Exploring the potential of newly-identified miRNA-encoded peptides to improve the production of bioactive secondary metabolites in grape cells

Dissertação de mestrado em Biologia Molecular, Biotecnologia e Bioempreendedorismo em PlantasThe global quality and characteristics of grape berries, and ultimately of wine, are influenced by their polyphenolic composition. Therefore, potential strategies to improve berry quality by targeting secondary metabolism pathways of phenolic compound synthesis are useful, particularly in an ongoing context of climate change. These pathways are modulated by several molecular mechanisms, including regulation of gene transcription by specific transcription factors and post-transcriptional regulation by microRNAs. Recently, it was discovered that the primary (non-mature) miRNAs transcripts (pri-miRNAs) could encode for small regulatory peptides (micropeptides – miPEPs). In a positive loop, these miRNA-encoded peptides enhance the transcription and accumulation of their corresponding pri-miRNAs and, consequently, of their mature miRNAs, subsequently leading to an accentuated negative regulation of miRNA-regulated target genes. The objective of this work was to explore this recent discovery and to experiment the exogenous application of a micropeptide (miPEP396a) that putatively promotes the inhibition of the transcription factor VvMYB5b, an activator of the expression of several genes involved in the flavonoid pathway. Designated in this study as miPEP-MYB5b, this micropeptide may serve as a fine-tuning tool for modulation of secondary metabolic pathways in grape berry cells and, consequently, improve their global quality-traits. MiPEP-MYB5b was identified in silico and exogenously added to a Gamay Freaux grape berry cells in two different concentrations (0.1 μM and 0.5 μM). Its effect in the concentration of secondary metabolites such as anthocyanins, total flavonoids, total phenolics and stilbenes as well as in the transcription of key genes involved in biosynthetic routes that produce secondary metabolites with bioactive properties and important for grape berry quality, particularly in flavonoid- and stilbene-synthesizing pathways was analyzed. Both concentrations of miPEP-MYB5b resulted in downregulation of key genes involved in the flavonoid pathway, such as VvLAR1, VvLAR2, and VvCHI, while 0.5 μM resulted in downregulation of flavonoid-related genes VvANR, VvFLS1, VvCHS1. A parallel stimulation of the expression of the stilbene-synthesizing gene VvSTS1 was also observed in miPEP-treated cells. This upregulation of the stilbene pathway was probably due to a miPEP-MYB5b-mediated inhibition of MYB5b and, thus, of the flavonoid pathway, that competes directly with the stilbene pathway for substrate. Concordantly with the inhibition of the flavonoid pathway and stimulation of the stilbene pathway, a higher stilbene content and lower concentration of flavonoids (including anthocyanins) were quantified in grape berry cells. Thus, miPEP-MYB5b exogenous application may be a promising strategy to modulate secondary metabolic pathways in order to produce and accumulate higher quantity of stilbenes in grape berry cells in a near future, by exploring mechanisms of microRNA-mediated gene regulation in plants.A qualidade e características globais dos bagos de uva e do vinho são influenciadas pela composição em polifenólicos. Por isso, estratégias que melhorem a qualidade dos bagos tendo como alvo as vias do metabolismo secundário que sintetizem compostos fenólicos são úteis, particularmente, no contexto atual das alterações climáticas. Estas vias são moduladas por vários mecanismos moleculares, incluindo a regulação da transcrição de genes através de fatores de transcrição específicos e regulação pós-transcricional através de microRNAs. Recentemente, descobriu-se que os transcritos primários (não-maduros) dos miRNAs codificam pequenos péptidos reguladores (micropéptidos- miPEPs). Num “loop” positivo, estes micropéptidos aumentam a transcrição e a acumulação do pri-miRNA e miRNA correspondentes e, posteriormente, levam a uma regulação negativa dos genes alvo de uma forma mais acentuada. O objetivo deste trabalho consistiu em explorar esta recente descoberta e experimentar a aplicação exógena de um micropéptido (miPEP396a) que, putativamente, promove a inibição do fator de transcrição VvMYB5b, um ativador da expressão de vários genes envolvidos na via dos flavonoides. Designado por miPEP-MYB5b neste estudo, este micropéptido poderá permitir a manipulação das vias do metabolismo secundário nas células dos bagos e, consequentemente, melhorar a sua qualidade global. O miPEP-MYB5b foi identificado in silico e depois adicionado a uma cultura celular de bagos da variedade Gamay Freaux, em duas concentrações diferentes (0,1 μM e 0,5 μM), sendo analisado o seu efeito na concentração de metabolitos secundários como antocianinas, flavonoides totais, fenólicos totais e stilbenos, bem como na transcrição de genes-chaves envolvidos nas vias metabólicas que produzem estes compostos secundários com propriedades bioativas e de grande importância para a qualidade dos bagos, particularmente nas vidas de síntese de flavonoides e stilbenos. Ambas as concentrações de micropéptido levaram à regulação negativa dos genes VvLAR1, VvLAR2 e VvCHI, enquanto a 0,5 μM provocaram uma regulação negativa de genes relacionados com a via dos flavonoides, como VvANR, VvFLS1 e VvCHS1. Foi também observada uma estimulação da expressão do gene VvSTS1, responsável pela síntese de stilbenos, em células tratadas com o micropéptido. Esta regulação positiva da via dos stilbenos ocorreu, provavelmente, devido a uma inibição do MYB5b mediada pelo micropéptido que, em consequência, inibiu a via dos flavonoides, que compete por substrato diretamente com a via dos stilbenos. Para além da inibição da via dos flavonoides e estimulação da via dos stilbenos, detetaram-se maiores quantidades de stilbenos e menor concentração de flavonoides (incluindo antocianinas) em células de bagos de uva. Desta forma, a aplicação exógena do miPEP-MYB5b poderá ser uma estratégia promissora para modular as vias do metabolismo secundário para produzir e acumular mais stilbenos em células dos bagos de uva, explorando os mecanismos de regulação genética mediados por miRNAs em plantas.The work was supported by National Funds by FCT - Portuguese Foundation for Science and Technology, under the strategic programmes UID/AGR/04033/2019 and UID/BIA/04050/2019. The work was also supported by FCT and European Funds (FEDER/POCI/COMPETE2020) through the research project “MitiVineDrought - Combining "omics" with molecular, biochemical and physiological analyses as an integrated effort to validate novel and easy-to-implement drought mitigation strategies in grapevine while reducing water use” with the ref. PTDC/BIA-FBT/30341/2017 and ref. POCI-01-0145-FEDER-030341, respectively; through the research project “BerryPlastid - Biosynthesis of secondary compounds in the grape berry: unlocking the role of the plastid” with the ref. POCI-01-0145-FEDER-028165 and ref. PTDC/BIA-FBT/28165/2017, respectively; and also through the FCT-funded research project “GrapeInfectomics” (PTDC/ASP-HOR/28485/2017). This work was also supported by the project “INTERACT - VitalityWine - ref. NORTE-01-0145-FEDER-000017 – (through FEDER/COMPETE and NORTE2020/CCDR-N). Artur Conde was supported with a post-doctoral fellow of the mentioned INTERACT/VitalityWine project with the ref. BPD/UTAD/INTERACT/VW/218/2016, and also supported by a post-doctoral researcher contract/position within the project “MitiVineDrought” (PTDC/BIA-FBT/30341/2017 and POCI-01-0145-FEDER-030341). This work also benefited from the networking activities within the European Union-funded COST Action CA17111 – “INTEGRAPE - Data Integration to maximize the power of omics for grapevine improvement”

