ESTUDO COMPARATIVO ENTRE OS MÉTODOS CALIFORNIA MASTITIS TEST, CONTAGEM DE CÉLULAS SOMÁTICAS E CULTIVO MICROBIOLÓGICO PARA O DIAGNÓSTICO DA MASTITE CAPRINA

Mastitis is a limiting factor in milk production and a problem in livestock worldwide. Many laboratory methods have been recommended in order to diagnose the incidence of mastitis in dairy herds, therefore, was conducted a comparative study of the diagnostic methods California Mastitis Test (CMT), somatic cell count (SCC) by electronic and microscopic methods and bacterial isolation, for the goats. A total of 306 milk samples from mammary quarters, collected in three moments of lactation stage (beginning, middle and end) of 51 infants goats were submitted to the California Mastitis Test (CMT), automatic somatic cell count (SCC), microscopic SCC and bacterial culture on blood agar. Only 4 (7.84%) animals showed visible clinical signs of clinical mastitis and 114 (37.25%) of half mammary gland showed a growth on blood agar. CMT and SCC have greater specificity than sensitivity, thus higher NPV than PPV. The values of k (kappa) of microbiological culture showed an insignificant correlation with CMT and an average agreement with SSC. An association (p <0.05) between tests evaluated with the gold standard was observed. SCC scores was suggested above 1,0x106 cells / mL as a criterion for carrying out microbiological tests. The CMT and SCC are more efficient in detecting negative mammary glands than positive mammary glands for mastitis.A mastite representa um fator limitante para a produção de leite e um problema em rebanhos no mundo. Vários métodos laboratoriais têm sido recomendados a fim de diagnosticar a incidência de mastite nos rebanhos leiteiros, portanto, foi realizado um estudo comparativo entre os métodos de diagnóstico California Mastitis Test (CMT), contagem de células somáticas (CCS) pelos métodos eletrônico e microscópico e isolamento bacteriano, para a espécie caprina. Um total de 306 amostras de leite de metades mamárias, coletadas em três momentos da fase lactacional (início, meio e fim), de 51 cabras lactentes foram submetidas ao CMT), à CCS automática (Somacount 300 Bentley Instruments®), à CCS microscópica e ao cultivo bacteriológico em ágar sangue. Apenas 4 (7,84%) animais apresentaram sinais clínicos visíveis de mastite clínica e 114 (37,25%) das metades mamárias apresentaram crescimento em ágar sangue. CMT e CCS apresentaram uma maior especificidade que sensibilidade e, portanto, maior VPN que VPP. Os valores de k (kappa) do cultivo microbiológico apresentaram uma concordância insignificante com o CMT e concordância média com CCS. Foi observada uma associação (p<0,05) entre os testes avaliados com o padrão ouro. Sugeriu-se contagens de CCS superiores a 1,0x106 células/mL de leite como critério para a realização de exames microbiológicos. O CMT e a CCS são mais eficientes em detectar glândulas mamárias negativas do que positivas para mastite

Patógenos transmitidos por carrapatos e micoplasmas hemotrópicos em ouriços-cacheiro (Sphiggurus villosus) e tamanduás-mirim (Tamandua tetradactyla), Paraná, Brasil

