Histochemical and morphometric analysis of endometriotic lesions induced in female rats and treated with dexamethasone

INTRODUCTION: The literature reports that endometrial implants have receptors for steroid hormones primarily stimulated by estrogen and that some treatment strategies have been proposed in experimental models such as the use of synthetic glucocorticoids, for example, dexamethasone. OBJECTIVE: to analyze histochemically and morphometrically endometriotic lesions induced in rats and treated with dexamethasone (0.8 mg/kg/day). MATERIAL AND METHODS: Forty albino female rats (Wistar strain), with 90 days of age, weighing approximately 150 g, were induced with endometriosis and divided into groups: I - rats with endometriosis and evaluated after 34 days, II - rats with endometriosis and evaluated after 47 days, III - rats with endometriosis and 21 days post-surgery treated with dexamethasone for 13 days and IV - rats with endometriosis and 21 days post-surgery treated with dexamethasone for 13 days and euthanized after a period of 13 days starting from the end of treatment. The fragments of endometrial implants were fixed in Bouin, embedded in Paraplast and stained with hematoxylin-eosin and Mallory trichrome. The mean number of glands was compared through nonparametric Tukey-Kramer test (p < 0,05). RESULTS: Dexamethasone reduced inflammation in the endometrial implants, the collagen content in the stroma and decreased significantly the area occupied by glands (GI - 123.25 ± 6.44ª; IGI - 113 ± 6.27ª; GIII - 81.66 ± 3.05b and GIV - 94 ± 6.24b). CONCLUSION: The applied dexamethasone dosage reduces estrogenic effects in endometrial implants in rats.INTRODUÇÃO: A literatura relata que os implantes endometriais possuem receptores para hormônios esteroides, sendo estimulados principalmente pelo estrógeno, e que algumas estratégicas de tratamento têm sido propostas em modelos experimentais, tais como a utilização de glicocorticoides sintéticos, como a dexametasona. OBJETIVO: analisar histoquímica e morfometricamente lesões endometrióticas induzidas em ratas e tratadas com 0,8 mg/kg/dia de dexametasona. MATERIAL E MÉTODOS: Quarenta ratas albinas (linhagem Wistar) com 90 dias de vida, pesando aproximadamente 150 g, foram induzidas à endometriose e divididas em grupos: 1. ratas com endometriose e avaliadas após 34 dias (G1); 2. ratas com endometriose e avaliadas após 47 dias (G2); 3. ratas com endometriose e, após 21 dias do pós-operatório, tratadas com dexametasona por 13 dias (G3) e 4. ratas com endometriose e, após 21 dias do pós-operatório, tratadas com dexametasona por 13 dias e eutanasiadas após um período de 13 dias, contados a partir do término do tratamento com dexametasona (G4). Os fragmentos dos implantes endometriais foram fixados em Bouin, incluídos em paraplast e corados por hematoxilina-eosina e tricrômico de Mallory. As médias do número de glândulas foram submetidas ao teste não-paramétrico de Tukey-Kramer (p < 0,05). RESULTADOS: A dexametasona reduziu a inflamação nos implantes endometriais, o teor de colágeno no estroma e significativamente a área ocupada pelas glândulas (G1= 123,25 ± 6,44ª; G2= 113 ± 6,27ª; G3= 81,66 ± 3,05b; e G4= 94 ± 6,24b). CONCLUSÃO: A dexametasona, na dosagem utilizada, reduz os efeitos estrogênicos em implantes endometriais em ratas.Universidade Federal de PernambucoUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Universidade de São PauloUNIFESPSciEL

Perfis hematológico e bioquímico de ratos (Rattus norvegicus) mantidos sob sistema de ventilação microambiental

