Inactivación selectiva del receptor de glucocorticoides en la epidermis de ratón. Defectos en el desarrollo y cáncer de piel

Los glucocorticoides y su receptor Los glucocorticoides (GCs) son hormonas esteroideas que se sintetizan y secretan en las glándulas adrenales como respuesta a señales de estrés externas y cuya síntesis está regulada por el eje hipotálamo-pituitaria-adrenal (HPA) (Taves et al., 2011). Los GCs, cortisol en humanos y corticosterona en ratones, regulan numerosos procesos fisiológicos como el metabolismo de glucosa y lípidos, la respuesta inflamatoria e inmune, el desarrollo fetal y la proliferación y supervivencia celular. Además, son importantes para la maduración de órganos como el pulmón, el riñón y la epidermis entre otros (Pérez, 2011). Además de las funciones básicas fisiológicas anteriormente descritas, los análogos de GCs son los compuestos más prescritos como tratamiento en clínica por sus propiedades anti-inflamatorias, anti-proliferativas e inmunosupresoras. También es frecuente su uso como tratamiento en enfermedades cutáneas y como co-adyuvante en tratamientos de quimioterapia, especialmente en casos de leucemia, dadas sus propiedades anti-proliferativas y pro-apoptóticas (Tissing et al., 2003). Los GCs ejercen su función a través del denominado receptor de glucocorticoides (GR). GR es un factor de transcripción dependiente de ligando que se expresa de manera ubicua y pertenece a la superfamilia de receptores hormonales nucleares (NHR) (Gronemeyer et al., 2004). Existen múltiples isoformas y variantes obtenidas por splicing alternativo y sitios alternativos de inicio de la traducción respectivamente. Las dos isoformas mejor caracterizadas, son GRα y GRβ, que se obtienen por splicing alternativo (Nicolaides et al., 2010). La piel La piel es la capa más externa de los vertebrados y se considera el órgano más grande del cuerpo. La piel es esencial para la supervivencia, ya que constituye la primera línea de defensa frente al medio ambiente, protegiendo de infecciones, radiaciones UV y heridas, entre otros. Además, evita la pérdida de agua, actúa como termoregulador, contiene receptores sensitivos y sintetiza vitamina D. La piel está compuesta por 2 capas principales: la epidermis y la dermis, que presentan estructuras y funciones diferentes (Fuchs y Raghavan, 2002). La epidermis de ratón deriva de una única capa de ectodemo embrionario que se puede observar a día de desarrollo embrionario (E)8.5-E10. Esta monocapa comienza a estratificar para dar lugar al peridermo (E9-E12). Alrededor del día E12-E15, se produce la formación de las capas intermedias. Las células de estas capas comienzan a diferenciar, expresando marcadores específicos (K1 y K10) para dar lugar a los estratos espinoso y granular (E15). Alrededor del día E16, la diferenciación terminal se completa y aparece el estrato córneo. A día E19 la epidermis es completamente madura y funcional (Byrne et al., 2003). Trabajos previos en el grupo, usando ratones transgénicos de ganancia y pérdida de función, nos han permitido estudiar y conocer el papel de GR en la fisiopatología de la piel (Pérez et al., 2001; Bayo et al., 2008). Para profundizar más en el estudio de GR y su importancia en el desarrollo de la piel, hemos generado y caracterizado los ratones transgénicos con pérdida específica de la función de GR en epidermis (Epidermal-specific GR knock-out, GREKO). RESULTADOS DE LA TESIS DOCTORAL En primer lugar quisimos investigar si la inactivación de GR en la epidermis afectaba a la formación de la barrera epidérmica durante el desarrollo embrionario. En los embriones control la epidermis maduró siguiendo el patrón establecido y esperado, comenzando a día E16.5 y finalizando a día E18.5. Sin embargo, los embriones GREKO mostraron un patrón de desarrollo alterado, con múltiples sitios de iniciación y un claro retraso en la maduración. El análisis histológico mostró que la epidermis de los embriones E17.5 GREKO era más fina que la de los controles y que en algunas regiones estaba compuesta por pocas capas de células. A día E18.5 se seguía observando esta diferencia en el grosor epidérmico. Además, se apreciaba una disminución de los estratos granular y córneo y la separación de este último del resto de la epidermis. Por el contrario, después del nacimiento (P0 y P2) los ratones GREKO presentaban una epidermis hiperplásica con defectos en la diferenciación de los queratinocitos. El estudio y expresión de marcadores de diferenciación epidérmica (filagrina, loricrina y corneodesmosina) reveló alteraciones en el patrón de expresión de los mismos, mostrando regiones parcheadas, negativas para la tinción, en la epidermis de los ratones GREKO recién nacidos. Para investigar los efectos que de manera generalizada provocó la pérdida de GR en la epidermis de los ratones GREKO, realizamos un análisis de microarrays de expresión a partir de RNA de muestras de epidermis dorsal de ratones recién nacidos. Los genes identificados con una expresión diferencial entre ambos genotipos se agruparon según su función, siendo el grupo más representado el que agrupa los genes que participan en el proceso de diferenciación de los queratinocitos. Además, muchos de los genes que se inducían en la epidermis de los ratones GREKO pertenecen al complejo de diferenciación epidérmica, compuesto por genes tanto de diferenciación de la epidermis como de defensa frente a patógenos. Para determinar si los cambios observados en la epidermis de los GREKO ocurrían de manera autónoma-celular llevamos a cabo el cultivo de los queratinocitos primarios. El análisis de expresión génica mediante qRT-PCR mostró el mismo perfil que obtuvimos en los microarrays, realizados a partir de epidermis dorsal. Es importante mencionar que tanto el fenotipo como los cambios transcriptómicos observados en la piel de ratones GREKO recién nacidos correlacionan con alteraciones características de patologías inflamatorias cutáneas como la dermatitis atópica y psoriasis (pej, Krt6/16, S100a8/a9, Tslp, Slpi). Los datos indican una respuesta epidérmica intrínseca a la pérdida de barrera epidérmica y permiten postular el uso de los transgénicos GREKO como modelo animal de estas enfermedades humanas. La pérdida de GR en la epidermis afecta a las vías de señalización por MAPKs. El análisis por inmuhistoquímica reveló un patrón de expresión normal de p-ERK en la epidermis de los ratones control de E18.5 y P0. Sin embargo, en los ratones GREKO observamos una expresión ectópica. Además, dado que GR interfiere con la actividad AKT, evaluamos la expresión y actividad de esta proteína. El análisis por Western Blot mostró un incremento en la actividad de AKT en la epidermis de los ratones GREKO, causante, al menos en parte, de los defectos en la barrera que presentan estos ratones. A pesar de que los ratones GREKO llegan a la edad adulta con normalidad, son más susceptibles que los ratones control frente a las agresiones del medio. Experimentos de carcinogénesis de piel demostraron dicha susceptibilidad. Los ratones GREKO desarrollaron un mayor número de papilomas (tumores benignos) y en un menor tiempo que los ratones control. Además, el 30% de los papilomas de los ratones GREKO (y ninguno de los controles) mostró expresión de keratina 13, un marcador que indica una posible malignización temprana de estos papilomas

