Nitric Oxide Protects Neuroblastoma Cells from Apoptosis Induced by Serum Deprivation through cAMP-response Element-binding Protein (CREB) Activation

The transcription factor cAMP-response element-binding protein (CREB) mediates survival in many cells, including neurons. Recently, death of cerebellar granule neurons due to nitric oxide (NO) deprivation was shown to be accompanied by down-regulation of CREB activity (1). We now provide evidence that overproduction of endogenous NO or supplementation with exogenous NO renders SK-N-BE human neuroblastoma cells more resistant to apoptosis induced by serum deprivation. Parental cells underwent apoptosis after 24 h of serum deprivation, an outcome largely absent in clones overexpressing human neuronal nitric oxide synthase (nNOS). This protective effect was reversed by the inhibition of NOS itself or soluble guanylyl cyclase, pointing at cGMP as an intermediate effector of NO-mediated rescue. A slow-releasing NO donor protected parental cells to a significant extent, thus confirming the survival effect of NO. The impaired viability of serum-deprived parental cells was accompanied by a strong decrease of CREB phosphorylation and transcriptional activity, effects significantly attenuated in nNOS-overexpressing clones. To confirm the role of CREB in survival, the ectopic expression of CREB and/or protein kinase A largely counteracted serum deprivation-induced cell death of SK-N-BE cells, whereas transfection with a CREB negative mutant was ineffective. These experiments indicate that CREB activity is an important step for NO-mediated survival in neuronal cells

Neonatal therapy with clenbuterol and salmeterol restores spinogenesis and dendritic complexity in the dentate gyrus of the Ts65Dn model of Down syndrome

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Detección de ADN porcino en productos cárnicos comerciales por qPCR

PosterBeef is one of the main sources of food in our country, due to its high protein content. biological value and organoleptic characteristics. Within meat products, a product made entirely with meat (fat ≤ 20%) is called Hamburger, while Medallion allows up to 50% fat, in addition to the incorporation of other ingredients (starch ≤ 5%; soy proteins ≤ 2%). Chapter V of the Argentine Food Code (CAA) establishes the requirements that complement the mandatory information that packaged food labels must have; This allows you to supply consumer information regarding the composition and nutritional properties, as well as its conservation and handling. Guaranteeing the genuineness of food is a crucial issue in the food industry, so it is important to have detection methods that allow determining the presence of undeclared ingredients (voluntarily added or present through cross contact), in the different stages of production and /or transport of a certain product. The developed methodology has proven to be simple, specific, sensitive and rapid for the identification of porcine DNA as a possible adulterant present in commercial meat foods, with the potential to be implemented in analysis laboratories, as a control tool.La carne vacuna es una de las principales fuentes de alimentación en nuestro país, por su aporte de proteínas de alto valor biológico y características organolépticas. Dentro de los productos cárnicos, se denomina Hamburguesa al producto elaborado en su totalidad con carne (grasa ≤ 20%), mientras que Medallón admite hasta 50% de grasa, además de la incorporación de otros ingredientes (almidón ≤ 5%; proteínas de soja ≤ 2%). El Capítulo V del Código Alimentario Argentino (CAA) establece los requisitos que complementan la información obligatoria con la que deben contar los rótulos de los alimentos envasados; este permite suministrar al consumidor información respecto de la composición y las propiedades nutricionales, así como su conservación y manipulación. Garantizar la genuinidad de alimentos es un tema crucial en la industria alimentaria, por lo que es importante contar con métodos de detección que permitan determinar la presencia de ingredientes no declarados (agregados voluntariamente o presenten por contacto cruzado), en las diferentes etapas de elaboración y/o transporte de un determinado producto.La metodología desarrollada ha demostrado ser simple, específica, sensible y rápida para la identificación de ADN porcino como posible adulterante presente en alimentos cárnicos comerciales, con potencial de ser implementado en laboratorios de análisis, como herramienta de control.Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos (ITA)Fil: Guidi, Silvina Mabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Universidad de Morón. Escuela Superior de Agronomía y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Universidad de Morón. Escuela Superior de Ingeniería, Informática y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina.Fil: Dolosa, Sasha. Universidad Nacional de Moreno (UNM). Departamento de Ciencias Aplicadas y Tecnología; Argentina.Fil: Nanni, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación de Agroindustria; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina

Efecto de yogur fortificado con nanoliposomas de ácidos grasos Omega 3 (EPA+DHA) sobre índices nutricionales