Orientador: Prof. Dr. Rafael Felipe da Costa VieiraTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 21/07/2021Inclui referênciasResumo: Os animais silvestres podem desempenhar um papel importante na propagação de carrapatos e patógenos de doenças transmitidas por carrapatos. No Brasil, ouriços-cacheiro (Sphiggurus villosus) e tamanduás-mirim (Tamandua tetradactyla) são amplamente distribuídos no bioma Mata Atlântica, e estão entre os animais mais atingidos e mortos em acidentes nas estradas. O objetivo deste estudo foi pesquisar ouriços-cacheiro e tamanduás-mirim de vida livre do Estado do Paraná, sul do Brasil, para infecção por micoplasmas hemotrópicos, Anaplasma/Ehrlichia spp. e piroplasmas. Amostras de sangue e/ou baço foram coletadas de nove ouriçoscacheiro e quatro tamanduás-mirim atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Paraná, Estado do Paraná, sul do Brasil. Foi realizada pesquisa de ectoparasitas nos animais. O DNA das amostras de sangue e baço foi extraído e testados por PCR para os genes 16S rRNA/23S rRNA de hemoplasmas, gene 16S rRNA de Anaplasma/Ehrlichia spp. e gene 18S rRNA de piroplasmas. Ao todo, 275 carrapatos (34 machos, 11 fêmeas, 7 ninfas e 223 larvas) foram coletados de oito ouriços-cacheiro: Amblyomma longirostre, Amblyomma parkeri e Amblyomma spp. larvas. Dois dos quatro tamanduás estavam infestados por carrapatos A. calcaratum (quatro machos e duas fêmeas). Dois dos nove ouriços-cacheiro foram PCR-positivos para hemoplasmas. Uma das quatro amostras de tamanduá-mirim testou positivo para Anaplasma/Ehrlichia spp. por PCR. Todos os animais apresentaram resultados negativos para piroplasmas. A análise filogenética dos genes 16S e 23S rRNA confirmou que os ouriços-cacheiro foram infectados por um potencial novo Mycoplasma sp. hemotrópico. O nome 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus' é proposto para esse novo organismo, que deve ser totalmente caracterizado. Análise filogenética do gene 16S rRNA mostrou que a sequência de Anaplasma spp. de tamanduá posicionada próxima às sequências de Anaplasma spp. de tamanduás de São Paulo, Brasil. Pesquisas envolvendo animais silvestres, principalmente os atropelados, representam importantes ferramentas para detecção de agentes de doenças transmitidas por vetores, uma vez que o acesso a muitos desses animais é limitado.Abstract: Wild animals may play an important role in the spread of ticks and tick-borne diseases (TBD) pathogens. In Brazil, orange-spined hairy dwarf porcupines (Sphiggurus villosus) and collared anteaters (Tamandua tetradactyla) are widely distributed in the Atlantic Rainforest biome being among the animals most frequently hit and killed by cars on the roads. The aim of this study was to screen free-ranging Brazilian porcupines and collared anteaters from Paraná State, southern Brazil, for hemotropic Mycoplasma, Anaplasma/Ehrlichia spp., and piroplasms infection. Blood and/or spleen samples were collected from nine orange-spined hairy dwarf porcupines and four collared anteaters referred to the Veterinary Teaching Hospital, Universidade Federal do Paraná, Parana State, southern Brazil. The animals were screened for the presence of ectoparasites. DNA was extracted from all samples and further screened by PCR assays targeting the 16S rRNA/23S rRNA genes of hemoplasmas, 16S rRNA gene of Anaplasma/Ehrlichia spp., and 18S r RNA gene of piroplasms. A total of 275 ticks (34 males, 11 females, 7 nymphs and 223 larvae) were collected from eight porcupines: Amblyomma longirostre, Amblyomma parkeri, and Amblyomma spp. larvae. Two out of four anteaters were infested by A. calcaratum ticks (four males, and two females). Two out of nine porcupines were PCR-positive for hemoplasmas. One of four collared anteater sample tested positive for Anaplasma/Ehrlichia spp. by PCR. All animals tested negative for Theileria/Babesia spp. Phylogenetic and network analysis of the 16S and 23S rRNA gene fragments confirmed that porcupines were infected by a potentially novel hemotropic Mycoplasma sp. The name 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus' is proposed for this novel organism, that should be further fully characterized. Phylogenetic analysis of Anaplasma spp. 16S rRNA gene showed our anteater sequence positioned close to sequences of Anaplasma spp. of anteaters from São Paulo, Brazil. In conclusion, research involving wild animals, especially those killed by cars on the roads, represents an important tool for detecting vector-borne disease agents, since access to many of these animals is limited

Doenças transmitidas por carrapatos em equinos carroceiros, Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil

Orientador: : Prof. Dr. Rafael Felipe da Costa VieiraDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 01/03/2019Inclui referênciasResumo: As doenças transmitidas por carrapatos (DTCs) constituem um importante grupo de doenças que afetam animais e seres humanos em todo o mundo. No Brasil, os carrapatos são considerados os principais artrópodes que acometem os equinos, sendo responsáveis pela transmissão de patógenos com importância na clínica médica equina e na saúde pública. Assim, os objetivos deste estudo foram: i) determinar a prevalência dos patógenos transmitidos por carrapatos Theileria equi, Babesia caballi e Ehrlichia spp., e hemoplasmas em equinos carroceiros; ii) identificar as espécies de carrapatos que estavam parasitando esses animais; e iii) determinar os fatores associados à exposição/infecção na cidade de Foz do Iguaçu, Paraná, Sul do Brasil. Ao todo, 103 amostras de sangue de equinos carroceiros foram analisadas quanto à presença de anticorpos anti-T. equi e anti-Ehrlichia spp. pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Foi realizada a PCR nas amostras para amplificação dos genes 18S rDNA de T. equi e B. caballi e 16S rDNA de hemoplasmas. Ainda, as asmotras foram testadas por PCR para os genes 16S rDNA, proteína de formação de ligação dissulfeto (dsb) e proteínas de repetição de 36 (trp36) de Ehrlichia spp. Anticorpos anti-T. equi e anti-Ehrlichia spp. foram detectados em 43/103 (41,75%; IC 95%: 32,10-51,88%) e cinco/103 (4,85%; IC 95%: 1,59- 10,97%) cavalos por RIFI, respectivamente. DNA de T. equi e B. caballi foi identificado em 25/103 (24,27%; IC 95%: 16,36-33,71%) e 10/103 (9,71%; IC 95%: 4,75-17,13%) equinos, respectivamente, e todos foram negativos para Ehrlichia spp. e hemoplasmas na PCR. Todas as sequências apresentaram ?99% de identidade com sequências do gene 18S rDNA de T. equi e B. caballi depositadas no GenBank. Um total de 191 carrapatos da espécie Dermacentor nitens foram coletados de 25/103 (24,27%; IC 95%: 16,36-33,71%) animais. Equinos carroceiros > 5 anos apresentaram mais chance de serem positivos para T. equi (p < 0,05). Em conclusão, piroplasmas equinos são altamente prevalente em cavalos carroceiros da cidade de Foz do Iguaçu. A baixa prevalência de Ehrlichia spp. observada pode estar relacionada à ausência de carrapatos Amblyomma infestando os animais. A infecção por hemoplasma em cavalos pode ser considerada uma infecção acidental ou incomum. PALAVRAS-CHAVE: Theileria equi, Babesia caballi, Ehrlichia spp., hemoplasmas, carrapatos.Abstract: Tick-borne diseases (TBD) constitute an important group of illness affecting animals and human beings worldwide. In Brazil, ticks are considered the main arthropods that affect horses, being responsible for the transmission of tick-borne pathogens with importance in equine internal medicine and public health. Accordingly, the aims of this study were to: i) determine the prevalence of the TBD agents Theileria equi, Babesia caballi and Ehrlichia sp., and hemoplasmas in carthorses, ii) identify the tick species parasitizing the animals, and iii) determine factors associated with exposure/infection in Foz do Iguaçu City, Parana state, southern Brazil. A total of 103 carthorses blood samples were screened for anti-T. equi and anti- Ehrlichia spp. antibodies by indirect fluorescent antibody assays (IFA). Samples were also tested by PCR assays targeting the 18S rDNA gene of T. equi and B. caballi, and 16S rDNA gene of hemoplasmas. Additionally, PCR assays targeting the 16S rDNA, disulfide bond formation protein (dsb) and tandem repeat proteins 36 (trp36) genes of Ehrlichia spp. were also performed. Anti-T. equi and anti-Ehrlichia spp. antibodies were detected in 43/103 (41.75%; 95% CI: 32.10-51.88%) and five/103 (4.85%; 95% CI: 1.59-10.97%) carthorses by IFA, respectively. DNA of T. equi and B. caballi were found in 25/103 (24.27%; IC 95%: 16.36- 33.71%) and 10/103 (9.71%; IC 95%: 4.75-17.13%) carthorses, respectively, and all tested negative for Ehrlichia spp. and hemoplasmas by PCR. All sequences showed ?99% identity with multiple T. equi and B. caballi 18S rDNA gene sequences deposited in GenBank database. A total of 191 Dermacentor nitens ticks were collected from 25/103 (24.27%; IC 95%: 16.36- 33.71%) animals. Carthorses older than 5 years were more likely to be positive for T. equi (p < 0.05). In conclusion, equine piroplasms are highly prevalent in carthorses from Foz do Iguaçu City. The low prevalence of Ehrlichia sp. found herein may be due to the absence of Amblyomma ticks infesting the animals, which should be further investigated. Hemoplasma infection in horses may be considered an accidental or uncommon infection. KEY-WORDS: Theileria equi, Babesia caballi, Ehrlichia spp., hemoplasmas, ticks

