Mechanical regulation of cardiac fibroblasts.

Cardiac fibrosis progressively contributes to heart failure (HF). Yet, its complex nature still lacks a more comprehensive understanding. One main hurdle is the lack of representative human models providing insights into the behaviour of cardiac fibroblasts (CF) and their pathological derivatives. Therefore, our group developed a human engineered connective tissue (hECT) model based on primary human CF and collagen type 1, which allows studying the pathological CF conversion. In this model, the environmental stiffness provided by the mould’s architecture was used as the single trigger for the CF conversion. The moulds contained either two flexible poles (flexible model) or a single central stiff rod (stiff model). Destructive tensile strength measurements showed that flexible hECT model achieved a stiffness similar to that of the healthy myocardium, while stiff hECT model achieved a stiffness comparable to the diseased myocardium. In addition, stiff hECT showed lower elasticity and extensibility compared to flexible hECT, but could withstand higher stress. A gradual increase in the stiffness of the flexible poles further demonstrated to result in an incremental increase in tissue stiffness and a decrease in tissue contraction. Furthermore, the modulation of the internal cell stiffness by interfering with the actin-myosin cytoskeleton was investigated. To that purpose, ROCK inhibitors and Latrunculin A were applied to both hECT and rat engineered connective tissue (rECT) generated with neonatal rat cardiac fibroblasts. The data indicates that the integrity of the actin-myosin network is relevant for compaction, contraction and stiffening of ECT. The underlying pathway involved the MRTF/SRF-dependent regulation of gene expression, e.g., of the collagen cross-linker enzyme lysyl oxidase (LOX). To obtain a more profound insight into the stiffness-dependent cellular remodelling, a comparison was conducted between 2D-cultured myofibroblasts and cells from flexible and stiff hECT. It was shown that a partial reversion of the myofibroblasts phenotype of 2D-cultured cells is achievable in hECT, as demonstrated by cell cycle activity and expression of myofibroblast markers. Importantly, the direct comparison of cells in flexible and stiff hECT showed a clear time-dependent segregation in two different cellular phenotypes. By RNA sequencing it was possible to demonstrate that the gene program differs between cells embedded in flexible and in stiff hECT, especially in gene clusters assigned to extracellular matrix organization and protein folding. In comparison with published data from human samples, hECT exposed to high environmental stiffness shows a transcriptome profile similar to that of a failing human heart. In summary, this novel engineered connective tissue model recapitulates the mechanical changes that occur during fibrogenesis and assisted phenotypic switching of cardiac myo- and fibroblasts mediated by environmental stiffness. Thus, the hECT model opens new perspectives and offers a versatile alternative to study mechanisms underlying scarring of the human heart and for screening for anti-fibrotic drugs.2021-10-2

Advances in the diagnosis of mitochondrial diseases by next generation sequencing

