3D printing-based technology using mesenchymal stem cells for personalized psoriasis therapy

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2020, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A psoríase é uma doença inflamatória crónica que afeta cerca de 2-3% da população mundial. Esta doença é caracterizada pela hiperproliferação aberrante dos queratinócitos e infiltração de células inflamatórias na derme que resultam no aparecimento de lesões cutâneas ruborizadas, pruriginosas e em placa. A sua patogénese tem sido intensamente estudada ao longo dos anos, no entanto o mecanismo exato da doença é bastante complexo e permanece elusivo. Esta complexidade inclui fatores genéticos, epigenéticos e ambientais e uma forte interação entre o sistema imunitário inato e adaptativo. O desequilíbrio de vias inflamatórias leva a uma forte ativação das células dendríticas e produção de péptidos antimicrobianos, citocinas e quimiocinas que exacerbam a resposta inflamatória. Atualmente, o tratamento tópico desta patologia passa pela aplicação de cremes emolientes, queratolíticos e anti-inflamatórios para tratar as zonas afetadas e diminuir a inflamação da pele. Nos casos mais severos da doença, muitas vezes é necessário recorrer a terapêutica sistémica, que pode desencadear efeitos adversos mais graves. Assim sendo, as terapêuticas tópicas são preferíveis, contudo, atualmente apenas aliviam os sintomas e são insuficientes no tratamento da patologia. Por este motivo, e considerando que a indústria farmacêutica está em crescente desenvolvimento, é incentivado o desenvolvimento de abordagens terapêuticas inovadoras com tecnologias mais avançadas. O secretoma das células estaminais mesenquimais (MSC) poderá ser uma boa opção para contornar este problema. As células estaminais mesenquimais (MSC) pertencem a um subgrupo de células estaminais e podem ser isoladas a partir de vários tecidos como a medula óssea, o cordão umbilical, os dentes, a pele ou mesmo o tecido adiposo. Estas células possuem propriedades regenerativas e imunomoduladoras, através da secreção de fatores bioativos que atuam de forma parácrina, induzindo a remodelação tecidular. Tendo em conta a fragilidade destas células, vários estudos referem vantagens na utilização do secretoma celular em substituição das mesmas. O secretoma constitui os biofatores produzidos pela maquinaria celular como proteínas, hormonas, lípidos e ácidos nucleicos que exercem funções importantes não só no seu desenvolvimento, mas também no de outras células. As suas mais-valias incluem uma fácil utilização e armazenamento, uma menor imunogenicidade e acessibilidade económica. Considerando estas suas propriedades, o secretoma das MSC é um potencial candidato para uma terapêutica de inovação tópica. Atualmente, o desenvolvimento de biotintas para aplicação tópica recorrendo à impressão 3D tem sido revolucionária no sentido em que permite a produção de formas farmacêuticas melhoradas e personalizadas. A impressão 3D é uma técnica utilizada em diferentes áreas incluindo produção de órgãos, próteses, implantes, modelos anatómicos e formas farmacêuticas. Esta tecnologia baseia-se na criação de um ficheiro modelo 3D através de um software digital de design, em inglês denominado por computer aided design (CAD) software. Depois de desenvolvido, este ficheiro modelo é convertido num formato reconhecido pela impressora a utilizar e procede-se a impressão 3D da biotinta com o design pré-definido. Dentro das várias tecnologias de impressão 3D, a extrusão é a mais adequada para a bioimpressão de células porque permite a impressão de formulações semissólidas à temperatura ambiente, mantendo a viabilidade celular; permite também a utilização ampla de vários polímeros e é facilmente personalizável, ajustando parâmetros da formulação e do processo. A escolha do polímero para a formulação da biotinta é de extrema importância porque os seus parâmetros físico-químicos irão influenciar significativamente a qualidade do produto final. Um polímero ideal deve ser biocompatível, biodegradável, pouco tóxico e possuir boas propriedades mecânicas para manter a integridade do impresso 3D. Há dois principais tipos de polímeros: os polímeros naturais e os polímeros sintéticos, sendo que os primeiros geralmente possuem melhor biocompatibilidade, mas piores propriedades mecânicas relativamente aos últimos, que possuem pior biocompatibilidade, mas melhores propriedades mecânicas. O alginato e o quitosano são dois polímeros naturais frequentemente utilizados por investigadores na impressão 3D de células porque, além de possuírem as características previamente descritas, também são relativamente económicos. Após seleção dos polímeros, é necessária a produção de uma formulação otimizada que seja imprimível, mantenha a sua integridade após impressão e que constitua um meio adequado para a incorporação do secretoma celular. No sentido de evitar gastos excessivos de tempo e dinheiro no desenvolvimento de várias formulações e apenas posteriormente averiguar a sua qualidade numa abordagem quality by testing, a