呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体的制备

目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定。方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化。重组蛋白免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分析结果选择L3935和L4099组小鼠进行脾脏免疫。融合后,用间接ELISA法筛选和多次克隆化,获得稳定分泌抗L蛋白单克隆抗体细胞株,并结合ELISA、免疫荧光和免疫印迹对所获得的单抗进行鉴定。结果:获得11株L蛋白特异性单克隆抗体,亚类鉴定结果 IgG1、IgG2a和IgG3单抗各3株,IgG2b单抗2株。结论:成功制备了L蛋白特异性单克隆抗体,也为RSV感染的免疫和发病机制研究奠定基础。国家自然科学基金(No.81401668)项

Simultaneous Detection of FLT3-ITD and NPM1Gene Mutations in Acute Myeloid Leukemia by Double PCR

本研究旨在建立一种同时筛查flT3-ITd突变和nPM1突变的检测方法。设计2对引物,分别扩增nPM1基因的外显子12和flT3基因的外显子14、内含子14、外显子15,以覆盖几乎所有已知突变位点。对双重PCr体系的反应程序和引物浓度比例进行优化,将双重PCr产物通过毛细管电泳分离,根据野生型产物和突变型产物的大小差异来判断突变存在与否并利用产物的峰面积对突变比例进行定量,并对突变阳性标本进行测序验证。结果表明,在93例标本中nPM1突变者17例(18.5%),flT3-ITd突变者15例(16.3%),nPM1突变和flT3-ITd突变双阳性6例。17例nPM1突变中7例M2、4例M4、5例M5、1例M6,其中10例男性、7例女性;有15例为A型,1例为b型,1例为nM型;有1例CMl急变为AMl的标本中带有nPM1基因A型突变。15例flT3-ITd阳性中1例M1、8例M2、2例M3、1例M4、3例M5,其中5例男性、10例女性。扩增产物测序结果进一步证明了该检测体系的准确性和可靠性。结论 :建立了同时筛查flT3-ITd突变和nPM1突变的检测体系,该体系以基因组dnA为模板,具有方便、快捷、准确、可定量的优点。Objective of this study was to establish a method for simultaneous detection of FLT3/ITD and NPM1 gene mutations in AML.A double PCR was firstly designed and optimized to amplify both exon 12 of NPM1 and exon 14-intron 14-exon 15 of FLT3,with the aim of detecting almost all reported mutations.After optimization,a touchdown PCR was chosen for the multiplex PCR procedure,with the primer concentrations of NPM1 and FLT3-ITD being 200 nmol/L and 152 nmol/L respectively.The PCR amplicons were separated by capillary electrophoresis and the presence of mutants was recognized by the size difference between the mutants and wild-type products.The areas of mutant peak and wild-type peak were used to calculate the mutant/wild-type ratio.All the positive mutated samples were confirmed by sequencing.The results showed that 17 patients with NPM1 mutation,15 patients with FLT3-ITD mutation,6 patients with both NPM1 and FLT3-ITD mutationts were found among 93 patents.7 patients with M2,4 patients with M4,5 patients with M5 and 1 patients with M6 were found out of 17 patients with NPM1 mutation,in which 10 patients were male and 7 patients were female,15 patients were with type A,1 patients was with type B and 1 patients was with type Nm,strinkingly 1 CML patient in blast crisis was found to carry a type A mutation.Among 15 patients with FLT3-ITD mutation 1 patient with M1,8 patients with M2,2 patients with M2,2 patients with M3,1 patient with M4,3 patients with M5 were found,in which 5 patients were male and 10 patients were lemale.Sequencing results further confirmed the accuracy and reliability of this method.It is concluded that a novel method with the ability to detect both FLT3-ITD and NPM1 mutations has been developed when genomic DNA was templated.This method is fast,easy,accurate and capable to calculate the mutant/wild-type ratio

Abundance and production of bacteria and their correlations with environmental factor