The required competencies for a consultant to deal with a situation of crisis (the COVID-19 pandemic) while working from home

The purpose of this thesis is to discover which were the required competencies for a consultant to deal with a situation of crisis (COVID-19 pandemic) while working from home. The goal is to understand i) if the consultants were indeed prepared to work from home, due to the short notice of the companies and the government, ii) which were the most important competencies that enabled the consultants to deal better with the situation and iii) the real impact of working from home during the pandemic and the quarantine period. To empirically investigate the above question a qualitative research approach will be used and in order to collect empirical evidence, a total of 18 qualitative interviews have been conducted with consultants from different business areas that worked from home during the pandemic. The results will thereafter be compared to the theoretical framework by utilizing an inductive and deductive approach, in order to, find patterns or relevant information that lead to conclusions. The results suggest that the most relevant competences in the context of working from home during a crisis are: i) interpersonal communication, ii) anxiety and stress management, iii) manage time and iv) e-leadership. These competencies will cause a greater impact on the consultants’ performance, well-being at work and ability to work from home, if adequate training is provided by the companies. Working from home provides in the majority of the cases a better work-life balance, however, this depends on the individual’s personal situation, personality and competencies acquired.O objetivo desta tese é descobrir quais são as competências necessárias para um consultor lidar com uma situação de crise (pandemia COVID-19) enquanto trabalha em casa. O objetivo é perceber i) se os consultores estavam preparados para trabalhar em casa, devido ao aviso de curto prazo das empresas e do governo, ii) quais foram as competências mais importantes que permitiram aos consultores lidar melhor com a situação e iii ) o impacto de trabalhar em casa durante a pandemia e o período de quarentena. Para investigar empiricamente a questão acima, uma abordagem de pesquisa qualitativa será usada e, a fim de recolher evidências empíricas, um total de 18 entrevistas qualitativas foram conduzidas com consultores de diferentes áreas de negócio que trabalharam em casa durante a crise. Os resultados serão posteriormente comparados com o enquadramento teórico, utilizando uma abordagem indutiva e dedutiva, a fim de encontrar padrões ou informações relevantes que levem a conclusões. Os resultados sugerem que as competências mais relevantes, no contexto do trabalho a partir de casa, durante uma crise são: i) comunicação interpessoal, ii) gestão da ansiedade e do stress, iii) gestão do tempo e iv) e-Leadership. Estas competências são as que irão causar um maior impacto no desempenho dos consultores, no bem-estar no trabalho e na capacidade para trabalhar em casa, se as empresas oferecerem formação adequada. Trabalhar em casa proporciona, na maioria dos casos, um melhor equilíbrio entre trabalho e vida pessoal, mas esta gestão depende da situação pessoal do indivíduo, da personalidade e das competências adquiridas

Alternativa alimentar saudável para crianças em idade escolar

Anais do 35º Seminário de Extensão Universitária da Região Sul - Área temática: SaúdeA presente ação extensionista teve o objetivo de promover um consumo de alimentos mais saudáveis para crianças em fase escolar. Para isso, foram elaborados alfajores com adição de diferentes teores de farinha da polpa de jabuticaba (FJ) para avaliar sua aceitabilidade sensorial. Foram desenvolvidas as seguintes formulações de alfajores: F1: padrão (0% de FJ) e as demais adicionadas de 20% (F2), 34% (F3), 48% (F4) e 62% (F5) de FJ. Participaram da avaliação sensorial 65 provadores não treinados, de ambos os gêneros, com idade entre 7 e 10 anos. Para os atributos de aparência, aroma e cor não houve diferença significativa (p>0,05) entre as formulações. Já para o sabor foram observadas maiores notas em F1, F2 e F3 (p<0,05), em relação à F4 e F5. Maiores notas para F1 e F2, comparadas à F4 e F5 e para F1, F2 e F3 em relação à F4 e F5 foram verificadas para a textura. Na avaliação da aceitação global e da intenção de compra, houve maior aceitabilidade (p<0,05) para F1 em relação à F4 e F5 e para F2 e F3 comparadas à F5. Conclui-se que um nível de adição de até 34% de FJ em alfajores foi bem aceito pelos consumidores infantis, obtendo-se aceitação sensorial semelhante ao produto padrão e com boas expectativas de comercializaçã

