A Novel Pathway of TEF Regulation Mediated by MicroRNA-125b Contributes to the Control of Actin Distribution and Cell Shape in Fibroblasts

BACKGROUND: Thyrotroph embryonic factor (TEF), a member of the PAR bZIP family of transcriptional regulators, has been involved in neurotransmitter homeostasis, amino acid metabolism, and regulation of apoptotic proteins. In spite of its relevance, nothing is known about the regulation of TEF. PRINCIPAL FINDINGS: p53-dependent genotoxic agents have been shown to be much more harmful for PAR bZIP-deficient mice as compared to wild type animals. Here we demonstrate that TEF expression is controlled by p53 through upregulation of microRNA-125b, as determined by both regulating the activity of p53 and transfecting cells with microRNA-125b precursors. We also describe a novel role for TEF in controlling actin distribution and cell shape in mouse fibroblasts. Lack of TEF is accompanied by dramatic increase of cell area and decrease of elongation (bipolarity) and dispersion (multipolarity). Staining of actin cytoskeleton also showed that TEF (-/-) cells are characterized by appearance of circumferential actin bundles and disappearance of straight fibers. Interestingly, transfection of TEF (-/-) fibroblasts with TEF induced a wild type-like phenotype. Consistent with our previous findings, transfection of wild type fibroblasts with miR-125b promoted a TEF (-/-)-like phenotype, and a similar but weaker effect was observed following exogenous expression of p53. CONCLUSIONS/SIGNIFICANCE: These findings provide the first evidence of TEF regulation, through a miR-125b-mediated pathway, and describes a novel role of TEF in the maintenance of cell shape in fibroblasts

Single-dose administration and the influence of the timing of the booster dose on immunogenicity and efficacy of ChAdOx1 nCoV-19 (AZD1222) vaccine: a pooled analysis of four randomised trials.

BACKGROUND: The ChAdOx1 nCoV-19 (AZD1222) vaccine has been approved for emergency use by the UK regulatory authority, Medicines and Healthcare products Regulatory Agency, with a regimen of two standard doses given with an interval of 4-12 weeks. The planned roll-out in the UK will involve vaccinating people in high-risk categories with their first dose immediately, and delivering the second dose 12 weeks later. Here, we provide both a further prespecified pooled analysis of trials of ChAdOx1 nCoV-19 and exploratory analyses of the impact on immunogenicity and efficacy of extending the interval between priming and booster doses. In addition, we show the immunogenicity and protection afforded by the first dose, before a booster dose has been offered. METHODS: We present data from three single-blind randomised controlled trials-one phase 1/2 study in the UK (COV001), one phase 2/3 study in the UK (COV002), and a phase 3 study in Brazil (COV003)-and one double-blind phase 1/2 study in South Africa (COV005). As previously described, individuals 18 years and older were randomly assigned 1:1 to receive two standard doses of ChAdOx1 nCoV-19 (5 × 1010 viral particles) or a control vaccine or saline placebo. In the UK trial, a subset of participants received a lower dose (2·2 × 1010 viral particles) of the ChAdOx1 nCoV-19 for the first dose. The primary outcome was virologically confirmed symptomatic COVID-19 disease, defined as a nucleic acid amplification test (NAAT)-positive swab combined with at least one qualifying symptom (fever ≥37·8°C, cough, shortness of breath, or anosmia or ageusia) more than 14 days after the second dose. Secondary efficacy analyses included cases occuring at least 22 days after the first dose. Antibody responses measured by immunoassay and by pseudovirus neutralisation were exploratory outcomes. All cases of COVID-19 with a NAAT-positive swab were adjudicated for inclusion in the analysis by a masked independent endpoint review committee. The primary analysis included all participants who were SARS-CoV-2 N protein seronegative at baseline, had had at least 14 days of follow-up after the second dose, and had no evidence of previous SARS-CoV-2 infection from NAAT swabs. Safety was assessed in all participants who received at least one dose. The four trials are registered at ISRCTN89951424 (COV003) and ClinicalTrials.gov, NCT04324606 (COV001), NCT04400838 (COV002), and NCT04444674 (COV005). FINDINGS: Between April 23 and Dec 6, 2020, 24 422 participants were recruited and vaccinated across the four studies, of whom 17 178 were included in the primary analysis (8597 receiving ChAdOx1 nCoV-19 and 8581 receiving control vaccine). The data cutoff for these analyses was Dec 7, 2020. 332 NAAT-positive infections met the primary endpoint of symptomatic infection more than 14 days after the second dose. Overall vaccine efficacy more than 14 days after the second dose was 66·7% (95% CI 57·4-74·0), with 84 (1·0%) cases in the 8597 participants in the ChAdOx1 nCoV-19 group and 248 (2·9%) in the 8581 participants in the control group. There were no hospital admissions for COVID-19 in the ChAdOx1 nCoV-19 group after the initial 21-day exclusion period, and 15 in the control group. 108 (0·9%) of 12 282 participants in the ChAdOx1 nCoV-19 group and 127 (1·1%) of 11 962 participants in the control group had serious adverse events. There were seven deaths considered unrelated to vaccination (two in the ChAdOx1 nCov-19 group and five in the control group), including one COVID-19-related death in one participant in the control group. Exploratory analyses showed that vaccine efficacy after a single standard dose of vaccine from day 22 to day 90 after vaccination was 76·0% (59·3-85·9). Our modelling analysis indicated that protection did not wane during this initial 3-month period. Similarly, antibody levels were maintained during this period with minimal waning by day 90 (geometric mean ratio [GMR] 0·66 [95% CI 0·59-0·74]). In the participants who received two standard doses, after the second dose, efficacy was higher in those with a longer prime-boost interval (vaccine efficacy 81·3% [95% CI 60·3-91·2] at ≥12 weeks) than in those with a short interval (vaccine efficacy 55·1% [33·0-69·9] at <6 weeks). These observations are supported by immunogenicity data that showed binding antibody responses more than two-fold higher after an interval of 12 or more weeks compared with an interval of less than 6 weeks in those who were aged 18-55 years (GMR 2·32 [2·01-2·68]). INTERPRETATION: The results of this primary analysis of two doses of ChAdOx1 nCoV-19 were consistent with those seen in the interim analysis of the trials and confirm that the vaccine is efficacious, with results varying by dose interval in exploratory analyses. A 3-month dose interval might have advantages over a programme with a short dose interval for roll-out of a pandemic vaccine to protect the largest number of individuals in the population as early as possible when supplies are scarce, while also improving protection after receiving a second dose. FUNDING: UK Research and Innovation, National Institutes of Health Research (NIHR), The Coalition for Epidemic Preparedness Innovations, the Bill & Melinda Gates Foundation, the Lemann Foundation, Rede D'Or, the Brava and Telles Foundation, NIHR Oxford Biomedical Research Centre, Thames Valley and South Midland's NIHR Clinical Research Network, and AstraZeneca

