Efecto de los anticuerpos monoclonales anti proteínas variable de superficie sobre el proceso de variación antigénica en Giardia Lamblia

Tesis (Doctor en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2016Giardia lamblia es un parásito intestinal considerado como uno de los eucariotas más primitivos. Vive en el duodeno de los humanos y otros mamíferos y es el agente causante la giardiasis, una enfermedad que puede manifestarse clínicamente con diarrea aguda o crónica así como puede causar infecciones asintomáticas. Giardia está recubierto por proteínas de superficie que constituyen una interfase entre el parásito y el medio ambiente y que pertenecen a la familia de proteínas llamadas Proteínas Variables de Superficie (Variant-specific Surface Proteins - VSPs). Su genoma contiene aproximadamente entre 150 y 200 genes codificantes para estas proteínas, pero sólo una VSP es expresada sobre la superficie de cada parásito en un dado momento y puede ser recambiada por otra mediante un mecanismo de regulación post transcripcional. Los estímulos que inducen este recambio son aún desconocidos. Varios estudios han sugerido que anticuerpos monoclonales contra una VSP específica podrían tener efectos citotóxicos sobre Giardia. En el presente trabajo de tesis se demuestra no sólo que los anticuerpos monoclonales contra VSPs no tiene efecto citotóxico sobre el parásito, sino también que son un estímulo que induce variación antigénica in vitro, sugiriendo que la presión del sistema inmunitario podría ser la principal causa de la variación antigénica in vivo.Giardia lamblia is an intestinal protozoan considered one of the most primitive eukaryotes. It lives in the small intestine of humans and other mammals and is the causative agent of giardiasis. This disorder is characterized by clinical manifestations ranging from asymptomatic infection to acute or chronic diarrhea, and closely related to malabsorption. Giardia is covered with a specific surface protein, which is a true interface between the parasite and the environment, and belong to a family of proteins called Variant-specific surface proteins (VSPs). Its genome contains a repertoire from 150 to 200 genes encoding these proteins, but only one VSP is expressed on the surface of each parasite at a particular time and can switches to a different VSP by unknown stimuli through a post transcriptional regulation. Several studies have suggested that monoclonal antibodies against a specific VSP may have cytotoxic effect on Giardia. Through this work it is demonstrated not only that • inmunoglobulins do not have a cytotoxic effect but also induce antigenic variation in vitro, suggesting that the inimune system pression can be a major cause of antigenic switching in vivo.Fil: Torri, Alessandro. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Medicina. Cátedra de Química; Argentina.Fil: Torri, Alessandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Luján, Hugo Daniel. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Medicina. Cátedra de Química; Argentina.Fil: Luján, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Inmunología y Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Barra, José Luis Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina.Fil: Barra, José Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.Fil: Sotomayor, Claudia Elena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Sotomayor, Claudia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Rivero, Virginia Elena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Rivero, Virginia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Mayorga, Luis Segundo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina

Analysis of total organic carbon in soil-biochar systems

Amending agricultural soils with biochar can contribute to negative carbon strategies when the resistance to oxidation of soil carbon is improved (avoided CO2 emission) and plant growth is promoted (increased CO2 fixation). The environmental stability and sequestering capacity of biochar is dependent on the chemical form of carbon and its physical location in the carbonaceous matrix. The addition of biochar in soil increases noticeably the stable carbon pool, while the effect on labile carbon, including polyaromatic structures, is less marked.1 The fertilizing action can be lost if biochar is removed from the cultivated area due to physical processes (vertical transport, lateral export, slacking). Assessing the fate of carbon in the soil requires the use of suitable analytical methods that should be validated for the presence of biochar. Please click on the file below for full content of the abstract

Implementing simulation–based approaches for healthcare workflow analysis

The Discrete Event Simulation (DES) approach has become a popular technique for problem solving in healthcare, as it provides a very realistic picture of the actual system. A simulation–based operational paradigm by means of the SIMUL8 software suite was implemented in the Department of Laboratory Medicine (DLM) of the "San Paolo” Hospital in Naples (Italy), as support of the Business Process Management (BPM) methodology, to analyse and improve the performances the current working performances

Gender influence on professional satisfaction and gender issue perception among young oncologists. A survey of the Young Oncologists Working Group of the Italian Association of Medical Oncology (AIOM)