以2014年8月南海北部海水样品为研究对象,利用平板计数法和流式细胞仪计数法对南海北部表层和垂直海域可培养细菌和细菌总数分布状况进行研究,对细菌; 生产力进行测定,并结合环境因子进行相关性分析。结果表明:珠江口到南海北部海域,水平方向可培养细菌总数变化范围是3.70*10~2 ~; 1.42*10~3 CFU/mL,细菌总数变化范围是5.12 * 10~5 ~1.61 * 10~6; cells/mL,细菌生产力的变化范围是0.03 ~0.40 mg/m~3/h;垂直方向上可培养细菌变化范围是1.08 *10~3 ~9.00; *10~3 CFU/mL,细菌生产力变化范围是0.01 ~0.08; mg/m~3/h,其中表层海水中的细菌生产力明显高于底层。与环境因子相关性分析表明,水平方向上,影响南海北部表层海水细菌总数和细菌生产力的主要因; 素是温度、盐度、硝酸盐(NO_3-N)、硅酸盐(SiO_3-Si)、亚硝酸盐(NO_2-N)和磷酸盐(PO_4-P)(P<0.05);垂直方向上; ,影响南海北部可培养细菌总数的主要因素是NO_2-N(P<0.05),影响细菌生产力的主要影响因素是温度和盐度(P; <0.05)。可见,南海北部表层海水中细菌总数高于可培养细菌总数2; ~3个数量级,表明该海域表层海水存在大量不可培养细菌;细菌的生命活动在海水表层相较底层更为活跃。Distribution of abundance and production of bacteria and their; correlations with environmental factor were investigated, using plate; count method and flow cytometry, in the surface and vertical waters of; the northern south China sea in August 2014. The cultivable bacterial; abundance ranged from 3.70 * 10~2 CFU/mL to 1.42 * 10~3 CFU/ mL, the; total bacterial abundance ranged from 5.12 * 10~5 cells/mL to 1.61 *; 10~6 cells/mL and the bacterial productions varied from 0.03 mg/m~3/h to; 0.40 mg/m~3/h in horizontal distribution. In vertical distribution, the; cultivable bacterial abundance ranged from 1.08 * 10~3 CFU/mL to 9.00 *; 10~3 CFU/mL and the bacterial productions varied from 0.01 mg/m~3/h to; 0.08 mg/m~3/h, respectively. The correlation analysis results showed; that the environmental factors affecting the abundance of total bacteria; and bacterial productivity included temperature, salinity,; nitrate(NO_3-N),silicate (SiO_3-Si), nitrite (NO_2-N),and phosphate; (PO_4-P) (P<0.05). NO_2-N was the main influencing factor to cultivable; bacteria abundance (P < 0.05), while bacterial productivity was highly; correlated with temperature and salinity in vertical distribution of; northern south China sea (P < 0.05). The total bacterial abundance was 2; ~ 3 orders of magnitude higher than cultivable bacteria, suggesting that; there were many uncultured bacterium in surface water of northern south; China sea and bacterial activities in the surface maybe more active than; in the bottom.全球变化与海气交互作用; 国家重点研发计划全球变化及应对专项; 海洋公益性行业科研专

中国物理海洋学研究70年：发展历程、学术成就概览

本文概略评述新中国成立70年来物理海洋学各分支研究领域的发展历程和若干学术成就。中国物理海洋学研究起步于海浪、潮汐、近海环流与水团,以及以风暴潮为主的海洋气象灾害的研究。随着国力的增强,研究领域不断拓展,涌现了大量具有广泛影响力的研究成果,其中包括:提出了被国际广泛采用的"普遍风浪谱"和"涌浪谱",发展了第三代海浪数值模式;提出了"准调和分析方法"和"潮汐潮流永久预报"等潮汐潮流的分析和预报方法;发现并命名了"棉兰老潜流",揭示了东海黑潮的多核结构及其多尺度变异机理等,系统描述了太平洋西边界流系;提出了印度尼西亚贯穿流的南海分支(或称南海贯穿流);不断完善了中国近海陆架环流系统,在南海环流、黑潮及其分支、台湾暖流、闽浙沿岸流、黄海冷水团环流、黄海暖流、渤海环流,以及陆架波方面均取得了深刻的认识;从大气桥和海洋桥两个方面对太平洋–印度洋–大西洋洋际相互作用进行了系统的总结;发展了浅海水团的研究方法,基本摸清了中国近海水团的分布和消长特征与机制,在大洋和极地水团分布及运动研究方面也做出了重要贡献;阐明了南海中尺度涡的宏观特征和生成机制,揭示了中尺度涡的三维结构,定量评估了其全球物质与能量输运能力;基本摸清了中国近海海洋锋的空间分布和季节变化特征,提出了地形、正压不稳定和斜压不稳定等锋面动力学机制;构建了"南海内波潜标观测网",实现了对内波生成–演变–消亡全过程机理的系统认识;发展了湍流的剪切不稳定理论,提出了海流"边缘不稳定"的概念,开发了海洋湍流模式,提出了湍流混合参数化的新方法等;在海洋内部混合机制和能量来源方面取得了新的认识,并阐述了混合对海洋深层环流、营养物质输运等过程的影响;研发了全球浪–潮–流耦合模式,推出一系列海洋与气候模式;发展了可同化主要海洋观测数据的海洋数据同化系统和用于ENSO预报的耦合同化系统;建立了达到国际水准的非地转(水槽/水池)和地转(旋转平台)物理模型实验平台;发展了ENSO预报的误差分析方法,建立了海洋和气候系统年代际变化的理论体系,揭示了中深层海洋对全球气候变化的响应;初步建成了中国近海海洋观测网;持续开展南北极调查研究;建立了台风、风暴潮、巨浪和海啸的业务化预报系统,为中国气象减灾提供保障;突破了国外的海洋技术封锁,研发了万米水深的深水水听器和海洋光学特性系列测量仪器;建立了溢油、危险化学品漂移扩散等预测模型,为伴随海洋资源开发所带来的风险事故的应急处理和预警预报提供科学支撑。文中引用的大量学术成果文献(每位第一作者优选不超过3篇)显示,经过70年的发展,中国物理海洋学研究培养了一支实力雄厚的科研队伍,这是最宝贵的成果。这支队伍必将成为中国物理海洋学研究攀登新高峰的主力军

