenetic manipulations of neurons; vi) selective expression of gain and loss of function actuators in astrocytes; vii) immunohistochemical analysis. The results include the implementation of two different tools to study astrocytic functional subsets within entire circuits. Using them, they demonstrate ex vivo the specialization of NAc astrocytes with respect to the main glutamatergic and dopaminergic inputs. Astrocytes respond in a pathway-specific manner and show non-linear calcium activity in response to the costimulation of simultaneous glutamatergic afferences. These integrative responses are not observed in the entire astrocytic population, but in a subset of functionally specific astrocytes, defined as astrocyte ensembles. Moreover, the existence in vivo of these ensembles was addressed, revealing the presence of behavior-related astrocyte ensembles in the context of a Pavlovian conditioning task. Gain and loss-of-function manipulations of the task ensemble demonstrate that this subset of astrocytes is necessary for tuning a specific cue-reward association related to NAc function. Our results show that this ensemble is related to such output only after a learning process, pointing to astrocytes as brain memory encoders of specific representations. In conclusion, this thesis presents novel tools for the functional study of astrocytes within specific circuits and behaviors, demonstrating that these cells do not act in homogeneous populations but that their activity is specialized into distinct astrocyte ensembles necessary for the functional outputs of the mouse nucleus accumbensPara entender en profundidad cómo el cerebro procesa información, necesitamos técnicas capaces de capturar y controlar específicamente la actividad de aquellos elementos involucrados, incluyendo a los astrocitos. Estas células son clave en los circuitos cerebrales regulando diversos aspectos de la fisiología sináptica y neuronal, sin embargo, han sido tradicionalmente relegados como células de soporte a la hora de estudiar cómo la actividad cerebral modula nuestro comportamiento. A diferencia de las neuronas, que se organizan en diferentes ensembles con los que el cerebro codifica representaciones específicas, los astrocitos se han considerado un grupo celular uniforme. Teniendo en cuenta que recientes investigaciones empiezan a dar evidencia de la rica heterogeneidad presente en estas células, el principal objetivo de esta tesis doctoral es entender hasta qué punto los astrocitos están funcionalmente especializados en subconjuntos dentro de una misma región cerebral. Para abordar esto, se han estudiado los circuitos del núcleo accumbens (NAc), un importante centro integrador en el que confluyen diferentes señales como las glutamatérgicas provenientes principalmente de la corteza prefrontal medial (mPFC), la amígdala basolateral (Amyg) y el hipocampo ventral (vHipp). Utilizando como modelo experimental el ratón, se ha estudiado la actividad de calcio en astrocitos del NAc mediante una combinación multidisciplinar de métodos experimentales y analíticos, incluyendo: i) la implementación de herramientas para identificar y manipular astrocitos funcionalmente específicos; ii) registros de imagen de calcio en astrocitos, tanto ex vivo utilizando cortes agudos como in vivo mediante fotometría de fibra óptica; iii) métodos de análisis espacial para mapear la activación de los astrocitos; iv) registros electrofisiológicos patch-clamp ex vivo e in vivo mediante implantes fabricados; v) manipulaciones optogenéticas de neuronas; vi) expresión selectiva de moléculas que permiten ganancia y pérdida de función en astrocitos; vii) análisis de inmunohistoquímica. Los resultados incluyen la implementación de dos herramientas distintas, diseñadas para discernir de entre toda la población subgrupos de astrocitos funcionalmente específicos. Mediante su uso se demuestra ex vivo que la actividad de calcio de los astrocitos del NAc está especializada con respecto a las principales vías de entrada glutamatérgicas y dopaminérgicas. En este contexto, se muestra que los astrocitos responden de manera específica a los estímulos provenientes de cada una de estas aferencias, adaptando sus respuestas de manera no lineal cuando la información proviene de la co-estimulación simultánea de distintas vías glutamatérgicas. Estos patrones integradores no se observan en el total de los astrocitos del accumbens, sino en subgrupos funcionales definidos como ensembles de astrocitos. La existencia de estos ensembles también se estudió in vivo, revelando la presencia de ensembles comportamiento-específicos en el contexto de una tarea Pavloviana. Experimentos de ganancia y pérdida de función demostraron que el subgrupo de astrocitos asociado a dicha tarea es necesario para modular una asociación estímulorecompensa específica y que está relacionada con la funcionalidad del NAc. Los resultados muestran que la función de este ensemble sólo se observa tras pasar por un proceso de aprendizaje, posicionando a los astrocitos como elementos de memoria capaces de codificar representaciones específicas dentro del cerebro. En conclusión, este trabajo presenta nuevas herramientas para el estudio funcional de los astrocitos con respecto a circuitos y comportamientos específicos, demostrando que estas células no actúan en poblaciones homogéneas, sino que su actividad está especializada en diferentes ensembles astrocíticos, necesarios para las funciones emergentes del núcleo accumbens del ratónThis work has been funded and supported by the Ramón y Cajal Program (RYC-2016-20414) and the Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades (RTI2018-094887-B-100 and PID2021- 122586NB-I00). Moreover, the PhD candidate has been awarded with an EMBO Scientific Exchange Grant and with the second prize of the dissemination contest “Yo Investigo. Yo soy CSIC” (CSIC) used to complete a 3 months’ internship at the laboratory of Prof. George Malliaras (University of Cambridge, United Kingdom

