Characterization of the Proinflammatory Profile of Synovial Fluid-Derived Exosomes of Patients with Osteoarthritis

The purpose of this study is to characterize synovial fluid- (SF-) derived exosomes of patients with gonarthrosis comparing two methods of isolation and to investigate their immune regulatory properties. Extracellular vesicles (EVs) have been isolated from inflamed SF by polymer precipitation method and quantified by Exocet kit and by nanoparticle tracking analysis. Vesicles expressed all the specific exosomal markers by immunoblot and FACS. After isolation with Exoquick, a relevant contamination by immune complexes was detected, which required further magnetic bead-based purification to remove. SF-derived exosomes significantly stimulated the release of several inflammatory cytokines and chemokines and metalloproteinases by M1 macrophages but did not influence the expression of CD80 and CD86 costimulatory molecules. In conclusion, we characterized purified exosomes isolated from inflamed SF and demonstrate that purified exosomes are functionally active in their ability to stimulate the release of proinflammatory factors from M1 macrophages. Our data indicate that SF-derived exosomes from gonarthrosis patients play a role in disease progression

GAMMA-ORYZANOL HAS AN EQUIVALENT EFFICACY AS A LIPID-LOWERING AGENT COMPARED TO FIBRATE AND STATIN IN TWO DYSLIPIDEMIA MICE MODELS

Objective: A substantial fraction of the population is intolerant or does not respond well to the recommended treatments for dyslipidemia. The purpose of this study was to evaluate the efficacy ofgamma-oryzanol (γ-ORZ) treatment in acute and long-term mouse experimental models of dyslipidemia in comparison toGemfibrozil and Simvastatin. Methods: For the acute dyslipidemia-induced model, dyslipidemia was induced in 40 mice using a single intra-peritoneal administration of Triton WR-1339. For the long-termmodel, dyslipidemia was induced in 24 mice using a hypercholesterolemic diet over 14 days. Thereafter, animals were divided into different groups of treatment,and orally received treatments with gamma-oryzanol (5, 25, 50mg. kg-1), gemfibrozil or simvastatin. For biochemical analysis, glucose, total cholesterol and triacylglycerols were measured. Body weight and net food intake was registered weekly, and urea, creatinine, AST and ALT levels were evaluated. The data were analyzed by analysis of variance (ANOVA), followed by the Student-Newman-Keuls method,and p value of less than 0.05 was considered significant. Results: Only the highest dose of γ-ORZ exhibited significant protective effects. Gamma-oryzanol andGemfibrozil treatments reduced total cholesterol and triacylglycerols levels in a similar manner in the acute model. In the second model, γ-ORZ and simvastatin treatments reduced glucose and total cholesterol levels in the same way. In addition, the administration ofγ-ORZ did not cause any adverse events, or significantly altered hepatic enzymes levels, plasmatic urea or creatinine concentrations. Conclusion: The results of this study suggest that gamma-oryzanol acts as a potential lipid-lowering agent, reducing triglycerides and total cholesterol in dyslipidemia-induced models

A sportomics soccer investigation unveils an exercise-induced shift in tyrosine metabolism leading to hawkinsinuria

Tyrosine metabolism has an intense role in the synthesis of neurotransmitters. Our study used an untargeted, sportomics-based analysis of urine samples to investigate changes in metabolism during a soccer match in 30 male junior professional soccer players. Samples were collected before and after the match and analyzed using liquid chromatography and mass spectrometry. Results showed significant changes in tyrosine metabolism. Exercise caused a downregulation of the homogentisate metabolites 4-maleylacetoacetate and succinylacetone to 20% (p = 4.69E−5) and 16% (p = 4.25E−14), respectively. 4-Hydroxyphenylpyruvate, a homogentisate precursor, was found to be upregulated by 26% (p = 7.20E−3). The concentration of hawkinsin and its metabolite 4-hydroxycyclohexyl acetate increased ~six-fold (p = 1.49E−6 and p = 9.81E−6, respectively). Different DOPA metabolism pathways were also affected by exercise. DOPA and dopaquinone increased four-to six-fold (p = 5.62E−14 and p = 4.98E−13, respectively). 3-Methoxytyrosine, indole-5,6-quinone, and melanin were downregulated from 1 to 25%, as were dopamine and tyramine (decreasing to up to 5% or 80%; p= 5.62E−14 and p = 2.47E−2, respectively). Blood TCO2 decreased as well as urinary glutathione and glutamate (40% and 10% respectively) associated with a two-fold increase in pyroglutamate. Our study found unexpected similarities between exercise-induced changes in metabolism and the inherited disorder Hawkinsinuria, suggesting a possible transient condition called exercise-induced hawkinsinuria (EIh). Additionally, our research suggests changes in DOPA pathways may be involved. Our findings suggest that soccer exercise could be used as a model to search for potential countermeasures in Hawkinsinuria and other tyrosine metabolism disorders