Web应用服务器中Web Service引擎的设计与实现

Web Service为程序之间的交互提供了基础,实现了独立于程序设计语言的一致化编程模型, 并以通用的方法进行应用程序集成.本文分析了Web应用服务器实现Web Service的关键需求,阐述了在应用服务器中基于SOAP的Web Service引擎的设计与实现,介绍了实现Web Service引擎的若干关键技术和解决办法.本文描述的Web Service引擎已在自主研发的OnceAS应用服务器中实现.中国科学院计算技术研究

design and implementation of web service engine in web application server

Web Service为程序之间的交互提供了基础,实现了独立于程序设计语言的一致化编程模型,并以通用的方法进行应用程序集成.分析了Web应用服务器实现Web Service的关键需求,阐述了在应用服务器中基于SOAP的Web Service引擎的设计与实现,介绍了实现Web Service引擎的若干关键技术和解决办法.Web Service引擎已在自主研发的OnceAS应用服务器中实现

Food culture in the Chinese context: Halal food characterized by language and belief

为了解中国各菜系之间的亲疏程度、探究清真饮食(特别是新疆清真饮食)与语言和宗教之间的关系,调查了2058名来自中国31个省级行政区的居民对日常饮食菜系的选择,并用心理测量的范式考察了饮食、语言和宗教三个主观距离变量的影响。结果发现:①原八大菜系的分类变得模糊,鲁菜、川菜和湘菜从食客&quot;口味兼容&quot;的意义上或可重新合并为一大类;②清真菜同其他常食菜系的距离均较远,若有意拉近其与其他菜系的距离,可考虑从与清真菜主观距离近(如浙菜)或共现频次高(如东北菜)的菜系入手;③饮食距离随着宗教距离和语言距离的变化呈现倒U型,且宗教距离在其中起主要作用。研究结果可为餐饮业的实践,特别是为新疆地区餐饮业的发展,提供有益的启发和指导。</p

Phenylhexyl isothiocyanate induces gene p16 demethylation by down-regulating DNA methyltransferases in U266 cells

目的研究异硫氰酸苯己酯(PHI)对骨髓瘤u266细胞株P16基因的去甲基化作用并探讨其作用机制。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测u266细胞经过PHI处理后dnA甲基转移酶dnMT1、dnMT3A和dnMT3b基因的MrnA的表达变化,用甲基化特异性聚合酶链反应检测PHI作用前后u266细胞株P16基因甲基化状态的变化。结果使用不同浓度的PHI处理u266细胞72H后,u266细胞表达dnMT1、dnMT3A、dnMT3bMrnA的水平明显降低并呈浓度依赖性。以不同浓度的PHI处理u266细胞10d后,P16基因的甲基化状态被逐渐逆转。结论 PHI可能通过抑制dnA甲基转移酶的表达水平诱导P16基因产生去甲基化,使失活的抑癌基因重新激活,诱导瘤细胞凋亡。Objective To study the effect of demethylation of P16 and discuss the mechanisms by phenylhexyl isothiocyanate(PHI) on Myeloma U266 cells.Methods The mRNA expression of DNA methyltransferase 1,DNA methyltransferase 3a and DNA methyltransferase 3b were measured by RT-PCR,Modified methylation specific PCR(MSP) was used to screen p16-M and p15-U mRNA on U266 cells treated with PHI.Results After 72 hours treatment with different concentration PHI,the mRNA expression of DNMT1,DNMT3a and DNMT3b was decreased and related to PHI concentration,After 10 days PHI treatment,P16 gene hypermethylation was reversed at 10 μmol/L concentration.Conclusion By decreasing the level of DNA methyltransferase,PHI can reverse hypermethylation of gene P16 and re-actived silenced P16 gene and induce myeloma cells apoptosis in U266 cells.厦门市科技计划项目(3502Z20104034