FAUNA IXODÍDEA DE ANIMAIS SILVESTRES DO ESTADO DO PARANÁ, BRASIL – DADOS PRELIMINARES

Os carrapatos são conhecidos por parasitar uma variedade de hospedeiros domésticos e silvestres, incluindo mamíferos, aves, répteis e anfíbios. Além disso, muitos animais silvestres participam do ciclo epidemiológico de doenças transmitidas por carrapatos. Nesse sentido, o objetivo desse estudo foi identificar as espécies de carrapatos parasitando animais silvestres atendidos no Hospital Veterinário, Universidade Federal do paraná, Curitiba, Brasil. Os carrapatos foram coletados de 28 animais silvestres: uma anta (Tapirus terrestres), um cervídeo (Mazama sp.), um javali (Sus scrofa), dois bugios (Alouatta guariba), duas capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris), 9 ouriços-cacheiros (Sphiggurus villosus), quatro tamanduás-mirins (Tamandua tetradactyla), seis gambás (Didelphis spp.), um gato-mourisco (Herpailurus yagouaroundi) e um teiú (Tupinambis sp.). Ao todo, foram coletados 115 carrapatos (65 machos, 33 fêmeas e 17 ninfas): Amblyomma aureolatum (1M, 3F, 2N) em dois bugios, um gambá e um gato-mourisco; Amblyomma calcaratum (8M, 2F) em 4 tamanduás-mirins; Amblyomma dubitatum (6M, 1F, 7N) em duas capivaras e um gambá; Amblyomma fuscum (3F) em um teiú; Amblyomma longirostre (28M, 8F, 4N) e Amblyomma parkeri (4M, 3F, 3N) em nove ouriços-cacheiros; Amblyomma ovale (1F) em um javali; Amblyomma sculptum (6M, 7F) em uma anta e um javali; Haemaphysalis juxtakochi (1N) em um cervídeo e Ixodes loricatus (12M, 5F) em cinco gambás. Estudos são necessários para melhor avaliar o papel dessas espécies na epidemiologia das doenças transmitidas por carrapatos

PESQUISA DE EHRLICHIA SPP. EM EQUINOS DO MUNICÍPIO DE PARANAGUÁ, PR – DADOS PRELIMINARES

Erliquioses são doenças transmitidas por carrapatos que afetam animais e seres humanos. No Brasil, Ehrlichia canis em cães e Ehrlichia minasensis em bovinos são as principais espécies descritas. Em equinos, uma potencial nova espécie de Ehrlichia foi descrita infectando animais do Brasil e da Nicarágua. Entretanto, o potencial vetor e sinais clínicos associados à infecção permanecem desconhecidos. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar equinos do município de Paranaguá, litoral do Estado do Paraná. Um total de cinco animais foram avaliados até o momento. O DNA das amostras foi extraído utilizando um kit comercial. Todas as amostras foram negativas para Ehrlichia spp. por PCR para os genes 16S rRNA e dsb de Ehrlichia. O gene endógeno gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (gapdh) foi amplificado em todas as amostras. Quatro de cinco (80%) equinos estavam infestados por carrapatos da espécie Amblyomma sculptum (1 M, 3 F e 2 ninfas) e um de cinco (20%) animal por carrapatos da espécie Dermacentor nitens (1 F). O estudo envolverá ainda a triagem sorológica dos equinos, bem como dos carrapatos por PCR em tempo real

Doenças transmitidas por carrapatos em equinos carroceiros, Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil

Orientador: : Prof. Dr. Rafael Felipe da Costa VieiraDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 01/03/2019Inclui referênciasResumo: As doenças transmitidas por carrapatos (DTCs) constituem um importante grupo de doenças que afetam animais e seres humanos em todo o mundo. No Brasil, os carrapatos são considerados os principais artrópodes que acometem os equinos, sendo responsáveis pela transmissão de patógenos com importância na clínica médica equina e na saúde pública. Assim, os objetivos deste estudo foram: i) determinar a prevalência dos patógenos transmitidos por carrapatos Theileria equi, Babesia caballi e Ehrlichia spp., e hemoplasmas em equinos carroceiros; ii) identificar as espécies de carrapatos que estavam parasitando esses animais; e iii) determinar os fatores associados à exposição/infecção na cidade de Foz do Iguaçu, Paraná, Sul do Brasil. Ao todo, 103 amostras de sangue de equinos carroceiros foram analisadas quanto à presença de anticorpos anti-T. equi e anti-Ehrlichia spp. pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Foi realizada a PCR nas amostras para amplificação dos genes 18S rDNA de T. equi e B. caballi e 16S rDNA de hemoplasmas. Ainda, as asmotras foram testadas por PCR para os genes 16S rDNA, proteína de formação de ligação dissulfeto (dsb) e proteínas de repetição de 36 (trp36) de Ehrlichia spp. Anticorpos anti-T. equi e anti-Ehrlichia spp. foram detectados em 43/103 (41,75%; IC 95%: 32,10-51,88%) e cinco/103 (4,85%; IC 95%: 1,59- 10,97%) cavalos por RIFI, respectivamente. DNA de T. equi e B. caballi foi identificado em 25/103 (24,27%; IC 95%: 16,36-33,71%) e 10/103 (9,71%; IC 95%: 4,75-17,13%) equinos, respectivamente, e todos foram negativos para Ehrlichia spp. e hemoplasmas na PCR. Todas as sequências apresentaram ?99% de identidade com sequências do gene 18S rDNA de T. equi e B. caballi depositadas no GenBank. Um total de 191 carrapatos da espécie Dermacentor nitens foram coletados de 25/103 (24,27%; IC 95%: 16,36-33,71%) animais. Equinos carroceiros > 5 anos apresentaram mais chance de serem positivos para T. equi (p < 0,05). Em conclusão, piroplasmas equinos são altamente prevalente em cavalos carroceiros da cidade de Foz do Iguaçu. A baixa prevalência de Ehrlichia spp. observada pode estar relacionada à ausência de carrapatos Amblyomma infestando os animais. A infecção por hemoplasma em cavalos pode ser considerada uma infecção acidental ou incomum. PALAVRAS-CHAVE: Theileria equi, Babesia caballi, Ehrlichia spp., hemoplasmas, carrapatos.Abstract: Tick-borne diseases (TBD) constitute an important group of illness affecting animals and human beings worldwide. In Brazil, ticks are considered the main arthropods that affect horses, being responsible for the transmission of tick-borne pathogens with importance in equine internal medicine and public health. Accordingly, the aims of this study were to: i) determine the prevalence of the TBD agents Theileria equi, Babesia caballi and Ehrlichia sp., and hemoplasmas in carthorses, ii) identify the tick species parasitizing the animals, and iii) determine factors associated with exposure/infection in Foz do Iguaçu City, Parana state, southern Brazil. A total of 103 carthorses blood samples were screened for anti-T. equi and anti- Ehrlichia spp. antibodies by indirect fluorescent antibody assays (IFA). Samples were also tested by PCR assays targeting the 18S rDNA gene of T. equi and B. caballi, and 16S rDNA gene of hemoplasmas. Additionally, PCR assays targeting the 16S rDNA, disulfide bond formation protein (dsb) and tandem repeat proteins 36 (trp36) genes of Ehrlichia spp. were also performed. Anti-T. equi and anti-Ehrlichia spp. antibodies were detected in 43/103 (41.75%; 95% CI: 32.10-51.88%) and five/103 (4.85%; 95% CI: 1.59-10.97%) carthorses by IFA, respectively. DNA of T. equi and B. caballi were found in 25/103 (24.27%; IC 95%: 16.36- 33.71%) and 10/103 (9.71%; IC 95%: 4.75-17.13%) carthorses, respectively, and all tested negative for Ehrlichia spp. and hemoplasmas by PCR. All sequences showed ?99% identity with multiple T. equi and B. caballi 18S rDNA gene sequences deposited in GenBank database. A total of 191 Dermacentor nitens ticks were collected from 25/103 (24.27%; IC 95%: 16.36- 33.71%) animals. Carthorses older than 5 years were more likely to be positive for T. equi (p < 0.05). In conclusion, equine piroplasms are highly prevalent in carthorses from Foz do Iguaçu City. The low prevalence of Ehrlichia sp. found herein may be due to the absence of Amblyomma ticks infesting the animals, which should be further investigated. Hemoplasma infection in horses may be considered an accidental or uncommon infection. KEY-WORDS: Theileria equi, Babesia caballi, Ehrlichia spp., hemoplasmas, ticks

