Diferenças na expressão e no descarte do TNFR1 e TNFR2 durante a infecção in vitro com o Mycobacterium bovis

A tuberculose é uma doença infecciosa causada por bactérias do gênero Mycobacterium, entre elas o M. bovis. Esses bacilos penetram no organismo principalmente pela via respiratória, sendo fagocitados pelos macrófagos alveolares. A infecção desencadeia uma cascata de moléculas inflamatórias, que visa a eliminação do patógeno. A citocina fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α) tem um papel importante no desenvolvimento da tuberculose por induzir potente resposta inflamatória, além de regular a apoptose. O TNF-α atua por meio de dois receptores de superfície celular, o receptor 55-kDa (TNFR1) e o receptor 75-kDa (TNFR2). Esses receptores são inicialmente sintetizados como proteínas ancoradas na membrana celular, mas podem ser clivados por proteólise originando os receptores solúveis sTNFR-1 e sTNFR-2, que podem competir com os TNFRs pela ligação com o TNF-α. O objetivo desse trabalho foi analisar, in vitro, a expressão de TNFRs na superfície macrófagos J774.A1 infectados com o M. bovis BCG, além de investigar a presença de sTNFRs e TNF-α nos sobrenadantes de cultura. Os resultados mostram uma produção significativa de TNF-α e maior expressão de TNFR1 nas culturas infectadas com M. bovis, em comparação ao controle não infectado. Na presença de M. bovis as células apresentaram uma diminuição significativa na expressão do TNFR2, o que correlacionou com maior detecção de sTNFR2. Estes dados indicam que a infecção de macrófagos J774.A1 com o M. bovis induz um aumento significativo na produção de TNF-α que correlaciona com uma maior expressão de TNFR1 na superfície das células cultivadas. Os níveis de sTNFR2 foram maiores após a infecção com M. bovis e podem influenciar no acesso do TNF-α ao TNFR1, modulando a atividade biológica do TNF-α

Reatividade de anticorpos de soros humanos a antígenos de Paracoccidioides brasiliensis tratados com metaperiodato sódico

In this study, we evaluated the profile of anti-Paracoccidioides brasiliensis immunoglobulin isotypes in serum from patients with the acute and chronic forms of paracoccidioidomycosis, using the whole Paracoccidioides brasiliensis antigen and the antigen treated with sodium metaperiodate. All the immunoglobulin isotypes present in the serum from patients with the acute and chronic forms of paracoccidioidomycosis presented higher reactivity towards the whole antigen than to the antigen treated with metaperiodate (P < 0.05). The reactivity of IgG and IgM to the antigen treated with metaperiodate was greater in serum from patients with the acute form of the disease (P < 0.05), while IgA was more reactive in serum from patients with the chronic form (P < 0.05). There was greater reactivity of IgG1 and IgG2 to the whole antigen and the antigen treated with metaperiodate in the serum from patients with paracoccidioidomycosis than there was in serum from patients with other parasitic infections (P < 0.05). Furthermore, IgG1 from patients with the acute form recognized the 19kDa, 27kDa and 31kDa antigens in the western blot test. Thus, the results suggest that modifications to the epitopes of Paracoccidioides brasiliensis antigens may help to improve the immunodiagnosis of paracoccidioidomycosis.Neste trabalho, foi avaliado o perfil de isotipos de imunoglobulinas anti-Paracoccidioides brasiliensis em soros de pacientes com formas crônica e aguda de paracoccidiodomicoses usando antígeno total e tratado com meta-periodato. Todos os tipos de imunoglobulinas presentes nos soros de pacientes com formas aguda e crônica apresentaram alta reatividade ao antígeno total quando comparado ao tratado com meta-periodato (P < 0,05). Houve maior reatividade de IgG e IgM anti-antígeno tratado com meta-periodato em soros de pacientes com forma aguda da doença (P < 0,05), enquanto IgA foi mais reativa em soros da forma crônica (P < 0,05). Houve maior reatividade de IgG1 e IgG2 com antígeno total e tratado com meta-periodato em soros de pacientes comparados aos com outras parasitoses (P < 0,05). Além disso, IgG1 de pacientes com a forma aguda reconhecem antígenos de 19kDa, 27kDa e 31kDa por western blot. Assim, os resultados sugerem que alterações nos epitopos de antígenos de Paracoccidioides brasiliensis podem auxiliar no aprimoramento do imunodiagnóstico da paracoccidioidomicose

Avaliação da produção de citocinas e quimiocinas na Tuberculose, antes e após o tratamento quimioterápico, através da técnica de Citometria ("Cytometric Bead Array")