Reliability and Validity of the Brief Version of the Mental Health Inventory for the Elderly

目的:考察简版老年心理健康量表在我国老年人当中的信效度.方法:根据原量表的理论构想,经专家研讨从各维度抽取内容效度良好的19道题目,形成老年心理健康量表(简版).采取方便取样的方法招募北京市朝阳区、门头沟区和福州市福鼎区的60岁以上共856名老年人进行施测,并于北京市朝阳区招募37名被试2月后进行重测.选取流调中心用抑郁量表-10条目版、简版孤独感量表、生活满意度量表、自编社会支持量表和自评健康状况作为效标效度工具,采用SPSS 22.0和Mplus 7.0进行信度和效度分析.结果:老年心理健康量表(简版)的各个条目具有良好的区分度,各条目与各维度总分及量表总分均呈显著正相关(r=0.43～0.57,Ps＜0.001);验证性因子分析支持量表的五维度结构(x2/df=4.60,CFI=0.92,TLI=0.90,SRMR=0.05,RMSEA=0.07);五个分量表与总量表的Cronbach&alpha; 系数分别为 0.61,0.61,0.73,0.74,0.61 和 0.91,间隔2 月的重测信度分别为 0.48,0.73,0.58,0.65,0.59 和 0.74(Ps＜0.01);量表总得分与抑郁量表总得分和孤独感量表总得分呈显著负相关(r=-0.31,r=-0.45,Ps＜0.001),与生活满意度量表、自编社会支持量表及自评健康状况得分呈显著正相关(r=0.31～0.39,Ps＜0.001).结论:老年心理健康量表(简版)符合测量学要求,可用于评价老年人的整体心理健康水平.</p

脂肪酸甲酯碳同位素测定值的校正方法对比研究

气相色谱－燃烧－同位素比值质谱（ＧＣ－Ｃ－ＩＲＭＳ）分析脂肪酸单体化合物碳同位素时，首先对脂肪酸甲酯 化，但是测得的&delta;１３　Ｃ值为脂肪酸甲酯的&delta;１３　Ｃ值，因此需要对其进行数学校正，才能得到脂肪酸&delta;１３　Ｃ值。为 了得到准确的甲酯化使用的甲醇&delta;１３　Ｃ值，提高校正后的脂肪酸&delta;１３　Ｃ值的精准度，本研究利用３种不同方法 测定甲醇&delta;１３　Ｃ值：１）甲醇与钠反应制备甲醇钠固体，离线测定甲醇钠固体&delta;１３　Ｃ值；２）液氮冷却石英管注样法 制备甲醇结晶体，离线测定甲醇结晶体&delta;１３　Ｃ值；３）ＧＣ－Ｃ－ＩＲＭＳ顶空进样测定甲醇&delta;１３　Ｃ值。并通过离线测定 得到脂肪酸单体化合物及其甲酯化后的脂肪酸甲酯&delta;１３　Ｃ值。然后用此３种不同方法测定的甲醇&delta;１３　Ｃ值分 别对脂肪酸甲酯&delta;１３　Ｃ值进行数学校正，将计算得到的脂肪酸&delta;１３　Ｃ值与脂肪酸单体化合物&delta;１３　Ｃ值进行误差 分析。研究结果表明：离线测定的甲醇结晶体&delta;１３　Ｃ值为－５０．１７&permil;，标准偏差为０．０８６&permil;（ｎ＝５），重现性优于 其他两种方法，用其校正后的脂肪酸&delta;１３　Ｃ值与离线测定的脂肪酸&delta;１３　Ｃ值误差最小。因此，离线测定甲醇结 晶体&delta;１３　Ｃ值是一种相对可靠的测定甲醇&delta;１３　Ｃ值的方法，可提高校正脂肪酸甲酯碳同位素测定值的精准度。</p