O recente desenvolvimento da tecnologia de sequenciação de nova geração (NGS) revolucionou o diagnóstico molecular das doenças genéticas raras, de difícil diagnóstico, tais como as doenças mitocondriais. O estudo destas patologias foi implementado em 1993 pelo nosso grupo e até à data foram investigados mais de 2500 doentes portugueses. Muitos destes doentes ainda não dispõem de diagnóstico molecular, pelo que foi desenvolvida uma estratégia de NGS para a identificação da mutação causal. A sequenciação de um painel de 209 genes nucleares associados a doenças mitocondriais e do DNA mitocondrial completo por NGS, foi realizada num sequenciador MiSeq (Illumina). O estudo de 145 doentes permitiu identificar 41 mutações causais e caraterizar 35 doentes. Esta investigação contribuiu para esclarecer a etiologia molecular destes doentes (35/145; 24%), ii) alargar o espetro mutacional destas patologias e, iii) oferecer um aconselhamento genético e um eventual diagnóstico pré-natal aos casais em risco. O desenvolvimento de um painel, específico para estas patologias, tem um caráter inovador e reforça o nosso Centro como laboratório nacional para o estudo e investigação de doenças mitocondriais.Recent development of high throughput, next-generation sequencing (NGS) technology has revolutionized the research and molecular diagnosis of hardto- diagnose genetic disorders such as mitochondrial disorders. The study of these diseases was implemented in 1993 by our group and to date more than 2,500 Portuguese patients have been investigated. As many of these patients do not yet have molecular diagnosis, an NGS strategy was developed to identify the causal mutation. NGS was performed in a MiSeq Illumina instrument using a custom mitochondrial gene panel with around 209 genes involved in mitochondria metabolism and the entire human mitochondrial genome. The study of 145 patients allowed the identification of 41 causal mutations and the molecular characterization of 35 patients. This investigation contributed to i) identify the pathogenic mutations in the studied patients (35/145; 24%), ii) expand the mutational spectrum in the etiology of these disorders, and iii) propose an accurate genetic counseling. Custom design panels have been widely used for molecular heterogeneous disorders however, the development of this panel will be innovative in our country strengthening our Center as a national reference for the study and research of mitochondrial disorders.Estudo financiado por: Fundação da Ciência e Tecnologia (PTDC/DTP-PIC/2220/2014, Genetic Defects of Mitochondrial Diseases: a Next Generation Sequencing Approach) - implementação da tecnologia de NGS e o desenho de um painel de genes nucleares aplicado ao diagnóstico das doenças mitocondriais; Programa NORTE 2020 (NORTE-01-0246-FEDER-000014, DESVENDAR “DEScobrir, VENcer as Doenças rARas”) - aquisição de equipamentos para a realização da sequenciação de nova geração.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Influência do perfil químico na eficácia de soluções de romã e sucupira – utilizadas popularmente em fitofármaco antifúngico / Influence of chemical profile on the efficacy of solutions of pomegranate and sucupira – popularly used in antifungal phytopharmaceutical

A aplicação da fitoterapia constitui uma tendência mundial crescente se baseando, principalmente, na tradição popular. Para que um fitofármaco seja reconhecido como medicamento sua eficácia e segurança devem ser cientificamente comprovados e sua metodologia de preparo deve ser estabelecida. A micose de unha é tratada, popularmente, utilizando um fitoterápico preparado pela adição 1:1 de soluções etanólicas à 20% (p/v) de sementes de sucupira e cascas secas de romã, submetidas, separadamente, à maceração por 15 dias. Este trabalho teve o objetivo de avaliar como a variação das condições de preparo do fitoterápico afetam seu perfil químico e atividade antifúngica. O perfil químico foi investigado por cromatografia em camada delgada e a atividade antifúngica pelo método de difusão em disco, com adaptações, contra Candida albicans ATCC 60193. Os parâmetros avaliados envolveram as seguintes variações no processo de extração: I) tempo de contato entre material vegetal e solvente, II) proteção à luz e III) extração separada e conjunta das espécies vegetais. Foi possível estabelecer que a maceração das cascas de romã e das sementes de sucupira, separadamente, à temperatura ambiente e abrigo da luz, empregando período de contacto entre material vegetal e solvente de dois dias é a metodologia mais simples, rápida e eficaz para a obtenção do fitoterápico. 

Acceptability of short message service (SMS) as a tool for malaria treatment adherence in the Brazilian Amazon: a qualitative study

Background: Malaria is one of the leading causes of morbidity worldwide, and patient adherence to prescribed antimalarials is essential for effective treatment. Methods: This cross-sectional study, with in-depth telephone interviews, analyzed participants’ perceptions of short message service (SMS) in adherence to treatment. Results: Five thematic categories emerged: decreased forgetfulness, the novelty of the tool, easy-to-understand language, the impact of SMS messages during treatment, and suggestions for improvement and complaints. Conclusions: SMS could assist patients in adhering to prescribed antimalarials.Fil: Rodovalho, Sheila. Universidade do Estado do Amazonas; BrasilFil: Dias, Ádila Liliane Barros. Universidade do Estado do Amazonas; BrasilFil: Paz Ade, Maria. Pan American Health Organization; ArgentinaFil: Saint Gerons, Diego Macias. Pan American Health Organization; ArgentinaFil: Castro, Jose Luis. Pan American Health Organization; ArgentinaFil: Beratarrechea, Andrea Gabriela. Instituto de Efectividad Clínica y Sanitaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Murta, Felipe Leão Gomes. Universidade do Estado do Amazonas; BrasilFil: dos Santos, Alicia Cacau Patrine. Universidade do Estado do Amazonas; BrasilFil: Marques, Leonardo Lincoln Gomes. Universidade do Estado do Amazonas; BrasilFil: Sampaio, Vanderson Souza. Universidade do Estado do Amazonas; BrasilFil: Baia da Silva, Djane Clarys. Fundación Oswaldo Cruz; Brasil. Universidade do Estado do Amazonas; BrasilFil: Monteiro, Wuelton Marcelo. Universidade do Estado do Amazonas; Brasi