A new method for the determination of very small Γ γ

We present a new method for the measurement of very small Γγ partial width that is important for the synthesis of elements in astrophysics. The method is based on the simultaneous detection of scattered beam, residual nucleus and decay γ rays. This method is optimized for the use of the CHIMERA detector at LNS. Experimental details are described

O exercício como modelo para estudo do metabolismo de aminoácidos e amônia

Intracelular increase of AMP during sub maximal exercise leads to an activation of AMP deaminase following production of inosine monophosphate and ammonia. In the same direction amino acids (AAs) are used as a carbon donors for the tricarboxylic acid cycle to maintain the ATP concentration in the cell. Both metabolic pathways lead to an increase in intracellular and blood ammonia concentration. In these events, the blood ammonia concentration can raise up to 400% the resting levels. Hyperammonemia is linked with lack in neurotransmitter regulation and can be associated with neuronal excitotoxicity and/or death. Raise in ammonia synthesis during exercise is related to decrease in neuro-physical capacity in health athletes and can affect the performance. The temporary disturbances in the central nerve system caused by exercise are similar to the observed in hepatic disease and neurodegenerative disorders. Here we evaluate different exercises intensities associated with metabolic modifications induced by diet and/or supplementation to understand ammonia metabolism. We showed the blood appearance kinetics of muscle injury markers and some metabolites. We suggested that the increase in these enzymes came primarily from muscle damage instead of liver and that white blood cells are selectively mobilized independently of hemoconcentration. We also had shown the early appearance of muscle injury markers in different kinds of exercise. Our results suggest that we are able to use exercise as a general model to study ammonia metabolism in humans without requiring external ammonia exposure.Doutor em Genética e BioquímicaA produção de amônia durante o exercício submáximo ocorre principalmente pela quebra da adenosina monofosfato (AMP) via AMP deaminase produzindo inosina monofosfato (IMP) e amônia. Na tentativa de auxiliar a manutenção das concentrações de ATP constantes e sinérgico a desaminação do AMP, os aminoácidos (AAs) são utlizados como doares de carbono para o ciclo dos ácidos tricarboxílicos (TCA) com consequênte liberação de amônia. Nestas situações a amonemia pode aumentar em até 400% acima dos valores considerados normais para o indivíduo sadio em repouso. A hiperamoniemia está associada à alteração na regulação de neurotransmissores podendo ser suficiente para causar excitotoxidade neural e/ou morte. Por isso, propõe-se que a produção de amônia relacionada ao exercício físico pode ser um dos fatores responsável pela diminuição da capacidade cognitivo-física em atletas saudáveis, afetando o processo de continuidade da atividade e produzir queda da performance. Estes distúrbios momentâneos no funcionamento do sistema nervoso central (SNC) são semelhantes àqueles encontrados em fases iniciais de diversas doenças relacionadas à hiperamoniemia e/ou doenças neuro-degenerativas. Pode-se assim, postular que o exercício intenso e prolongado seja capaz de induzir um estado tóxico de amonemia agudo e subclínico. Podendo ser suficientemente severo a regiões críticas do SNC afetando a realização de atividades coordenadas. Nesta tese avaliaremos exercícios de diferentes intensidades combinado a modificações metabólicas induzidas por dieta e/ou suplementação para estudo do metabolismo de amônia em humanos, buscando estabelecer um modelo experimental

As brasileiras

Esta dissertação tem como tema as narrativas seriadas brasileiras, tendo como objeto de estudo o seriado As Brasileiras (2013), produzido pela Lereby e exibido pela emissora Rede Globo. O recorte proposto para o objeto foi a enunciação do narrador do seriado, que se faz presente em todos os episódios e o objetivo deste trabalho foi perceber, no discurso do narrador, noções de identidade nacional e brasilidade, de maneira a pensar essas noções na contemporaneidade. A narrativa seriada, herdeira do melodrama folhetinesco, está localizada em um contexto mercadológico de produção: sua estética é embasada em uma lógica do capital, que tanto promove a venda de bens culturais como também a democracia a partir da mistura da "alta" e da "baixa" cultura. No seriado As Brasileiras, é possível debater as noções de identidade e representação no que tange a identidade nacional, que pode tanto ser percebida como unificada e atrelada ao projeto de nação na modernidade, como pode ser vista como diversa, apresentando a diversidade cultural. Assim, foi possível perceber tanto traços da modernidade quanto da pós-modernidadeThis dissertation is an assessment of the series of narratives from the TV show, As Brasileiras, (2013), produced by Lereby, and aired by Rede Globo. The segment proposed was the narration of the series, which is present in all episodes. The goal of this dissertation is to recognize in the narrator's speech, the expression of national identity and "Brasility", and how it can relate it to a contemporary interpretation. The melodramatic narration is situated in a capitalistic production context where its environment/background evokes a capitalist ideation, which not only promotes the sale of unnecessary cultural goods, but also incorporates the democratic mixture of "high" and "low" culture. In the series As Brasileiras, it is possible to debate the notions of identity and representation, regarding national identity, which can be seen as unified and related to a project of nation and modernity, as it can be seen as diverse, showing cultural diversity. Thus, it was possible to notice traits of modernity as well as postmodernit

