TRANSFERÊNCIA DE RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA ENTRE ENTEROBACTÉRIAS PATOGÊNICAS DE IMPORTÂNCIA AVIÁRIA - IMPACTOS EM SAÚDE PÚBLICA

Ligações entre o uso indiscriminado de antimicrobianos na produção de animais, que se destinam à alimentação humana, conferindo pressão seletiva sobre microrganismos, e uma emergência na sua existência, surgimento, disseminação e transferência de genes que conferem de resistência a drogas antimicrobianas constituí preocupação global crescente. Processos de resistência antimicrobiana ocorrem de modo natural ou adquirido, sendo a maneira adquirida a mais preocupante. Vários são os mecanismos de transferência de resistência antimicrobiana, sobretudo elementos genéticos móveis são determinantes ao desenvolvimento de cepas bacterianas resistentes. Enterobactérias são frequentemente isoladas em produtos avícolas, sendo relatada múltipla resistência antimicrobiana e surtos de doenças em humanos. O objetivo da presente revisão foi discutir e expor aspectos relacionados à transferência de resistência antimicrobiana, destacando os impactos da utilização de antimicrobianos e o processo de transferência de resistência antimicrobiana entre bactérias patogênicas, zoonóticas e comensais de aves.

A922 Sequential measurement of 1 hour creatinine clearance (1-CRCL) in critically ill patients at risk of acute kidney injury (AKI)

Meeting abstrac

Detecção dos genes integron, invA e spvC em Salmonella Enteritidis proveniente de material avícola e transferência horizontal do gene integron entre enterobactérias

Neste trabalho foram analisadas 100 cepas de Salmonella Enteritidis (SE) isoladas de material avícola, visando à detecção dos genes de virulência spvC e invA e resistência a antimicrobianos integron classe 1. Comparando-se com a possível expressão dos fatores de virulência para sobrevivência em condições impróprias de temperatura, pH e concentração de nutrientes e o teste de inibição em placa, respectivamente. Também a capacidade de transferência horizontal do gene integron classe 1 foi avaliada em SE. Das cepas analisadas, duas apresentaram os genes spvC e invA, simultaneamente, com uma provável expressão destes sendo verificada no crescimento com pH 10,0 ou temperatura de 25ºC. Porém em relação à concentração de nutriente, ambas as cepas não cresceram na menor concentração (0,5%). Não houve relação direta entre a presença do gene integron classe 1 com a multiresistência de SE aos 14 antimicrobianos testados, já que 80% das cepas pesquisadas foram resistentes a até três antimicrobianos e não apresentaram o referido gene. Entretanto, a transferência horizontal desse gene e da resistência antimicrobiana foi realizada in vitro, de um Escherichia coli para uma Salmonella Enteritidis, demonstrando a capacidade de disseminação do gene presente em integron classe 1.In this work, 100 strains of Salmonella Enteritidis (SE) isolated from avian material were studied, aiming to detect the genes of virulence spvC and invA, as well as the antimicrobial resistance type 1 integron genes using the polymerase chain reaction (PCR), comparing it with the possible expression of the virulence factors to survive under inappropriate conditions of temperature, pH and nutrient concentration, and the plaque inhibition assay, respectively. Capacity of horizontal transfer of type 1 0,integron gene was also evaluated in SE. Two of the analyzed strains showed spvC and InvA genes simultaneously, with a probable expression verified through growing in pH 10.0 or 25°C temperature. However, regarding to nutrient concentration, the aforementioned strains did not grow at the lowest concentration (0.5%). There was no direct relation between type 1 integron gene and the multiresistance of SE to the 14 tested antibiotics, because 80% of the strains did not showed the gen, but was resistant till three antibiotics. However, horizontal transfer of this gene was performed in vitro, showing the capacity of dissemination of the type 1 integron gene between bacteria

Avaliação histopatológica e imunológica da mucosa intestinal de aves tratadas com Lactobacillus spp. desfiadas com Salmonella Enteritidis