Hábitos de lectura y competencia literaria al final de la E.S.O.

This article describes the results and conclusions of a research on reading habits and literary competence in students of 4th ESO. The project came up from the need to obtain specific information about the literary competence of students. The teachers talk a lot about what their pupils know or do not know, about what they must and must not do, about what the teachers have or do not have to do and also about what the education authorities should carry out. In other words the teachers put into words their thoughts but they rarely do it in a systematic way. This work brings specific data about literary preferences, reading habits, fiction consumption, literary knowledge, etc., of students. The purpose of this data is to convert the spontaneous concepts (the teachers´ thoughts) in more scientific concepts, allowing to modify those aspects in which students present the greatest deficiencies.Este artículo describe los resultados y las conclusiones de un trabajo de investigación sobre hábitos de lectura y competencia literaria en alumnos de 4º de la E.S.O. El proyecto surgió de la necesidad de obtener datos concretos sobre la competencia literaria de los alumnos. Los profesores hablan muchísimo sobre lo que saben o no saben los alumnos, lo que deben o no hacer, lo que tienen o no que hacer ellos y, también, los responsables de la política educativa. Es decir, los profesores verbalizan sus reflexiones, pero, sólo en contadas ocasiones, lo hacen de manera sistemática. El trabajo aporta datos concretos sobre gustos literarios, hábitos lectores, consumo de ficción, conocimientos literarios, etc.; datos cuya finalidad es la de convertir conceptos espontáneos en conceptos más científicos, que son los que permitirán modificar aquellos aspectos en los que el alumnado presenta deficiencias