Background: The professional gender gap is increasingly recognised in oncology. We explored gender issues perception and gender influence on professional satisfaction/gratification among young Italian oncologists. Methods: Italian oncologists aged 6440 years and members of the Italian Association of Medical Oncology were invited to participate in an online survey addressing workload/burnout, satisfaction in professional abilities and relations, relevant factors for professional gratification, and gender barriers. \u3c72 test for general association or \u3c72 test for trend was used to analyse the data. Results: 201 young oncologists participated in the survey: 67% female, 71% aged 30-40 years, 41% still in training and 82% without children. Women and men were equally poorly satisfied by the relations with people occupying superior hierarchical positions. There was heterogeneity between women and men in current (p=0.011) and expected future (p=0.007) satisfaction in professional abilities: women were more satisfied by current empathy and relations with colleagues and were more confident in their future managerial and team leader skills. The most important elements for professional gratification indicated by all participants were, in general, work-life balance (36%) and intellectual stimulation/research (32%); specifically for women, work-life balance (48%) and intellectual stimulation/research (20%); and specifically for men, career (29%) and social prestige/recognition (26%). Heterogeneity within the same gender emerged. For example, the elements indicated by men as the most important were intellectual stimulation/research (39%) and work-life balance (21%) in general, versus social prestige/recognition (24%) and career (24%), respectively, specifically for men (p<0.0001). More women versus men perceived gender issue as an actual problem (60% vs 38%, p=0.03); men underestimated gender barriers to women's career (p=0.011). Conclusions: Satisfaction in professional abilities varied by gender. Work-life balance is important for both women and men. Stereotypes about gender issues may be present. Gender issue is an actual problem for young oncologists, mostly perceived by women

Biochar from gasification in cultivated soils and riparian buffer zones: Chemical characterization

During rain events, pollutants in agricultural soils can be transported from fields to surface and/or groundwater resulting in contamination of streams and rivers. Researchers and farmers must work together to find solutions to ensure the preservation of crop production without jeopardizing water quality or the health of the ecosystem. Establishment of riparian zones may reduce the effects of diffuse discharges of pollutants into waterways. The addition of biochar to soils, particularly in a riparian zones, can reduce the mobility of contaminants and improve removal efficiency due its sorptive capacity. Please click on the file below for full content of the abstract

Procesos epigenéticos involucrados en la diferenciación celular y la variación antigénica de Giardia lamblia

Giardia lamblia es un protozoario que posee diferentes mecanismos para adaptarse fuera o dentro del intestino del hospedador, entre los que se encuentran los procesos de enquistamiento y de variación antigénica. La diferenciación a quiste permite la transmisión del parásito y su resistencia a las condiciones adversas del medio. Por otro lado, la variación de la expresión de sus antígenos de superficie (VSPs) permite evadir la respuesta inmune, generando infecciones crónicas y/o recurrentes. Ambos procesos se regulan por diferentes mecanismos, el primero a nivel transcripcional y el segundo por un mecanismo post-transcripcional similar al ARN de interferencia. Estos estudios se centraron en la determinación de la existencia de procesos epigenéticos que podrían colaborar en la regulación de ambos mecanismos.Asociación Parasitológica Argentin

ARN helicasas en dos procesos de desarrollo: variación antigénica y enquistamiento de giardia lamblia

