Modulation of neuroinflammation by phenolic sulfates metabolites

"Within the central nervous system, microglial cells are key regulators of a set of inflammatory processes. The microglial inflammatory response is the main contributor to the process of neuroinflammation. Inside the brain, under certain abnormal conditions, a sustained microglial activation may lead to an exacerbation of the inflammatory state, causing chronic pathological conditions such as neurodegeneration. (...)"N/

PROGRESSIVE CONSTRUCTIONS IN BRAZILIAN PORTUGUESE AND ENGLISH

Esse artigo discute diferenças no licenciamento de construções progressivas em português brasileiro (PB) e inglês. Minha proposta central é que a variação translingüística pode ser explicada por um único requerimento universal: o operador de progressivo (no sentido de Landman, 1992) deve ter escopo sobre algum elemento que possua o traço [+ stage]. Stage, sob este ponto de vista, é um traço semântico relacionado à propriedade de "ser dinâmico em um intervalo de tempo". Os dados discutidos neste artigo mostram que o significado básico das classes verbais e o significado das construções progressivas é o mesmo em PB e inglês. A variação translingüística é explicada a partir das propriedades específicas dos verbos auxiliares usados em construções progressivas; em outras palavras, o verbo auxiliar em PB possui o traço [+ stage], mas o verbo auxiliar em inglês não o possui