Modelización del mecanismo de priming de la PrimPol humana a partir de datos experimentales y estructuras predichas por la IA

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de Lectura: 24-01-2025Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 24-07-2026PrimPol is the second primase discovered in eukaryotic cells, whose main role in vivo is to rescue stalled replication forks during nuclear and mitochondrial DNA replication via repriming. Our current work is focused on deciphering the key structural elements involved in its unique DNA primase activity. Regarding the structure, PrimPol contains an archaeo-eukaryotic primase (AEP) catalityc domain followed by a Zn finger-containing domain (ZnFD). Since 2016, the crystal structure of the AEP core domain is available. However, the experimental structure of the ZnFD, which is essential for primase activity, remains unresolved. Using the artifical intellinge-based AlphaFold software, in this doctoral thesis we have modelled the conformation that PrimPol may adopt to initiate primer synthesis, in which both ZnFD (predicted) and AEP core (crystallized) domains are in a closed state and interact with the DNA template and with the first 2 substrate nucleotides. Thanks to this model, new key residues of the ZnFD implicated in template interaction and nucleotide binding have been identified. Moreover, previous work demonstrated that HsPrimPol is able to use translesion synthesis (TLS) abilities as a primase being able to skip DNA lesions during priming. Despite this, there was no evidence regarding whether the ZnFD of HsPrimPol is influencing in this particular TLS primase activity. In this doctoral thesis we prove that specific residues of the ZnFD, the 5’ triphosphate and the cryptic base are essential components in order to maintain HsPrimPol TLS primase activity. Our results indicate that just the lack of one of them is enough to completely disrupt the ability of HsPrimPol to skip lesions while priming. In addition, using the HsPrimPol ZnFD predicted structure we made a comparative structural analysis between accessory domains of other primases. As a result, we propose a structural model of the priming mechanism of PrimPol from Thermus thermophilus, an enzyme of interest in biotechnology. Moreover, a structural comparison between primases from different families has been performed and we show that Zinc finger domains of DnaG and AEP primases are structurally related. Finally, it has been reported that mitochondrial Polγ is blocked in vitro by the active form of the antiviral drug remdesivir (remdesivir triphosphate or RTP), but the low impact in vivo on mitochondrial DNA replication stalling is likely due to repriming by HsPrimPol, which also operates in mitochondria. In this doctoral thesis, we have tested if RTP is a valid substrate for both DNA primase and DNA polymerase activities of HsPrimPol, and its impact in the production of mature DNA primers. RTP has shown to be an invalid substrate for elongation, but it can be used to initiate primers at the 5·site, competing with ATP. Nevertheless, RTP-initiated primers are abortive, occasionally reaching a maximal length of 4-5 mer, and do not support elongation mediated by primer/template distortions. However, considering that the concentration of ATP, the natural substrate, is much higher than the intracellular concentration of RTP, it is unlikely that HsPrimPol would use RTP for primer synthesis during