Retinopatia da Prematuridade: uma revisão de literatura

Introdução: a retinopatia da prematuridade é uma doença vasoproliferativa da retina, de etiologia multifatorial, relacionada principalmente à prematuridade, oxigenioterapia prolongada e ao baixo peso ao nascer. Atualmente, crianças com mais baixo peso têm sobrevivido devido à modernização dos equipamentos e melhor qualificação dos profissionais que atuam nas UTIs neonatais. Com isso, tem-se um aumento da incidência da retinopatia. Objetivo: conhecer a produção científica sobre a retinopatia da prematuridade, descrevendo a enfermidade, seus fatores de risco e como a identificação precoce auxilia no diagnóstico e no tratamento. Método: Foi realizada uma revisão integrativa a partir das bases de dados da Biblioteca Virtual em Saúde (BVS) com os descritores Retinopatia, Recém-nascido e Enfermagem. A seleção foi limitada a artigos publicados nos últimos dez anos. Resultados: Foram selecionados 10 artigos em periódicos, que compuseram duas categorias: diagnóstico e prevenção da retinopatia da prematuridade. Os estudos revelam a importância do diagnóstico precoce da doença para evitar sequelas definitivas que podem comprometer a qualidade de vida destes recém-nascidos e da importância da sua prevenção no ambiente das unidades de terapia intensiva.  Conclusão: os profissionais de saúde, especialmente os enfermeiros, têm importante papel na prevenção, bem como no diagnóstico e tratamento da retinopatia da prematuridade. Através de sua atuação o enfermeiro poderá minimizar agravos à saúde do recém-nascido, auxiliando na identificação precoce de alterações visuais e encaminhando esses recém-nascidos para investigação diagnóstica especializada

ALTERNATIVAS DE FORMULAÇÕES INÉDITAS DE PROTETORES SOLARES NATURAIS: EXTRATO DAS SEMENTES DE MORINGA OLEÍFERA COM EXTRATOS ETANÓLICOS DE PRÓPOLIS.