Patógenos transmitidos por carrapatos e micoplasmas hemotrópicos em ouriços-cacheiro (Sphiggurus villosus) e tamanduás-mirim (Tamandua tetradactyla), Paraná, Brasil

Orientador: Prof. Dr. Rafael Felipe da Costa VieiraTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 21/07/2021Inclui referênciasResumo: Os animais silvestres podem desempenhar um papel importante na propagação de carrapatos e patógenos de doenças transmitidas por carrapatos. No Brasil, ouriços-cacheiro (Sphiggurus villosus) e tamanduás-mirim (Tamandua tetradactyla) são amplamente distribuídos no bioma Mata Atlântica, e estão entre os animais mais atingidos e mortos em acidentes nas estradas. O objetivo deste estudo foi pesquisar ouriços-cacheiro e tamanduás-mirim de vida livre do Estado do Paraná, sul do Brasil, para infecção por micoplasmas hemotrópicos, Anaplasma/Ehrlichia spp. e piroplasmas. Amostras de sangue e/ou baço foram coletadas de nove ouriçoscacheiro e quatro tamanduás-mirim atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Paraná, Estado do Paraná, sul do Brasil. Foi realizada pesquisa de ectoparasitas nos animais. O DNA das amostras de sangue e baço foi extraído e testados por PCR para os genes 16S rRNA/23S rRNA de hemoplasmas, gene 16S rRNA de Anaplasma/Ehrlichia spp. e gene 18S rRNA de piroplasmas. Ao todo, 275 carrapatos (34 machos, 11 fêmeas, 7 ninfas e 223 larvas) foram coletados de oito ouriços-cacheiro: Amblyomma longirostre, Amblyomma parkeri e Amblyomma spp. larvas. Dois dos quatro tamanduás estavam infestados por carrapatos A. calcaratum (quatro machos e duas fêmeas). Dois dos nove ouriços-cacheiro foram PCR-positivos para hemoplasmas. Uma das quatro amostras de tamanduá-mirim testou positivo para Anaplasma/Ehrlichia spp. por PCR. Todos os animais apresentaram resultados negativos para piroplasmas. A análise filogenética dos genes 16S e 23S rRNA confirmou que os ouriços-cacheiro foram infectados por um potencial novo Mycoplasma sp. hemotrópico. O nome 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus' é proposto para esse novo organismo, que deve ser totalmente caracterizado. Análise filogenética do gene 16S rRNA mostrou que a sequência de Anaplasma spp. de tamanduá posicionada próxima às sequências de Anaplasma spp. de tamanduás de São Paulo, Brasil. Pesquisas envolvendo animais silvestres, principalmente os atropelados, representam importantes ferramentas para detecção de agentes de doenças transmitidas por vetores, uma vez que o acesso a muitos desses animais é limitado.Abstract: Wild animals may play an important role in the spread of ticks and tick-borne diseases (TBD) pathogens. In Brazil, orange-spined hairy dwarf porcupines (Sphiggurus villosus) and collared anteaters (Tamandua tetradactyla) are widely distributed in the Atlantic Rainforest biome being among the animals most frequently hit and killed by cars on the roads. The aim of this study was to screen free-ranging Brazilian porcupines and collared anteaters from Paraná State, southern Brazil, for hemotropic Mycoplasma, Anaplasma/Ehrlichia spp., and piroplasms infection. Blood and/or spleen samples were collected from nine orange-spined hairy dwarf porcupines and four collared anteaters referred to the Veterinary Teaching Hospital, Universidade Federal do Paraná, Parana State, southern Brazil. The animals were screened for the presence of ectoparasites. DNA was extracted from all samples and further screened by PCR assays targeting the 16S rRNA/23S rRNA genes of hemoplasmas, 16S rRNA gene of Anaplasma/Ehrlichia spp., and 18S r RNA gene of piroplasms. A total of 275 ticks (34 males, 11 females, 7 nymphs and 223 larvae) were collected from eight porcupines: Amblyomma longirostre, Amblyomma parkeri, and Amblyomma spp. larvae. Two out of four anteaters were infested by A. calcaratum ticks (four males, and two females). Two out of nine porcupines were PCR-positive for hemoplasmas. One of four collared anteater sample tested positive for Anaplasma/Ehrlichia spp. by PCR. All animals tested negative for Theileria/Babesia spp. Phylogenetic and network analysis of the 16S and 23S rRNA gene fragments confirmed that porcupines were infected by a potentially novel hemotropic Mycoplasma sp. The name 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus' is proposed for this novel organism, that should be further fully characterized. Phylogenetic analysis of Anaplasma spp. 16S rRNA gene showed our anteater sequence positioned close to sequences of Anaplasma spp. of anteaters from São Paulo, Brazil. In conclusion, research involving wild animals, especially those killed by cars on the roads, represents an important tool for detecting vector-borne disease agents, since access to many of these animals is limited