Poster y resumenThe main Omega3 polyunsaturated fatty acids (3 PUFA) are alpha-linolenic acid (ALA, 18:3 n-3), eicosapentaenoic acid (EPA, 202:5 n-3) and docosahexaenoic acid (DHA, 22:6 n-3). ALA is essential; It means that the body does not synthesize it, and it must be obtained from the foods that are consumed. The conversion efficiency of ALA into EPA and DHA in the body is low; Therefore, the only way to increase their concentration in the body is through food. Due to the high susceptibility of 3 PUFAs to oxidation, fortification of food products with them is challenging. Yogurt constitutes a convenient matrix to transport bioactives due to its semisolid structure, oxidative stability and nutritional value. In this framework, although nanotechnology has been used to prevent the oxidation of bioactive compounds, experimental data on its application in foods in relation to technological aspects are scarce. Therefore, the evaluation of a yogurt and its capacity as a vehicle to provide recommended amounts of EPA and DHA was carried out, and to establish whether the nanoliposomes confer greater stability to the aforementioned fatty acids, thus influencing their nutritional indices. For this, yogurt formulations were made using ultra-pasteurized partially skimmed milk (2% total fat), commercial starter culture (S. thermophilus and L. delbrueckii subsp. bulgaricus) and marine oil rich in EPA DHA. The formulations were developed to contain free oil or innanoliposomes with concentrations between 100-125; 200-250 -and 450-500 mg/ 200 ml of yogurt (Formulas under protection). The nanoliposomes based on soy lecithin were made under the framework of an agreement between the Food Technology Institute of INTA and a private company (protected development). Samples were taken at 0, 14, and 28 days, which were stored at 4 ºC. The fatty acid profile was quantified by gas chromatography (GC) and calculations were performed to determine indices. nutritional; Atherogenic Index (AI), Thrombogenic Index (TI), Health Promoting Index (HPI) and Hypocholesterolemic / Hypercholesterolemic Ratio (HH). The data obtained by CG showed that the yogurt formulations with free oil presented an approximate loss of 81% of these 3 PUFA after 28 days of storage at 4 ºC, while no such drop was recorded in any of the yogurts developed that contained nanoliposomes, evaluated up to 28 days of storage. In the case of the AI, TI, HPI and HH indices for the nanoliposomal formulations, values ​​of 3.05, 1.46, 0.36 and 1.02 were obtained, while for the free formulations the values ​​were 3.50, 1.70, 0.23 and 0.86, respectively, observing thus better performance for nanoliposomal formulations. These results indicated that yogurt constitutes a matrix suitable to be used as a vehicle to incorporate 3 PUFA beneficial for health, and if they are found in nanoliposomes, their stability remains stable, thus ensuring the quantity and property of the bioactive until the end of the shelf life of the food.Los principales ácidos grasos poliinsaturados Omega3 (3 PUFA) son el ácido alfa-linolénico (ALA, 18:3 n-3), el ácido eicosapentaenoico (EPA, 202:5 n-3) y el ácido docosahexaenoico (DHA, 22:6 n-3). El ALA es esencial; significa que el cuerpo no lo sintetiza, y debe obtenerse de los alimentos que se consumen. La eficiencia de conversión de ALA en EPA y DHA en el organismo es baja; por lo tanto, la única manera de aumentar la concentración de estos en el organismo es a través de los alimentos. Debido a la alta susceptibilidad de los 3 PUFA a la oxidación, la fortificación de productos alimenticios con ellos es desafiante. El yogur constituye una matriz conveniente para vehiculizar bioactivos por su estructura semisólida, estabilidad oxidativa y valor nutricional. En este marco, si bien la nanotecnología ha sido utilizada para prevenir la oxidación de compuestos bioactivos, los datos experimentales sobre su aplicación en alimentos con relación a aspectos tecnológicos son escasos. Por lo tanto, se realizó la evaluación de un yogur y su capacidad como vehículo para aportar cantidades recomendadas de EPA y DHA, y establecer si los nanoliposomas, confieren una estabilidad mayor a los mencionados ácidos grasos, influyendo así en sus índices nutricionales. Para ello, se realizaron formulaciones de yogur utilizando leche parcialmente descremada ultra pasteurizada (2 % de grasa total), cultivo comercial iniciador (S. thermophilus y L. delbrueckii subsp. bulgaricus) y aceite marino rico en EPA DHA. Las formulaciones se desarrollaron para contener aceite libre o en nanoliposomas con concentraciones entre 100- 125; 200-250 -y 450-500 mg/ 200 ml de yogur (Fórmulas bajo protección). Los nanoliposomas en base a lecitina de soja, se realizaron bajo el marco de un acuerdo entre el Instituto Tecnología de Alimentos del INTA y una empresa privada (desarrollo protegido). Se tomaron muestras a los 0, 14, y 28 días, las cuales fueron almacenadas a 4 ºC. Se cuantificó el perfil de ácidos grasos mediante cromatografía gaseosa (CG) y se realizaron los cálculos para determinar índices nutricionales; Índice Aterogénico (AI), Índice Trombogénico (TI), Índice promotor de salud (HPI) y Relación Hipocolesterolémica / Hipercolesterolémica (HH). Los datos obtenidos por CG mostraron que las formulaciones de yogur con aceite libre presentaron una pérdida aproximada del 81% de estos 3 PUFA a los 28 días de almacenamiento a 4 ºC, mientras que no se registró tal caída en ninguno de los yogures desarrollados que contenían nanoliposomas, evaluados hasta los 28 días de almacenamiento. En el caso de los índices AI, TI, HPI y HH para las formulaciones nanoliposomales, se obtuvieron valores de 3.05, 1.46, 0.36 y 1.02, mientras que para las formulaciones libres los valores fueron 3.50, 1.70, 0.23 y 0.86, respectivamente, observándose así una mejor performance para las formulaciones nanoliposomales. Estos resultados indicaron que el yogur constituye una matriz apta para ser utilizada como vehículo para incorporar 3 PUFA benéficos para la salud, y si ellos se encuentran en nanoliposomas, su estabilidad se mantiene estable, asegurando así la cantidad y propiedad del bioactivo hasta el final de la vida útil del alimento.Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos (ITA)Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Universidad de Buenos Aires (UBA). Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina.Fil: Pega, Juan Franco. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Pega, Juan Franco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). CIA. Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos (ITA); Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Universidad de Morón. Escuela Superior de Ingeniería, Informática y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas de Argentina (CONICET); Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Universidad de Morón. Escuela Superior de Ingeniería, Informática y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Universidad de Morón. Escuela Superior de Agronomía y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Nanni, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación de Agroindustria; Argentina