Contribution à l’amélioration de la germination chez une endémique forestière du Maroc, le cyprès de l’Atlas

The Cupressaceae Cupressus atlantica (Gaussen 1950), which shows a unique biological diversity, plays an important socio-economic and ecolog-La cupressacée à Cupressus atlantica, qui abrite une diversité biologique originale, joue un rôle socio-économique et écologique important. Cependant, ces formations, souvent présteppiques, sont soumises à des pressions croissantes d’origine principalement antropique. En outre, d’autres facteurs tels que la sécheresse, l’absence de régénération ou encore les ravageurs des cônes et des graines, menacent à terme l’avenir du cyprès de l’Atlas. Actuellement, les services forestiers marocains adoptent des orientations qui consistent à utiliser de plus en plus des espèces autochtones, notamment le Cyprès atlasique, dans les programmes de reboisement. Ainsi, il est très important de maîtriser l’itinéraire technique de production des plants de qualité. Cela nécessite une intensification des efforts en matière de recherche pour améliorer les connaissances des différentes étapes de ce processus, depuis la collecte des semences jusqu’à l’acclimatation des plants en passant par le stockage et la germination des graines. La présente étude vise à apporter une contribution concernant le comportement germinatif de ce conifère. En premier lieu, plusieurs traitements de prégermination (traitement chimique, traitement par l’eau à différentes températures, traitement mécanique qui consiste à frotter les graines avec du papier à sable) ont été expérimentés afin d’améliorer la germination par la levée de la dormance des graines. Les résultats relatifs à ces prétraitements ont montré que ces derniers jouent un rôle primordial dans la levée de la dormance et améliorent par conséquence la germination. En effet, les taux de germination les plus élevés 67,77 % et 75,55 % ont été enregistrés respectivement au niveau des graines traitées avec de l’eau chaude (60 oC) et par la scarification mécanique. Le traitement avec de l’acide sulfurique concentré a conduit à des taux de germination très faibles voire nuls, contrairement à ce qui a été observé chez d’autres espèces forestières et à ce qui avait été précédemment reporté chez le Cyprès atlasique. C. atlantica possèdent une dormance physique attribuée au tégument dur, qui peut entraver la régénération naturelle. La scarification mécanique et l’eau chaude (60 oC) sont les traitements les plus efficaces pour améliorer la germination des graines du C. atlantica. Le stress hydrique et le stress salin ont un effet inhibiteur sur la germination des graines du cyprès de l’Atlas. Ces résultats, concernant la germination, premier maillon de l’opération de reboisement, peuvent contribuer à la restauration des espaces dégradés et la réhabilitation des écosystèmes aride et semi-aride.Arjouni Y., El Alaoui El Fels Mounia, El Mercht Saïd, Abou Sy Amadou, El Wahidi Farid, Romane Abderrahmane, Roques Alain, Yart Annie. Contribution à l’amélioration de la germination chez une endémique forestière du Maroc, le cyprès de l’Atlas. In: Ecologia mediterranea, tome 39 n°1, 2013. Actes du IVe Colloque international sur le Genévrier thurifère. 5-8 octobre 2011 Mont-Dauphin et Saint-Crépin (Hautes-Alpes, France) pp. 201-208