indústria farmacêutica tem apostado numa abordagem muito mais eficiente denominada quality by design (QbD). A QbD é uma abordagem sistemática, proativa e baseada na gestão de risco que incentiva a definição dos padrões de qualidade antes do processo de manufatura propriamente dito e a adoção de procedimentos consistentes para atingir o objetivo de qualidade previamente definido. O principal objetivo deste trabalho é a otimização de uma forma farmacêutica tridimensional (3D) para futura libertação tópica de secretoma de MSC, utilizando uma estratégia de QbD. Formulações iniciais de alginato e quitosano foram desenvolvidas para avaliar as suas propriedades físico-químicas, estudo esse que resultou na exclusão das formulações de quitosano por apresentarem valores de pH incompatíveis com a viabilidade celular. Subsequentemente, um estudo de otimização foi desenvolvido, onde se avaliou o impacto da concentração de alginato, da concentração do agente de gelificação e do efeito pré-crosslink no tempo de gelificação, que foi definido como a característica de qualidade a controlar. Os resultados demonstraram que apenas o agente de gelificação apresentou um impacto significativo no tempo de gelificação. Esta abordagem de QbD é importante para perceber em que concentrações e condições se deve trabalhar para atingir a qualidade do produto pretendida. A formulação otimizada foi utilizada como prova de conceito para corroborar a sua sustentabilidade para incorporar o secretoma celular das MSC. A produção de formas farmacêuticas que requerem a manipulação celular, deve ser realizada em condições asséticas. Quando isso não é possível, opta-se pela esterilização do material e meio de cultura e adição de conservantes à formulação. O impacto do método de esterilização, bem como da incorporação de meio celular na formulação foi avaliado recorrendo a uma análise reológica. Verificou-se uma menor interferência nos valores iniciais de viscosidade com o método de esterilização UV-C e assistiu-se a um aumento de viscosidade com a adição de meio celular. Também foi estudada a influência da incorporação na viscosidade da biotinta e a biocompatibilidade de cinco conservantes diferentes, tendo sido selecionado o NipaginTM/Nipazol® como o mais adequado. O processo de impressão e a qualidade do produto final também foram avaliadas e concluiu-se que a formulação otimizada está efetivamente apta para ser utilizada na incorporação de secretoma celular de MSC. Trabalhos futuros nesta área podem incluir o estudo e otimização de formulações com misturas de polímeros naturais e sintéticos, a fim de se obter um melhor comprometimento entre biocompatibilidade e propriedades mecânicas e também estudar a libertação de secretoma celular de MSC através da forma farmacêutica 3D.Psoriasis is a chronic inflammatory disease characterized by hyperproliferation of keratinocytes and infiltration of inflammatory cells manifested by characteristic skin lesions typically red, itchy, and scaly. Enhanced understanding of the underlying pathomechanisms and the interplay between the innate and adaptive immune system resulted in the development of many therapeutical options. Nevertheless, psoriasis remains without cure and this lack of curative therapeutics in the market demands a search for novel therapeutical approaches. Mesenchymal stem cell (MSC) derived secretome presents regenerative and immunomodulatory properties and therefore may be a suitable option if embedded in the adequate bioink. In the pharmaceutical industry, the development of hydrogel bioinks for topical application using semisolid extrusion-based 3D printing has been revolutionary since it allows the production of improved pharmaceutical forms with tuneable properties. Alginate and chitosan are natural polymers commonly used by researchers in this area due to their biocompatibility, biodegradability, non-toxicity, and relatively low cost. The main goal of this project was the optimization of a 3D system for future application for topical delivery of secretome using a Quality by Design (QbD) approach. Initial formulations were developed to understand physicochemical properties of both polymers and chitosan formulations were excluded for not presenting biocompatible pH values. Then an optimization study was performed where the impact of different parameters on gelation time was evaluated. The results showed that only the crosslinking agent had a significant impact on gelation time. A proof of concept was performed to guarantee the suitability of the optimized hydrogel in encapsulating cells secretome. The rheological influence of two sterilization methods, incorporation of preservatives and cell culture medium were studied, as well as the biocompatibility of five different preservatives. The printability process and the quality of the final product in terms of structural properties were also evaluated. The results obtained confirmed the potential use of this bioink for secretome delivery.Com o patrocínio da Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa e do Instituto Politécnico de Setúbal

