Sensibilidad de diferentes especies de Rhodnius (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) a una cepa brasileña de Trypanosoma rangeli (SC58/KP1-)

Introducción. Se han detectado asociaciones biológicas huésped-parásito específicas que sugieren que los triatominos del género Rhodnius podrían actuar como filtros biológicos en la transmisión de Trypanosoma rangeli. Objetivo. Estudiar la sensibilidad de cuatro especies de Rhodnius ( Rhodnius robustus , Rhodnius neglectus , Rhodnius nasutus y Rhodnius p ictipes ) frente a la cepa de T. rangeli (SC-58/KP1-). Materiales y métodos. Se seleccionaron treinta ninfas de cada especie después de xenodiagnóstico artificial en sangre infectada con T. rangeli. Se examinaron periódicamente m uestras de heces y hemolinfa. Los insectos con hemolinfas infectadas fueron alimentados en ratones a fin de comprobar la transmisión por picadura y posteriormente disecados para confirmar la infección de las glándulas salivales. Resultados . En Rhodnius pictipes se encontró un mayor porcentaje de infección intestinal que en las otras especies . Se detectaron epimastigotes y tripomastigotes en la hemolinfa de las cuatro especies , y se encontró que el parasitismo fue menor en las especies del linaje R. robustus . Rhodnius robustus y R. neglectus no transmitían T.rangeli a ratones por picadura: después de la disección , sus glándulas no estaban infectadas. Solo un espécimen de R.nasutus y dos de R. pictipes transmitieron el parásito por la picadura . La tasa de infección glandular fue de 16 % paraR. pictipes y de 4 % para R. nasutus. Conclusiones. La capacidad infecciosa ( hemolinfática, intestinal y glandular ) y la transmisión de T. rangeli (SC-58/KP1-) fueron mayores y más eficientes en R. pictipes . Estos resultados refuerzan la hipótesis de que estos triatominos actúan como filtros biológicos en la transmisión de T. rangeli. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACTIntroduction: Specific host-parasite a ssociations have been detected experimentally and suggest that triatomines of the genus Rhodnius act as biological filters in the transmission of Trypanosoma rangeli. Objective: To analyze the susceptibility of four Rhodnius species ( Rhodnius robustus , Rhodnius neglectus , Rhodnius nasutus and Rhodnius pictipes ) to a Brazilian strain of T. rangeli (SC-58/KP1-). Materials and methods: We selected t hirty nymphs of each species, which were fed on blood infected with T. rangeli. Periodically, samples of feces and hemolymph were analyzed. Triatomines with T. rangeli in their hemolymph were fed on mice to check for transmission by bites. Later, the triatomines were dissected to confirm salivary gland infection. Results: Specimens of R. pictipes showed higher rates of intestinal infection compared to the other three species. Epimastigotes and trypomastigotes were detected in hemolymph of four species; however, parasitism was lower in the species of the R. robustus lineage. Rhodnius robustus and R. neglectus specimens did not transmit T. rangeli by bite; after dissection, their glands were not infected. Only one specimen of R. nasutus and two of R. pictipes transmitted the parasite by bite. The rate of salivary gland infection was 16% for R. pictipes and 4% for R. nasutus. Conclusions: Both infectivity (intestinal, hemolymphatic and glandular) and transmission of T. rangeli (SC58/KP1-) were greater and more efficient in R. pictipes. These results reinforce the hypothesis that these triatomines may act as biological filters in the transmission of T. rangeli. Key words: Trypanosoma rangeli, Rhodnius, host-parasite interactions

Comparative biology and feeding behavior of Rhodnius neglectus and Rhodnius robustus (Triatominae) under laboratory conditions