Previous studies reported that rats (Rattus norvegicus) kept under microenvironmental ventilation systems (MEV) present better productive and health parameters when compared to animals kept under general diluting ventilation (GDV). The objective of the present research trial was to evaluate hematological and biochemical profiles of rats kept under MVS. In order to achieve this objective, two different trials were designed: Trail 1 (E1), in which it was evaluated the reproductive performance of males and females submitted to two different air speed limits - FV1, from 0.03 to 0.26 m / sec and FV2, from 0.27 to 0.80 m / sec. In Trial 2 (E2) it was evaluated different bed change intervals (3, 5, 7 and 9 days), for males kept under constant air speed (0.5 m / sec). Values for hemogram and biochemical patterns of these animals were compared to those of rats kept under GDV. Results show statistical differences in some of the studied parameters not only for the comparison between GVD and E1 and GVD and E2, but also between both groups submitted to MEV (E1 and E2). However, values found for all studied parameters are inside the normal range reported for this species, what indicates that MEV does not induce important changes in the physiological parameters evaluated.Em estudos anteriores, demonstrou-se que ratos mantidos em sistema de Ventilação Microambiental (VMA) apresentaram parâmetros de produtividade e padrão sanitário melhores do que aqueles mantidos em sistema de Ventilação Geral Diluidora (VGD). Outra etapa dos experimentos foi determinar os parâmetros fisiológicos destes animais. O presente estudo foi realizado para avaliar os perfis hematológico e bioquímico de ratos mantidos sob o sistema de VMA. Para tanto, foram realizados dois experimentos diferentes, com ratos mantidos em VMA, quais sejam: Experimento 1 (E1), no qual foi avaliado o desempenho reprodutivo de machos e fêmeas, sob duas faixas de velocidade de ar (FV1 - de 0,03 a 0,26 m/s, e FV2 - de 0,27 a 0,80 m/s); Experimento 2 (E2), no qual foram avaliados diferentes intervalos de troca de cama (3, 5, 7 e 9 dias), para ratos machos mantidos a uma velocidade de ar constante de 0,5 m/s. Os valores do hemograma e de parâmetros bioquímicos destes animais foram comparados com os valores encontrados em ratos mantidos sob VGD. Os resultados obtidos demonstraram diferenças estatísticas em alguns dos parâmetros observados, tanto entre os sistemas VGD e VMA, como entre os diferentes grupos de VMA. Contudo, os valores encontrados em todos os parâmetros avaliados encontram-se dentro de faixas de variação normal para a espécie estudada, como é descrito na literatura. Isto indica que o emprego do sistema de VMA não induz alterações relevantes nos parâmetros fisiológicos estudados

Combination of Melatonin and Metformin Hydrochloride for Treatment Polycystic Ovarian in Female Rats

Background: Polycystic ovary syndrome (PCOS) is a gynecological endocrine disorder, results in menstrual abnormalities, androgynism and infertility. In the case of women or others animals with PCOS wishing to treat infertility with the aim of becoming pregnant, the most commonly used is metformin hydrochloride. Recent studies have analyzed the combination of metformin hydrochloride with melatonin in oncological treatment but not to treatment of polycystic ovary syndrome (PCOS). The aim of the present study was to analyze the effectiveness of the combination of metformin hydrochloride and melatonin in the treatment of PCOS to improve the fertility of rats and your hormonal alterations.Materials, Methods & Results: This study was carried out in strict accordance with the recommendations in the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals of the National Institutes of Health. The protocol was approved by the Committee on the Ethics of Animal Experiments of the University of Federal Rural of Pernambuco (Permit Number: 23081.009130/2010). A total of 50 albino Wistar rats were used. The animal laboratory of an academic research environment, were randomly separated into five groups consisting of 10 females each. After inducing PCOS, the rats were treated with metformin hydrochloride, and/or melatonin, and the results compared with standard and ultrasound confirmed. The physiological similarities were confirmed by our academic researchers morphological science, and published to the association results of effects syndrome induction through constant lighting in reputable magazine recently. This article was analyzed histological of the implantation sites and ovaries, and the estradiol and progesterone levels on the seventh day of gestation, and the other rats for monitoring pregnancy and morphological identification of possible fetal abnormalities, weight measurement and quantification of offspring. The rats were anaesthetized with intraperitoneal injections of ketamine hydrochloride (80 mg/kg) and xylazine (6 mg/kg) to allow analysis of the reproductive organs. Main outcome measures: The study included histopathology, histochemical and quantitative (of the implantation sites) tests, ultrasound analysis, weight benchmarking and ovarian histology tests, as well as comparison of serum estradiol and progesterone levels, and the morphological assessment of offspring. Results paper shows pharmacological treatment reduced the time needed for pregnancy, increased the plasma progesterone levels, the number and weight of offspring, and reduced plasma estrogen levels and collagen fiber grade, improving blastocyst-endometrium interaction and fetal development.Discussion: Our team of researchers confirmed in a previous paper; in addition, the main experimental model used in research about PCOS in recent years, and considered appropriate combination of the drugs caused a physiological reaction similar to responses identified in healthy rats without induction of the POS control group. However, the clinical and physiological effectiveness of the combination should be further explored, especially with respect to the possible side effects on offspring. The treatment with a combination of metformin hydrochloride and melatonin was more effective against hormonal alterations produced by PCOS, allowing a normalization of biochemical parameters during pregnancy, than monotherapeutic treatment with these drugs. In conclusion, proposed drug combination is a viable option to treatment of polycystic ovary syndrome and improved fetal development. This article allows suggest that further research should be conducted to examine effects associated with these drugs in the treatment of diseases of the female reproductive system experimentally. Only such treatment later in animals and humans suggest