Estudo comparativo de dois testes sorológicos para detecção de anticorpos anti-Theileria equi em equinos

Theileria equi is the causative agent of worldwide piroplasmosis, an important tick-borne disease of equids associated to a lifetime carrier state of infected horses. Since rapid, accessible and reliable tests have been posted as a challenge for clinicians, the aim of the present study was to verify the agreement between an in-house immunofluorescence antibody assay (IFA) and a commercial competitive inhibition enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) in a population of 198 carthorses from Southern Brazil. The horse seroreactivity for T. equi revealed 152/198 (76.8%) positive samples by IFA and 155/198 (78.3%) by cELISA. Using cELISA as gold standard, IFA has shown a sensitivity of 91.6% (95% CI = 86.18-95.03%) and specificity of 76.7% (95% CI = 62.26-86.85%), with a substantial degree of agreement (k = 0.8445). In conclusion, the in-house IFA may be used as a screening test for diagnosis of equine piroplasmosis.Theileria equi é o agente causador da piroplasmose no mundo, é uma importante doença transmitida por carrapatos nos equídeos em todo o mundo, e está associada ao estado de portador nos equinos infectados. Uma vez que testes rápidos, acessíveis e confiáveis são considerados um desafio para os clínicos, o objetivo do presente estudo foi avaliar a concordância entre os testes de imunofluorescência indireta (RIFI) e um ensaio imunoenzimático por competição comercial (cELISA) em uma população de 198 equinos de tração na região Sul do Brasil. A sororreatividade dos cavalos para T. equi mostrou 152/198 (76.8%) amostras positivas para RIFI e 155/198 (78.3%) amostras positivas para cELISA. Utilizando o cELISA como padrão ouro, a RIFI demonstrou sensibilidade de 91.6% (95% CI = 86.18-95.03%) e especificidade de 76.7% (95% CI = 62.26-86.85%), com uma concordância de grau substancial (k = 0.8445). Em conclusão, a RIFI pode ser utilizada como um teste de triagem para o diagnóstico de piroplasmose equina

Theileria sp. in water buffaloes from Maranhão State, northeastern Brazil

Abstract Anaplasma marginale and piroplasm species are widespread among Brazilian cattle herds. Both of these tick-borne pathogens hamper livestock production and cause a significant economic impact. Although buffaloes have demonstrated a high level of adaptability, data on tick-borne pathogens are scarcely reported in Brazil. Thus, the aim of this study was to screen water buffaloes from the state of Maranhão for piroplasm and A. marginale occurrence using PCR assays. All samples were negative for A. marginale. One of the 287 (0.35%) water buffaloes tested was positive for Theileria sp. Sequencing of the 18S rDNA fragment (356 bp) showed that the Theileria sp. identified was closely related to the T. buffeli /orientalis group. Future studies on the clinical signs of infection and the main vector in this country are needed