a remdesivir treatment in real patientsPrimPol es la segunda primasa descubierta en células eucariotas, cuya principal función in vivo consiste en rescatar mediante repriming las horquillas de replicación bloqueadas. El trabajo del laboratorio está enfocado en identificar los elementos estructurales clave implicados en su única actividad como DNA primasa. En relación a su estructura, PrimPol contiene un dominio catalítico arqueo-eucariota (AEP) seguido de un dominio de dedos de zinc o zinc finger (ZnFD). Desde 2016 se conoce la estructura cristalográfica del dominio AEP, pero la estructura del ZnFD, el cual es esencial para mantener la actividad primasa de la enzima, sigue sin estar determinada. En esta tesis doctoral, utilizando el software de inteligencia artifical Alphafold, se ha modelado la conformación que PrimPol adopará el comienzo del priming, en la cual ambos dominios (ZnFD y AEP) estarán en una conformación cerrada e interaccionando con el DNA molde y los dos primeros nucleótidos libres. Gracias a este modelo, se han identificado nuevos residuos del ZnFD implicados en la interacción con el template y el anclaje del nucleótido 5’. Además, trabajo previo demostró que HsPrimPol es capaz de realizar síntesis a través de lesiones (TLS) durante su actividad como primasa. A pesar de esto, no hay evidencia previa sobre si el ZnFD de HsPrimPol, el cual es esencial para mantener la actividad primasa, también es necesario para mantener la actividad de TLS primasa. En esta tesis doctoral se ha demostrado que tanto residuos específicos del ZnFD, como la presencia de un trifosfato en el nucleótido 5’, como la base críptica son componentes esenciales para mantener la actividad TLS primasa de HsPrimPol. Nuestros resultados indican que basta con perder uno de ellos para perder completamente la actividad TLS de HsPrimPol durante el primado. Por otro lado, comparamos la predicción estructural del ZnFD de HsPrimPol con los dominios accesorios de otras primasas. Como resultado pudimos hacer un modelo estructural y del mecanismo de primado de la PrimPol de Thermus thermophilus, una enzima con interés biotecnológico. Asimismo, la comparación estructural entre primasas de diferentes familias nos ha permitido demostrar que la estructura de los ZnFDs de las primasas de las familias DnaG y AEP están emparentadas. Por último, se publicó que la Polγ mitocnodiral es bloqueada in vitro por la forma activa de la droga antiviral remdesivir (remdesivir trifosfato o RTP). Sin embargo, el poco impacto que se observó en el genoma mitocondrial in vivo sugiere que HsPrimPol puede estar actuando. En esta tesis doctoral hemos ensayado si el RTP es un sustrato válido tanto para la actividad DNA polimerasa como la actividad DNA primasa de la PrimPol humana y su impacto en la producción de primers maduros. El RTP resultó ser un sustrato no válido para elongación, pero pudo ser usado por la enzima para iniciar primers, compitiendo con el ATP por el extremo 5·del primer. A pesar de esto, los primers iniciados con RTP fueron abortivos y nunca pasaron de 4-5 nucleótidos. Si se considera que la concentración intracelular del ATP es muy superior a las del RTP, es muy improbable que HsPrimPol pueda usar RTP para hacer primers durante un tratamiento con remdesivir en la clínicaThis doctoral thesis has been fnanced through the Spanish Government (Ref.PGC2018-093576-B-C21(FEDER),Programa Estatal de Generación de Conocimiento;and Ref.PRE2019-08784

