Caractérisation phénotypique et génotypique de la néphropathie liée aux mutations du facteur de transcription HNF-1Beta : rôle d'HNF-1Beta dans l'insuffisance rénale aiguë expérimentale

Le gène HNF1B code pour le facteur de transcription HNF-1bêta (hepatocyte nuclear factor-1bêta). Chez l'homme, les mutations d'HNF1B sont associées à une maladie à transmission autosomique dominante touchant à des degrés divers le rein, le pancréas, le foie et l'appareil génital. Dans le rein, HNF-1bêta régule la néphrogenèse précoce et tardive, la tubulogenèse, la polarisation planaire des cellules tubulaires (division orientée dans l'espace) et plus tardivement l'homéostasie des cellules tubulaires. Les objectifs de ce travail de thèse étaient de trois ordres : mieux caractériser le phénotype associé aux mutations d'HNF1B en particulier à l'âge adulte (partie clinique), mieux définir le génotype des patients HNF1B (partie génétique) et caractériser le rôle d'HNF-1bêta au cours de la régénération suivant une agression épithéliale aiguë (partie fondamentale). (1) Caractérisation phénotypique. Outre la publication de deux phénotypes originaux (atrésie de l'œsophage - anomalies rénales ; néphropathie kystique mimant une polykystose autosomique dominante), nous avons pu colliger les données d'une cohorte de 27 patients adultes porteurs d'une mutation d'HNF1B et rapporter les faits suivants : à l'âge adulte, la néphropathie est de type tubulo-interstitielle chronique et associe fréquemment une hypomagnésémie et une hypokaliémie. Nous avons également pu réaliser une analyse génotype-phénotype précise d'une large cohorte d'individus mutés (majoritairement d'âge pédiatrique). (2) Caractérisation Génétique. En plus de participer à une étude de corrélation génotype - phénotype, nous avons entrepris de mieux définir la population pouvant bénéficier d'une exploration du gène HNF1B. L'étude d'une large cohorte de 433 patients testés dans le laboratoire de Génétique du CHU de Toulouse nous a permis de définir un score prédictif de mutation d'HNF1B utile à la fois aux cliniciens et aux généticiens. (3) Caractérisation du rôle d'HNF-1bêta chez l'homme et en pathologie. Dans un premier temps, le rôle d' HNF-1bêta dans le rein humain post-natal a été appréhendé par l'analyse de l'expression de ses gènes cibles dans le sédiment urinaire de patients HNF1B (succédané du tissu rénal habituellement non disponible dans cette pathologie) et de leurs apparentés au 1er degré indemnes de la mutation. Nous avons pu confirmer par cette approche indirecte les données parcellaires disponibles chez la souris : l'expression des cystogènes cibles d'HNF-1bêta après la phase du développement rénal n'est pas différente de celle des patients témoins. Dans un second temps, nous avons tenté d'appréhender le rôle d'HNF-1bêta au cours des phases de régénération épithéliale suivant une agression rénale aiguë. L'étude d'un modèle murin de choc hémorragique contrôlé nous a permis de définir la cinétique d'expression d'HNF-1bêta et de la rapporter à celle de ses cibles géniques, dont SOCS3, acteur clé de la réparation de l'épithélium rénal et de la réponse épithéliale aux stimuli extra-cellulaires (IL-6, HGF, EGF...). In vitro, l'impact de l'hypoxie et du facteur induit par l'hypoxie Hif-1a sur l'expression d'HNF-1bêta a également pu être détaillée. L'expression d'HNF-1bêta n'étant pas limitée au rein, nous faisons l'hypothèse que ce facteur pourrait également être impliqué dans la régénération d'autres épithélia, comme le foie ou le tube digestif. Enfin, afin de mieux caractériser l'impact d'une agression épithéliale sur l'expression d'HNF-1bêta et en déduire les mécanismes moléculaires de sa régulation, nous détaillons actuellement l'impact d'un choc endotoxinique (injection de lipopolysaccharide) sur l'expression d'HNF-1bêta et de ses gènes cibles dans les différents organes sus-cités. L'étude in vitro de cellules rénales soumises au même stress nous a également permis de définir une nouvelle voie de régulation d'HNF-1bêta. En résumé, ce travail aborde un ensemble de problématiques attenant au facteur de transcription HNF-1bêta (manifestions phénotypiques et génotypiques de ses mutations, caractérisation du rôle d'HNF-1bêta en situation d'agression épithéliale aiguë). Par extension, la caractérisation du rôle d'HNF-1bêta dans la réparation épithéliale et de ses modes de régulation pourrait ouvrir un nouveau champ de recherche sur son éventuelle capacité à prévenir la dédifférenciation tubulaire, prémisse à l'apparition d'une fibrose rénale.The HNF1B gene encodes for the HNF-1beta transcription factor (hepatocyte nuclear factor-1beta). In human, HNF1B-related disease is a highly heterogeneous dominantly inherited multi-organ disease, which encompasses renal, pancreas, liver and genital tract abnormalities. In the kidney, HNF-1beta controls all the steps of the nephrogenesis (tubulogenesis, planar cell polarity (oriented mitotic division) and tubular segment specification and maintenance. Aims of this thesis were to better detail the phenotype associated with HNF1B mutations (clinical part), to better define the genotype of the HNF1B patients (genetic part) and to assess the role of HNF-1beta in acute kidney injury (scientific part). 1. Clinical part. First, we reported two atypical presentations of HNF1B mutation (cystic kidney disease mimicking an autosomal polycystic kidney disease ; esophageal atresia and urinary tract/renal abnormalities). We also reported the clinical charts of 27 adult patients with HNF1B mutation and highlighted the following data : in adult patients, HNF1B nephropathy has the characteristics of a chronic tubulo-interstitial nephritis with frequent hypomagnesemia and hypokaliemia. Last, we could perform a genotype-phenotype analysis in a large cohort of HNF1B individuals (mostly lower than 18 years of age). 2. Genetic part. In addition to the genotype-phenotype correlation study, we tried to better define the individuals that could beneficiate from HNF1B analysis. Studying a large cohort of 433 patients tested in the Genetic department of the University hospital of Toulouse, we could establish a predictive score of HNF1B mutation in order to help both clinicians and geneticist. 3. Scientific part. First, role of HNF-1 beta in post-natal human kidney was assessed by studying the expression of its target genes in the urinary cells pellets of HNF1B patients and their first-degree relatives free of mutation. With this indirect approach, we could confirm preliminary data observed in mouse models : in post-natal kidney, expression of HNF-1 beta target cystogenes was similar in individuals with and without HNF1B mutation. Then, we aimed at better delineate the role of HNF-1beta in acute kidney injury. Studying a mouse model of hemorrhagic shock, we could characterize the kinetic of HNF-1beta expression in injured kidney and to correlate it to the expression of its target genes, like Socs3, a key actor of epithelial repair which control an adaptative response of the epithelium to extra-cellular signals (IL-6, EGF, HGF...). In vitro, respective roles of the hypoxia-inducible factor HIF-1a and hypoxia per se were detailed. Given the expression of HNF-1beta in many epithelial cells, we hypothesized that this transcription factor may also be involved in the reparation of other organ (liver, gut...). Last, in order to better decipher the consequences of an epithelial injury on HNF-1beta expression, experiments in a mouse model of endotoxinic shock (lipopolysaccharide infusion) are currently on going. In summary, this work aimed at better delineate the genotype and phenotype of HNF1B mutations and decipher the role of this transcription factor in acute (ischemic and septic) kidney injury. Characterization of the role of HNF-1beta in epithelial repair and identification of its regulatory factors could open a new field of research : may HNF-1beta prevent epithelial dedifferentiation, a well-known trigger of renal fibrosis