Repeated or intense exposure to UV (ultraviolet) radiation causes skin changes by generating reactive oxygen species (ROS), which are harmful to tissues, causing burns, spots, erythema, photoaging and DNA mutations. The use of sunscreens is a means of preventing or reducing the effects of these exposures, as they have the ability to reflect and/or absorb them. Protectors can be of synthetic or natural origin. The development of actives capable of increasing the efficiency of sunscreens, especially those of plant origin, represents a growing demand in cosmetology. Moringa oleifera is a plant with varied pharmacological applications, it has a fast growth in tropical countries, and it is present in the Brazilian northeast and north of the state of Minas Gerais. Based on this, this study aims to evaluate the use of raw materials of natural origin as photoprotective agents, looking for trends in the consumer market. For this, novel formulations of dichloromethane extract of Moringa oleífera seeds, in association with different ethanolic extracts of propolis, were studied in relation to the photoprotective capacity. Regarding the propolis extracts (green, red and brown) 70% ethanolic were used. The photoprotective activity was studied in vitro. The results showed significant increases in FPS for the formulations. The high increase in sun protection was verified in green propolis, justified by the greater amount of flavonoids it presents. We concluded that the propolis extracts incorporated in the formulations with dichloromethane extract in the Moringa oleifera seeds showed a synergism in the intensification of the sun protection factor.La exposición repetida o intensa a la radiación UV (ultravioleta) provoca cambios en la piel debido a la generación de especies reactivas de oxígeno (ROS), las cuales son dañinas para los tejidos, provocando quemaduras, manchas, eritema, fotoenvejecimiento y mutaciones en el ADN. El uso de protectores solares es un medio para prevenir o reducir los efectos de estas exposiciones, ya que tienen la capacidad de reflejarlos y/o absorberlos. Los protectores pueden ser de origen sintético o natural. El desarrollo de activos capaces de aumentar la eficacia de los fotoprotectores, especialmente los de origen vegetal, representa una demanda creciente en cosmetología. Moringa oleifera es una planta con variadas aplicaciones farmacológicas, presenta un rápido crecimiento en los países tropicales y está presente en el noreste brasileño y norte del estado de Minas Gerais. En base a esto, este estudio tiene como objetivo evaluar el uso de materias primas de origen natural como agentes fotoprotectores, buscando tendencias en el mercado de consumo. Para ello, se estudiaron formulaciones inéditas de extracto de diclorometano de semillas de Moringa oleifera, en asociación con diferentes extractos etanólicos de propóleo, en relación a su capacidad fotoprotectora. En cuanto a los extractos de propóleos (verde, rojo y pardo) se utilizaron etanólicos al 70%. La actividad fotoprotectora se estudió in vitro. Los resultados mostraron aumentos significativos de SPF para las formulaciones. En el propóleo verde se verificó el alto incremento de la protección solar, justificado por la mayor cantidad de flavonoides que presenta. Concluimos que los extractos de propóleo incorporados en las formulaciones con extracto de diclorometano en semillas de Moringa oleifera mostraron un sinergismo en la intensificación del factor de protección solar.Exposições repetidas ou intensas a radiações UV (ultravioleta) causam alterações cutâneas pela geração das espécies reativas do oxigênio (EROs), danosas aos tecidos, causando queimaduras, manchas, eritemas, fotoenvelhecimento e mutações no DNA. O uso de protetores solares é um meio de prevenir ou reduzir os efeitos destas exposições, por terem a capacidade de refletir e/ou absorvé-las. Os protetores podem ser de origem sintética ou natural. O desenvolvimento de ativos, capazes de aumentar à eficiência de protetores solares, principalmente os de origem vegetal, representa uma demanda crescente da cosmetologia. Moringa oleifera é uma planta com variadas aplicações farmacológicas, apresenta um rápido crescimento nos países tropicais, e está presente no nordeste brasileiro e norte do estado de Minas Gerais. Com base nisso, esse estudo visa avaliar a utilização de matérias primas de origem natural como agentes fotoprotetores, buscando as tendências do mercado consumidor. Para isso, formulações inéditas de extrato diclorometano de sementes de Moringa oleífera, em associação com diferentes extratos etanólicos de própolis, foram estudadas em relação à capacidade fotoprotetora. Em relação aos extratos de própolis (verde, vermelha e marrom) foram usados os etanólicos 70%. A atividade fotoprotetora foi estudada in vitro. Os resultados mostraram aumentos significativos de FPS para as formulações. O incremento elevado na proteção solar foi verificado na própolis verde, justificado pela maior quantidade de flavonóides que ela apresenta. Concluímos que os extratos de própolis incorporados nas formulações com extrato de diclorometano nas sementes Moringa oleifera apresentaram um sinergismo na intensificação do fator de proteção solar

Pacientes com síndrome de Dumping pós-gastroplastia tipo bypass em Y-de-Roux: conhecimentos e práticas alimentares

A obesidade mórbida é uma doença metabólica de origem multifatorial, envolvendo fatores genéticos, endócrinos e ambientais. O estilo de vida contemporâneo tem contribuído para o aumento da prevalência dessa patologia e, consequentemente, para o aumento da busca pelo tratamento cirúrgico. A gastroplastia do tipo bypass em Y de Roux é a técnica mais utilizada, atualmente, sendo considerada padrão-ouro. Entretanto, os pacientes submetidos a essa cirurgia não estão livres de complicações apresentando com elevada frequência a Síndrome de Dumping. O objetivo desse trabalho é avaliar os pacientes submetidos a técnica de bypass e identificar os que apresentam esta síndrome, além de seus hábitos alimentares e seus conhecimentos sobre o assunto. Este trabalho justifica-se pelo crescente aumento do número de gastroplastias realizadas e pela importância do paciente possuir o conhecimento correto sobre os alimentos que devem ser consumidos, já que hábitos dietéticos influenciam diretamente na qualidade de vida dos mesmos. Foi realizado um estudo transversal com informações coletadas de um grupo de pacientes da Clínica Gastro Vita, localizada no município de Araraquara-SP. A prevalência de Síndrome de Dumping obtida na amostra foi de 56,7%. Dos pacientes, 70% possuíam algum conhecimento sobre a síndrome, no entanto, destes, 52,37% apresentaram a Síndrome de Dumping segundo o Escore de Sigstad. Observou-se que os carboidratos obtiveram maior Índice de Nocividade e que a ausência de conhecimento sobre a composição dos alimentos apresenta relação direta com a prática alimentar do individuo e a ocorrência dos sintomas da síndrome