Emotional contexts and empathic responses-what can we expect from the chimpanzee?

Tese de mestrado, Biologia (Biologia Evolutiva e do Desenvolvimento), 2009, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasResumo alargado em português disponível no documentoAs social species, mechanisms of social cohesion must exist to secure the harmony within the group and defence of the survival of the kind. Empathy could have emerged to answer just that: an internal mechanism allowing the embodiement of emotions that ensures the efficient contagion of emotional states for the synchrony of individuals within the group. Even though understanding the actions and emotions of others is a pragmatic need of social animals, the study of empathy remained crippled through many years due to the erroneous idea of human exclusivity. The new tools brought by psychological, behavioural and neural sciences not only make it possible, but urge the redefinition of many abilities we thought until now to be exclusive to man. The present study reviews what we know so far regarding the study of empathy, and presents behavioural work towards the systematic approach to the phenomenon. With the purpose of inferring on the existence of emotional empathy in chimpanzees, presenting a method of systematic data collection and investigating further into the empathic process, the present study was carried out for the course of four months in South Africa, at Jane Goodall's Institute sanctuary, Chimp Eden. Behavioural sampling was carried out to register empathy triggers and group scans were conducted in order to obtain measures of Relationship Quality and Proximity and ascertain their possible relation to the empathic response. The present study presents results that support the existence of empathy in chimpanzees and proposes the next steps in the systematic study of the phenomenon, either in laboratory or wild conditions

In Vitro Anti-Candida Activity of Lidocaine and Nitroglycerin: Alone and Combined

The aim of this work was to study the anti-Candida activity of lidocaine and nitroglycerin alone and in combination. Ten Candida strains were included, corresponding to 1 collection type strain (ATCC 10231) and 9 clinical isolates: 4 C. albicans, 2 C. glabrata, 1 C. tropicalis, 1 C. krusei, and 1 C. parapsilosis. The CLSI reference M27-A3 micromethod was used to determine the anti-Candida activity of the drugs alone; minimal inhibitory and lethal concentrations were determined. The classic checkboard technique was used to determine the activity of combined drugs. Lidocaine fungicidal effect was dosedependent. Nitroglycerin exhibited a higher effect. The drugs combination resulted in a reduction of the inhibitory concentration, corresponding to an additive effect. In conclusion, both drugs exhibited an interesting anti-Candida activity. The combination of lidocaine with nitroglycerin was shown to have an additive effect against Candida spp., predicting the interest to include, in the future, these drugs in a new delivery system for the treatment of mucocutaneous candidosis