Este estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a capacidade protetora de Lactobacillus spp. em frangos de corte desafiados com Salmonella Enteritidis, utilizando-o como tratamento no primeiro dia de idade, e posterior desafio com Salmonella Enteritidis fagotipo 04, observando-se possíveis alterações histopatológicas e imunológicas na mucosa intestinal, como o comprimento das vilosidades, a produção de imunoglobulina A e o peso corporal. Foi observada maior eficácia do tratamento com Lactobacillus spp. somente quando as aves foram desafiadas com Salmonella Enteritidis aos 21 dias de idade. O comprimento das vilosidades intestinais apresentou-se reduzido após os desafios, mostrando posterior regeneração. Com o desafio de Salmonella Enteritidis ocorrendo no terceiro dia de idade, verificou-se que aves jovens possuem maior sensibilidade à infecção.This study was driven with the objective of evaluate the protective capacity of Lactobacillus spp. in chickens challenged with Salmonella Enteritidis, utilizing as handling on one-day old chicks and posterior challenge with Salmonella Enteritidis phagotype 04, observing possible histopathological and immunological alterations in the intestinal mucosa, like the length of the villus, the production of immunoglobulin A and body weight. Greater efficacy in the treatment with Lactobacillus ssp. was observed only when the chicks were challenged with Salmonella Enteritidis at 21 days old. The length of the intestinal villus always diminished after challenge, regenerating later. After the first challenge of with Salmonella Enteritidis (at three-days old), we verified that young chicks possess a greater sensibility to infection.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

Transference in vitro of the resistance to the antimicrobials between Escherichia coli, Lactobacillus spp. and Salmonella enteritidis isolated from chickens

O objetivo deste trabalho foi verificar a possibilidade de transferência de resistência aos antimicrobianos entre bactérias normais da microbiota de frangos e Salmonella Enteritidis. Utilizamos amostras de Lactobacillus spp. (L. spp.), Salmonella Enteritidis (SE) e Escherichia coli (E. coli) previamente isolados de frangos, selecionados após prova de sensibilidade antimicrobiana in vitro conforme metodologia padrão (Comitê Nacional para Padrões Clínicos de Laboratório). Utilizamos aqueles com resistência e sensibilidade aos antimicrobianos indutores, chamados de bactérias doadoras e receptoras, respectivamente. Os antimicrobianos indutores foram utilizados para estimular a transferência de resistência aos antimicrobianos entre as bactérias. A possibilidade de transferência foi verificada da E. coli resistente para a SE e L. spp. Também foi verificada a transferência de uma amostra de L. spp resistente aos antimicrobianos indutores para a SE. Só foi possível verificar a transferência da resistência aos antimicrobianos indutores quando a bactéria doadora foi a E. coli e a bactéria receptora foi a SE. No presente estudo concluímos que a transferência de resistência aos antimicrobianos entre bactérias é possível, mas nem todas as bactérias participam desse evento, não transmitindo e nem adquirindo esta resistência.The objective of this work was to verify the possibility of transference of resistance to the antimicrobials between bacteria that are in the present normal microbiota of chickens and Salmonella Enteritidis. Samples of Lactobacillus spp. (L. spp.), Salmonella Enteritidis (SE) and Escherichia coli (E. coli) previously isolated from chickens, selected after the test of sensitivity antimicrobial in vitro according the standard method (National Committee for Clinical Laboratory Standards) utilizing those with resistance and sensibility to the antimicrobials inductors, named donor and receptor bacteria, respectively were used. Antimicrobials inductors were utilized to stimulate the transference of resistance to the antimicrobials between the bacteria. The possibility of transference was verified from the E. coli resistant to the SE and L. spp. Transference of a sample of L. spp resistant to the antimicrobials inductors to the SE was also verified. It was only possible to verify the transference of the resistance to the antimicrobials inductor when the donor bacteria was the E. coli and the bacteria receptor was SE. In the present study we conclude that the transference of resistance to the antimicrobials between bacteria is possible, however, not all bacteria participate in that trial, not transmitting and neither acquiring this resistance

Detection of CD4+ and CD8+ lymphocytes in the intestine of broiler chicks treated with lactobacillus spp. and challenged with Salmonella enterica serovar enteritidis

