Determination of Melamine in Candies by Triple Quadurupole Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

本文建立了高效液相色谱串联质谱检测糖果中三聚氰胺的方法。以糖果为基质,采用三氯乙酸水溶液超声提取目标分析物,提取液经过离心、净化处理后,用强阳离子交换与反相C18混合填料色谱柱分离,乙腈和l0MMOl/l乙酸铵作为流动相(1:1),用串联质谱在多级反应监测模式下定量检测。lC-MS/MS定量限为0.01Mg/kg,线性范围为10~500μg/l,相关系数r2>0.99,平均回收率为66.8%~98.7%,相对标准偏差为1.9%~7.6%(n=6)。A method to analyze melamine residue in candies was established by using triple quadurupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry(LC-MS/MS).Trichloroacetic acid was used to extract the target analyte.The CAPCELL PAK CR column was used for separation and the multiple reaction monitoring(MRM) positive ion mode was used for the determination.The limit of detection was 0.01mg/kg for LC-MS/MS.The coefficient of linear calibration curve was over 0.99 within the melamine concentration range of 10～500μg/L.The average recoveries of melamine by this method were 66.8%～98.7%,and the RSDs ranged from 1.9%～7.6%(n=6

牙鲆热休克蛋白家族基因的克隆、鉴定及其表达分析

本文运用抑制性差减杂交技术，构建了灭活大菱鲆弹状病毒诱导的牙鲆囊胚培养细胞和正常对照细胞间差异表达基因的差减cDNA文库。通过构建SMART-cDNA文库并结合RACE技术，从该细胞模型系统中克隆、鉴定了10个Hsp家族基因一个鱼类蛋白质精氨酸甲基转移酶基因的全长cDNA序列和PoCctz基因的部分cDNA序列。 进一步利用Real-time PCR对11个热休克蛋白家族基因在热休克和灭活病毒诱导下的表达时序的研究表明：在灭活病毒诱导下，牙鲆Hsp基因表达特征与在热休克状态下的表达特征相似，均表现为上调表达，但强度要弱于在热休克状态下最大诱导强度，而且持续时间短；其中诱导型的Hsp的上调表达水平远高于组成型Hsp, 其余Hsp家族基因则表现为中等程度的上调表达。而PoCctz和PoCRT基因在病毒诱导下诱导表达的最大诱导强度要大大强于在热休克状态下的最大诱导强度，且启动时间滞后；而且其表达时序与PoMx 基因极其吻合。 对PoHsp70、PoHsp90和PoCRT基因进行原核表达并用金属亲和层析纯化了融合蛋白并制备了多克隆抗体。利用Western blot在蛋白水平也检测到了PoHsp70、PoHsp90和PoCRT蛋白在热休克状态和病毒诱导下的上调表达，同时组织表达特异性分析表明这几种热休克蛋白是遍在表达的。最后，对Cctz，PRMT1和钙网蛋白基因的诱导表达特性在鱼体内进行了验证，在几种主要组织内诱导结果也表现为上调表达

灭活病毒诱导牙鲆传代细胞差减cDNA文库的构建及分析

以灭活大鳞鲆弹状病毒诱导的牙鲆(Paralichthys olivaceus)传代细胞作为检测子(tester)，正常对照细胞作为驱赶子(driver)，分别提取mRNA，逆转录合成双链cDNA。经两轮差减杂交，两轮抑制性PCR扩增后，取正向差减的PCR产物与T载体连接，构建抑制差减cDNA文库，随机挑取7400余个克隆，对其中4200多个克隆进行PCR扩增鉴定，发现近4000个克隆中均含有插入片段，大小在250～1000bps之间，进一步对含有插入片段的近4000个克隆进行了斑点杂交筛选，得到近668个可能含有抗病毒或与免疫相关的阳性克隆。初步的结果表明所建立的差减cDNA文库适合进一步克隆鱼类抗病毒相关新基因

水对离子液体溶解再生蚕蛹蛋白的影响

以蚕蛹粉为原料,考察了含水量对离子液体1-烯丙基-3-甲基咪唑氯([Amim]Cl)溶解再生蚕蛹蛋白的影响,并对再生蚕蛹蛋白的结构和热稳定性进行了分析.结果表明,水会破坏[Amim]Cl的氢键结构,降低对蚕蛹粉的溶解再生效率;不含水的[Amim]Cl溶解再生蚕蛹蛋白的效果最好,在溶解温度90℃、时间24 h、乙醇为再生剂的条件下,蚕蛹粉溶解率为86.5%,蚕蛹蛋白再生率达59.6%,再生物为蛋白质,并具有&alpha;螺旋、&beta;折叠二级结构,且&beta;折叠结构比例大于&alpha;螺旋结构;离子液体含水量对再生蛋白的结构没有明显影响,再生蛋白的热稳定性比蚕蛹粉稍有提高.</p