The book of birds in Portuguese scriptoria: preservation and access

In this thesis, the Books of Birds from Hugh of Fouilloy produced in the Portuguese monasteries of São Mamede of Lorvão, Santa Maria of Alcobaça and Santa Cruz of Coimbra, were studied for the first time through an interdisciplinary and holistic approach. This investigation opened doors to a customized methodology for the study of manuscript circulation, by converging their history, codicology, iconography, colour – both molecular and symbolic – text analysis and conservation state. This allowed proposing new chronologies and correlations between each copy. Santa Cruz still lacked a comprehensive study from a material and technical point of view, contrarily to Alcobaça and Lorvão, which could ultimately support the research on the Books of Birds. Therefore, the Santa Cruz manuscripts were subject of a detailed investigation on their painting materials and techniques, as well as its bindings, used in their production. Since the collection had been previously analysed in a MOLAB access, the experimental work developed in this thesis was compared with the MOLAB data and the advantages of an in situ and micro-sampling approach were discussed. The three collections were compared, which allowed establishing more in-depth the colour palette used in Romanesque manuscripts, their singularities and main degradation issues. In order to study the meaning behind the usage of these colours, a colour mapping tool was developed and systematically applied in the three scriptoria. It was established that this complementary technique can bring new insights to art history, by correlating colour patterns to specific historical periods. Finally, it was also developed a new methodology for the study and characterization of dyes in illuminated manuscripts, by combining microspectrofluorimetry and SERS for the first time. It allowed establishing that lac dye was used to paint dark reds and pinks in Portuguese scriptoria, during the Romanesque period

Influence of chronic obstructive pulmonary disease and ventilotherapy on hearing

Chronic Obstructive Pulmonary Disease is a disease that affects the airways, characterized by its chronic and progressive inflammation, resulting in obstruction of the respiratory flow. It’s pathogenesis leads to states of hypoxia and hypercapnia (states of low oxygen content and high carbon dioxide content, respectively, in the bloodstream), which several authors advocate as causes for the development of hearing loss. At the same time, ventilation therapy is commonly used in the treatment of this pathology, as it prevents this same respiratory obstruction. In doing so, this therapy is thought to have the potential to counteract the effects of the disease on hearing ability. This study aims to investigate whether chronic obstructive pulmonary disease has any influence on the auditory system, and therefore whether it can be considered a risk for the development of hearing loss, and also to assess the possibility of ventilation therapy, indirectly, effect on its attenuation or reversal.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