Introdução: A competência vetorial de triatomíneos é determinada a partir de estudos sobre biologia e comportamento alimentar em condições de campo e/ou laboratório. Fatores como número de picadas, quantidade de sangue ingerido e tempo de defecação têm implicações na transmissão de tripanosomatídeos. Parâmetros biológicos e comportamentais de Rhodnius neglectus e R. robustus foram comparados experimentalmente para estimar diferenças no potencial de transmissão de tripanosomatídeos. Métodos: Os triatomíneos foram observados diariamente para determinar o período de desenvolvimento ninfal, mortalidade, detecção da fonte alimentar, número de picadas, tempo do repasto sanguíneo, quantidade de sangue ingerido, tempo entre o final do repasto e a primeira defecação e frequência de defecação. Resultados: Apesar do período ninfal de R. neglectus (156,4 ± 25,05d) ter sido menor que o de R. robustus (204,7 ± 13,22d), a mortalidade foi similar entre as espécies (63,8 e 65%, respectivamente). R. robustus e R. neglectus detectaram rapidamente a fonte alimentar, especialmente no primeiro estádio (2,5 e 1,6 min, respectivamente). Apesar do tempo de repasto sanguíneo ter sido similar entre as espécies, R. robustus ingeriu em média uma maior quantidade de sangue em todos os estádios, com maiores valores para as ninfas V. As ninfas de R. neglectus picaram mais vezes as fontes alimentares, defecaram mais rápido e mais frequentemente que as de R. robustus. Conclusões: Sob as condições de laboratório usadas, R. neglectus possui um maior potencial para transmissão de Trypanosoma cruzi e T. rangeli que R. robustus, atributo que deve ser avaliado em infecções experimentais.Introduction: The vector competence of triatomine insects is determined by studying their biology and feeding behavior under field and/or laboratory conditions. Factors including the number of bites, the amount of blood ingested and defecation time have implications for trypanosome transmission. The biological and behavioral parameters of Rhodnius neglectus and R. robustus were compared under experimental conditions to estimate differences in the potential transmission of trypanosomes. Methods: The insects were observed daily to determine the period of nymphal development, mortality, detection of food source, number of bites, time of blood meal intake, amount of blood ingested, time elapsed between the end of the meal and the first defecation and the frequency of defecation. Results: Although the nymphal development of R. neglectus (156.4 ± 25.05d) was lower than that of R. robustus (204.7 ± 13.22d), the mortality between species was similar (63.8 and 65% respectively). R. robustus and R. neglectus quickly located the food source, especially in the first instar (2.5 and 1.6 min, respectively). Although the time of blood meal intake was similar between the species, R. robustus ingested a larger amount of blood on average at all stages and exhibited higher values for the fifth instar. Nymphs of R. neglectus bit more frequently, and they defecated faster and more often than those of R. robustus. Conclusions: Under laboratory conditions,R. neglectus has a greater potential for transmission of Trypanosoma cruzi and T. rangeli than does R. robustus, an attribute that should be further evaluated in experimental infections

FIBROEDEMA GELÓIDE E QUALIDADE DE VIDA EM ESTUDANTES DO CURSO DE FISIOTERAPIA

Introduction: Fibroedema geloid (FEG) is a condition of the dermal and subcutaneous tissue that causes lipodystrophy changes in the tissue. Objective: To descriptively evaluate the percentage of the FEG classification, physical activity and quality of life of students and relate the quality of life of students in the Physiotherapy course at UFS Campus Lagarto with the FEG classification and physical activity. Methods: Qualitative study with a descriptive character of percentage, including students from the physiotherapy course at UFS Campus Lagarto aged between 18 and 30 years who had FEG. A part of