Design, development and in vitro evaluation of a plasmid DNA delivery system

Cancer is one of the major causes of morbidity and mortality worldwide. It involves genetic changes that affect a variety of genes, namely tumour suppressor genes. The traditional approaches for cancer treatment include chemotherapy, surgery and radiation. Chemotherapy represents the main choice of treatment in most cases, however, traditional therapies seemed unvalued to fight against metastasis, recurrence of tumour, and the treatment of advanced cancer. Therefore, new strategies need to be developed to increase therapy efficacy. Gene therapy has brought a promising and unique approach to medicine because of its wide application in the treatment of various diseases, including hereditary diseases to acquired (infection or cancer) pathologies. p53 suppressor gene mutation or degradation is found in more than 50% of human cancers, therefore, gene therapy protocols focussed on the restauration of p53 protein are a priority in this field. For gene therapy viability in a clinical setting, the development of an efficient gene delivery system is imperative. The conception of delivery systems based on cell penetrating peptides represents an incredible asset and may deeply contribute for the evolution of cancer therapy. In this context, a new system for p53 encoding plasmid DNA (pDNA) delivery based on RALA peptide was designed and developed in order to produce a suitable intracellular delivery platform capable of gene delivery and restoration of p53 levels within the cancer cells. These carriers were characterized in terms of morphology, size, surface charge, loading and encapsulation efficiency and the fine structure was analyzed by Fourier-transformed infrared (FTIR) spectroscopy. The results showed that formed nanoparticles are suitable for cell uptake, internalization and gene release. Furthermore, stability studies demonstrated that RALA is capable of protect encapsulated DNA from serum nucleases and MTT assay showed that these systems are biocompatible. Confocal microscopy and live cell imaging experiments confirmed intracellular localization of nanoparticles, resulting in enhanced sustained pDNA uptake. Moreover, in vitro transfection of HeLa cells mediated by RALA/pDNA vectors allowed the detection of mRNA transcripts by RT-PCR and p53 protein expression by Western Blot. An ELISA kit assay quantified the produced protein levels. From these progresses, apoptosis in cancer cells was investigated. Caspase 3 activation was monitored by means of colorimetric assay and TUNEL assay enabled to confirm nuclear DNA fragmentation post transfection with the carriers. Lastly, a western blot assay with BAX antibody permitted to figure out which apoptosis pathway is responsible for cancer cells death. Taken together, the presented results revealed that the RALA/pDNA vector seems to be suitable as an innovative platform for p53 mediated cancer gene therapy.O cancro é uma das principais causas de morbidade e mortalidade em todo o mundo. Envolve mudanças genéticas que afetam uma variedade de genes, como os oncogenes e genes supressores de tumor. Esta alteração leva a uma proliferação celular desregulada, angiogénese, invasão e formação de metástases. As abordagens tradicionais para o tratamento do cancro incluem quimioterapia, cirurgia e radiação. A quimioterapia representa a principal escolha de tratamento na maioria dos casos, no entanto, as terapias tradicionais são ineficazes no combate de metástases, na recorrência do tumor e no tratamento do cancro num estado mais avançado. Em alguns casos estes tratamentos são ineficazes, inespecíficos, podem danificar células saudáveis, causar resistência a fármacos e serem acompanhados por efeitos secundários indesejáveis. Portanto, novas estratégias precisam de ser desenvolvidas de forma a aumentar a eficácia terapêutica. A terapia genética proporciona uma abordagem promissora e única à medicina devido à sua ampla aplicação no tratamento de várias doenças, incluindo doenças hereditárias e patologias adquiridas (infeção ou cancro). É uma técnica que usa ácidos nucleicos exógenos (DNA ou RNA) para reparar, substituir ou regular genes que expressem uma proteína terapêutica de interesse de forma a prevenir ou tratar uma doença. O gene supressor de tumor da proteína p53 é responsável por manter a integridade do genoma sobre situações de stress e está envolvido em várias vias celulares como a reparação do DNA, regulação do ciclo celular e indução da apoptose. No entanto, este gene encontra-se mutado ou inexistente em mais de 50 % dos cancros humanos, e, portanto, é fundamental criar protocolos de terapia génica que permitam restaurar o nível e função desta proteína. Para a terapia génica ser viável num cenário clínico é necessário desenvolver um sistema de entrega de genes eficiente. A conceção de sistemas de entrega baseados em péptidos capazes de penetrar nas células é vantajosa e pode contribuir para a evolução da terapia do cancro. Neste contexto, foi desenvolvido um novo sistema de entrega de DNA plasmídico (pDNA) codificante para a p53 com base no péptido RALA de modo a obter um sistema de entrega intracelular adequado e capaz de entregar o gene e restabelecer os níveis de p53 nas células cancerígenas. O péptido RALA é um péptido anfipático composto por 30 aminoácidos, com uma estrutura em hélice-a que possui baixa citotoxicidade. Este péptido quando conjugado com ácidos nucleicos estabelece interações eletrostáticas e forma partículas com tamanho nanométrico adequadas para a captação celular e internalização nuclear. No presente trabalho, estes transportadores foram, numa fase inicial, caracterizados em termos de morfologia, tamanho, carga superficial e eficiência de encapsulação por microscopia eletrónica de varrimento (SEM) e através da Dispersão da Luz Dinâmica (DLS) usando o Zetasizer Nano Zs., respetivamente, e a sua estrutura analisada através de espectroscopia de infravermelho transformada por Fourier (FTIR). Os resultados mostraram que as nanopartículas formadas possuem uma forma esférica/oval, um tamanho adequado, carga global positiva e eficiências de encapsulação do plasmídeo elevadas o que indica que são adequadas para a captação celular, internalização e libertação de genes. Além disso, estudos de estabilidade demonstraram que o péptido RALA é capaz de proteger o pDNA encapsulado das nucleases séricas e o ensaio de brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2yl) -2,5-difenil tetrazolium (MTT) mostrou que estes sistemas são biocompatíveis. Experiências de microscopia confocal e de live cell imaging confirmaram a localização intracelular de nanopartículas e a co-localização do plasmídeo no núcleo, logo após 2 h de transfecção. Além disso, a transfecção in vitro de células HeLa mediada pelos vetores RALA/pDNA permitiu a deteção de transcritos de mRNA por reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR) e expressão da proteína p53 por western blot. Um kit de ensaio de imunoabsorsão enzimático (ELISA) permitiu quantificar os níveis de proteína produzidos. A partir destes progressos, a indução de apoptose pelos sistemas RALA/pDNA nestas células cancerígenas do colo do útero foi avaliada. A ativação da caspase-3 foi monitorizada por meio de um ensaio colorimétrico e o ensaio de deteção de células em apoptose por TUNEL permitiu confirmar a fragmentação do DNA nuclear após transfecção com os poliplexos. Por último, um ensaio de western blot para marcação da proteína BAX permitiu perceber que a morte celular observada nas células tumorais transfetadas pelos nanos sistemas RALA/pDNA foi induzida pela via de apoptose intrínseca mediada pela BAX que por sua vez foi ativada pela suplementação do nível do supressor de tumor p53 nestas células. Em suma, o conjunto de resultados apresentados no presente trabalho revelam que o vetor RALA/pDNA parece ser adequado para aplicação na terapia génica do cancro