Además de su importancia médica y veterinaria al ser una de las mayores causas de enfermedad intestinal con origen en el consumo de agua, Giardia es un excelente modelo para estudiar la evolución de importantes procesos celulares, ya que es una de las células eucariotas más primitivas que se conocen. Giardia utiliza dos mecanismos de adaptación a los cambios ambientales que confronta durante su ciclo de vida, ya sea para sobrevivir dentro del intestino del huésped como es la variación de sus antígenos de superficie, o fuera del mismo como es la diferenciación a quiste o enquistamiento. El Objetivo General de nuestro proyecto de investigación es el de comprender los mecanismos de adaptación y diferenciación celular en Giardia lamblia y utilizar esos conocimientos para el desarrollo de metodologías que permitan evitar la enfermedad y/o la transmisión del parásito así como también para definir nuevas técnicas diagnósticas. Las ARN Helicasas están presentes en muchas Archaea, casi todas las Eubacterias y todos los organismos eucariotas, y son necesarias o están involucradas en muchos procesos diferentes del metabolismo del ARN. En células eucariotas se las ha asociado desde la transcripción hasta la degradación del ARN, incluyendo pre-ARNm splicing, exportación del ARNm, biogénesis del ribosoma, iniciación de la traducción y expresión génica en organelas. Resultados previos indican que el mecanismo por el cual Giardia regula la expresión de sus proteínas variables de superficie es a nivel post-transcripcional, utilizando un mecanismo similar a ARN de interferencia. La presencia de los complejos de doble hebra de ARN promueve la acción de ARN Helicasas y ARNasas III que cortan el dsRNA en fragmentos cortos de 21-23 nt. Sin dudas ésta es la primera evidencia de un mecanismo de este tipo que participa fisiológicamente en la regulación génica diferencial. Por otro lado, se ha descripto la interacción de helicasas con deacetilasas de histonas (HDAC), las cuales según estudios realizados en nuestro laboratorio estarían involucradas en la regulación epigenética de la variación antigénica y el enquistamiento. Se busca por lo tanto comprender la participación de ARN Helicasas en ambos procesos de adaptación del parásito, evaluando el grado e importancia de las mismas. En particular se focalizará en la localización subcelular, la interacción con otros componentes de la maquinaria regulatoria y determinación de los dominios involucrados, como también la relación entre sus niveles de expresión y los diferentes fenotipos asociados a estos procesos de adaptación del parásito.Fil: Gargantini, Pablo Rubén. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Luján, Hugo Daniel. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias de la Salud; Argentin

Desarrollo de una vacuna contra el Protozoario intestinal Giardia Lamblia basado en la manipulación del mecanismo de variación antigénica

Una característica de los parásitos es su capacidad de adaptación. Uno de los mecanismos que utiliza Giardia es la variación de sus antígenos de superficie (VSP), pudiendo así evadir la respuesta inmune del huésped. Esto es posible debido a que cada trofozoíto expresa una sola VSP en su superficie pero frente a la respuesta del huésped produce el recambio de las VSPs, evadiendo el ataque inmunológico. Nuestro grupo de trabajo investigó el mecanismo involucrado en este proceso, demostrando que la regulación de la expresión de las VSP es mediado por un mecanismo de silenciamiento posttranscripcional. Caracterizamos las enzimas involucradas en el mismo y su localización. La dilucidación del mecanismo de variación antigénica en Giardia abre las fronteras hacia la manipulación del mismo para emplearlo en la generación de una vacuna contra este parásito intestinal. Si se lograra inhibir la acción de enzimas claves no habría silenciamiento génico y todos los genes que codifican VSP se traducirían en proteínas, expresándose todas en la superficie del parásito posibilitando al hospedador generar una respuesta inmune protectiva que contrarreste la infección. En el presente proyecto se completarán los estudios relacionados al silenciamiento génico y se explicará los antígenos utilizados en los esquemas de inmunización.Fil: Luján, Hugo Daniel. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Carranza, Pedro Gabriel. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias de la Salud; Argentin

Desarrollo de una vacuna contra el Protozoario intestinal Giardia Lamblia basado en la manipulación del mecanismo de variación antigénica

Una característica de los parásitos es su capacidad de adaptación. Uno de los mecanismos que utiliza Giardia es la variación de sus antígenos de superficie (VSP), pudiendo así evadir la respuesta inmune del huésped. Esto es posible debido a que cada trofozoíto expresa una sola VSP en su superficie pero frente a la respuesta del huésped produce el recambio de las VSPs, evadiendo el ataque inmunológico. Nuestro grupo de trabajo investigó el mecanismo involucrado en este proceso, demostrando que la regulación de la expresión de las VSP es mediado por un mecanismo de silenciamiento posttranscripcional. Caracterizamos las enzimas involucradas en el mismo y su localización. La dilucidación del mecanismo de variación antigénica en Giardia abre las fronteras hacia la manipulación del mismo para emplearlo en la generación de una vacuna contra este parásito intestinal. Si se lograra inhibir la acción de enzimas claves no habría silenciamiento génico y todos los genes que codifican VSP se traducirían en proteínas, expresándose todas en la superficie del parásito posibilitando al hospedador generar una respuesta inmune protectiva que contrarreste la infección. En el presente proyecto se completarán los estudios relacionados al silenciamiento génico y se explicará los antígenos utilizados en los esquemas de inmunización.Fil: Luján, Hugo Daniel. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Carranza, Pedro Gabriel. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias de la Salud; Argentin