Composición corporal y fuerza del atleta veterano: efecto

Introducción El atleta máster ha sido propuesto como modelo ideal de envejecimiento debido a su participación en el ejercicio de alta intensidad. El propósito de este estudio es analizar la fuerza y composición corporal de atletas veteranos de fondo en relación con la edad. Material y método Los participantes son 43 atletas, 40 hombres (edad: 41,2 ± 1,1 años) y 3 mujeres (edad: 44,3 ± 3,1 años) que entrenaban actualmente. Se analizó la fuerza de piernas mediante CMJ y saltos en 30 s, dinamometría manual y diferentes parámetros de composición corporal. Como parámetros explicativos se establecieron 2 grupos de edad (35-44 años y 45-54 años). Resultados No se han encontrado diferencias significativas (p ≥ 0,05) en composición corporal por el efecto de la edad, pero sí en relación con la fuerza que experimenta reducciones significativas (p < 0,05) en altura de salto, velocidad máxima, potencia máxima y trabajo concéntrico en el CMJ y en la altura media de salto y potencia media en los saltos en 30 s del grupo de mayor edad. Conclusiones El atleta veterano, a pesar de la edad, mantiene parámetros saludables de composición corporal, sin embargo, este tipo de entrenamiento no permite mantener los valores de fuerza de piernas a lo largo del envejecimiento

Selective ablation of glucocorticoid receptor in mouse keratinocytes increases susceptibility to skin tumorigenesis.

9 páginas, 5 figuras. En material suplementario 5 figuras.We recently demonstrated that mice lacking the epidermal glucocorticoid (GC) receptor (GR) (GR epidermal knockout (GR(EKO)) mice) have developmental defects and sensitivity to epidermal challenge in adulthood. We examined the susceptibility of GR(EKO) mice to skin chemical carcinogenesis. GR(EKO) mice treated with a low dose of 12-dimethylbenz(a) anthracene (DMBA) followed by phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) promotion exhibited earlier papilloma formation with higher incidence and multiplicity relative to control littermates (CO). Augmented proliferation and inflammation and defective differentiation of GR(EKO) keratinocytes contributed to the phenotype, likely through increased AKT and STAT3 (signal transducer and activator of transcription 3) activities. GR(EKO) tumors exhibited signs of early malignization, including delocalized expression of laminin A, dermal invasion of keratin 5 (K5)-positive cells, K13 expression, and focal loss of E-cadherin. Cultured GR(EKO) keratinocytes were spindle like, with loss of E-cadherin and upregulation of smooth muscle actin (SMA) and Snail, suggesting partial epithelial-mesenchymal transition. A high DMBA dose followed by PMA promotion generated sebaceous adenomas and melanocytic foci in GR(EKO) and CO. Importantly, the number, growth kinetics, and extent of both tumor types increased in GR(EKO) mice, suggesting that in addition to regulating tumorigenesis from epidermal lineages, GR in keratinocytes is important for cross-talk with other skin cells. Altogether, our data reinforce the importance of GR in the pathogenesis of skin cancer.This work was supported by grant SAF2011-28115 of the Ministerio de Economía y Competitividad from the Spanish government. VL holds a fellowship from the MICINN (BES-2009-021944).Peer reviewe

Epidermal inactivation of the glucocorticoid receptor triggers skin barrier defects and cutaneous inflammation.

9 páginas, 5 figuras. En material suplementario 7 figuras, 2 tablas.The glucocorticoid (GC) receptor (GR) mediates the effects of physiological and pharmacological GC ligands and has a major role in cutaneous pathophysiology. To dissect the epithelial versus mesenchymal contribution of GR in developing and adult skin, we generated mice with keratinocyte-restricted GR inactivation (GR epidermal knockout or GR(EKO) mice). Developing and early postnatal GR(EKO) mice exhibited impaired epidermal barrier formation, abnormal keratinocyte differentiation, hyperproliferation, and stratum corneum (SC) fragility. At birth, GR(EKO) epidermis showed altered levels of epidermal differentiation complex genes, proteases and protease inhibitors which participate in SC maintenance, and innate immunity genes. Many upregulated genes, including S100a8/a9 and Tslp, also have increased expression in inflammatory skin diseases. Infiltration of macrophages and degranulating mast cells were observed in newborn GR(EKO) skin, hallmarks of atopic dermatitis. In addition to increased extracellular signal-regulated kinase activation, GR(EKO) newborn and adult epidermis had increased levels of phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3, a feature of psoriasis. Although adult GR(EKO) epidermis had a mild phenotype of increased proliferation, perturbation of skin homeostasis with detergent or phorbol ester triggered an exaggerated proliferative and hyperkeratotic response relative to wild type. Together, our results show that epidermal loss of GR provokes skin barrier defects and cutaneous inflammation.This work was supported by grant SAF2008-00540 and SAF2011-28115 of the Ministerio de Ciencia e Innovación/Economía y Competitividad from the Spanish Government and ACOMP2011/127 from Generalitat Valenciana. LMS holds a JAE-DOC contract partly supported by the EC and VL is a recipient of an FPI fellowship of MICINN (BES-2009-021944).Peer reviewe

