A case report of cutaneous mucormycosis of the hand after minor trauma in a patient with acute myeloid leukaemia

Background: Mucormycosis is a rare but life-threatening infection, caused by fungi of the Mucorales order, which can be found in soil, rotting leaves or on animals. Through characteristic angioinvasive growth, infections with mucor spores can occur as a pulmonary, rhinocerebral or cutaneous form. Infections mainly affect immunosuppressed patients with a history of uncontrolled diabetes or haematological malignancies, among others. Treatment is multimodal and requires an immediate combination of intravenous amphotericin B therapy and serial surgical debridements. Only a limited number of cases of cutaneous mucormycosis of the hand have been documented and described previously. Case presentation: We report a cutaneous mucormycosis in an elderly patient with a therapy-resistant acute myeloid leukaemia after a minor trauma on his right hand, sustained whilst gardening. The fungal infection was treated with serial radical debridements, vacuum-assisted negative-pressure wound closure technique and intravenous antifungals. Despite successful eradication of the fungal infection, a palliative open wound care concept was implemented during the terminal course of the patient's leukaemia. Conclusions: Cutaneous mucormycosis is a rare but fulminant fungal infection mostly affecting immunosuppressed patients. Survival is possible when diagnosed and treated early, yet mortality rates remain high

Die Funktion der viralen Phospholipase A2 während der Infektion des Adeno-assoziierten Virus 2

Das Adeno-assoziierte Virus (AAV), ein Vertreter der Parvoviridae, wurde zu einem sehr erfolgreichen Vektorsystem entwickelt. Einen wichtigen Beitrag hierzu hat die Verfügbarkeit der verschiedenen Serotypen geleistet. Zwei dieser Serotypen, AAV2 und AAV8, wurden in dieser Arbeit näher untersucht. Beide Serotypen akkumulieren nach intravenöser Gabe in der Leber, aber nur AAV8 vermittelt eine effiziente Transgenexpression. In meiner Arbeit konnte ich deutlich zeigen, dass AAV2 im Gegensatz zu AAV8 in Hepatozyten einen intrazellulären Block erfährt. So wurde AAV2 zwar signifikant effizienter als AAV8 in humane (HepG2) und murine (H2.35) Hepatozyten aufgenommen, aber im Vergleich zu AAV8 waren deutlich mehr intrazelluläre AAV2-Partikel nötig, um in Hepatozyten eine Genexpression zu erreichen. Die Identifizierung des limitierenden Schritts könnte durch die Visualisierung der Transduktion erleichtert werden. Bis zu meiner Arbeit waren mikroskopische Analysen für AAV8 jedoch nicht möglich, da keine Antikörper zur Verfügung stehen. Um diese Limitation zu überwinden, markierte ich das AAV-Kapsid genetisch mit Fluoreszenzproteinen. Hierzu verwendete ich GFP, CFP, DsRed und mCherry, die ich genetisch an den N-Terminus des VP2 fusionierte. Bei der Vektorherstellung werden die Fusionsproteine dann in das Kapsid eingebaut. Die Vektorpräparationen wiesen genomische Titer auf, die mit denen von nicht-markierten Viren vergleichbar waren und konnten erfolgreich zur Visualisierung verwendet werden. Durch diese technische Entwicklung können - wie hier gezeigt - nun auch Ko-Transduktionen mit genetisch-markierten AAV2 und AAV8 Vektoren durchgeführt werden. Im zweiten Teil meiner Arbeit konnte ich die Rolle der Phospholipase A2 (PLA2)-Domäne, die sich in der unique region des VP1 befindet, aufklären. Eine Mutation im katalytischen Zentrum der PLA2 führt zu einer signifikanten Abnahme des infektiösen Titers (Girod et al., 2002). Diese Abnahme begründet sich nicht in einer ineffizienten zellulären Aufnahme, wie ich durch quantitative Bestimmung der intrazellulären Partikel zeigen konnte. Auch werden sowohl die Mutante als auch das AAV2 effizient in die perinukleäre Region transportiert. Da der intrazelluläre Transport von AAV innerhalb von Endosomen erfolgt und späte Endosomen in der perinuklären Region zu detektieren sind, könnte die Phospholipaseaktivität an der Freisetzung der viralen Partikel aus den Endosomen und/oder am Kerneintritt beteiligt sein. Meine Ergebnisse sprachen gegen letztere Hypothese. Dagegen konnte ich zeigen, dass die Inhibierung des proteasomalen Abbaus sowie wie Verwendung der endoosmolytischen Aktivität des Adenovirus die Transduktionseffizienz der Mutante deutlich steigerte. Daraus lässt sich ableiten, dass die Mutante innerhalb von Endosomen zurückgehalten wird und dass die PLA2 Aktivität für die Freisetzung von AAV aus den Endosomen benötigt wird