The expression of immune response as a leukocytic infiltrate by CD4+ and CD8+ cells in the epithelium and in the intestinal lamina propria of chicks fed Lactobacillus spp or cecal microflora (CM) and experimentally challenged or not with Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE) was studied using immunohistochemistry. Three hundred and twenty day-of-hatch broiler chicks were divided into four groups of 80 birds each and orally received L. reuteri, L. salivarius, L. acidophilus, or CM. Each group was subdivided into four subgroups of 20 birds each, classified as follows: a subgroup did not receive any oral treatment (negative control), subgroup treated with L. spp or CM, subgroup treated with L. spp or CM and challenged with SE, and subgroup only challenged with SE (positive control). The results show that the oral treatment with L. reuteri, L. salivarius, L. acidophilus, or CM and challenge or not with SE stimulated bird immune response as determined by the leukocytic infiltrate by CD8+ lymphocytes followed by CD4+ in the epithelium and in the lamina propria of the duodenum, jejunum, and cecum of chicks up to 12 days of age. CD8+ lymphocyte number was significantly higher in the intestine of chicks receiving CM and challenged with SE. The duodenum, followed by the jejunum, were the segments in which the immune response, as shown by T, CD4+ and CD8+ cells, was stimulated with the greatest intensity

Ácaro de saco aéreo (Cytodites nudus) em galinhas de subsistência: relato de caso

The mite Cytodites nudus is responsible for causing granulomatous pneumonia in infected birds. It can affect the air sacs, pneumatic bones, lungs and bronchi of chickens, turkeys, pigeons, pheasants and canaries, causing respiratory signs that can be easily confused with other diseases. The clinical signs are characterized by coughing, dyspnea, emaciation, weight loss, peritonitis, weakness, loss of balance, airway obstruction, airsaculitis, diarrhea and consequently death. Diagnosis is made through the necropsy and histopathological examination of the lung. This work aims to report a case of infestation by C. nudus in subsistence chickens evaluated in Avian Pathology Laboratory college of Veterinary Medicine and Animal Science of the São Paulo State University (FMVZ - UNESP), Botucatu - SP, Brazil.El ácaro Cytodites nudus es responsable de causar la neumonía granulomatosa en las aves infectadas. Puede afectar los sacos aereos, los huesos neumáticos, los pulmones y bronquios de los pollos, pavos, palomas, faisanes y canários, causando síntomas respiratorios que puede ser fácilmente confundido con otras enfermedades. Los signos clínicos se caracterizan por tos, dificultad para respirar, adelgazamiento, pérdida de peso, peritonitis, debilidad, pérdida del equilibrio, la obstrucción de las vías respiratorias, aerosaculitis, diarrea y por lo tanto muerte. El diagnóstico se realiza a través de la necropsia y examen histopatológico de los pulmones. Este trabajo tiene como objetivo reportar un caso de infestación por Cytodites nudus en gallinas de subsistencia que fueran atendidos en el Laboratorio del Ornitopathology la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad del Estado de São Paulo (FMVZ - UNESP), Botucatu - SP, Brasil.O ácaro Cytodites nudus é responsável por causar pneumonia granulomatosa nas aves infectadas. Pode acometer os sacos aéreos, ossos pneumáticos, brônquios e pulmões de galinhas, perus, pombos, faisões e canários, ocasionando sinais respiratórios que podem ser facilmente confundidos com outras doenças. Os sinais são caracterizados por tosse, dificuldade respiratória, emaciação, perda de peso, peritonite, fraqueza, perda de equilíbrio, obstrução das vias aéreas, aerossaculite, diarreia e consequentemente morte. O diagnóstico é feito pelos achados de necropsia e o exame histopatológico de pulmão. Este trabalho teve como objetivo relatar um caso de infestação por Cytodites nudus em galinhas de subsistência atendidas no laboratório de Ornitopatologia da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade Estadual Paulista (FMVZ – UNESP), Botucatu – SP, Brasil

