Assessing functional activity of astrocytes by calcium imaging: how do astrocytes respond to the electrophysiological microenvironment

Apesar de não serem capazes de produzir potenciais de acção, é sabido que os astrócitos integram as sinapses, sendo capazes de detectar e responder a estímulos externos com dinâmicas de cálcio espaciotemporalmente complexas, podendo modelar a transmissão sináptica. O objectivo deste projecto é avaliar as dinâmincas de cálcio dos astrócitos através da modelação do seu microambiente electrofisiológico. Para tal, culturas de astrócitos foram estimuladas recorrendo a ThinMEAs©, monitorizando a actividade de cálcio. Os resultados obtidos demonstraram que os astrócitos respondem a estímulos de ±600mV ou ±800mV, gerando uma onda de cálcio que se propaga para células vizinhas. A amplitude, tempo de subida e velocidade de propagação da onda de cálcio está dependente do estímulo, sendo que um estímulo de maior amplitude resulta numa resposta de maior amplitude, demorando mais tempo a atingir o seu pico máximo mas atingindo distâncias mais longas. Apesar de preliminares, estes resultados indicam que os astrócitos são capazes de detectar e responder a mudanças eléctricas externas. Desta forma, os astrócitos são células electricamente excitáveis, possivelmente através do seguinte mecanismo: a estimulação leva à abertura dos canais de cálcio voltagem-dependentes de maneira dependente da voltagem, que irá sensibilizar o retículo endoplasmático resultando numa cascata de libertação de cálcio, gerando uma onda de cálcio que se irá propagar através de junções comunicantes ou gliotransmissão vesicular.Although not able to generate action potentials, it is known that astrocytes integrate synapses, being able to sense and respond to external stimuli with complex calcium dynamics, having the ability to shape synaptic transmission. The aim of this project is to assess astrocytic calcium dynamics upon the modulation of their eletrophysiological microenvironment. To accomplish this, astrocyte cultures were electrically stimulated using ThinMEAs© while monitoring their calcium activity. Obtained data showed that astocytes respond to a ±600mV or ±800mV stimulus by generating a calcium wave which propagates to neighboring cells. The amplitude, rise time and propagation velocity of the calcium wave is dependent on the stimulus, with a higher stimulation amplitude leading to a higher response amplitude, wich takes longer to reach its maximum peak but reach a larger distance. Although preliminary, these results indicate that astrocytes are able to sense and respond to changes of the electrical environment. In this way, astrocytes are electrically excitable cells, possibly due to the following mechanism: electrical stimulation causes voltage-gated calcium channels to open in a voltage-dependent manner, which will sensitize the endoplasmic reticulum leading to a cascade of calcium releases, generating a calcium wave, which will propagate through gap junctions or vesicular gliotransmission

Desenvolvimento de sistemas micelares de duas fases aquosas para a extração seletiva e purificação de IgG de matrizes reais