experimental study

O ácido hialurónico é um glicosaminoglicano com capacidade de absorção de água, cuja utilização tem sido cada vez mais frequente em fillers injetáveis, de modo a melhorar as características estéticas da face. Com o crescente aumento da popularidade e utilização de fillers de ácido hialurónico na medicina estética, surgiu a necessidade de encontrar um antídoto eficaz para tratar possíveis complicações relacionadas com estes procedimentos, como por exemplo oclusões vasculares ou reações alérgicas. Neste contexto, a hialuronidase, uma enzima com capacidade de degradar o ácido hialurónico em ácido glucorónico e N-acetilglucosamina (NAG), tem sido amplamente utilizada. Esta enzima tem sido objeto de estudo crescente desde a primeira metade do século XX. Para além do seu uso na medicina estética, embora ainda off- label, é utilizado em diversas outras áreas da medicina. Em 1971, esta enzima foi bem documentada e classificada por Karl Meyer em três origens distintas: animal, microbiana e de moluscos, com base não só na sua estrutura como também na sua atividade enzimática. Após vários estudos, foi desenvolvida uma enzima com maior atividade, criada por engenharia recombinante, com recurso ao DNA de hamsters. Atualmente, as formulações mais frequentemente utilizadas na prática clínica são de origem animal e de origem recombinante. Apesar da importância da hialuronidase no contexto dos fillers de ácido hialurónico, existe uma escassez de estudos na literatura relativamente a este tema, nomeadamente na comparação da efetividade de hialuronidases de diferentes origens na degradação de ácido hialurónico. Além disso, a influência que as propriedades físicas dos fillers podem ter nesta degradação também necessita de maior investigação, apesar de ser um tema já mais desenvolvido. Não existe consenso no que diz respeito às concentrações de enzima a utilizar, sendo premente uma padronização para facilitar a aplicabilidade clínica destas enzimas. Com base nestas limitações, foi identificada a necessidade de realizar um estudo que comparasse a efetividade de duas hialuronidases de diferentes origens na degradação de fillers injetáveis de ácido hialurónico, tendo sido esse o objetivo do estudo experimental apresentado. Para a realização do estudo experimental, foram utilizados dois fillers de ácido hialurónico da marca Fillmed® (França) e duas hialuronidases distintas, uma animal da marca InstitutoBcn® (Espanha) e outra recombinante da pbserum® (Espanha), formando assim quatro grupos de estudo: ART FILLER® Universal com hialuronidase animal, ART FILLER® Universal com hialuronidase recombinante, ART FILLER® Volume com hialuronidase animal e ART FILLER® Volume com hialuronidase recombinante. A seleção de fillers e hialuronidases para este estudo baseou-se no que é frequentemente utilizado em Portugal e nas opções às quais tínhamos acesso mais facilmente. A marca Fillmed® é apresentada em poucos estudos na literatura, daí haver uma necessidade acrescida do seu estudo. A nível de hialuronidases, optou- se por utilizar uma hialuronidase de origem animal devido ao extenso histórico de estudos a que esta já foi submetida ao longo dos anos, e uma hialuronidase de origem recombinante, por ser uma formulação mais recente e com boas propriedades já documentadas na literatura. A concentração utilizada de cada hialuronidase foi de 75 UI (Unidades Internacionais) para cada 0,1ml de cada filler (25mg/ml), o que vai de encontro à literatura previamente estudada, dentro das limitações que esta apresenta. Para chegar a esta concentração, ambas as hialuronidases foram diluídas em solução salina. A cada grupo foi adicionado um reagente, p- dimetilaminobenzaldeído, também conhecido como reagente de Ehrlich, que tem a capacidade de reagir com as cadeias de NAG, libertadas pelo ácido hialurónico aquando da sua degradação por hialuronidase, fornecendo uma cor violeta à amostra. Utilizando uma técnica colorimétrica, a quantidade de NAG libertada foi posteriormente medida através da absorbância (A) com recurso a um medidor de placas (Perkin Elmer® Inc., USA). Quanto maior a degradação do ácido hialurónico, mais cadeias de NAG livres, e assim, maior será o valor de absorbância, uma vez que haverá uma cor mais intensa do reagente. Esta medição da absorbância foi realizada em quatro momentos distintos ao longo do tempo: após 1, 6, 24 e 48 horas de incubação a 37ºC, de modo mimetizar as condições de temperatura no corpo humano, com N=5. Os resultados de absorbância foram apresentados sobre a forma de média ± desvio padrão (DP) e posteriormente analisados recorrendo a um teste não-paramétrico, após se mostrar a ausência de normalidade da amostra, através de um software específico de análise estatística. H0: não existem diferenças na degradação dos dois fillers pelas duas hialuronidases. A utilização rigorosa deste protocolo experimental permitiu chegar a resultados significativos, onde se demonstrou que ambos os fillers sofreram degradação enzimática por ambas as hialuronidases (animal e recombinante). Após a análise estatística dos resultados, com recurso a um teste não-paramétrico, a hipótese nula foi rejeitada, provando que existem diferenças estatisticamente