Extracorporeal Membrane Oxygenation for Severe Acute Respiratory Distress Syndrome associated with COVID-19: An Emulated Target Trial Analysis.

RATIONALE: Whether COVID patients may benefit from extracorporeal membrane oxygenation (ECMO) compared with conventional invasive mechanical ventilation (IMV) remains unknown. OBJECTIVES: To estimate the effect of ECMO on 90-Day mortality vs IMV only Methods: Among 4,244 critically ill adult patients with COVID-19 included in a multicenter cohort study, we emulated a target trial comparing the treatment strategies of initiating ECMO vs. no ECMO within 7 days of IMV in patients with severe acute respiratory distress syndrome (PaO2/FiO2 <80 or PaCO2 ≥60 mmHg). We controlled for confounding using a multivariable Cox model based on predefined variables. MAIN RESULTS: 1,235 patients met the full eligibility criteria for the emulated trial, among whom 164 patients initiated ECMO. The ECMO strategy had a higher survival probability at Day-7 from the onset of eligibility criteria (87% vs 83%, risk difference: 4%, 95% CI 0;9%) which decreased during follow-up (survival at Day-90: 63% vs 65%, risk difference: -2%, 95% CI -10;5%). However, ECMO was associated with higher survival when performed in high-volume ECMO centers or in regions where a specific ECMO network organization was set up to handle high demand, and when initiated within the first 4 days of MV and in profoundly hypoxemic patients. CONCLUSIONS: In an emulated trial based on a nationwide COVID-19 cohort, we found differential survival over time of an ECMO compared with a no-ECMO strategy. However, ECMO was consistently associated with better outcomes when performed in high-volume centers and in regions with ECMO capacities specifically organized to handle high demand. This article is open access and distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial No Derivatives License 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)