the FEG Assessment Protocol questionnaire (PAFEG) and the quality-of-life questionnaire in women with cellulite (CELLUQOL) were used. Results: Most of the volunteers were practitioners of physical activity and had a mild degree of FEG, a little more than half of the participants had their quality of life affected in some degree of FEG. According to the Odds rate, there is a 31% chance that the FEG does not affect the quality of life of the participants, and a 2.833% chance that the participants who practice physical activity have their quality of life affected by the FEG. Conclusion: Most students practiced physical activity, had a mild degree and had their quality of life affected to some degree by the FEG. In addition, students with a moderate degree of FEG may be more likely to have a greater compromise in their quality of life, noting that there is no relationship between the practice of physical activity and quality of life.Introducción: El fibroedema geloideo (FeG) es una condición del tejido dérmico y subcutáneo que causa cambios lipotróficos en el tejido. Objetivo: Evaluar descriptivamente el porcentaje de clasificación feg, actividad física y calidad de vida de los estudiantes y relacionar la calidad de vida de los alumnos del curso de Fisioterapia de la UFS Campus Lagarto con la clasificación de FeG y actividad física. Métodos: Estudio cualitativo con carácter porcentual descriptivo, incluyendo estudiantes del curso de fisioterapia de la UFS Campus Lagarto con edades comprendidas entre los 18 y los 30 años que tenían FEG. Se utilizó una parte del cuestionario del Protocolo de Evaluación del FEAG (PAFEG) y del cuestionario de calidad de vida en mujeres con celulitis (CELLUQOL). Resultados: La mayoría de los voluntarios eran practicantes de actividad física y tenían un grado leve de FEAG, un poco más de la mitad de los participantes tenían la calidad de vida afectada en algún grado de FEAG. Según la odds rate, existe un 31% de probabilidades de que el FEAG no afecte la calidad de vida de los participantes, y un 2,833% de probabilidades de que los participantes que practican actividad física tengan la calidad de vida afectada por el FEAG. Conclusión: La mayoría de los estudiantes practicaron actividad física, presentaron grado leve y tuvieron la calidad de vida afectada en algún grado por el FEAG.  Además, los estudiantes con un grado moderado de FEAG pueden tener más probabilidades de tener un mayor deterioro de la calidad de vida.Introdução: O fibroedema gelóide (FEG) é uma afecção do tecido dérmico e subcutâneo que provoca alterações lipodistróficas no tecido. Objetivo: Avaliar descritivamente o percentual da classificação da FEG, atividade física e a qualidade de vida das estudantes e relacionar a qualidade de vida das estudantes do curso de Fisioterapia da UFS Campus Lagarto com a classificação da FEG e atividade física. Métodos: Estudo qualitativo com caráter descritivo de percentual, incluindo alunas do curso de fisioterapia da UFS Campus Lagarto com idade entre 18 e 30 anos que possuíam FEG. Foi utilizada uma parte do questionário Protocolo de Avaliação do FEG (PAFEG) e o questionário de qualidade de vida em mulheres com celulite (CELLUQOL). Resultados: A maior parte das voluntárias eram praticantes de atividade física e possuíam grau brando de FEG, um pouco mais da metade das participantes tem a qualidade de vida afetada em algum grau de FEG. De acordo com a taxa Odds, há 31% de chance de o FEG não afetar a qualidade de vida das participantes, e 2,833% de chances das participantes que praticam atividade física terem a qualidade de vida afetada pelo FEG. Conclusão: A maior parte das estudantes praticavam atividade física, apresentaram grau brando e tiveram a qualidade de vida afetada em algum grau pelo FEG.  Além disso, as estudantes com grau moderado de FEG podem ter mais chances de ter um maior comprometimento da qualidade de vida, notando-se que não há relação entre a prática de atividade física e a qualidade de vida