FUNDAMENTOS DO SERVIÇO SOCIAL E IMPLICAÇÕES PARA A DISPUTA NO ÂMBITO DA COMUNICAÇÃO

Anais do III Seminário Nacional Serviço Social, Trabalho e Política SocialO presente artigo tem como propósito apresentar estratégias de defesa dos direitos da classe trabalhadora a partir do posicionamento hegemônico do Serviço Social preconizado nos documentos que o regulamentam e os debates realizados na área. Trata-se de um estudo realizado através de revisão bibliográfica oriunda do projeto de tese em Serviço Social da PUCRS. Em síntese, a partir do acumulo da profissão na perspectiva do direcionamento éticopolítico, e da defesa dos direitos humanos e sociais, evidencia-se enquanto estratégica a inserção da categoria profissional no debate da comunicação e sua inserção nas diversas mídias

Compliance, trabalho e enfrentamento ao racismo: limites, possibilidades e desafios

Diante do cenário de profundas desigualdades característico da estrutura social brasileira, o presente estudo se propôs ao esboço de uma práxis transformadora amparada em uma perspectiva crítica direcionada ao mundo do trabalho. Dialogando com temas sensíveis, toma-se como problema de pesquisa a efetividade das métricas de Compliance situadas no ambiente empresarial brasileiro. Para tanto, parte-se para a análise do cordão umbilical que conecta passado e presente com vistas a construção de possíveis remediações para as problemáticas que resistiram à negação formal do escravismo colonial. Ao fim, reconhecendo-se os caminhos permeados pelas boas práticas como uma das vias trilháveis para a efetividade do conteúdo protetivo da norma trabalhista, constata-se as concepções de um mundo de fábulas, perversidades e possibilidades

Nas sombras, às margens : o Reprimido e o Outro no cinema brasileiro de horror contemporâneo