牙鲆精氨酸转甲基酶基因的克隆与原核表达

蛋白质的甲基化如同磷酸化;在RNA加工中;涉及到翻译后的调控;mRNA成熟;转移和稳定;也是细胞因子受体的一种重要的信号传导机制。根据抑制性差减杂交方法建立的牙鲆正常囊胚细胞和受灭活弹状病毒诱导的囊胚细胞之间的差减文库;利用斑点杂交方法筛选出牙鲆精氨酸转甲基酶基因的480bp大小片段;根据该序列设计合成特异引物;应用RACE-PCR方法分别扩增该基因的5’末端和3’末端;经过序列拼接得到全长基因。序列分析表明:所克隆的牙鲆精氨酸转甲基酶基因cDNA长1671bp;编码341个氨基酸。与

Condition optimization for bio-oxidation of high-S and high-As gold concentrate

【目的】研究温度以及返回液添加量对体系中氧化效果以及金(Au)氰化浸出率的影响。【方法】针对某高硫高砷金精矿建立了一套连续生物预氧化体系(氧化时间6 d),比较不同的温度(40℃和45℃)和返回液添加量(0和600 M l)对生物预氧化效果的影响:间隔8 H连续测定氧化体系中的氧化液、氧化渣以及氰化渣中的总fE、总S、总AS以及SO42-和Au含量;并用16S rrnA基因克隆文库的方法对体系中的浸矿菌群结构进行分析。【结果】结果显示,提高温度和添加氧化返回液都会改变体系:升高温度在一定程度上提高了体系的氧化程度,主要表现为显著降低了尾渣中总铁、总硫含量,显著提高了尾渣中的S6+比例,并且降低前三槽氧化体系的耗碱量;投加返回液则会降低体系的氧化程度,主要表现为显著提高了尾渣金品位和铁含量,显著降低了尾渣中的S6+以及Au浸出率;dISSIMIlArITy和dCA结果表明温度变化对体系的影响更为显著;氧化过程中的Au浸出率、硫氧化率以及AS去除率,三者互为显著正相关;克隆文库结果显示,该浸矿菌群主要包括3类细菌:ACIdITHIOCACIlluS CAldu(71%)、lEPTOSPIrIlluM fErrIPHIluM(23%)和SulfObACIlluS THErMOSulfIdOOXIdAnS(6%),基于97%相似性的OTu覆盖率达93.67%。【结论】研究结果表明,相对于添加返回液,温度变化会更显著的改变体系反应效率。提高体系温度有利于矿物的氧化,而添加返回液会降低Au浸出率。本文首次研究了连续生物预氧化过程中温度梯度和返回液添加对体系的影响,本研究结果对中温生物预氧化工业生产的工艺优化、降低工业运行成本具有重要的指导意义。[Objective]To study the effects of temperature and lixivium return on the concentrate bio-oxidation and rate of gold cyanide leaching.[Methods] The bioleaching of a high-sulphur( S) and high-arsenic( As) refractory gold concentrate was conducted,and we studied the effects of different temperature( 40 ℃ and 45 ℃) and lixivium return( 0and 600 m L) on the bio-oxidation efficiency.The bacterial community structure also was investigated by 16 S rRNA gene clone library.[Results] The results showed that both the temperature and lixivium return significantly influenced the oxidation system.The temperature rising elevated the oxidation level,while the addition of lixivium depressed the oxidation.Dissimilarity and DCA( detrended correspondence analysis) indicated the effect of temperature on oxidation system was much greater than lixivium.The bacterial community was comprised by Acidithiocacillus caldu( 71%),Leptospirillum ferriphilum( 23%) and Sulfobacillus thermosulfidooxidans( 6%) indicated by the clone library,and the OTU coverage based on 97% sequence similarity was as high as 93.67%.[Conclusion] Temperature rising to 45 ℃would improve the oxidation efficiency while lixivium return would decrease it.This study is helpful to provide an important guiding value for the industry cost optimization of mesophile bacterial oxidation and reduction process.福建省自然科学基金(2014J06021)~

A 1, 2, 3 - triazole class starch derivative and its preparation method and application

本发明涉及日化领域及医药行业，具体是一种1, 2, 3‑三氮唑类淀粉衍生物及其制备方法和应用。1, 2, 3‑三氮唑类淀粉衍生物结构式如式(1)所示，其中，R为含有不同活性基团的等链长取代基；平均聚合度n取值范围是5‑12000。本发明反应高效，易于推广，所需设备及原料易得。研究表明合成的1, 2, 3‑三氮唑类淀粉衍生物水溶性好，具有极好的抑菌活性，增强了淀粉的生物活性，扩大了淀粉的应用范围，可以广泛应用于日化及医药领域

一种1,2,3-三氮唑类淀粉衍生物及其制备方法和应用

本发明涉及日化领域及医药行业，具体是一种1,2,3-三氮唑类淀粉衍生物及其制备方法和应用。1,2,3-三氮唑类淀粉衍生物结构式如式(1)所示，其中，R为含有不同活性基团的等链长取代基；平均聚合度n取值范围是5-12000。本发明反应高效，易于推广，所需设备及原料易得。研究表明合成的1,2,3-三氮唑类淀粉衍生物水溶性好，具有极好的抑菌活性，增强了淀粉的生物活性，扩大了淀粉的应用范围，可以广泛应用于日化及医药领域