Desarrollo de nanopartículas sólidas lipídicas como sistemas de administración de ADN para terapia génica

290 p. (Bibliogr. 257-290) Correo electrónico de la autora: [email protected][EN] This work includes the development, characterization and optimization of a gene delivery system based on solid lipid nanoparticles (SLNs) . Formulations were characterized in terms of particle size , surface charge and the ability to protect the DNA from nucleases . Likewise, the efficiency of transfection and cell viability in vitro was assessed in culture cells and transfection capacity in vivo after intravenous administration in BALB/c mice . Lyophilization process was also optimized, and a short- and medium-term stability study was carried out with the lyophilized formulations. The results demonstrated that the in vitro transfection efficiency was dependent on the ratio of cationic lipid DOTAP in SLNs and on the DOTAP tp DNA ratio used to prepare SLN – DNA complexes. Likewise, the ability of the transfection in vitro depends on cell line; it is lower in ARPE-19 cells than in HEK293 . Moreover, the incorporation of the cell-penetrating peptide SAP resulted in an increase in the level of transfection in both cell lines . Furthermore, it is possible to obtain lyophilized SLNs stable for 6 to 9 months when stored at 30 ° C/65 % RH and 25 ° C/60 % RH , respectively. Finally, the study showed that SLNs are able to transfect in vivo after intravenous administration in BALB/c mice, leading to the expression of green fluorescent protein in the liver and spleen, which is maintained for at least 7 days.[ES] Este trabajo recoge el desarrollo, caracterización y optimización de un sistema de administración de genes basado en nanopartículas sólidas lipídicas (SLNs). Las formulaciones se caracterizaron determinandose el tamaño de partícula, la carga superficial y la capacidad de protección del ADN frente a nucleasas. Así mismo, se evaluó la eficacia de transfección y la viabilidad celular in vitro en cultivos celulares y la capacidad de transfección in vivo tras su administración intravenosa en ratones Balb/c. También se optimizó el proceso de liofilización y se llevó a cabo un estudio de estabilidad a corto y medio plazo de las formulaciones liofilizadas. Los resultados demostraron que la eficacia de transfección in vitro dependía de la proporción de lípido catiónico DOTAP en las SLNs y de la relación DOTAP:ADN utilizada para elaborar los complejos SLN:ADN. Así mismo, la capacidad de transfección in vitro de los vectores dependía de la línea celular, siendo menor en las células ARPE-19 que en las HEK293. Por otro lado, la incorporación del péptido de penetración celular SAP en los vectores produce un incremento en el nivel de transfección en las dos líneas celulares. Además, es posible obtener SLNs liofilizadas estables durante 6 y 9 meses cuando se almacenan a 30 ºC/65%HR y 25 ºC/60%HR, respectivamente. Finalmente, este trabajo demostró que las SLNs son capaces de transfectar in vivo tras su administración intravenosa en ratones Balb/c, dando lugar a la expresión de proteína verde fluorescente en el hígado y en el bazo, que se mantiene durante al menos 7 días

Kernel bandwidth estimation for moving object detection in non-stabilized cameras

The evolution of the television market is led by 3DTV technology, and this tendency can accelerate during the next years according to expert forecasts. However, 3DTV delivery by broadcast networks is not currently developed enough, and acts as a bottleneck for the complete deployment of the technology. Thus, increasing interest is dedicated to ste-reo 3DTV formats compatible with current HDTV video equipment and infrastructure, as they may greatly encourage 3D acceptance. In this paper, different subsampling schemes for HDTV compatible transmission of both progressive and interlaced stereo 3DTV are studied and compared. The frequency characteristics and preserved frequency content of each scheme are analyzed, and a simple interpolation filter is specially designed. Finally, the advantages and disadvantages of the different schemes and filters are evaluated through quality testing on several progressive and interlaced video sequences

Comentarios sobre el artículo: "Depresión del adulto mayor peruano y variables sociodemográficas asociadas: Análisis de ENDES 2017": Comments on the article: “depression of the peruvian elderly adult and associated Sociodemographical variables, analysis of endes 2017”

In the article published by Baldeón-Martínez et al1 on depression in the elderly, the authors estimated a prevalence of depression of 14.2% in a probabilistic sample of 4917 people over 60 in our country. The factors associated with this diagnosis were female sex, lack of education, age over 75, live in rural areas and be poor. This study was carried out based on data from the Demographic and Family Health Survey (ENDES) 2017, using the Patient Health Questionnaire (PHQ-9) instrument for the diagnosis of depression. The study presents some strengths such as wide coverage, quality of sampling and detailed and updated information on respondents, especially in socio-demographic aspects.En el artículo publicado por Baldeón-Martínez et al sobre depresión en el adulto mayor, los autores estimaron una prevalencia de depresión de 14,2% en una muestra probabilística de 4917 personas mayores de 60 años de nuestro país. Los factores asociados a este diagnóstico fueron el sexo femenino, carecer de instrucción, edad mayor de 75 años, vivir en zona rural y ser pobre. Dicho estudio se realizó en base a los datos de la Encuesta Demográfica y de Salud Familiar (ENDES) 2017, utilizando para el diagnóstico de depresión el instrumento Patient Health Questionnaire (PHQ-9). El estudio presenta algunas fortalezas como la amplia cobertura, la calidad del muestreo y la información detallada y actualizada sobre los encuestados, sobre todo en los aspectos socio demográficos

Educación, reforma e ideología en Marruecos

Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Filosofía y Letras, Departamento de Estudios Arabes e Islámicos y Estudios Orientale