Mestrado Biotecnologia MolecularOs anticorpos, mono e policlonais, têm sido alvo de estudo intenso pelas indústrias farmacêuticas e biotecnológicas, resultando num extraordinário crescimento do mercado de produção de anticorpos. Este crescente interesse deve-se principalmente às vantagens que estas biomoléculas compreendem, tais como a sua aplicação terapêutica e a sua incorporação numa vasta variedade de técnicas de quantificação. A imunoglobulina G (IgG) é um dos anticorpos já aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) que oferece uma grande variedade de aplicações em diversas áreas e, portanto, reconhecida como uma proteína de valor acrescentado. Apesar da vasta oferta de técnicas de purificação de anticorpos, ainda existem grandes desvantagens associadas à sua purificação. As técnicas atualmente utilizadas centram-se em técnicas cromatográficas, as quais envolvem materiais dispendiosos e longos períodos de operação, sendo responsáveis por 50-80% dos custos totais do produto. Copulativamente, estas técnicas apresentam grandes limitações relativamente à escalabilidade do processo. Como alternativa, este trabalho foca-se na aplicação de sistemas micelares de duas fases aquosas convencionais e mistos, utilizando líquidos iónicos com carácter tensioativo, como uma técnica de purificação não cromatográfica para a extração e purificação de IgG a partir de soro de coelho. Foram otimizados alguns parâmetros associados ao processo de purificação, tais como a concentração de surfactante, a presença/ ausência de líquidos iónicos como co-surfactantes, o efeito da sua concentração e as suas características estruturais. Após o estudo de otimização, os sistemas convencionais foram confinados a uma percentagem de 10% de Triton X-114 a pH 7, alcançando purezas de IgG de 24,6%. Com a aplicação de sistemas micelares mistos de duas fases aquosas compostos por líquidos iónicos obtiveram-se ainda melhores fatores de purificação. Os sistemas que conduziram a melhores purezas foram os sistemas com adição de [C16mim]Cl a 0,7 wt%, [P4,4,4,14]Cl a 1,0 wt% e [P6,6,6,14]Br a 0,7wt%, obtendo-se purezas de IgG de 26,3%, 28,1% e 29,2%, respectivamente. Estes resultados de pureza são superiores aos reportados na literatura relativamente à purificação de IgG a partir do soro do coelho utilizando sistemas de duas fases aquosas, confirmando o potencial desta técnica na extração e purificação de anticorpos ou outros produtos de valor acrescentado de matrizes complexas.Os anticorpos, mono e policlonais, têm sido alvo de estudo intenso pelas indústrias farmacêuticas e biotecnológicas, resultando num extraordinário crescimento do mercado de produção de anticorpos. Este crescente interesse deve-se principalmente às vantagens que estas biomoléculas compreendem, tais como a sua aplicação terapêutica e a sua incorporação numa vasta variedade de técnicas de quantificação. A imunoglobulina G (IgG) é um dos anticorpos já aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) que oferece uma grande variedade de aplicações em diversas áreas e, portanto, reconhecida como uma proteína de valor acrescentado. Apesar da vasta oferta de técnicas de purificação de anticorpos, ainda existem grandes desvantagens associadas à sua purificação. As técnicas atualmente utilizadas centram-se em técnicas cromatográficas, as quais envolvem materiais dispendiosos e longos períodos de operação, sendo responsáveis por 50-80% dos custos totais do produto. Copulativamente, estas técnicas apresentam grandes limitações relativamente à escalabilidade do processo. Como alternativa, este trabalho foca-se na aplicação de sistemas micelares de duas fases aquosas convencionais e mistos, utilizando líquidos iónicos com carácter tensioativo, como uma técnica de purificação não cromatográfica para a extração e purificação de IgG a partir de soro de coelho. Foram otimizados alguns parâmetros associados ao processo de purificação, tais como a concentração de surfactante, a presença/ ausência de líquidos iónicos como co-surfactantes, o efeito da sua concentração e as suas características estruturais. Após o estudo de otimização, os sistemas convencionais foram confinados a uma percentagem de 10% de Triton X-114 a pH 7, alcançando purezas de IgG de 24,6%. Com a aplicação de sistemas micelares mistos de duas fases aquosas compostos por líquidos iónicos obtiveram-se ainda melhores fatores de purificação. Os sistemas que conduziram a melhores purezas foram os sistemas com adição de [C16mim]Cl a 0,7 wt%, [P4,4,4,14]Cl a 1,0 wt% e [P6,6,6,14]Br a 0,7wt%, obtendo-se purezas de IgG de 26,3%, 28,1% e 29,2%, respectivamente. Estes resultados de pureza são superiores aos reportados na literatura relativamente à purificação de IgG a partir do soro do coelho utilizando sistemas de duas fases aquosas, confirmando o potencial desta técnica na extração e purificação de anticorpos ou outros produtos de valor acrescentado de matrizes complexas

Exploring drivers of consumer well-being in music festivals: a relationship marketing approach

