Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge, IP
Abstract
O recente desenvolvimento da tecnologia de sequenciação de nova geração
(NGS) revolucionou o diagnóstico molecular das doenças genéticas raras, de
difícil diagnóstico, tais como as doenças mitocondriais. O estudo destas patologias
foi implementado em 1993 pelo nosso grupo e até à data foram investigados
mais de 2500 doentes portugueses. Muitos destes doentes ainda
não dispõem de diagnóstico molecular, pelo que foi desenvolvida uma estratégia
de NGS para a identificação da mutação causal. A sequenciação de
um painel de 209 genes nucleares associados a doenças mitocondriais e do
DNA mitocondrial completo por NGS, foi realizada num sequenciador MiSeq
(Illumina). O estudo de 145 doentes permitiu identificar 41 mutações causais
e caraterizar 35 doentes. Esta investigação contribuiu para esclarecer a etiologia
molecular destes doentes (35/145; 24%), ii) alargar o espetro mutacional
destas patologias e, iii) oferecer um aconselhamento genético e um eventual
diagnóstico pré-natal aos casais em risco. O desenvolvimento de um painel,
específico para estas patologias, tem um caráter inovador e reforça o nosso
Centro como laboratório nacional para o estudo e investigação de doenças
mitocondriais.Recent development of high throughput, next-generation sequencing (NGS)
technology has revolutionized the research and molecular diagnosis of hardto-
diagnose genetic disorders such as mitochondrial disorders. The study of
these diseases was implemented in 1993 by our group and to date more than
2,500 Portuguese patients have been investigated. As many of these patients
do not yet have molecular diagnosis, an NGS strategy was developed to identify
the causal mutation. NGS was performed in a MiSeq Illumina instrument
using a custom mitochondrial gene panel with around 209 genes involved in
mitochondria metabolism and the entire human mitochondrial genome. The
study of 145 patients allowed the identification of 41 causal mutations and the
molecular characterization of 35 patients. This investigation contributed to i)
identify the pathogenic mutations in the studied patients (35/145; 24%), ii) expand
the mutational spectrum in the etiology of these disorders, and iii) propose
an accurate genetic counseling. Custom design panels have been widely
used for molecular heterogeneous disorders however, the development of this
panel will be innovative in our country strengthening our Center as a national
reference for the study and research of mitochondrial disorders.Estudo financiado por: Fundação da Ciência e Tecnologia (PTDC/DTP-PIC/2220/2014, Genetic Defects of Mitochondrial Diseases: a Next Generation Sequencing Approach) - implementação da tecnologia
de NGS e o desenho de um painel de genes nucleares aplicado ao
diagnóstico das doenças mitocondriais; Programa NORTE 2020
(NORTE-01-0246-FEDER-000014, DESVENDAR “DEScobrir, VENcer
as Doenças rARas”) - aquisição de equipamentos para a realização
da sequenciação de nova geração.info:eu-repo/semantics/publishedVersio