O punctum de Barthes e o estranho familiar em Freud

With this work, it is elaborated a rapprochement between the concepts of uncanny, by Sigmund Freud, and punctum, by Roland Barthes. The purpose is understanding that the photographic image, when cut by gaze comes as a demand of a strange but familiar and through which time is suspended. There is something on the image that pricks the gaze, opening a fissure between the referent and the image. It is also articulated anguish as an affect that does not deceive and which points to the subjects truth. Affect that can be mobilized through the punctum, concept developed by Barthes during his mourning period after his mother’s death, Henriette.Com este trabalho, elabora-se uma aproximação dos conceitos de estranho, em Sigmund Freud, e punctum, em Roland Barthes. O objetivo é mostrar que o ponto na imagem fotográfica recortado pelo olhar vem como demanda de um estranho familiar e por meio do qual o tempo é suspenso. Há algo da imagem que punge o olhar, abrindo uma fissura na representação. Articula-se também a angústia como afeto que não engana e que aponta para a verdade do sujeito. Afeto pelo qual pode ser mobilizada pelas vias do punctum, conceito desenvolvido no período de luto após a morte Henriette, mãe de Barthes.

Perfil hematológico e de reservas de macronutrientes em jogadores de futebol em fase de pré-temporada

A performance de jogadores de futebol está intimamente ligada ao seu treinamento e sua possibilidade de recuperação. As con­dições de treinamento e alimentação em clubes de distintas divisões são singularmente diferentes. No presente estudo comparamos o perfil hematológico e bioquímico de duas equipes de jogadores do futebol brasileiro, uma da primeira divisão (EqP) e outra da terceira divisão (EqA) na fase de pré-temporada. As equipes tinham diferentes condições de treinamento, alimentação e de suporte multiprofissional que estavam relacionadas à estrutura do clubes a que pertenciam. Os atletas foram avaliados hematologicamente e bioquimicamente em jejum no dia da sua apresentação ao clube. A análise do setor vermelho dos atletas da EqP mostrou uma maior saturação de hemoglobina, assim como um setor branco diferenciado, com leucometria maior em aproximadamente 37%, iminentemente entre os neutrófilos e monócitos (p < 0,05). A análise de indicadores nutricionais do grupo da primeira divisão revelou também uma maior reserva de macronutrientes com concentração mais elevada de glicose, triacilgliceróis e albumina sanguineos. Em adição a concentração sanguinea de creatinina e uréia da EqP foram maiores sugerindo maior turnover protéico. Nossos achados podem indicar que a EqP da primeira divisão conta com atletas com maior condição nutricional e melhor possibilidade de recuperação pós-exercício e sugerem a possibilidade de acompanhamento de equipes desportivas através de análises bioquímicas com o objetivo de melhora de performance

“Nada contra, mas (...)”: uma análise netnográfica do discurso de ódio sobre o beijo gay da novela Órfãos da Terra.

Telenovelas são potentes influenciadoras e promulgadoras de debates sobre interesses sociais, sobretudo em plataformas de rede social, devido à liberdade de expressão garantida pelo espaço propenso à exposição de opiniões. Nesse sentido, buscou-se entender em que medida tais discursos simbólicos podem ser percebidos como discursos odiosos. Assim, utilizou-se como objeto de pesquisa uma publicação do perfil oficial da Rede Globo no Instagram, em que se exibe uma imagem de beijo entre duas mulheres da novela Órfãos da Terra, de 2019. A partir do monitoramento social da postagem e de procedimentos metodológicos embasados na netnografia, percebeu-se a repetição de argumentos por parte dos sujeitos e a presença de enunciações e normativas pré-estabelecidas para fundamentar e justificar o ódio difundido