In the recent decades, the music festivals industry has developed very fast as well as contributed for the growth of wealth in the tourism sector. However, the research up-to-date about festivals is at an early stage, as there are plenty concepts and themes that have not been explored yet. Therefore, this study is motivated to explore what is behind the music festivals’ phenomenon. This dissertation considers the context of music festivals in Portugal due to its increasing levels of tourism growth, and investigates the existing relationships between common concepts within the field of Relationship Marketing, such as consumer’s experience, emotions and level of satisfaction, and yet their level engagement and their sense of well-being. In order to establish a connection between all these constructs, the S-O-R framework developed by Mehrabian and Russell (1974), regarded as one of the most influential in environmental psychology, was adapted to this study to carry this investigation. The results of the study revealed that all the constructs explored in the study show a positive relationship that enables to better comprehend the music festival experience felt by visitors, but it should be noted that not all the dimensions of each construct can be considered as relevant to our theoretical model. The overall findings in the Conclusion Chapter presented some interesting information, particularly, the relationship between consumers’ engagement and well-being, because it provides innovative and revealing facts that have not been explored previously in the music festivals literature. The managerial implications concerned to this study are discussed at the end.Nas últimas décadas, a indústria dos festivais de música tem vindo a desenvolver-se rapidamente, como ainda tem contribuído para o crescimento da riqueza que é gerada através do sector do turismo. No entanto, a pesquisa que é recolhida até à data acerca de festivais encontra-se ainda numa fase inicial, uma vez que existem vários conceitos e temas que não foram ainda investigados. Desta forma, este estudo é motivado a explorar o que está por detrás do fenómeno dos festivais de música. Esta dissertação considera o contexto dos festivais de música em Portugal, devido aos altos níveis de crescimento do seu turismo, e investiga as relações entre alguns conceitos que são comuns na área do Marketing Relacional, como por exemplo, a experiência dos consumidores, as suas emoções e satisfação, e ainda os seus níveis de compromisso, e as suas sensações de bem-estar. De maneira a estabelecer uma conexão entre todos estes conceitos, o framework S-O-R desenvolvido por Mehrabian e Russell (1974), reconhecido como um dos mais influentes na área de psicologia ambiental, foi adaptado a este estudo para que fosse conduzida esta investigação. Os resultados deste estudo revelaram que todos os constructos explorados neste estudo demonstram uma relação positiva que permite compreender melhor a experiência dos festivais de música sentida pelos visitantes, mas deve também ser referido que nem todas as dimensões de cada constructo podem ser consideradas como relevantes para este modelo teórico. Os resultados gerais que se encontram no capítulo das conclusões apresentaram informação relevante, nomeadamente, a relação entre compromisso e bem-estar dos consumidores, por apresentar factos inovadores e reveladores que não foram ainda explorados na literatura dos festivais de música. As implicações que foram reconhecidas neste estudo são discutidas no final do mesmo

Presidential election and the initial public offering performance : the Trump case

Mestrado em FinançasEste estudo representa a minha dissertação, que terá como foco a Oferta pública inicial de ações (IPO). Este consiste na análise do impacto que determinados momentos de mudanças políticas e/ou económicas poderão ter na performance dos IPO?s, examinando em concreto a eleição de Donald J. Trump, doravante denominado como Trump, para Presidente dos Estados Unidos da América (EUA). Sendo que Trump tem sido alvo de grande polémica por todo o mundo, devido à sua propensão para criar um impacto em grande escala na sociedade com os seus métodos e ideologias, será, portanto, de enorme interesse e valor para o meu mestrado, o estudo da influência que este terá no mercado financeiro. O meu objetivo é dar um contributo à comunidade científica ao juntar duas realidades distintas: o Mercado acionista e o Ambiente político. Através do estudo dos IPO?s lançados no momento anterior e no momento posterior à eleição de Trump, a sua performance será o objeto de estudo e a principal ferramenta para analisar o impacto que este momento de instabilidade económica e política, bem como as políticas relacionadas com o mercado acionário tiveram no mesmo. De modo a chegar a determinadas conclusões, foi utilizada estatística descritiva, bem como foi desenvolvida uma análise estatística, baseada no número de IPO?s e na taxa de rendimento médio das ações. Esta análise assenta em definições inerentes ao Estudo de Evento, largamente utilizado por vários autores, nomeadamente o conceito de janelas de evento, que teve grande utilidade na separação dos 3 momentos de estudo.This study represents my dissertation, which will focus on the Initial Public Offering (IPO). This is an analysis of the impact that certain moments of political and / or economic change may have on the performance of IPOs, specifically examining the election of Donald J. Trump, hereafter referred to as Trump, as President of the United States of America. Since Trump has been the subject of such controversy around the world, because of his propensity to create a large-scale impact on society with his methods and ideologies, it will therefore be of enormous interest and value to my master's degree, the study of its influence on the financial market. My goal is to contribute to the scientific community by bringing together two distinct realities: the stock market and the political environment. Through the study of the IPOs launched before and after Trump's election, their performance will be the object of study and the main tool to analyze the impact that this moment of economic and political instability, as well as the policies related to the stock market had in it. In order to reach certain conclusions, descriptive statistics were used, as well as a statistical analysis based on the number of IPOs and the average yield of the shares. This analysis is based on definitions inherent to the Event Study, widely used by several authors, namely the concept of event windows, which was very useful in separating the 3 study moments.info:eu-repo/semantics/publishedVersio