Dinámicas de carga intramoleculares ultrarápidas en sistemas donor-aceptor

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Química Física Aplicada. Fecha de Lectura: 17-01-2025Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 17-07-2026This thesis focuses on the description of the coupled electron nuclear dynamics in small prototype organic donor acceptor molecules, triggered by the action of ultrashort laser pulses. The work analyses the dynamics initiated by two different kinds of interactions: photoionization and photoexcitation. In both cases, our simulations of the coupled electron nuclear dynamics shed light on the behaviour of the charge distribution of the studied molecules after the interaction with the laser pulses. The dynamics triggered by photoionization are investigated in the context of a theoretical-experimental collaboration to analyse a set of XUV-IR pump-probe experiments performed on different species of nitroanilines. The theoretical results presented in this work explain the main experimental findings, namely an ultrafast change in the fragmentation yields of some of the species produced during the pumpprobe experiment, and how this is related to the charge dynamics triggered by the initial ionization. The dynamics in photoexcited molecules were simulated for the para and metanitroaniline molecules. The study shows how the charge dynamics initiated by the excitation depends on the electronic structure of the irradiated molecules, and how the effects affecting the dynamics play different roles at different time scales. In short, the present research helps understand the different kinds of charge dynamics which light matter interaction can trigger in small donor acceptor moleculesEsta tesis se centra en la descripción de la dinámica acoplada electrónica-nuclear en pequeñas moléculas orgánicas prototipo de sistemas donor-aceptor, desencadenada por la acción de pulsos láser ultracortos. El trabajo analiza las dinámicas iniciadas por dos tipos diferentes de interacciones: fotoionización y fotoexcitación. En ambos casos, nuestras simulaciones de la dinámica acoplada electrónica-nuclear permiten entender el comportamiento de la distribución de carga de las moléculas estudiadas tras la interacción con los pulsos láser. Las dinámicas desencadenadas por la fotoionización se investigan en el contexto de una colaboración teórico-experimental para analizar un conjunto de experimentos pump-probe XUV-IR realizados en distintas especies de nitroanilinas. Los resultados teóricos presentados en este trabajo explican los principales hallazgos experimentales, a saber, un cambio ultrarrápido en la fragmentación de algunas de las especies producidas durante el experimento pump-probe, y cómo esto está relacionado con la dinámica de carga desencadenada por la ionización inicial. Las dinámicas en moléculas fotoexcitadas se simularon para las moléculas para y metanitroanilina. El estudio muestra cómo la dinámica de carga iniciada por la excitación depende de la estructura electr ónica de las moléculas irradiadas, y cómo los efectos que afectan a la dinámica juegan diferentes roles en distintas escalas de tiempo. En resumen, la presente investigación ayuda a comprender los diferentes tipos de dinámicas de carga que la interacción luz-materia puede desencadenar en pequeñas moléculas donoras-aceptora

Evaluación del tratamiento combinado de células T NKG2D-CAR y fármacos epigenéticos para la terapia del neuroblastoma

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Bioquímica. Fecha de Lectura: 02-12-2024Esta Tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 02-06-2026El neuroblastoma (NB) representa el tumor sólido extracraneal más prevalente en la población pediátrica, siendo responsable de hasta el 15% de la mortalidad por cáncer en los menores de 15 años. A pesar de la implementación de tratamientos multimodales agresivos en pacientes de alto riesgo, la tasa de supervivencia se permanece limitada, rondando aproximadamente el 50%. Las terapias emergentes, como la terapia con células CAR-T, ofrecen nuevas esperanzas para estos pacientes. Parte de los mecanismos involucrados en la inmunovigilancia tumoral se centra en la interacción entre las células citotóxicas del sistema inmunológico, que expresan el receptor de grupo 2D del linfocito Natural Killer (NKG2D), y sus ligandos (NKG2DL) expresados en diversos tumores, incluido el NB. Sin embargo, las células tumorales pueden desarrollar mecanismos de evasión inmunológica, tales como la disminución de la expresión de NKG2DL o la liberación de NKG2DL solubles (sNKG2DL), lo que impide la interacción NKG2D-NKG2DL, obstaculizando la respuesta antitumoral. Se ha descrito que diferentes mecanismos epigenéticos pueden reprimir la expresión de NKG2DL en las células tumorales; sin embargo, existen ciertos agentes farmacológicos con el potencial de estimular su transcripción génica. En este estudio, planteamos la hipótesis de que la combinación de células T CAR-NKG2D con agentes que modulan la regulación epigenética podría superar estas limitaciones, ofreciendo una nueva alternativa terapéutica para el NB. Nuestros resultados revelan una expresión heterogénea de NKG2DL en líneas celulares y muestras primarias de NB. No obstante, algunas células de NB que expresan NKG2DL demostraron resistencia a la citotoxicidad de las células T CAR-NKG2D. Además, observamos que el tratamiento de las células de NB con fármacos epigéneticos como ácido valproico (VPA) y tazemetostat (TZM), eleva la expresión de NKG2DL y mejora la eficacia de los linfocitos T CAR-NKG2D. Los experimentos preliminares in vivo arrojaron resultados prometedores, reforzando el potencial de esta combinación terapéutica. En resumen, nuestros hallazgos indican que las células de NB podrían evadir la actividad de los linfocitos T CAR-NKG2D a pesar de la expresión de NKG2DL, sugiriendo la existencia de un umbral de detección. La utilización de fármacos que modulan la regulación epigenética de las células tumorales parece elevar el umbral de expresión de NKG2DL en las células de NB, facilitando el reconocimiento y la eliminación por parte de los linfocitos T CAR-NKG2D. Esta investigación preliminar propone un enfoque integral que combina la terapia celular con intervenciones farmacológicas, presentándose como una estrategia prometedora para tratar de manera eficaz el N