Trypanosoma rangeli : biologia do parasitismo em espécies do gênero Rhodnius e aspectos ultraestruturais na dinâmica da invasão e morfogênese em glândulas salivares

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde. 2011.Trypanosoma rangeli é um protozoário hemoflagelado parasita de triatomíneos e mamíferos, com a distribuição geográfica em vários países latino-americanos. Neste trabalho abordamos de três formas o estudo sobre o T. rangeli nas diferentes espécies de Rhodnius. Na primeira abordagem, estudamos a suscetibilidade e a competência vetorial das diferentes espécies de Rhodnius à cepa SC-58 de T. rangeli (genótipo KP1-), testando a hipótese de que essas espécies poderiam apresentar diferente susceptibilidade à cepa SC-58 devido a um mecanismo hipotético de co-evolução parasito-vetor; na segunda, analisamos o processo de penetração e adesão do T. rangeli nas glândulas salivares e morfogênese do T. rangeli em R. robustus; e na terceira, analisamos a influência da infecção por T. rangeli na biologia de algumas espécies de Rhodnius, testando a hipótese de que há diferença no ciclo biológico e comportamento alimentar dos espécimes infectados, quando comparados com os insetos não infectados. Na primeira abordagem, analisando-se a evolução da infecção por T. rangeli em 4 espécies de Rhodnius (R. neglectus, R. pictipes, R. robustus, R. nasutus), observou-se que a suscetibilidade (desenvolvimento no intestino, hemolinfa e glândula salivar) e o processo de transmissão deste protozoário foram maiores e mais eficientes em R. pictipes, reforçando a evidência relatada de que esses triatomíneos podem atuar como filtros biológicos na transmissão de populações geneticamente diferentes de T. rangeli. Na segunda abordagem, através das observações realizadas com Microscopia Eletrônica de Varredura e de Transmissão, observou-se que o fenômeno inicial de penetração e invasão nas glândulas salivares se daria por formas tripomastigotas e/ou epimastigotas. As micrografias mostraram várias formas de flagelados nas glândulas salivares – epimastigotas e tripomastigotas espalhadas na luz glandular. Finalmente, na terceira abordagem, comparando-se a duração do ciclo de vida, a taxa de mortalidade e o comportamento alimentar de R. neglectus, R. pictipes e R. robustus, observou-se que alguns parâmetros do comportamento alimentar como número de picadas, detecção do hospedeiro, número de interrupções e dejeções dos triatomíneos infectados foram modificados quando comparados com os espécimes não infectados.Trypanosoma rangeli is a hemoflagellated protozoan, triatomine and mammals parasite, present in many Latin American countries. In this work we approach the study about T. rangeli and the different species of Rhodnius in three forms. On the first approach, we study the susceptibility and vector competence of different species of Rhodnius to the strain SC-58 of T. rangeli (KP1- genotype), testing the hypothesis that these species could present different susceptibility due to a hypothetical mechanism of co-evolution parasite-vector; on the second approach, we analyze the invasion process (attachment, adhesion) in salivary glands and morphogenesis of T. rangeli in R. robustus; and on the third, we analyze the influence of the infection by T. rangeli in biology of some species of Rhodnius, testing the hypothesis that there are differences on biological cycle and feeding behavior on the infected species, when compared to uninfected insects. On the first approach, analyzing the evolution of the infection by T. rangeli in species of Rhodnius (R. neglectus, R. pictipes, R. robustus, R. nasutus), we observed that susceptibility (thorough the intestine, haemolymph and salivary glands development) and the transmission process of this protozoan were larger and more efficient in R. pictipes, reinforcing the reported evidence that these triatomines may act as biological filters in transmission of genetically different populations of T. rangeli. On the second approach, from observations carry out with Transmission and Scanning Electronic Microscopy, it was observed that the initial phenomenon of attachment and invasion into salivary glands occurred by trypomastigote and/or epimastigote forms. The micrographics showed several forms of flagellated in salivary glands – epimastigotes and trypomastigotes spread on the gland lumen. Finally, on the third approach, comparing the duration of life cycle, mortality rate and feeding behavior of R. neglectus, R. pictipes and R. robustus, it was observed that some parameters of feeding behavior as number of bites, source host detection, number of interruptions and dejecting in the infected triatomines were modified when compared with those uninfected control individuals