-Introdução: Um terço da população mundial está infectada com o Mycobacterium tuberculosis. A vacinação dos indivíduos com a cepa vacinal de M. bovis (BCG) e os métodos diagnósticos utilizados, em especial o teste cutâneo com o derivado protéico purificado do M. tuberculosis (PPD), apesar de auxiliarem no controle da doença, apresentam certas limitações. A proteção da vacina BCG pode oscilar entre 0 a 80%, e o teste cutâneo do PPD pode resultar em diagnóstico falso-positivo. Desta forma, tornam-se necessários estudos sobre novos antígenos do M. tuberculosis para tornar mais eficaz a vacinação e o diagnóstico precoce da tuberculose. Objetivo: O presente trabalho teve como objetivo o estudo da produção de citocinas e quimiocinas durante a tuberculose pulmonar, frente a estímulos de antígenos do M. tuberculosis (ESAT-6/CFP-10 e 16kDa). Métodos: Através da técnica de citometria foram avaliadas a produção das citocinas: IFN-gama, TNF-alfa, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10; e das quimiocinas: MIG, IP-10, IL-8, RANTES, MCP-1 no sobrenadante de cultura de células mononucleares do sangue periférico de pacientes com TB ativa (TBA;n=10) e após tratamento quimioterápico (TBT;n=10) em resposta a antígenos do M. tuberculosis (ESAT-6/CFP-10 e 16kDa). Indivíduos controle sadios (CS;n=13) e aqueles que tiveram contato com TB (CT;n=5) também foram estudados.Resultados: Foram detectados alta produção de IFN-gama, TNF-alfa, IL-2 e IL-6, assim como altos níveis de MIG, IP-10, IL-8 e RANTES em culturas estimuladas com ESAT-6/CFP-10 nos grupos TBA e CT em comparação com CS e TBT (pConclusão: Estes resultados sugerem que as citocinas e quimiocinas produzidas em resposta à proteína ESAT-6/CFP-10 têm potencial valor diagnóstico e pode contribuir pra resposta protetora na TB. O antígeno 16kDa mostrou-se um forte estimulador para produção de IL-10 e MCP-1 e pode participar do mecanismo regulatório induzido pela micobacteria, que favorece a persistência do bacilo no hospedeiro

Avaliação da apoptose de macrófagos alveolares em camundongos Balb/c infectados com cepas de Mycobacterium bovis de diferentes virulências

-O Mycobacterium bovis é um membro do complexo Mycobacterium tuberculosis, um grupo de microorganismos com a capacidade de causar tuberculose em humanos. A característica marcante das micobactérias patogênicas é a sua habilidade para sobreviver e replicar dentro do fagossomo do macrófago. A apoptose dos macrófagos infectados pode ser uma alternativa de defesa do hospedeiro, capaz de eliminar o ambiente de suporte para o crescimento da micobactéria. No presente trabalho investigamos, in vivo, a influência da virulência e da carga bacteriana na ocorrência da apoptose de macrófagos durante a fase inicial da infecção pulmonar experimental por M. bovis. Camundongos BALB/c foram infectados intratraquealmente com alta ou baixa carga das cepas virulenta (ATCC 19274) e atenuada (BCG Moreau) de M. bovis. Após 3 e 7 dias de infecção, avaliamos a freqüência da apoptose dos macrófagos pulmonares e sua correlação com o crescimento da micobacteria e com os níveis in situ das citocinas TNF-alfa, IL-10 e IL-12 e da proteína anti-apoptótica Bcl-2. Foi observado um aumento da apoptose de macrófagos após a infecção com ambas as cepas. Entretanto, a cepa virulenta induziu menos apoptose do que a cepa atenuada, sendo que, no 3o dia houve redução da apoptose na infecção com alta carga, enquanto que no 7o dia uma maior inibição ocorreu em baixa carga. Essa inibição da apoptose, promovida pela cepa virulenta, foi associada com o aumento da produção de IL-10, redução da produção de TNF-alfa e aumento da expressão de Bcl-2. Observamos ainda uma menor produção de IL-12 nos pontos de menor apoptose dos macrófagos o que reforça a hipótese de que a apoptose das células infectadas contribui para o desenvolvimento de imunidade específica contra o patógeno. Em conjunto esses dados sugerem que a cepa virulenta de M. bovis é capaz de modular a apoptose em um modo carga-dependente de acordo com suas necessidades de crescimento intracelular e disseminação para células adjacentes

Avaliação da resposta TH1/TH2 em camundongos co-infectados com Mycobacterium bovis-BCG e Strongyloides venezuelensis