Caracterización multiescala de diodos rectificadores en condiciones de operación para mejorar su fiabilidad

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Física Aplicada. Fecha de Lectura: 16-12-2024Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 16-06-2026El desarrollo de este trabajo también fue posible gracias a los proyectos PID2021-124585NB-C33 y PID2020- 114192RB-C41 financiados por MCIN/AEI/10.13039/501100011033 y la ayuda RYC-2013-14436 financiada por MCIN/AEI/10.13039/501100011033 y RYC2021- 031236-I financiada por MCIN/AEI/10.13039/501100011033 y por la “Unión Europea NextGenerationEU/PRTR”. Se agradece también a The European Synchrotron Radiation Facility (The ESRF) y el CSIC por la financiación de los experimentos: A25-02-940, A25-02-997, A25- 02-1030, MA-5391 y A25-02-1074, así como al Centro de Microanálisis de Materiales (CMAM), de la Universidad Autónoma de Madrid (UAM) por la financiación de los experimentos IMP019/22 y IMP013/2

Escuela secundaria y disputas por lo social. Límites y posibilidades para una crítica en los discursos de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Formación del Profesorado y Educación, Departamento de Pedagogía. Fecha de Lectura: 05-12-2024Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 05-06-202

Vascular and hormonal interactions in the adrenal cortex

Tesis Doctoral inédita cotutelada por la Université París Cité y la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Farmacología. Fecha de Lectura: 04-12-2024Esta Tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 04-06-202

Enhancing nonlinear solvers for the Navier–Stokes equations with continuous (noisy) data assimilation

We consider nonlinear solvers for the incompressible, steady (or at a fixed time step for unsteady) Navier–Stokes equations in the setting where partial measurement data of the solution is available. The measurement data is incorporated/assimilated into the solution through a nudging term addition to the Picard iteration that penalized the difference between the coarse mesh interpolants of the true solution and solver solution, analogous to how continuous data assimilation (CDA) is implemented for time dependent PDEs. This was considered in the paper (Li et al. 2023), and we extend the methodology by improving the analysis to be in the L2 norm instead of a weighted H1 norm where the weight depended on the coarse mesh width, and to the case of noisy measurement data. For noisy measurement data, we prove that the CDA-Picard method is stable and convergent, up to the size of the noise. Numerical tests illustrate the results, and show that a very good strategy when using noisy data is to use CDA-Picard to generate an initial guess for the classical Newton iterationResearch is supported by grants PID2021-123200NB-I00 and PID2022-136550NB-I00 funded by MCIN/AEI/10.13039/501100011033 and by ERDF. A way of making Europe, by the European Union.Research is supported by grant PID2022-136550NB-I00 funded by MCIN/AEI/10.13039/501100011033 and by ERDF. A way of making Europe, by the European Union.Research, is partially supported by National Science Foundation grant DMS 2152623