Biologia comparativa de Rhodnius neglectus e Rhodnius robustus (Triatominae) sob condições de laboratório e infecção experimental pelo Trypanosoma rangeli com ênfase nos aspectos ultraestruturais das glândulas salivares infectadas

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2006.Triatomíneos do gênero Rhodnius: R. neglectus e R. robustus, vetores naturais do Trypanosoma rangeli, foram identificados utilizando-se as chaves taxonômicas de Lent & Wygodzinsky, 1979 e a morfometria geométrica das asas. Este último confirmou sua utilidade como parâmetro de identificação taxonômica em triatomíneos do gênero Rhodnius. No estudo comparativo das estatísticas vitais e dos aspectos de comportamento alimentar, os triatomíneos das duas espécies foram observados diariamente para se estabelecer: (i) o período de desenvolvimento dos estádios ninfais; (ii) percentual de mortalidade; (iii) detecção do hospedeiro (tempo de aproximação dos triatomíneos ao hospedeiro vertebrado experimental); (iv) número de tentativas de picadas dos insetos no hospedeiro; (v) tempo total do repasto sanguíneo; (vi) índice de picadas; (vii) lapso entre o final do repasto e a primeira defecação; e (viii) quantidade de sangue ingerido. Comparando-se as duas espécies, R. neglectus apresentou um período ninfal significativamente menor que R. robustus, havendo diferença significativa (p<0,001) para todos os estádios, exceto para Ninfa V. Com relação ao comportamento alimentar, as duas espécies apresentaram os parâmetros bem similares, exceto para o número de picadas onde R. neglectus se apresentou significativamente maior para as Ninfas IV e V, e para a quantidade de sangue ingerido onde R. robustus apresentou uma média de ingestão significativamente maior que R. neglectus. Em R. robustus, registrou-se a presença dos dois pares de glândulas (D1 e D2), característica da espécie estudada. Para verificar o potencial vetorial de T. rangeli nas espécies de triatomíneos, utilizou-se três procedimentos laboratoriais com a cepa SC-58: infecção via alimentação em camundongo infectado, via inoculação intracelômica e via xenodiagnóstico artificial, mas não houve infecção das glândulas salivares. Após diversas tentativas, T. rangeli infectou a hemolinfa em apenas dois triatomíneos, sem progresso de infecção. Com a cepa LP-01, isolada recentemente de R. neglectus naturalmente infectado, realizou-se uma tentativa de infecção via alimentação em camundongo infectado, sem demonstrar invasão hemolinfática. Na infecção in vitro das glândulas salivares, foi utilizada uma glândula controle (sem infecção) e mais quatros glândulas, infectadas por quatro tempos distintos (30 minutos, 1, 3 e 24 horas), que foram processadas e levadas ao Microscópio Eletrônico de Varredura para verificar e documentar o processo inicial de adesão e penetração na membrana basal. Após o processamento, observou se que apenas com 30 minutos e 1 hora de infecção, flagelados encontravam-se aderidos na membrana basal, formando “grumos” com aparência de estar penetrando por orifícios grandes e visíveis. Isto poderia sugerir então que de alguma maneira, os flagelados lesam a membrana basal, com a finalidade de atravessá-la e ganhar passo às células do epitélio glandular.Rhodnius neglectus and Rhodnius robustus (Hemíptera, Triatominae), two species from the genus Rhodnius, were initially identified using the well known taxonomical keys described by Lent and Wygodzinsky ( 1979) and, in addition, techniques of wings geometric morphometry. Both approaches resulted in good agreement confirming the value of the last one in accurate identification of species of Rhodnius spp .Comparative studies on experimental life tables and feeding behavior of R. neglectus and R. robustus important natural vectors of Trypanosoma rangeli in Brazil, were carried out in order to establish: (i) time instars development (ii) mortality (iii) source host detection (iv) average number of bugs’ bite on host (v) bloodmeal spending time (vi) biting rate (vii) elapsed time between bloodmeal intake and first defecation (viii) total bloodmeal ingested . Main results of such comparison were: R. neglectus have shown a faster development of nymphs than R. robustus during all different stages except nymph V ( p<0,001). Regarding feeding behavior, if on one hand R neglectus demonstrated a higher number of bites in instar IV and V, on the other hand R. robustus have shown higher average of blood uptake . Two pairs of salivary glands (D1 and D2) were recorded in R. robustus and histologically described .The vector potential of the two species under study were pursued with challenges using two strains of T. rangeli (strains SC58 and LP01). Attempts of experimental infection using mouse infected with the flagellate, artificial xenodiagnosis and intracoelomic injections of cultures of the flagellate, were carried out with partial intestinal and haemolymphatic infections. No invasion of salivary glands were obtained in spite of our repeated efforts. Alternatively, salivary glands “in vitro infections” procedures, in different time-point( 30’, 1 hour, 24 hours) were performed. Studies on infected glands by light microscopy and scanning electron microscopy (SME) were done. Striking results were the recording of parasites recognition, adhesion and , probably, initial penetration through holes /orifices apparently produce by the flagellum of T. rangeli trypomastigotes/epimastigotes on the basal membrane surface. Our interpretation is that the parasite somehow open holes through the basal membrane of the salivary glands when they form clusters of flagellum first, to gain entry into the adjacent glandular epithelium

Biologia comparativa e comportamento alimentar de Rhodnius neglectus e Rhodnius robustus (Triatominae) sob condições de laboratório

INTRODUÇÃO: A competência vetorial de triatomíneos é determinada a partir de estudos sobre biologia e comportamento alimentar em condições de campo e/ou laboratório. Fatores como número de picadas, quantidade de sangue ingerido e tempo de defecação têm implicações na transmissão de tripanosomatídeos. Parâmetros biológicos e comportamentais de Rhodnius neglectus e R. robustus foram comparados experimentalmente para estimar diferenças no potencial de transmissão de tripanosomatídeos. MÉTODOS: Os triatomíneos foram observados diariamente para determinar o período de desenvolvimento ninfal, mortalidade, detecção da fonte alimentar, número de picadas, tempo do repasto sanguíneo, quantidade de sangue ingerido, tempo entre o final do repasto e a primeira defecação e frequência de defecação. RESULTADOS: Apesar do período ninfal de R. neglectus (156,4 ± 25,05d) ter sido menor que o de R. robustus (204,7 ± 13,22d), a mortalidade foi similar entre as espécies (63,8 e 65%, respectivamente). R. robustus e R. neglectus detectaram rapidamente a fonte alimentar, especialmente no primeiro estádio (2,5 e 1,6min, respectivamente). Apesar do tempo de repasto sanguíneo ter sido similar entre as espécies, R. robustus ingeriu em média uma maior quantidade de sangue em todos os estádios, com maiores valores para as ninfas V. As ninfas de R. neglectus picaram mais vezes as fontes alimentares, defecaram mais rápido e mais frequentemente que as de R. robustus. CONCLUSÕES: Sob as condições de laboratório usadas, R. neglectus possui um maior potencial para transmissão de Trypanosoma cruzi e T. rangeli que R. robustus, atributo que deve ser avaliado em infecções experimentais