O contador de histórias : das representações literárias ao contexto educativo atual

Neste artigo cruzam-se duas perspetivas complementares sobre o contador de histórias : a visão transmitida em obras da literatura portuguesa e a visão de educadores e professores. Para isso efetuou-se um levantamento da figura do contador em obras de diversas épocas que remetem para o contexto do ato de contar, identifi cando vários aspetos da sua caracterização, em particular a questão de género, os objetivos do contador e as estratégias utilizadas. Estes elementos são cruzados com os resultados de um questionário aplicado a um grupo de educadores e professores, analisando-se em especial os dados que remetem também para as suas representações e práticas em relação aos três elementos acima referidos, salientando-se assim os propósitos que tanto nas representações literárias do contador como na prática atual em contexto escolar se evidenciam, acrescentando-se ainda, no caso dos respondentes ao questionário, a eventual utilização das novas tecnologias como apoio ao ato de contar

E-Learning e desenvolvimento profissional de bibliotecários : entre o global e o local

Neste artigo apresentam-se os resultados de um estudo efetuado com os estudantes de um curso vocacionado para o desenvolvimento profissional de bibliotecários. O objetivo central consiste em analisar de que forma o modelo que foi desenvolvido, ao aliar uma vertente de reflexão teórica mais global, seguindo a modalidade de e-learning, e a aplicação local (em contexto de trabalho) de determinadas ferramentas de análise e de intervenção, corresponde às necessidades de formação destes profissionais. No estudo empírico seguiu-se uma metodologia de base qualitativa, através da aplicação de um questionário aos estudantes do curso de pós-graduação em Ciências da Informação e da Documentação. Os resultados obtidos revelam, entre outros aspectos, que o desenho do curso promove a criação de comunidades de aprendizagem, em que os níveis de interação e de partilha de ideias têm um peso significativo, proporcionando, segundo os inquiridos, experiências mais diversificadas e de melhor qualidade. Ressaltam ainda a importância de uma reflexão crítica, social e profissionalmente contextualizada, realizada no seio de comunidades de aprendizagem, permitindo a construção conjunta do conhecimento e aliando-se, desta forma, uma dimensão “global” com uma dimensão “local”

Controlo da velocidade em eixos rodoviários: definição de soluções combinadas de acalmia de tráfego

Peer Reviewe

Data mining: uma potencial ferramenta para a analise de tendências em dados limnológicos?

Hoje em dia, a quantidade de dados armazenados excede a capacidade de análise dos mesmos senão se recorrer ao uso de técnicas de análise automatizadas. Como consequência deste aumento efectivo de informação, o processamento através de métodos tradicionais tornou-se mais difícil e complexo. A descoberta de conhecimento em bases de dados é um campo que está em evolução de forma a fornecer soluções de análise automatizadas. O conhecimento obtido pode ser expresso na elaboração de modelos predictivos. No presente trabalho pretende-se avaliar, ainda que de que forma preliminar, a potencial utilidade destas ferramentas para a detecção de tendências e padrões em dados de natureza limnológica

Experimental and numerical evaluation of bond properties between reinforcement and concrete

A study of the bond behaviour between steel reinforcement bars and four different types of surrounding concrete: normal strength concrete (NSC), steel fibber reinforced concrete (SFRC) and two structural lightweight aggregate concretes (SLWAC) is here presented. Five beam-tests according to Standard RILEM (1982) [5] were conducted on specimens under monotonously increased loading. Bond-slip response curves between concretes and reinforcement are obtained and discussed. The results obtained show that standard bond length of 10∅d is not adequate to determine bond characteristics of reinforcement in concretes with grades higher than C 25/30. Bond failure of the NSC beam did not occur but the bar itself failed. Bond failure was observed for NSC beam and for LWAC and SFRC beams when reduced bond length of 5∅d was used. A numerical simulation of the beam tests using the finite element method analysis, using bond-slip model of CEB-FIP Model Code 1990 [1] and real properties of test materials, was also carried out and the results are compared with the experimental values