Efeitos da administração exógena de melatonina sobre o fígado da prole de ratas Wistar submetidas à corticoterapia durante a prenhez

A dexametasona vem sendo amplamente utilizada em casos de gestação com risco de prematuridade. Entretanto, doses suprafisiológicas podem acarretar complicações e afetar a embriogênese. A melatonina, por sua vez, apresenta efeitos antagônicos aos glicocorticoides. Assim, avaliou-se a ação da dexametasona administrada durante o período gestacional, e a influência da melatonina sobre os efeitos decorrentes da corticoterapia. Foram utilizadas 20 ratas, divididas em 4 grupos: I - ratas prenhes que receberam solução placebo; II - ratas prenhes que receberam dexametasona (0,8mg/kg); III - ratas prenhes tratadas com melatonina (0,5mg/kg) e IV - ratas prenhes que receberam dexametasona e foram tratadas com melatonina. As amostras foram obtidas da prole com 10, 15 e 20 dias de vida pós-natal. Os resultados mostraram que a dexametasona, administrada a partir do 10º dia do período gestacional, promoveu uma maior taxa de mortalidade, redução acentuada no ganho de peso desses animais, bem como alterações hepáticas histopatológicas e morfométricas, como esteatose, necrose, vacuolização celular, além de diminuição nos grânulos de glicogênio, carboidratos totais e aumento das fibras colágenas teciduais. Entretanto, os animais do grupo IV, apresentaram alterações mais atenuadas, com parâmetros semelhantes aos animais do grupo controle. Assim, conclui-se que a administração da melatonina exógena pode proteger o fígado dos animais ou atenuar alguns efeitos decorrentes da corticoterapia

Efeito protetor da melatonina sobre intoxicações por herbicidas

Resumo: O uso inadequado de herbicidas pode resultar em intoxicações agudas e, às vezes, crônicas por exposição em longo prazo a baixos níveis desses agentes tóxicos, podendo o herbicida atuar também como agentes teratogênicos, mutagênicos, cancerígenos e desreguladores endócrinos, com o aparecimento de doenças neurodegenerativas e distúrbios reprodutivos. Estudos têm revelado que a melatonina tem propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e imunomoduladoras e atua na reprodução. Essa indolamina está entre os agentes que têm se mostrado benéfico em intoxicações por herbicidas, porém não há relatos do uso de melatonina contra intoxicações por Glifosato-Roundup®, muito menos em associação com o Paraquat. Dessa forma, o maior interesse no tratamento das intoxicações por herbicidas, tem-se concentrado em medidas que impeçam ou minimizem as lesões celulares provocadas nos diversos sistemas biológicos. Assim, a melatonina, como antioxidante conhecido, pode ser mais uma alternativa contra as intoxicações por herbicidas associados e/ou individuais

Cotesia flavipes (CAM) (Hymenoptera: Braconidae) Supresses Immune Responses In Diatraea flavipennella (BOX) (Lepidoptera: Crambidae)