Análisis y tipificación de carne de Búfalo mediante la amplificación por qPCR. Comunicación.

PosterMeat is one of the main food sources due to its protein content. In recent years, consumers, both nationally and internationally, have shown interest in alternative sources to beef (e.g. ostrich, Kobe beef, buffalo, etc.). In this sense, the production of buffalo meat (Bubalus bubalis) is under development in Argentina, and provides an alternative to meat production in regions that are not suitable for cattle. The objective of this work was to evaluate the suitability of the real-time PCR (qPCR) methodology to differentiate both species (vaccine and bubalin) using the primers designed for the Bos taurus species. The results obtained allowed us to determine that the primers designed for Bos taurus were capable of differentially amplifying pure bovine and bubaline DNA samples. Although there is similarity in sequences presented by both species of the bovine subfamily, it was possible, based on the Tm of both pure samples, to differentiate both types of meat, analytically.La carne es una de las principales fuentes de alimentación por su aporte de proteína. En los últimos años, los consumidores, tanto a nivel nacional como internacional, han presentado interés en fuentes alternativas a la de carne vacuna (ej. avestruz, buey de Kobe, búfalo, etc.). En este sentido, la producción de carne de búfalo (Bubalus bubalis), se encuentra en desarrollo en Argentina, y proporciona una alternativa a la producción de carne en regiones que no son adecuadas para el ganado vacuno. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la aptitud de la metodología de PCR entiempo real (qPCR), para diferenciar ambas especies (vacuna y bubalina) utilizando los primers diseñados para la especie Bos taurus. Los resultados obtenidos permitieron determinar que los primers diseñados para Bos taurus, fueron capaces de amplificar diferencialmente muestras de ADN puras de vacuno y bubalino. Si bien existe similitud de secuencias que presentan ambas especies de la subfamilia bovina, se logró, a partir de las Tm de ambas muestras puras diferenciar ambos tipos de carne, de manera analítica.Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos (ITA)Fil: Guidi, Silvina Mabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Universidad de Morón. Escuela Superior de Agronomía y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Universidad de Morón. Escuela Superior de Ingeniería, Informática y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina.Fil: Cadoppi, Carlos Armando. Fuska S.A. La Filiberta. Entre Ríos; Argentina.Fil: Nanni, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación de Agroindustria; Argentina.Fil: Cunzolo, Sebastián Abel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Cunzolo, Sebastián Abel. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Cunzolo, Sebastián Abel. Universidad de Morón. Escuela Superior de Ingeniería, Informática y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Cunzolo, Sebastián Abel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina

Treatment with corn oil improves neurogenesis and cognitive performance in the Ts65Dn mouse model of Down syndrome

Individuals with Down syndrome (DS), a genetic condition due to triplication of Chromosome 21, are characterized by intellectual disability that worsens with age. Since impairment of neurogenesis and dendritic maturation are very likely key determinants of intellectual disability in DS, interventions targeted to these defects may translate into a behavioral benefit. While most of the neurogenesis enhancers tested so far in DS mouse models may pose some caveats due to possible side effects, substances naturally present in the human diet may be regarded as therapeutic tools with a high translational impact. Linoleic acid and oleic acid are major constituents of corn oil that positively affect neurogenesis and neuron maturation. Based on these premises, the goal of the current study was to establish whether treatment with corn oil improves hippocampal neurogenesis and hippocampus-dependent memory in the Ts65Dn model of DS. Four-month-old Ts65Dn and euploid mice were treated with saline or corn oil for 30 days. Evaluation of behavior at the end of treatment showed that Ts65Dn mice treated with corn oil underwent a large improvement in hippocampus-dependent learning and memory. Evaluation of neurogenesis and dendritogenesis showed that in treated Ts65Dn mice the number of new granule cells of the hippocampal dentate gyrus and their dendritic pattern became similar to those of euploid mice. In addition, treated Ts65Dn mice underwent an increase in body and brain weight. This study shows for the first time that fatty acids have a positive impact on the brain of the Ts65Dn mouse model of DS. These results suggest that a diet that is rich in fatty acids may exert beneficial effects on cognitive performance in individuals with DS without causing adverse effects

Event reconstruction for KM3NeT/ORCA using convolutional neural networks

The KM3NeT research infrastructure is currently under construction at two locations in the Mediterranean Sea. The KM3NeT/ORCA water-Cherenkov neutrino detector off the French coast will instrument several megatons of seawater with photosensors. Its main objective is the determination of the neutrino mass ordering. This work aims at demonstrating the general applicability of deep convolutional neural networks to neutrino telescopes, using simulated datasets for the KM3NeT/ORCA detector as an example. To this end, the networks are employed to achieve reconstruction and classification tasks that constitute an alternative to the analysis pipeline presented for KM3NeT/ORCA in the KM3NeT Letter of Intent. They are used to infer event reconstruction estimates for the energy, the direction, and the interaction point of incident neutrinos. The spatial distribution of Cherenkov light generated by charged particles induced in neutrino interactions is classified as shower- or track-like, and the main background processes associated with the detection of atmospheric neutrinos are recognized. Performance comparisons to machine-learning classification and maximum-likelihood reconstruction algorithms previously developed for KM3NeT/ORCA are provided. It is shown that this application of deep convolutional neural networks to simulated datasets for a large-volume neutrino telescope yields competitive reconstruction results and performance improvements with respect to classical approaches

Event reconstruction for KM3NeT/ORCA using convolutional neural networks

The KM3NeT research infrastructure is currently under construction at two locations in the Mediterranean Sea. The KM3NeT/ORCA water-Cherenkov neutrino de tector off the French coast will instrument several megatons of seawater with photosensors. Its main objective is the determination of the neutrino mass ordering. This work aims at demonstrating the general applicability of deep convolutional neural networks to neutrino telescopes, using simulated datasets for the KM3NeT/ORCA detector as an example. To this end, the networks are employed to achieve reconstruction and classification tasks that constitute an alternative to the analysis pipeline presented for KM3NeT/ORCA in the KM3NeT Letter of Intent. They are used to infer event reconstruction estimates for the energy, the direction, and the interaction point of incident neutrinos. The spatial distribution of Cherenkov light generated by charged particles induced in neutrino interactions is classified as shower-or track-like, and the main background processes associated with the detection of atmospheric neutrinos are recognized. Performance comparisons to machine-learning classification and maximum-likelihood reconstruction algorithms previously developed for KM3NeT/ORCA are provided. It is shown that this application of deep convolutional neural networks to simulated datasets for a large-volume neutrino telescope yields competitive reconstruction results and performance improvements with respect to classical approaches