Estudo clínico e imunológico comparativo do acometimento inicial e desfecho de pacientes com Lúpus Eritematoso Sistêmico juvenil e adulto

Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES) é uma doença reumática autoimune, de caráter crônico e largo espectro clínico, sendo caracterizada por complexas anormalidades do sistema imunológico, com o predomínio de anticorpos antinucleares que atingem diversos órgãos e sistemas. Embora possa ocorrer em qualquer idade e em ambos, apresenta maior incidência em mulheres de idade reprodutiva, com um pico aos 30 anos. Em alguns casos, pode manifestar-se ainda na faixa etária juvenil (LESJ). No entanto, considerando o diagnóstico e as manifestações clínicas prevalentes diversas do LES e LESJ, ainda não são comuns os trabalhos acerca desse assunto, dificultando a criação de um perfil que comprove a maior gravidade dos sintomas manifestados antes dos dezoito anos em comparação com o LES. Nesse contexto, este trabalho busca identificar diferenças no perfil clínico, epidemiológico e imunológico de pacientes que preenchem critérios diagnósticos para LES e LESJ. Foi realizado um estudo longitudinal retrospectivo, descritivo e observacional do tipo coorte histórico, com abordagem quali-quantitativa. O estudo foi realizado nos ambulatórios de reumatologia e reumatologia pediátrica do Centro de Especialidades Médicas do CESUPA (CEMEC) do Centro Universitário do Pará (CESUPA), localizado em Belém-PA. As manifestações clínicas mais frequentes no LESJ foram febre, astenia, alterações cutâneas agudas, artralgia, vasculite, derrame pericárdico, proteinúria, cilindros hemáticos, nefrite lúpica, linfopenia, trombocitopenia e hipocomplementenemia. Pacientes do grupo adulto tiveram ao início e seguimento predominância em valores aumentados nas provas inflamatórias, perda de peso, lúpus cutâneo papuloescamoso, alopecia cicatricial e não cicatricial, úlceras orais, artrite, pericardite, derrame pleural, mielite transversa, neurite e psicose, anemia hemolítica autoimune, leucopenia e neutropenia. O grupo juvenil apresentou maior índice de atividade ao início da doença, porém, teve um desenvolvimento mais favorável, quando comparado ao grupo adulto, já que diminuiu seu índice SLEDAI-2K de maneira mais efetiva que o grupo de início adulto. Conclui-se que pacientes LESJ tiveram prevalência levemente maior do sexo masculino, positividade do anticorpo anti-dsDNA, hipocomplementenemia, maior frequência de manifestações cutâneas agudas, acometimento renal e maior índice de atividade da doença no início, porém com melhor evolução em seu curso. Em contrapartida, o LES obteve prevalência do sexo feminino, manifestações laboratoriais de anemia hemolítica autoimune e leucopenia, além maior atividade inflamatória e sintomas articulares

Defeitos Genéticos das Doenças Mitocondriais: Abordagem por Sequenciação de Nova Geração

Objetivos:O objetivo deste projeto de investigação é desenvolver uma estratégia de sequenciação de nova geração para a identificação das alterações genéticas em doentes suspeitos de doenças mitocondriais sem caracterização molecular.Este projeto de investigação é financiado pela FCT (Fundação da Ciência e Tecnologia) (PTDC/DTP-PIC/2220/2014)info:eu-repo/semantics/draf

Mitochondrial disorders: insights into diagnosis and management in the new era of genomic medicine

Objectives: The overall aim of our research project was to develop a Next Generation Sequencing strategy to identify nuclear disease causing-mutations in patients suspicious of mitochondrial disorders but without molecular etiology.This Research Project is support by FCT (Fundação da Ciência e Tecnologia) (PTDC/DTP-PIC/2220/2014) - Genetic Defects of Mitochondrial Diseases: a Next Generation Sequencing Approach.info:eu-repo/semantics/draf