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    Activités de systèmes antioxydants chez Unio tumidus, bivalve dulçaquicole en conditions physiologiques et de stress chimique

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    The subject of this research concerned the use of biomarkers for the control of the health of exposed populations in the aquatic environment. We have been involved in the study of antioxidant systems as biomarkers for toxicity. Antioxidant systems can neutalize chemical reactive species produced by the endogenous metabolism, but also by xenobiotics. The different antioxidant parametres we have been studying are the activities of glutathione peroxidase, glutathione reductase, catalase and reduced and oxidized glutathione levels. Those different antioxidant activities were measured in frehwater bivalves, Unio tumidus, in physiological conditions and during a stress induced by chemicals. There were no significant differences between the basal levels measured in the males and the femelles. The season (spring and automn) did not seem to have any influence on the antioxidant parameters, except for (i) the glutathione reductase activities in the digestive glands and (ii) the catalase activities in the gills ; both were weaker during the spring than during the automn. The antioxidant activities were generaly smaller in the gills compared to the digestive glands. When the bivalves were exposed to a stress, in the laboratory or in situ during field experimentations, we have noticed that glutathione peroxidase selenium-dependent and glutathione reductase activities as well as reduced glutathione levels were sensitives and may be candidates as biomarkers for toxicity. Those parameters were decreased in the digestives glands as in the gills when bivalves were exposed in the laboratory to chemicals as copper and thiram, but also during field experimentations when the organisms were transfered in areas polluted by polycyclic aromatic hydrocarbons (pahs) and polychlorobiphenyls (pcbs). The decreases of those parametres may traduce some toxic effects due to xenobiotics. But it is necessary to study the relationships between the antioxidant responses and the contamination levels in oder to know the meaning of the induction or the inhibition of those antioxidant activitiesCette recherche a été conduite dans le but de déterminer si les systèmes antioxydants pouvaient constituer des biomarqueurs de toxicité intéressants et de bons indices capables de refléter l'éventuelle contamination d'un site. Le stress oxydant implique la formation d'espèces radicalaires très réactives pouvant être générées au cours de processus physiologiques mais également lors de la métabolisation de certains xénobiotiques. Nous sommes intéressés aux systèmes de défense antioxydants et avons étudié les activités d'enzymes telles les glutathion peroxydases, la gluthation réductase et la catalase, associées aux mesures des taux de glutathion réduit et oxyde. Ces différentes activités antioxydantes ont été étudiées chez Unio tumidus, bivalve dulcaquicole, en conditions physiologiques mais également chez des individus soumis à un stress chimique dans des conditions environnementales et expérimentales. Nous n'avons pas mis en évidence de différences significatives entre les activités antioxydantes mesurées chez les individus mâles et femelles, ni entre les femelles au cours de la période de reproduction. Les saisons (printemps et automne) ne semblent pas influencer les paramètres antioxydants suaf pour (i) l'activité glutathion réductase au niveau hépatique et (ii) l'activité catalase au niveau branchial qui sont toutes deux plus faibles au printemps qu'à l'automne. Les activités antioxydantes ont des niveaux globalement plus faibles dans les branchies que dans les glandes digestives. Lorsque les individus sont soumis à un stress chimique, au laboratoire ou in situ, nous avons remarqué que les activités glutathion réductase, glutathion péroxydase sélénium-dépendante et les taux de glutathion réduit semblaient sensibles et répondre rapidement à la présence de polluants. Ils pourraient donc constituer des indicateurs intéressants de l'état précaire des individus. Ces trois paramètres étaient fortement diminues dans les branchies et dans les glandes digestives lors de l'intoxication des individus au laboratoire avec du cuivre et du thiram, mais également lors des etudes de terrain chez des bivalves transférés sur un site fortement pollué par les hydrocarbures aromatiques polycycliques (haps) et les polychlorobiphényles (pcbs). La déplétion de ces activités antioxydantes semblent traduire des effets de toxicité induits par les contaminants et pourraient être utilisés comme biomarqueurs de toxicité. Mais il est indispensable d'étudier les relations entre les réponses des systèmes antioxydants et les niveaux de contaminations pour pouvoir à plus long terme connaître la signification d'une induction ou d'une inhibition de ces système

    Polymorphus Minutus Affects Antitoxic Responses of Gammarus Roeseli Exposed to Cadmium