Comparação de métodos para extração de dna na reação em cadeia da polimerase para detecção de Salmonella enterica sorovar enteritidis em produtos avícolas

The identification of Salmonella spp. in food samples by microbiological diagnosis is time consuming, with approximately five different stages, requiring about 120 hours until the final result. The utilization of the polymerase chain reaction technique (PCR) can reduce this time, but substances present in samples may affect the reaction. The present work aimed to compare DNA extraction by thermic treatment and by the use of cetyltrimethil ammonium bromide (CTAB), in products originated from poultry houses corresponding to raw material (meat meal) and experimentally contaminated drag swabs. Materials obtained from the extractions were submitted to PCR, utilizing a pair of initiator oligonucleotides for amplification of Sdf 1 gene fragments. Comparing the methods of extraction, it was observed that when CTAB was employed, SE was detected in 70% of meat meal and in 80% of drag swabs, while the thermic treatment method yielded positive results in 20% of meat meal and in 40% of drag swabs. SE was detected under both methods utilized for DNA extraction, but the use of CTAB detected a greater number of positive samples, compared with thermal treatment.A identificação de Salmonella spp. em amostras de alimentos por diagnóstico microbiológico é demorada, com aproximadamente cinco diferentes etapas, levando cerca de 120 horas até o resultado final. A utilização da técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) pode diminuir esse período; entretanto, substâncias presentes nas amostras podem afetar a reação. O objetivo deste trabalho foi comparar a extração de DNA de Salmonella enterica sorovar Enteritidis (SE), por tratamento térmico e pelo uso do cetyltrimethil ammonium bromide (CTAB), em produtos provenientes de granjas avícolas, correspondentes a matéria prima (farinha de carne) e a suabes de arrasto experimentalmente contaminados. As amostras de DNA obtidas com as extrações foram submetidas a PCR, utilizando-se um par de oligonucleotí- deos iniciadores para amplificação de DNA do gene específico de SE – Sdf 1. Comparando-se os métodos de extração, observou-se que quando do uso do CTAB detectou-se SE em 70% de matéria prima e em 80% de suabes de arrasto, enquanto com o método por tratamento térmico houve positividade em 20% de matéria prima e em 40% de suabes de arrasto. Houve detecção de SE em ambos os métodos utilizados para extração de DNA, porém, o uso de CTAB detectou maior número de amostras positivas, quando comparado com o tratamento térmico

Evaluation of the antimicrobian resistance of Escherichia coli isolated of healthy hens (Gallus gallus).

Intestinal microbiota of the chickens is composed by many species of bacteria that benefit the host in many ways during its life. When the host is submitted to inadequate treatments with antibiotics, this microbiota suffers a selection trial, becoming resistant to these drugs. It was evaluated the resistance profile of Escherichia coli isolated from intestine of healthy posture hens to the antibiotics. From 100 samples analyzed, 83 showed resistance to more than three antibiotics, and two were resistant to all of the tested antibiotics.La microbiota intestinal de los pollos se compone de muchas especies bacterianas que benefician al huésped de diversas maneras durante toda su vida. Cuando el huésped es sometido a tratamientos antibióticos inadecuados, este microbiota sufre un proceso de selección y puede llegar a crear resistencia a dichos fármacos. En este estudio, evaluamos el perfil de resistencia de Escherichia coli aislada del intestino de gallinas de postura sanas. De las 100 muestras, 83 presentaron resistencia a más de tres antibióticos y dos de las muestras fueron resistentes a todos los antibióticos probados.A microbiota intestinal das aves é composta por inúmeras espécies bacterianas que beneficiam o hospedeiro de alguma maneira durante toda sua vida. Quando o hospedeiro é submetido a tratamentos inadequados com antimicrobianos, essa microbiota sofre um processo de seleção, podendo tornar-se resistente a esses medicamentos. Nesse estudo avaliamos o perfil de resistência de amostras de Escherichia coli isoladas do intestino de galinhas de postura saudáveis aos antimicrobianos. Das 100 amostras analisadas, 83 apresentaram resistência a mais de três antimicrobianos, sendo que duas amostras foram resistentes a todos os antibióticos