Caractérisation phénotypique et génotypique de la néphropathie liée aux mutations du facteur de transcription TCF2/HNF-1

L'identification d'une mutation de TCF2/HNF-1 est peu aisée chez l'adulte : grande variabilité phénotypique, fréquence des néo-mutations (30-50%) et existence de formes frustres. L'atteinte rénale est la conséquence la plus fréquente : chez l'adulte, les reins sont le plus souvent de taille diminuée avec un contingent kystique modéré ou absent - contrairement à la présentation anténatale ou infantile - et l'insuffisance rénale progresse lentement. Dans ce travail princeps colligeant le phénotype de 30 adultes mutés, nous rapportons une atteinte tubulaire associant hypomagnésémie et hypokaliémie par fuite urinaire de ces deux ions, chez respectivement 62% et 38% des patients testés. Pour diagnostiquer la maladie, le néphrologue d'adultes peut désormais s'aider 1) de l'histoire familiale (diabète de type MODY, malformations génitales ou anomalies des tests hépatiques), compatible avec une transmission autosomique dominante et/ou 2) du dépistage des troubles ioniques.TOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocSudocFranceF

Utilisation du Rituximab dans le syndrome néphrotique à lésions glomérulaires minimes de l'adulte

TOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocSudocFranceF

Bortezomib plus dexamethasone for rituximab-resistant PLA2R+ membranous nephropathy

International audienc

IL6-R blocking with tocilizumab in critically ill patients with hemophagocytic syndrome

International audienc

Value of Urine Peptides in Assessing Kidney and Cardiovascular Disease

International audienceUrinary peptides gained significant attention as potential biomarkers especially in the context of kidney and cardiovascular disease. In this manuscript the recent literature since 2015 on urinary peptide investigation in human kidney and cardiovascular disease is reviewed. The technology most commonly used in this context is capillary electrophoresis coupled mass spectrometry, in part owed to the large database available and the well-defined dataspace. Several studies based on over 1000 subjects were reported in the recent past, especially examining CKD273, a classifier for assessment of chronic kidney disease based on 273 urine peptides. Interestingly, the most abundant urinary peptides are generally collagen fragments, which may have gone undetected for some time as they are typically modified via proline hydroxylation. The data available suggest that urinary peptides specifically depict inflammation and fibrosis, and may serve as a non-invasive tool to assess fibrosis, which appears to be a key driver in kidney and cardiovascular disease. The recent successful completion of the first urinary peptide guided intervention trial, PRIORITY, is expected to further spur clinical application of urinary peptidomics, aiming especially at early detection of chronic diseases, prediction of progression and prognosis of drug response. This article is protected by copyright. All rights reserved

Tocilizumab for Hemophagocytic Syndrome in a Kidney Transplant Recipient With COVID-19

International audienceBackground:A subset of patients with coronavirus dis-ease 2019 (COVID-19) will develop acute respiratory distresssyndrome and require mechanical ventilation. Studies sug-gest that many patients with COVID-19 and acute respiratorydistress syndrome experience a cytokine storm characterizedby fever; hyperferritinemia; and a massive release of inflam-matory cytokines, including interleukin-6, tumor necrosisfactor-, and monocyte chemoattractant proteins (1). Thesefindings led to the hypothesis that biological agents targetingspecific cytokine or inflammatory pathways may improve therespiratory outcomes of patients with the most severe formsof COVID-19 (2

Anti-SARS-CoV-2 Monoclonal Antibodies in Solid-organ Transplant Patients

International audienceSolid-organ transplant (SOT) patients are at high risk of developing severe coronavirus disease-19 (COVID-19). Neutralizing monoclonal antibodies that bind to severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) spike protein prevent viral attachment to ACE2 receptor. When administered to immunocompetent patients in the early phase of infection, they reduce the risk of hospitalization and improved symptoms resolution. Similar data were reported in a real-life study that included 69 immunosuppressed patients. However, the proportion of SOT patients and their specific outcome were not reported. Dhand et al reported encouraging results in SOT patients given bamlanivimab monotherapy or casirivimab/imdevimab without a control group