-Introdução e objetivos: A co-existência de Mycobacterium tuberculosis, que induz resposta do tipo Th1, e helmintos, de perfil Th2, no hospedeiro, é uma importante co-endemia em muitas regiões do mundo. A ativação e diferenciação de células imunológicas em resposta a estes patógenos dependem da atuação de diferentes citocinas, tais como IFN-gama (Th1) e IL-4, IL-5 e IL-13 (Th2). Neste estudo avaliamos o número de ovos e vermes intestinais e o perfil de citocinas no intestino de animais co-infectados com Strongyloides venezuelensis (Sv) e M. bovis (Mb) em camundongos BALB/c. Metodologia e resultados: Foram estudados quatro grupos de camundongos: controle não infectado (CT); infectados somente com S. venezuelensis (SV); infectados somente com M. bovis (MB) e co-infectados (COIN). Os animais foram infectados por via subcutânea com 700 larvas L3 de Sv e, após 3 dias, infectados por via intravenosa com 1 x 10(6) células de Mb virulento (ATCC 19274). O número de ovos nas fezes foi contado 7 e 10 dias após a infecção por Sv, assim como o número de vermes no intestino. Ainda, 7 e 10 dias após a infecção com Sv, os intestinos dos animais foram coletados e macerados. Dos sobrenadantes obtidos foram avaliados os níveis das citocinas IL-4, IL-5 e IL-13 por ELISA. Os resultados mostraram aumento do número de ovos e vermes nos animais co-infectados quando comparados com animais do grupo SV, assim como, observou-se a diminuição dos níveis de IL-4, IL-5 e IL-13 em animais do grupo COIN. Conclusão: Os resultados demonstraram que o perfil de resposta imunológica durante a infecção por Strongyloides venezuelensis parece ser diretamente influenciada pela presença do Mycobacterium bovis, uma vez que o perfil de resposta Th2, específica ao verme, esteve diminuída nos animais co-infectados

Influence of the spleen, asplenism and autologous splenic implants on lipid metabolism in mice

BACKGROUND: This work evaluated the influence of the spleen and splenic remnants on lipid metabolism, by evaluating the impact of splenectomy on the lipidogram of mice and by studying the effect of autogenous spleen tissue implanted in different sites. METHODS: 70 BALB/c mice were divided into seven groups of 10 animals: normal control group, with no diet or surgery; fat control group, without surgery; surgical procedure sham group; total splenectomy group and three groups with implants in different sites: greater omentum, retroperitonium and abdominal subcutaneous tissue. The animals, except the normal control group, received food with 1.25% cholesterol. The surgical procedure was carried out 30 days after the beginning of the food administration. Two months after the operations, serum triglycerides, cholesterol and glycemia were studied. Histological assessments of the spleen or implants and the liver were carried out. RESULTS: The enriched food increased the plasmatic levels of total cholesterol, HDL, and mainly LDL of the mice (p<0.05). No significant difference was found in the lipidograms of the animals of the control groups when compared with the splenectomized ones, as well as in the animals submitted to the autogenous splenic tissue transplantation. The preservation of the splenic histological architecture was similar on the three implantation sites. All the animals receiving enriched food presented liver steatosis. CONCLUSION: The spleen, splenectomy and splenic implants do not influence lipidogram in BALB/c mice.OBJETIVO: Estudar a influência do baço, da asplenia e do implante esplênico autógeno no metabolismo lipídico, por meio da avaliação do lipidograma sérico de camundongos e da verificação do efeito do transplante autógeno de baço em diferentes locais do abdome. MÉTODO: Foram utilizados camundongos BALB/c distribuídos em sete grupos de 10 animais: controle normal (CN); controle obeso (CO); operação simulada (OS); esplenectomia total (ET); três grupos submetidos ao transplante autógeno do baço: omento maior (OM), retroperitônio (RP), tecido subcutâneo da parede abdominal (PA). Os animais, com exceção do grupo CN, foram submetidos a dieta com 1,25% de colesterol. A intervenção cirúrgica foi realizada 30 dias após o início da dieta. A coleta de sangue ocorreu no 60º dia pós-operatório. Foram dosados os níveis de triglicérides, de colesterol total e de suas frações, bem como a glicemia. O baço, os implantes esplênicos e o fígado foram submetidos a estudo histológico. RESULTADOS: A dieta aumentou os níveis plasmáticos de colesterol total, HDL e LDL dos camundongos (p < 0,05 versus CN). Entre os animais em uso da dieta, não houve diferença no lipidograma dos grupos controles (CO e OS) quando comparados ao grupo esplenectomizado (ET), assim como em relação aos animais submetidos ao transplante autógeno do baço (OM, RP, PA). A capacidade de preservação da arquitetura histológica esplênica foi semelhante nos três locais de implante. Todos os animais que utilizaram a dieta enriquecida apresentaram esteatose hepática. CONCLUSÃO: De acordo com os resultados obtidos o baço não parece participar da regulação dos níveis de lipídeos plasmáticos em camundongos BALB/c