Contribution à l’amélioration de la germination chez une endémique forestière du Maroc, le cyprès de l’Atlas

The Cupressaceae Cupressus atlantica (Gaussen 1950), which shows a unique biological diversity, plays an important socio-economic and ecolog-La cupressacée à Cupressus atlantica, qui abrite une diversité biologique originale, joue un rôle socio-économique et écologique important. Cependant, ces formations, souvent présteppiques, sont soumises à des pressions croissantes d’origine principalement antropique. En outre, d’autres facteurs tels que la sécheresse, l’absence de régénération ou encore les ravageurs des cônes et des graines, menacent à terme l’avenir du cyprès de l’Atlas. Actuellement, les services forestiers marocains adoptent des orientations qui consistent à utiliser de plus en plus des espèces autochtones, notamment le Cyprès atlasique, dans les programmes de reboisement. Ainsi, il est très important de maîtriser l’itinéraire technique de production des plants de qualité. Cela nécessite une intensification des efforts en matière de recherche pour améliorer les connaissances des différentes étapes de ce processus, depuis la collecte des semences jusqu’à l’acclimatation des plants en passant par le stockage et la germination des graines. La présente étude vise à apporter une contribution concernant le comportement germinatif de ce conifère. En premier lieu, plusieurs traitements de prégermination (traitement chimique, traitement par l’eau à différentes températures, traitement mécanique qui consiste à frotter les graines avec du papier à sable) ont été expérimentés afin d’améliorer la germination par la levée de la dormance des graines. Les résultats relatifs à ces prétraitements ont montré que ces derniers jouent un rôle primordial dans la levée de la dormance et améliorent par conséquence la germination. En effet, les taux de germination les plus élevés 67,77 % et 75,55 % ont été enregistrés respectivement au niveau des graines traitées avec de l’eau chaude (60 oC) et par la scarification mécanique. Le traitement avec de l’acide sulfurique concentré a conduit à des taux de germination très faibles voire nuls, contrairement à ce qui a été observé chez d’autres espèces forestières et à ce qui avait été précédemment reporté chez le Cyprès atlasique. C. atlantica possèdent une dormance physique attribuée au tégument dur, qui peut entraver la régénération naturelle. La scarification mécanique et l’eau chaude (60 oC) sont les traitements les plus efficaces pour améliorer la germination des graines du C. atlantica. Le stress hydrique et le stress salin ont un effet inhibiteur sur la germination des graines du cyprès de l’Atlas. Ces résultats, concernant la germination, premier maillon de l’opération de reboisement, peuvent contribuer à la restauration des espaces dégradés et la réhabilitation des écosystèmes aride et semi-aride.Arjouni Y., El Alaoui El Fels Mounia, El Mercht Saïd, Abou Sy Amadou, El Wahidi Farid, Romane Abderrahmane, Roques Alain, Yart Annie. Contribution à l’amélioration de la germination chez une endémique forestière du Maroc, le cyprès de l’Atlas. In: Ecologia mediterranea, tome 39 n°1, 2013. Actes du IVe Colloque international sur le Genévrier thurifère. 5-8 octobre 2011 Mont-Dauphin et Saint-Crépin (Hautes-Alpes, France) pp. 201-208