Este estudo propõe analisar como o cinema brasileiro de horror contemporâneo desenvolve a noção de Reprimido e do Outro. Investigando o corpus fílmico e sua relação com o contexto sociopolítico do Brasil na atualidade, a discussão será realizada a partir de quatro longas-metragens: O Animal Cordial (Gabriela Amaral Almeida, 2017), As Boas Maneiras (Juliana Rojas e Marco Dutra, 2017), Morto Não Fala (Dennison Ramalho, 2019) e Cabrito (Luciano de Azevedo, 2020). A escolha do objeto de pesquisa acompanha um momento de expansão da filmografia brasileira do gênero horror, compreendida neste trabalho de 2010 a 2020. Por isso, o objetivo geral desta pesquisa é discutir o cinema brasileiro que dialoga com convenções do horror, dentro do movimento contemporâneo deste gênero, e pensando em como estes filmes articulam-se com o contexto sociopolítico brasileiro da atualidade. A investigação sobre as potencialidades do Reprimido e do Outro como o Monstro será articulada à luz dos estudos de Robin Wood, que propõem uma ideia central aos filmes de horror: a normalidade é ameaçada por um Monstro. Nesta direção, os seguintes objetivos específicos foram formulados: 1) Mapear o cenário contemporâneo do cinema brasileiro de horror a fim de compreender suas características; 2) Analisar a constituição da figura do Monstro nas narrativas cinematográficas de horror contemporâneo, em particular nos filmes analisados; 3) Examinar os filmes que compõem o corpus com enfoque em como os personagens dialogam com o contexto sociopolítico do Brasil contemporâneo a partir da noção de Reprimido e Outro. Com isso, desenvolve-se uma análise sobre o corpus fílmico, buscando entender como seus protagonistas experienciam aspectos que são reprimidos e oprimidos nas condutas inerentes à vida em sociedade, e como as convenções do gênero horror surgem a partir da ameaça que as transgressões sociais tensionam na narrativa. O estudo possibilitou compreender que as noções de Reprimido e do Outro desenvolvem-se nas obras a partir da hibridação do gênero horror com aspectos culturais do Brasil, criando Monstros que expõem problemáticas tipicamente brasileiras. Considera-se que a origem descentralizada dos cineastas dedicados ao horror contemporâneo no País possibilita uma maior diversidade nestas obras e na criação de imagens e experiências comuns ao gênero horror.The aim of this work is to analyze and investigate how the Brazilian contemporary horror cinema developed the notions of Repressed and the Other. As from issues raised by film analysis and its relationship with the socio-political context of Brazil these days, the discussion will be held from four films: Friendly Beast (O Animal Cordial, Gabriela Amaral Almeida, 2017), Good Manners (As Boas Maneiras, Juliana Rojas e Marco Dutra, 2017), The Nightshifter (Morto Não Fala, Dennison Ramalho, 2019) and Cabrito (Cabrito, Luciano de Azevedo, 2020). This work is the result of Brazilian’s horror genre filmography expansion, perceived in this research from 2010 to 2020. Therefore, the main purpose of this work is to analyze how the Brazilian cinema articulates with horror conventions and within the contemporary movement of this genre, reflecting on the way in which these films communicate with the current Brazilian socio-political context. The examination of the potentialities of the Repressed and the Other as the monster narrative will be articulated based on the essays of Robin Wood (1979; 2003), who proposes a central idea to horror films: normality is threatened by a Monster. On this occasion, specific requirements were formulated: 1) To investigate the development of the contemporary movement of cinematographic horror, analysing possible specificities of its current cycle; 2) To analyse the constitution of the Monster figure in contemporary horror cinematographic narratives, particularly in the films studied; 3) Examine the films that create the inventory focusing on how the characters support Brazilian’s contemporary socio-political context from the notions of the Repressed and the Other. Based on this material, an analysis of the films initiated, seeking to understand how the protagonists experienced aspects that are repressed and oppressed in the inherent behaviour of society’s life, and how the conventions of the horror genre arise from the threat that social transgressions tension in the narrative. This work made it possible to understand that the notions of the Repressed and the Other developed in the hybridization works of the horror genre, with Brazilian cultural aspects, creating Monsters that expose the country's own problems. It is considered that the decentralized origin of filmmakers dedicated to contemporary horror allows for a greater constructed diversity and experience in the creation of images and experiences common to the horror genre

Avaliação da qualidade de três diferentes tipos de cavacos de madeira do híbrido Eucalyptus urophila x grandis

Orientador: Prof. Dr. Dimas Agostinho da SilvaMonografia (graduação) - Universidade Federal do Paraná,Setor de Ciências Agrárias, Curso de Engenharia Florestal.Resumo: A biomassa vem sendo utilizada como fonte de energia há séculos. Apesar de seu consumo ter caído ao longo dos anos, no Brasil a expectativa é que sua participação na matriz energética cresça em função do alto consumo, pelo fato de ser uma fonte de energia renovável de baixo custo. Em uma empresa que comercializa esse combustível, a análise de qualidade do mesmo é de importância fundamental para formação de preços e garantia de qualidade para os consumidores. O objetivo deste trabalho foi calcular o Índice de Valor Combustível (IVC) de três diferentes tipos de cavacos de madeira, sendo eles: cavaco de madeira com casca, cavaco de madeira sem casca e cavaco de madeira proveniente de serraria. Foram realizadas as análises de densidade, teor de umidade, teor de cinzas e poder calorífico, de acordo com normas da Associação Brasileira de Normas Técnicas (ABNT). O Índice de Valor Combustível é um parâmetro de medida de qualidade de combustíveis. Nesta pesquisa os resultados demonstraram que o combustível que apresentou maior IVC foi o cavaco sem casca, sendo 440 seu valor médio determinado, os cavacos de serraria e com casca obtiveram valores próximos, sendo 100 e 114 seus valores médios, respectivamente