The role of glutathionperoxidase 4 (GPX4) in hematopoiesis and leukemia

Redox systems are a major tool for the organism to deal with oxidative stress and the balance of these systems is crucial for life. The glutathione (GSH) dependent system consists of glutathione, glutathione peroxidases and glutathione reductases and is critically involved in the maintenance of intracellular redox balance. In addition, the glutathione dependent system is a promising target for anti-cancer therapy. In particular, glutathione peroxidase 4, an enzyme that protects cell membranes from lipidperoxidation, plays a major role in proliferation, growth and development as Gpx4 disruption leads to growth arrest and embryonic death in a mouse model. GPX4 function plays a regulative role in several kinds of cancer and is highly expressed in leukemias, especially in patients carrying the AML1-ETO fusion gene. In this work, we delineated the role and expression of GPX4 in hematopoiesis and leukemia and investigated its role as potential target for anti-cancer therapy. In a state of non-disease glutathionperoxidase 4 is highly expressed in all hematopoietic lineages with the highest expression in the mouse erythroid lineage and is upregulated in the stem cell compartment in human bone marrow. This suggests that GPX4 is involved as one of the major antioxidative mechanisms in hematopoiesis. In the state of leukemia we could prove an upregulation of the gene in AML1-ETO patients compared to healthy individuals, which was shown by microarray data before. The present study thus could show that a knock-down of GPX4 in leukemic cell lines carrying the AML1-ETO fusion gene led to a strong anti-proliferative effect but no effect on the clonogenicity of the cells was observed. In addition, the knockdown of only this one antioxidative mechanism was sufficient to increase ROS levels in those cell lines. Apoptosis signaling was not involved in these processes. These data shed new light on the role of GPX4 in normal and malignant hematopoiesis and encourage further studies testing the therapeutic efficacy of GPX4 blockage in human AML.Redox Systeme sind ein Hauptwerkzeug des Organismus um oxidativen Stress zu bewältigen und die Balance dieser Systeme ist lebenswichtig. Das Glutathion abhängige System besteht aus Glutathion, Glutathion Peroxidasen und Glutathion Reductasen und spielt eine wichtige Rolle bei der Aufrechterhaltung des intrazellulären Redox Gleichgewichts. Außerdem scheint eine Beeinflussung des Glutathion abhängigen Systems ein vielversprechender Ansatz in der Tumortherapie zu sein. Vor allem Glutathion Peroxidase 4, ein Enzym das Zellmembranen vor Lipidperoxidation schützt spielt eine wichtige Rolle bei Tumorproliferation, -wachstum und -entwicklung. Ein knockdown des Gens führt zu Wachstumsstop und embryonalem Tod im Maus Modell. Es ist bekannt dass GPX4 eine regulative Rolle bei verschiedenen Krebsarten inne hat und dass das Gen in Leukämien hoch exprimiert wird. Dies gilt vor allem für Patienten die Träger des AML1-ETO Fusionsgens sind. In dieser Arbeit, „The role of gutathionperoxidase 4 (GPX4) in hematopoiesis and leukemogensis“ zeigen wir die Bedeutung der Glutathionperoxidase 4 in hämatopoetischen Zellen und Leukämien und untersuchen die Rolle dieses speziellen Enzyms als Angriffspunkt für die Krebstherapie. In gesundem Knochenmark ist Glutathionperoxidase 4 in allen hämatopoetischen Linien hoch exprimiert. Die höchste Expression im murinen System findet sich dabei in der erythroiden Linie. Im humanen Knochenmark ist das Gen ist im Stammzell Kompartiment hochreguliert. Dies legt den Schluss nahe, dass GPX4 als ein bedeutender antioxidativer Mechanismus an der Hämatopoese beteiligt ist. In Leukämien konnten wir eine Hochregulierung des Gens in AML1-ETO Patienten verglichen mit mononuklearen Zellen gesunder Menschen bestätigen. Dies wurde zuvor im Mikroarray gezeigt. Die vorliegende Studie zeigt außerdem, dass ein knock-down von GPX4 in Leukämiezellinien die das AML1-ETO Fusionsgen tragen einen starken antiproliferativen Effekt hat. Die Klonogenität der Zellen wurde dabei nicht beeinflusst. Außerdem ist ein knockdown dieses einzelnen antioxidativen Enzyms ausreichend um den oxidativen Stress, das ROS Level in den Zellen zu erhöhen. Apoptose spielte hierbei keine Rolle. Diese Daten stellen die Rolle von GPX4 in der normalen und malignen Hämatopoese in einem neuen Licht dar und fordern weitere Studien die den therapeutischen Effekt einer Blockade von GPX4 in humanen AML erforschen.Deutsche Übersetzung des Titels: Die Bedeutung der Glutathionperoxidase 4 (GPX4) in der Hämatopoese und bei Leukämi