The present research aimed to elucidate which aspects of immune responses in Diatraea flavipennella are suppressed by the parasitoid Cotesia flavipes, thus, ensuring parasitism success. We investigated the presence of apoptosis in fat body cells through the TUNEL technique. According to the results, reduced levels of nitric oxide and phenoloxidase activity were observed in larvae parasitized for three days, and reduced total number of hemocytes, after three and seven days. An increase in plasmatocytes and decrease in spherulocytes numbers were observed in the differential count on the third day of parasitism. The number of melanized microspheres in parasitized larvae was low and indicated less intense melanization. The ultrastructural analysis confirmed the immunosuppressive effect of C. flavipes on the encapsulation response of D. flavipennella because only the formation of hemocytes capsules, adhered to the microspheres' surface, was evidenced in non-parasitized caterpillars. The effect of parasitism was also recorded on the third day with the presence of hemocytes and apoptosis in fat body cells, including aspects of degeneration in the latter. We concluded that C. flavipes suppresses cellular and humoral immunological responses in D. flavipennella and drastically affects the host's fat tissue

<b>Efeito de <em>Beauveria bassiana</em> (Bals.) Vuill. e <em>Metarhizium anisopliae</em> (Metsch.) Sorok. sobre características biológicas de <em>Diatraea saccharalis</em> F. (Lepidoptera: Crambidae)</b> - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i2.3627 <b>Effect of <em>Beauveria bassiana</em> (Bals.) Vuill. and <em>Metarhizium anisopliae</em> (Metsch.) Sorok. on Biological Characteristics of <em>Diatraea saccharalis</em> F. (Lepidoptera: Crambidae)</b> - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i2.3627

A broca da cana-de-açúcar <em>Diatraea saccharalis</em> F. é considerada uma das principais pragas nas Américas. Entre os métodos de controle, o uso de fungos entomopatogênicos tem sido amplamente recomendado no manejo das pragas da cana-de-açúcar, incluindo outras lepidobrocas. Assim sendo, este estudo investigou os efeitos de diferentes concentrações de <em>Beauveria bassiana</em> (Bals.) Vuill. e <em>Metarhizium anisopliae</em> (Metsch.) Sorok. sobre parâmetros biológicos da broca da cana-de-açúcar. Larvas de terceiro instar de <em>D. saccharalis</em> foram tratadas com os fungos usando as concentrações de 10³, 10⁴ e 10⁵ conídios mL^-1. Larvas tratadas com 10⁵ conídios mL^-1 de <em>B. bassiana</em> tiveram menor sobrevivência (56,6%), comparadas com lagartas não-tratadas (90%). Adultos originados de larvas tratadas colocaram menor número de ovos, com menor viabilidade, e viveram menos, comparados com adultos originados de larvas não-tratadas. Larvas tratadas com <em>M. anisopliae</em> na concentração de 10⁵ conídios mL^-1 e adultos originados destas larvas também exibiram redução no desempenho, comparados aos insetos não-tratados. Os resultados indicam que <em>B. bassiana</em> e <em>M. anisopliae</em>, além de patogênicos às larvas de <em>D. saccharalis</em>, também interferem negativamente na sua biologia, mostrando potencial de uso contra esta praga.<br>The sugarcane borer <em>Diatraea saccharalis</em> F. is considered one of the major sugarcane pests in the American continent. Among control methods, the use of entomopathogenic fungi has been broadly recommended to manage sugarcane pests, including other sugarcane borers. Therefore, this study investigated the effects of different concentrations of <em>Beauveria bassiana</em> (Bals.) Vuill and <em>Metarhizium anisopliae</em> (Metch.) Sorok on biological characteristics of the sugarcane borer. Third-instar larvae of <em>D. saccharalis</em> were fungi-treated using the concentrations of 10³, 10⁴ and 10⁵ conidia mL^-1. Larvae treated with 10⁵ conidia mL^-1 of <em>B. bassiana</em> showed lower survival (56.6%) compared to untreated larvae (90%). Adults originated from treated larvae laid a lower number of eggs and exhibited lower viability, and lived less compared to adults of untreated larvae. Also, larvae treated with 10⁵ conidia mL^-1 of <em>M. anisopliae</em> and adults originated from those larvae presented reduced performance compared to untreated larvae. Results indicate that <em>B. bassiana</em> and <em>M. anisopliae</em> are pathogenic to <em>D. saccharalis</em> larvae and affect its biology. Hence, they have potential to be used against this pest