Inter e intra-variability of the best ranked teams : a network analysis in male high-level volleyball

The present research objective was to analyze the offensive phase from Complex I in highlevel male volleyball teams in a macro- and micro-level view, through the inter e intra-team variability analysis of eight best teams of the 2018 Men’s Volleyball World Championship over the social network analysis and eigenvector centrality. The sample consisted of 22 matches and 2,743 offensive actions, resulting in 8 sub-networks with 368 nodes and 6221 edges. The results showed from macro view the variables that presented highest centrality values were Attack Zone 4 (range 0.56–0.90), Attack Tempo 2 (0.65–0.87), Power Attack (0.62–0.94), No Touch Block (0.61–1), Attack Effect Continuity (0.59–0.94), and Middle Blocker Centralized (0.60–0.95). In a micro view, Reception Effect, Play Position, Reception Zone, and Block Composition showed high variability in each sub-network. The intra- and inter-team variability presented the importance of to respect each team idiosyncrasies and to consider the different approaches to the game and success

Assessment of the use of hydroxychloroquine on knees' osteoarthritis treatment

OBJECTIVE: To assess the effectiveness of hydroxychloroquine (HCQ) on knee osteoarthritis (OA). METHODS: Two groups of patients with OA diagnosis have been assessed in a controlled, randomic, double-blind study, the first group consisted of 16 patients who received the therapeutics with HCQ, with the dosage of 400 milligrams per day during four months and the other one consisted of 13 patients who received the placebo during the same period of time. Both groups were assessed using the Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index (WOMAC), Lequèsne Algofunctional Index and the Visual Analogue Scale (VAS). RESULTS: There was not any difference between the groups on the WOMAC subscales in relation to the pain (p=0,551), stiffness (p=0.512) and function (p=0.293). On the VAS and Lequèsne scale, there was not any difference statistically significant with p=0.461 and p=0.803 respectively. CONCLUSION: Although both groups have presented improvement, there was not superiority on the knees' OA treatment in the group which underwent HCQ use in relation to the placebo group in this study.OBJETIVO: Avaliar o efeito da hidroxicloroquina (HCQ) no tratamento da osteoartrite (OA) sintomática de joelhos. MÉTODOS: Dois grupos de pacientes com diagnóstico de OA sintomática de joelhos foram avaliados em estudo randomizado, controlado por placebo e duplo-cego, o primeiro constituído de 16 pacientes submetidos à terapêutica com HCQ, na dosagem de 400 mg/dia, durante quatro meses e o outro grupo constituído de 13 pacientes recebeu placebo por igual período. Ambos os grupos foram avaliados utilizando o Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index (WOMAC), o índice algofuncional de Lequesne e a escala visual analógica (EVA). RESULTADOS: Não houve diferença entre os grupos nas subescalas do WOMAC em relação à dor (Wdor), p = 0,551, rigidez (Wrig), p = 0,512, e função (Wfunção), p = 0,293. Nas escalas EVA e Lequesne também não houve diferença estatisticamente significante com p = 0,461 e p = 0,803, respectivamente. CONCLUSÃO: Embora os dois grupos tenham apresentado melhora, não houve superioridade no tratamento da OA de joelhos no grupo submetido ao uso de HCQ em relação ao grupo placebo neste estudo

a study from ecological theory and social network analysis perspective

The objective of the present study was to analyze and compare the setter's decision-making (DM) in the offensive construction of the side-out (attack from the reception) in high-level men's volleyball. The sample consisted of the analysis of 132 games of the Brazilian men's volleyball Super-League 2021/2022, with 22 games for each team. The results showed that the eigenvector values were higher for setting to position 3, central attacker next to the setter, simple block, and obtaining the attack point. In addition, the setter's DM was similar between teams, suggesting that the game strategies aim to provide subsidies for the setter to make the decisions according to the game context in a flexible way and generate benefits for the attackers about the number of blockers, being that under ideal conditions and due to the lifter's correct choices in distribution, central blockers avoid anticipating the setting, and this fact allows the conditions of a single block or double-broken blocks in most cases. As a practical application, setting for the central attacker in position 3 becomes an interesting option for point acquisition and is capable of influencing the number of blockers, as well as the optimal blocking condition. Another application would be for the central attacker to position themselves close to the setter, a strategy that would enable the use of the "pipe" attack in other areas of the court with lower defensive blocking power.9E1A-F9DD-3EB8 | Filipe Manuel ClementeN/