Rádios comunitárias : as potencialidades para a promoção da informação sobre os direitos sociais

A presente dissertação do mestrado em Política Social e Serviço Social da Universidade Federal do Rio Grande do Sul é resultado de uma pesquisa que teve o a seguinte questão central: Como as rádios comunitárias do Rio Grande do Sul promovem programas radiofônicos que visam o acesso à informação sobre políticas sociais e a potencialização dos direitos sociais aos/às ouvintes? Seu objetivo é analisar de que maneira as rádios comunitárias do Rio Grande do Sul promovem programas radiofônicos informativos sobre políticas sociais que visam o acesso à informação e a potencialização dos direitos sociais aos/às ouvintes. Tem como objetivos específicos: identificar as rádios comunitárias do Rio Grande do Sul que possuem programas radiofônicos com temáticas no que tange as políticas sociais; analisar os conteúdos sobre direitos sociais tratados nos programas radiofônicos das rádios comunitárias que contribuem com o acesso a informação; captar a percepção dos ouvintes sobre os aspectos que potencializam o acesso à informação dos direitos sociais nos territórios em que as rádios comunitárias operam. Para tanto, tem como referência o método do materialismo histórico e dialético em Marx, método esse que subsidiou a reflexão sobre as potencialidades das rádios comunitárias para a promoção da informação sobre os direitos sociais. As principais categorias teóricas foram: Estado Social, Meios de Comunicação, Rádios Comunitárias, Serviço Social, Direitos Sociais, Políticas Sociais. Trata-se de uma pesquisa social de natureza qualitativa realizada com 34 rádios comunitárias do Rio Grande do Sul. A metodologia de análise utilizada foi análise de conteúdo, com base em Bardin (2010). Concluímos no processo investigativo, que as rádios comunitárias do Rio Grande do Sul tem como objetivo informar a comunidade onde ela está inserida, e que estas rádios tem programas que tratam sobre os direitos sociais, principalmente por terem envolvimento com entidades e trabalhadores/as que tratam sobre o tema, articulando com a comunidade onde essas rádios estão inseridas. Sobre os ouvintes participantes da pesquisa, mais do que audiência estes se configuram como participantes da programação do rádio, sendo parte da construção do que é transmitido nos programas radiofônicos. Identificamos que mesmo em meio as contradições e limites essas rádios são fundamentais nos territórios.The present dissertation of the Master in Social Policy and Social Work of the Federal University of Rio Grande do Sul is the result of a research that had the following central question: How do community radio stations in Rio Grande do Sul promote radio programs aimed at access to information about social policies and the enhancement of social rights to listeners? Its objective is to analyze how community radio stations in Rio Grande do Sul promote radio programs that inform social policies that aim at access to information and the enhancement of social rights to listeners. Its specific objectives are: to identify the community radios of Rio Grande do Sul that have radio programs with themes related to social policies; analyze the contents of social rights in the radio programs of the community radios that contribute to the access to the information; to capture the perception of the listeners on the aspects that potentiate the access to the information of the social rights in the territories in which the radios community operate. For that, it has as reference the method of historical materialism in Marx; a method that subsidized reflection on the potential of community radios to promote information on social rights. The main theoretical categories were: Social State, Media, Community Radios, Social Service, Social Rights, Social Policies. This is a social research of a qualitative nature with application of online questionnaire, via google forms, with 34 community radio stations in Rio Grande do Sul. In order to manage data, it was used the analysis of content based in Bardin (2010). The conclusion in this investigation process indicate the community radio in Rio Grande do Sul has the objective to inform de community were they are, and these radios have programs which talk about social rights, especially because they are involved with entities and workers which discuss the theme, to articulate with community were the radios are placed. About the radio listeners, more than audience they are participants in radio programming, being part of the construction about what is communicate in radio. We have recognized even with the contradictions and limits these radios are fundamental in the territories