Social Media and Sports Management: a Data Envelopment Analysis of the English Premier League

Purpose: The aim of this article is to measure the efficiency of the English Premier League (EPL) football clubs combining sports, financial, and social media indicators. Methodology: For that end, Data Envelopment Analysis (DEA) has been extensively employed to assess sports productivity. In this particular case, selected inputs are: total assets, wages &amp; salaries, and number of Facebook publications. As outputs, season points, number of Facebook fans, and profits before taxes are considered. Findings/Contribution: Results indicate a direct relationship between table position, efficiency, and profit before taxes and social networks’ use. Intensive utilization of social media can also contribute to the enlargement of a sports institution’s social base, which can also improve its economic resources to be employed on the club’s sport potential

Composició corporal i força de l’atleta veterà: efecte de

Introducció: L’atleta màster ha estat proposat com a model ideal d’envelliment degut a la seva participació en l’exercici d’alta intensitat. El propòsit d’aquest estudi és analitzar la força i la composició corporal d’atletes veterans de fons en relació amb l’edat. Material i mètode: Els participants foren 43 atletes, 40 homes (edat: 41,2 ± 1,1 anys) i 3 dones (edat: 44,3 ± 3,1 anys) que continuaven entrenant. S’analitzà la força de cames mitjançant el CMJ i salts en 30 s, dinamometria manual i diferents paràmetres de composició corporal. Com a paràmetres explicatius s’establiren 2 grups d’edat (35-44 anys i 45-54 anys). Resultats: No es trobaren diferències significatives (p ≥ 0,05) en la composició corporal per l’efecte de l’edat, però sí en relació amb la força, que experimenta reduccions significatives (p < 0,05) en altura del salt, velocitat màxima, potència màxima i treball concèntric en el CMJ i en l’altura mitjana del salt i potència mitjana dels salts en 30 s del grup de més edat. Conclusions: L’atleta veterà, tot i l’edat, manté uns paràmetres saludables de composició corporal; tanmateix, aquest tipus d’entrenament no permet mantenir els valors de força de cames al llarg de l’envelliment

Perfil de los usuarios de servicios deportivos de fitness según la situación contextual

En la actualidad el sector del fitness está muy demandado por la sociedad, y cada vez son más las personas que optan por este ámbito para ocupar su tiempo libre, además este sector es una salida profesional para licenciados/ graduados en Ciencias de la Actividad Física y del Deporte (CCAFD). Por lo que se ha convertido en un sector económico muy potente en España, donde se ofertan servicios muy heterogéneos con diferentes objetivos y para los diferentes perfiles de las personas. Por ello, la finalidad de este estudio es conocer el perfil de la población que requiere de estos servicios del fitness, saber sus motivaciones, gustos, conocimientos, hábitos. El estudio se ha llevado a cabo en un centro deportivo de Huesca, obteniendo una muestra de 203 personas, todas ellas mayores de edad. Con los resultados obtenidos podemos observar que la asistencia es muy similar en ambos sexos. La mayoría son solteros/as con una edad comprendida entre los 26-34 años. La calidad de las instalaciones y el buen trato personal son muy tenidas en cuenta a la hora de la elección del centro. La principal motivación que les mueve a solicitar los servicios del fitness es el mero hecho de sentirse bien y saludables. El horario más demandado es a partir de las 20:00h. La mayoría de los usuarios acuden al centro 2 ó 3 días a la semana de forma regular independientemente de la época del año. Las actividades cardiovasculares y las de tonificación son las más solicitadas aunque algunos clientes a la hora de elegir las actividades se decantan por aquellas con monitores más motivadores

Cipriano de Rivas Cherif en el Teatro Español de Madrid (1930-1936)

Cipriano de Rivas Cherif (1891-1967), pionero en la introducción de la figura del director de escena en España, es una figura clave para entender los intentos de renovación de la escena teatral española de la primera mitad del siglo XX. El presente trabajo tratará de analizar su labor como director de escena dentro del Teatro Español de Madrid, en el que ocupó el puesto de asesor artístico de la compañía de Margarita Xirgu entre 1930 y 1936, aportando una visión general de los criterios que se siguieron a la hora de realizar los montajes