Las células natural killer en la leucemia pediátrica: mecanismos de inmunovigilancia y su papel en la eficacia del tratamiento en un haplo-hsct

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Bioquímica. Fecha de Lectura: 29-05-2025Esta Tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 29-11-2026Pediatric acute leukemia is the most common cancer in children. Despite significant advances in survival rates, leukemia cells develop immune escape mechanisms that contribute to relapses or refractory disease. Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) remains the most effective curative option when combined with intensive chemotherapy, particularly for relapsed and high-risk patients. However, for those without a human leukocyte antigen (HLA)-matched donor, haploidentical HSCT (haplo-HSCT) serves as a viable alternative. HLA mismatch in haplo-HSCT increases the risk of graft-versus-host disease (GvHD). Nevertheless, alloreactive natural killer (NK) cells, arising from HLA/KIR (killer immunoglobulin-like receptor) disparity between the donor and recipient, mediate the graft-versus-leukemia (GvL) effect, reducing the risk of relapse and infections. Thus, optimizing therapies that mitigate GvHD while preserving the GvL effect could significantly improve clinical outcomes for pediatric patients. This doctoral research aimed to explore three main hypotheses: first, that an in-depth analysis of the interaction between bone marrow infiltrating NK (BiNK) cells and leukemia cells would reveal tumor escape mechanisms responsible for disease relapse. Second, that IL-15-stimulated NK (IL15-NK) cells could replicate the GvL effects mediated by alloreactive NK (allo-NK) cells in HLA-matched haplo-HSCT. Finally, that the NK cell-mediated GvL effect would remain unaffected by the use of ruxolitinib, a drug used to eliminate GvHD complications. The results revealed that the leukemic microenvironment inhibits the proper development and degranulation capacity of BiNK cells and NK cells. NK cells from peripheral blood (PB) regain their functionality during treatment. In contrast, BiNK cells fail to recover their functional capacity. Additionally, leukemic blasts at relapse were found to increase the expression of inhibitory ligands for BiNK cells, contributing to immune evasion. Furthermore, patients who received IL15-NK cell infusions exhibited similar clinical outcomes to those receiving allo-NK cell infusions, despite showing a more inflammatory environment during one year of follow-up. The NK cells infused after IL-15 activation demonstrated comparable immune reconstitution, immunophenotype, and functional capacity to allo-NK cells. Finally, experiments with TLR4/9 ligand-activated NK cells showed that ruxolitinib did not impair their cytotoxic capacity. Only at high concentrations, above the basal dose, did the drug alter the phenotypic profile and reduce the proliferative capacity of NK cells. In conclusion, this study elucidates the intricate interaction between BiNK cells and the leukemic microenvironment, providing key insights into tumor immune escape mechanisms and their role in disease relapse. It highlights the therapeutic potential of IL-15-stimulated NK cells in haplo-HSCT as a strategy to counteract NK cell hyporesponsiveness in pediatric patients with HLA/KIR compatibility. However, the inflammatory state observed in patients receiving IL-15-stimulated NK cell infusions could be managed with innovative pharmacological approaches, such as ruxolitinib, which effectively controls GVHD without compromising the NK cell-mediated IcL effect. Collectively, this thesis underscores the critical role of NK cells from the onset of acute leukemia to its eradication through transplantation, emphasizing their significance in improving clinical outcomes in pediatric leukemia patient

La red SOLVIT, como mecanismo alternativo de resolución de controversias para el fortalecimiento del mercado interior: Evolución y perspectivas de futuro

En el presente trabajo se recogen resultados de la investigación realizada en el contexto del Proyecto de I+D correspondiente al Programa estatal de fomento de la investigación científica y técnica de excelencia, Relaciones jurídicas transnacionales en el mercado interior y justicia administrativa (DER 2017-84500-P), dirigido por el profesor J. AGUDO GONZÁLEZ, 2018-21. Acción financiada por la Comunidad de Madrid en el marco del convenio plurianual con la Universidad Autónoma de Madrid en la Línea 3: Excelencia para el Profesorado Universitario en el marco del V PRICIT (V Plan Regional de Investigación Científica e Innovación Tecnológica