Identificación microbiana directa a partir de frascos de hemocultivo positivos mediante espectrometría de masas MALDI-TOF

Para el correcto manejo de los pacientes que padecen una bacteriemia es indispensable la administración de los antibióticos adecuados lo más rápidamente posible. Para ello se debe conocer la especie bacteriana que está causando la bacteriemia. La espectrometría de masas MALDI-TOF ha irrumpido en los laboratorios de Microbiología Clínica debido a que es capaz de proporcionar una identificación microbiana en unos minutos. Esta ventaja es de gran importancia cuando se aplica a la identificación microbiana directa a partir de frascos de hemocultivos positivos. El objetivo de este TFG será describir la técnica MALDI-TOF, recopilar los resultados que ofrece de identificación microbiana directa en cuestión de tiempo y capacidad de identificación, comparándola con los procedimientos convencionales. Con el propósito de realizar una revisión sistemática se llevó a cabo una búsqueda en PubMed, Scielo o Elsevier. Se seleccionaron estudios relacionados con la espectrometría de masas MALDI-TOF y la identificación directa de hemocultivos. Se han revisado 24 artículos, de los cuales se analizaron cuatro estudios que compararon los métodos de identificación directa de frascos de hemocultivo crecido mediante MALDI-TOF frente a los métodos convencionales de subcultivo en placa de aislamiento. Se ha observado una concordancia de alrededor el 90% y un adelanto de tiempo en unas 17 horas como mínimo con respecto a la identificación convencional. La identificación microbiana directa mediante MALDI-TOF ha demostrado una gran concordancia con los resultados convencionales obtenidos a partir del subcultivo en placas de aislamiento, consiguiendo identificaciones válidas en menos tiempo que los métodos convencionales.Grado en Enfermerí

Legislación y Deontología - Aprendizaje Basado en Problemas

Duración (en horas): Más de 50 horas. Destinatario: EstudianteEl objetivo general de la asignatura Legislación y Deontología es que el alumnado conozca e interprete los aspectos de la legislación sanitaria que tienen implicación directa en el área farmacéutica. Las distintas actividades se centrarán en el manejo, consulta e interpretación de normativas y leyes relacionadas con el ámbito sanitario, y más específicamente con el ejercicio farmacéutico. Los estudiantes conocerán la legislación relativa, por un lado, a la adquisición de una oficina de farmacia, y por otro, a la correcta dispensación de un medicamento y los pasos posteriores para que la administración sanitaria abone al farmacéutico la cantidad económica correspondiente

Development of nucleic acid vaccines: use of self-amplifying RNA in lipid nanoparticles

Self-amplifying RNA or RNA replicon is a form of nucleic acid-based vaccine derived from either positive-strand or negative-strand RNA viruses. The gene sequences encoding structural proteins in these RNA viruses are replaced by mRNA encoding antigens of interest as well as by RNA polymerase for replication and transcription. This kind of vaccine has been successfully assayed with many different antigens as vaccines candidates, and has been shown to be potent in several animal species, including mice, nonhuman primates, and humans. A key challenge to realizing the broad potential of self-amplifying vaccines is the need for safe and effective delivery methods. Ideally, an RNA nanocarrier should provide protection from blood nucleases and extended blood circulation, which ultimately would increase the possibility of reaching the target tissue. The delivery system must then be internalized by the target cell and, upon receptor-mediated endocytosis, must be able to escape from the endosomal compartment into the cell cytoplasm, where the RNA machinery is located, while avoiding degradation by lysosomal enzymes. Further, delivery systems for systemic administration ought to be well tolerated upon administration. They should be safe, enabling the multiadministration treatment modalities required for improved clinical outcomes and, from a developmental point of view, production of large batches with reproducible specifications is also desirable. In this review, the concept of self-amplifying RNA vaccines and the most promising lipid-based delivery systems are discussed.This work was supported by the Basque Government's Department of Education, Universities and Investigation (IT-341-10)

Asymmetric a-functionatlization of barbituric acids via bronsted base catalysis.

345 p.El objetivo de esta tesis ha sido lograr la ¿-desimetrización de amidas por medio de la organocatálisis.Este estudio ha sido enfocado a dos subconjuntos de amidas: derivados del ácido barbitúrico y ¿-iminoamidas, debido a que ambas estructuras tienen un alto interés farmacológico.- En la primera parte del trabajo, se ha estudiado la ¿-funcionalización enantioselectiva de ácidos barbitúricos para dar lugar a productos con un átomo de carbono cuaternario en el ciclo. De esta manera, se ha sintetizado una gran variedad de derivados del ácido barbitúrico enantiómericamente enriquecidos.- En la segunda parte de la tesis, se pensó en la síntesis de un nucleófilo derivado de amida con elementos activantes para aumentar su reactividad en la posición ¿. Con estas propiedades, se sintetizó un derivado de iminoamida, pensando que la formación de enlaces de hidrógeno intramoleculares podrían facilitar su reactividad

Psychosocial Disability and Deprivation of Liberty: Reviewing the case of Qatar in the light of the Convention on the Rights of Persons with Disabilities

This paper analyses the main implications of the prohibition of deprivation of liberty on the basis of disability in the field of mental health under the Convention on the Rights of Persons with Disabilities and its impact in Qatar’s legal system. It shows the contradiction between the specific regimes of deprivation of liberty of persons with psychosocial disabilities and Article 14 of the Convention. The paper also proposes some changes in Qatar’s system to ensure that persons with psychosocial disabilities enjoy the right to liberty on equal terms with others