significativas na degradação dos fillers pelas duas hialuronidases. No entanto, ao realizar uma comparação das duas hialuronidases individualmente na degradação de cada filler, compreendeu-se que só se verificaram diferenças estatisticamente significativas na degradação de ART FILLER® Universal pelas hialuronidases às 24 horas (p=0,007), tempo no qual a hialuronidase recombinante se mostrou mais efetiva em comparação com a animal. No entanto, ao analisar o comportamento de ART FILLER® Volume ao longo do tempo, constatamos uma degradação estatisticamente significativa maior pela hialuronidase recombinante às 6 horas (p<0,001), 24 horas (p=0,007) e 48 horas (p<0,001) quando comparado com a hialuronidase animal. Estes dados mostram que a hialuronidase recombinante apresenta maior degradação de ART FILLER® Volume logo depois das 6h. Ao realizar a comparação individual dos dois fillers, quando submetidos à mesma hialuronidase, apenas se observaram diferenças estatisticamente significativas à 1h, na degradação destes por hialuronidase animal (p<0,001), onde se observou uma maior degradação de ART FILLER® Universal. A nível de degradação pela hialuronidase recombinante, não foram demonstradas diferenças entre os fillers. Assim, observou-se que não existem diferenças significativas no filler em si que possam influenciar a sua degradação, quando comparado com o outro filler em análise, após 6h de incubação. Com base nos resultados obtidos, o nosso estudo permitiu concluir que, entre todos os grupos analisados, a hialuronidase que apresenta melhores resultados ao longo do tempo é a recombinante, principalmente na degradação de ART FILLER® Volume, enquanto ART FILLER® Universal não mostrou diferenças significativas na sua degradação pelas duas enzimas na maioria dos tempos medidos. Também se observou que não há diferenças na degradação dos dois fillers diferentes quando submetidos à mesma hialuronidase, nem quando submetidos à de origem animal nem à de origem recombinante, a partir das 6h de incubação. O estudo realizado contribui para a evolução do conhecimento e da literatura existente, porém, é importante destacar que existiram diversas limitações que podem ser superadas com a formulação de estudos futuros na área. Entre essas limitações encontram-se a falta de recursos, o que impossibilitou a realização de medições mais frequentes ao longo do tempo, para uma melhor compreensão do comportamento da enzima e da sua interação com o ácido hialurónico. Para além disso, tratando-se de um estudo in vitro há sempre condições que são difíceis de mimetizar e deve-se ter isso em consideração ao extrapolar os resultados deste estudo para a prática clínica. Muitos dos estudos presentes na literatura utilizam concentrações de hialuronidase muito elevadas, que dificilmente são extrapoladas para a prática clínica sem nenhum risco acrescido. Sugerimos que futuras pesquisas avaliem não só as duas hialuronidases mencionadas neste estudo como também analisem o seu comportamento ao longo de um maior período de tempo e com diferentes concentrações.Objectives: This study aimed to evaluate and compare the effectiveness of two hyaluronidases in degrading two different hyaluronic acid fillers. Materials and methods: Four groups were tested: ART FILLER® Universal and animal hyaluronidase, ART FILLER® Universal and recombinant hyaluronidase, ART FILLER® Volume and animal hyaluronidase and ART FILLER® Volume and recombinant hyaluronidase (N=5). A reagent that reacts with N-acetylglucosamine (NAG) was added. Absorbance was measured at 585 nm after 1, 6, 24 and 48 hours of incubation at 37ºC. Results were expressed as mean and standard deviation (±SD) of absorbance and analyzed using a non-parametric test. Results: All tested HA fillers were susceptible to degradation by hyaluronidase. Comparing the degradation of ART FILLER® Universal by the two hyaluronidases, statistically significant differences were observed at 24 hours, with recombinant hyaluronidase showing higher degradation than animal (p=0,007). For ART FILLER® Volume, recombinant hyaluronidase resulted in higher absorbance values than animal, throughout the entire time of degradation, except at 1h (6h p<0,001; 24h p=0,007; 48h p<0,001). Differences were also observed when comparing the effect of the same hyaluronidase on degrading both HA fillers. Animal hyaluronidase demonstrated greater effectiveness in degrading ART FILLER® Universal, compared to ART FILLER® Volume, particularly significant at 1h (p<0,001). However, no statistically differences in the degradation of the two HA fillers were found with recombinant hyaluronidase. Conclusion: Recombinant hyaluronidase appeared to be the most effective overall. However, the significantly higher degradation values compared to animal hyaluronidase were only observed when paired with ART FILLER® Volume, at 6, 24 and 48 hours. Therefore, in clinical practice, recombinant hyaluronidase should be preferred when treating complications associated with prior injection of ART FILLER® Volume. When comparing the two HA fillers, no significant differences were observed, except at 1h, when animal hyaluronidase exhibited greater effectiveness in degrading ART FILLER® Universal