The New Left and its Implications for Strategy in the Seventies

Serious analysis of current history is never an easy task. It is doubly difficult in this period of accelerated change in which today\u27s crises often become merely footnotes in tomorrow\u27s history. However, this paper attempts rather brazenly to judge the place in history of the current generational revolt which has, within the past few years, become a major, and often distorted, feature in the media and a preoccupation of the public generally

Native Plants of the Northern Great Plains: Ethylene Induction of Asteraceae Seed Germination

As part of our efforts to develop alternative agricultural systems utilizing plants native to the Northern Great Plains, methods for overcoming seed dormancy are being tested. Seeds of Achillea millefolium L., Antennaria neglecta Greene, Chrysopsis villosa (Pursh) Nutt., Echinacea angustifolia DC, Helianthus maximilianii Schrad, Liatris punctata Hook., Ratibida columnifera (Nutt.) Woot. & Standl., and Townsendia exscapa (Richards.) Porter were collected from several populations within the state of South Dakota. Initial germination tests showed varying degrees of seed dormancy between populations and species. Liatris, Achillea, Echinacea and Ratibida showed germination rates of ~10 to 20 %, while the other four species showed almost no germination without extensive periods of stratification. Seed source and seed maturity have been shown to significantly affect germination rates. Therefore, only well developed seeds (relatively high dry weight) taken from flower heads that readily released the seeds, were used for this experiment. To improve germination without months of stratification, the seeds were treated using the ethephon protocol developed for Echinacea (Feghahati and Reese, 1994). Briefly, the seeds were exposed to two weeks of continuous light (40 W cool white fluorescent tubes), in the cold (5 C), and in the presence of the phytohormone ethylene, applied as ethephon (1mM). This treatment has been shown to eliminate the need for months of stratification. Germination was significantly increased for all seed sources (with final germination ranging from ~30 to 85%) except for those of Liatris and Ratibida, which showed no improvement. Tetrazolium tests were conducted to allow calculation of germination rates of viable seeds. The results indicated that the variability in the increased rates of germination, in response to the ethephon treatment, reflected the variability in seed viability and that germination of live seeds ranged between 70- 85%. Furthermore, the lack of response by Liatris and Ratibida seeds to the treatment reflected the fact that most of the viable seeds germinated without any need of stratification or ethephon treatment. Factors affecting seedling emergence from soil were also examined during these experiments. Preliminary observation suggest that many of these factors may need study to ensure the success of agronomic protocols for successful plant production

Wundheilungsmodulation im vorderen Augenabschnitt: experimentelle und klinische Betrachtungen

Die vorliegende Arbeit betrachtet Aspekte der Wundheilungsmodulation im vorderen Augenabschnitt. Dabei werden drei ophthalmologische Anwendungsfelder mit hoher klinischer Relevanz betrachtet, welche alle mit fibrotischen Prozessen assoziiert sind. Der erste Themenkomplex beschreibt induzierte Wundheilungsmechanismen nach fistulierender Glaukomchirurgie. Im zweiten Themenbereich der Schrift werden Wundheilungsmechanismen der Kornea und im abschließenden dritten Themenfeld postoperative Wundheilungsprozesse nach durchgeführter Kataraktchirurgie näher betrachtet.The present work considers aspects of wound healing modulation in the anterior segment of the eye. Three ophthalmological fields of application with high clinical relevance are considered, all of which are associated with fibrotic processes. The first topic describes induced wound healing mechanisms after fistulating glaucoma surgery. In the second topic, wound healing mechanisms of the cornea are described, followed by postoperative wound healing mechanisms after cataract surgery in the third topic