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    The acanthocephalan parasite Polymorphus minutus is a manipulator of its intermediate host Gammarus roeseli, which favours its transmission to the final host, a water bird. In contaminated environments, G. roeseli have to cope with two stresses, i.e. P. minutus infection and pollutants. As P. minutus survival relies on its host's survival, we investigated the influence of P. minutus on the antitoxic defence capacities and the energy reserves of G. roeseli females after cadmium exposure. In parallel, malondialdehyde, a toxic effect biomarker, was measured in G. roeseli females and in P. minutus. The results revealed that infected females displayed higher cell damage than uninfected ones, despite an apparent increase in reduced glutathione and metallothionein production. In fact, the increase of these antitoxic systems could be counterbalanced by carotenoid intake by the parasite, so that the overall defence system seemed less efficient in infected females than in uninfected ones. In addition, we demonstrated that cadmium induced cell damage in P. minutus, probably linked with cadmium accumulation in the parasite. Altogether, we observed a paradoxical pattern of responses suggesting that P. minutus increases cadmium toxicity in G. roeseli females although (i) it tends to increase several host antitoxic defence capacities and (ii) it bears part of the pollutant, as reflected by cell damage in the parasite

    Intérêts du test des comètes pour l'évaluation de la génotoxicité environnementale

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    L'objectif général de ce travail était l'étude de l'intérêt du test des comètes en génotoxicité environnementale. Pour cela, nous avons étudié, au moyen de cet essai, les dommages à l'ADN, chez des mammifères contaminés par la voie alimentaire dans un premier temps, puis chez un invertébré d'eau douce, Unio tumidus, suite à des expositions au benzo(a)pyrène et au fer ferrique in vivo, en conditions contrôlées au laboratoire. Les études avec les rats montrent l'apparition de dommages à l'ADN principalement dans le foie, chez les animaux nourris par des moules fortement contaminées suite a une marée noire et permettent d'établir le transfert des polluants présents et des hydrocarbures aromatiques polycycliques, des moules vers le consommateur. Des effets sont également observés à un degré moindre dans les cellules de moelle osseuse. Les résultats d'une étude sur leur réversibilité montrent que les dommages mis en évidence sont transitoires, avec une réparation complète en deux semaines dans tous les cas. Dans la deuxième partie relative à l'étude de deux marqueurs de génotoxicité chez le bivalve Unio tumidus, les réponses observées étaient dues à la toxicité du benzo(a)pyrène. Les cassures de la molécule d'ADN mesurées par le test des comètes ne sont pas apparues comme le paramètre le plus sensible, comparées à la mesure des lésions d'oxydation. Globalement, le test des comètes se révèle adapté à l'étude de la génotoxicité d'échantillons environnementaux et de la biodisponibilité de composés génotoxiques.The aims of this work was to the study the interest of the single-cell gel electrophoresis (Comet) assay, in environmental genotoxicity. DNA damage were studied in mammals contaminated via the food and in freshwater invertebrates. Studies with the rats demonstrated the occurrence of DNA damage in the livers of the animals fed with mussels strongly contaminated following an oil slick and established a transfer of polycylic aromatic hydrocarbons present in mussels to the consumers. Genotoxic effects were also registered in the bone marrow cells. The results of a study on their reversibility pointed that DNA damages were transitory, with a complete repair in two weeks in our exposure conditions. The second part of this work related genotoxic effects consecutive to in vivo exposures to benzo(a)pyrene and ferric iron in the freshwater bivalve Unio tumidus. For the two markers of genotoxicity, DNA breaks measured by the comet assay and oxidative DNA damage assessed by the measurement of the 8-oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine by HPLC-EC, responses were mainly consecutive to the toxicity of benzo(a)pyrene. DNA breaks did not appear as the most sensitive parameter under these conditions of exposure, comparatively to the measure of DNA oxidation lesions. Globally, the comet assay proved to be adjusted to study the genotoxicity of environmental samples and the biodisponibility of genotoxic compounds.METZ-SCD (574632105) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

    Effect of Multiple Parasitic Infections on the Tolerance to Pollutant Contamination

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    The horizontally-transmitted acanthocephalan parasite Polymorphus minutus and the vertically-transmitted microsporidian parasite Dictyocoela roeselum have both been shown to influence on the antitoxic responses of mono-infected Gammarus roeseli exposed to cadmium. The present study investigates the effect of this co-infection on the antitoxic defence responses of naturally infected females exposed to cadmium stress. Our results revealed that, depending on the cadmium dose, bi-infection induced only slight, significant increased cell damage in G. roeseli as compared to non-infection. In addition, the antitoxic defence pattern of cadmium-exposed bi-infected hosts was similar to the pattern of cadmium-exposed D. roeselum-infected hosts. Reduced glutathione concentrations, carotenoid levels and γ-glutamylcystein ligase activity decreased, while metallothionein concentrations increased. This similar pattern indicates that host physiology can be controlled to some extent by microsporidia under stress conditions. It supports the hypothesis of a disruption of acanthocephalan effects in the presence of microsporidia. However, the global negative effects of bi-infection on host condition should be tested on more biological models, since competition between parasites depends on life history trade-off
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