Caracterização e análise das lesões músculo-esqueléticas em atletas de alta competição de voleibol

Dissertação de Mestrado em Engenharia HumanaNos dias de hoje, as lesões músculo-esqueléticas (LME) são consideradas um problema sério de saúde pública tendo em vista a sua grande incidência sobre a população, incapacitando-a definitiva ou temporariamente, para o desempenho das respectivas actividades profissionais. A busca da perfeição e de resultados de sucesso no desporto profissional, nomeadamente no Voleibol, tem levado algumas equipas ao incremento desmedido de grande volume e intensidade de trabalho físico, que leva muitas vezes a lesões de carácter repetitivo e de desgaste. O desempenho e a eficácia nos jogos dos atletas de alta competição devem constituir uma orientação fundamental para a planificação do processo de formação preventiva. O termo “prevenção” compreende todas as intervenções directas e indirectas com o objectivo de evitar danos ao atleta. Vários podem ser os métodos usados, consoante a natureza da lesão a prevenir. Assim, este trabalho consistiu na caracterização e análise das lesões músculo-esqueléticas em atletas de alta competição de Voleibol e no estudo dos principais factores de risco relativos ao desenvolvimento de LME nos atletas e a sua forma de prevenção. A primeira fase do estudo consistiu na recolha dos dados relativos a diferentes variáveis que foram observadas no período de estágio, compreendido entre Abril e Agosto de 2006. Os dados recolhidos permitiram caracterizar a amostra dos atletas quanto à idade, peso, altura, posição ocupada em campo, número de horas de jogo e de treino, número de movimentos relativamente aos elementos fundamentais da situação de jogo e informações acerca do tipo de lesão antes de integrarem o estágio e durante o estágio, por localização anatómica. Numa segunda fase, a análise ergonómica das posturas e dos movimentos das diferentes posições ocupadas em campo e respectivas características, foi realizada por intermédio da técnica REBA, aplicada às posturas mais representativas adoptadas no decorrer dos jogos que foram filmados. Os resultados mostraram que os movimentos realizados pelos atletas envolvem, em geral, um risco elevado de ocorrência de lesões músculo-esqueléticas. Algumas recomendações e sugestões foram tecidas no final do trabalho tentando, deste modo, contribuir para a prevenção das LME, que passa pela responsabilidade de todos os envolvidos no desporto, de forma directa ou indirecta, nomeadamente os fisioterapeutas.Nowadays, the musculoskeletal disorders (MSDs) are considered a serious public health problem, since they affect a great part of the population, causing people permanent or temporary incapacity which prevents them from working. The search for perfection (and for success) as far as a professional sport is concerned, more specifically in volleyball, has led some teams to overuse increasingly intense physical effort. This often provokes repetitive and wear injuries. The performance and efficacy in the high competition athletes’ games should constitute a fundamental principle regarding the planning of the process of preventive formation. The term “prevention” involves all the direct and indirect interventions that have the objective to avoid athlete injuries. Several methods can be used, according to the type of disorder we intend to prevent. Therefore, this work has focused on characterising and analysing musculoskeletal disorders in high competition volleyball athletes, as well as on the study of the main risk factors regarding the development of MSDs and the way to prevent them. The first phase of the study focused on gathering data regarding different variables, which were observed during the training period, from April to August 2006. The data that was gathered made it possible to characterise the athletes as to age, weight, height, player positions, number of hours they played and practised, number of movements regarding the fundamental elements of the game situation and information about the type of injury before they went into training and during the training, as far as anatomic location is concerned. In a second phase, the ergonomic analysis of the postures and of the movements of the different player positions in the court and their characteristics was carried out using the REBA technique, regarding the athletes who have, in general, a higher risk of contracting musculoskeletal disorders. Some recommendations and suggestions which may contribute to the prevention of MSDs were presented in the end of the work. However, this also depends on the responsibility of all the people who are involved in the sport, either directly or indirectly