The Actual Conditions and Technical Problems of Dairy Farming in Setana District, Hokkaido Prefecture

わが国の酪農は,多頭化の中で牛乳生産過剰,消費の停滞,生産費の高騰による負債の累積,濃厚飼料多給やその他の飼育管理技術の不確立による疾病の発生など,多くの問題をかかえている. 北海道は,わが国で最も多頭化の進んだ地域であり,草地酪農が展開されている地域である. そこで,本研究は,北海道の酪農の実態を調査し,その結果を通して酪農技術の問題点を明らかにするために行なわれた. 調査農家は,北海道の中でも比較的歴史が浅く,地域的に本州と似通った道南の瀬棚地区の酪農家で,無作為に選択された飼育規模の異なる6戸である. 調査表に基いて直接聞き取りによって調査が行なわれた. 調査農家をアルファベット順に表わすと,飼育頭数は成牛換算でA：64,B：26,C：25,D：22,E：12,F：7であった. 成牛換算1頭当りの飼料作付面積(a)はA：64,B：65,C：72,D：92,E：62F：96であった. 山林原野の酪農への利用は行なわれていなかった. F以外の5戸の農家ではサイレージ用にデントコーンを,また3農家(A,B,C)ではサイレージ用の牧草を栽培していた. 飼育形態はいずれの農家も夏期放牧,冬期舎飼いで,牛舎での管理方式はAではフリーストールバーン方式,他の5戸ではスタンチョン方式であった. 各農家とも,維持飼料と牛乳生産飼料を区別し,いわゆる｢2本立て｣給与法を採用していたが,基礎飼料不足により,この方法は十分には実行されていなかった. いずれの農家も多量の濃厚飼料を購入しており,濃厚飼料多給農家では繁殖障害の発生が高かった. 各農家の成牛換算年平均乳量(千㎏)は,A：5.2,B：6.6,C：5.4,D：5.1,E：3.7,F：4.8であった. 駄牛淘汰は一定の基準を設けて行なっていたが,B,C以外の農家では十分実行されていなかった. いずれの農家も,搾乳施設や牧草の栽培収穫用の機械類の大部分を所有し,高い減価償却費と,高い負債をかかえていた. Eを除き飼育規模の大きい農家ほど比較的高い純益を得ていた. 以上より,調査地区の酪農技術の問題点として,(1)飼料生産技術の不確立から生ずる良質飼料の不足,(2)飼育管理技術の低水準,(3)駄牛淘汰の不徹底,(4)過剰の設備投資による多額の負債の累積が指摘された

簡便な成熟ブタ膵内分泌細胞分離法の検討

膵細胞移植に際しては,大量かつ高純度の膵内分泌細胞を得ることが重要である.本研究では,リンパ球分離溶液を用いた簡便な成熟ブタ膵内分泌細胞の分離法を検討した.屠殺場より入手した成熟ブタ膵を細切・攪拌した後,細胞懸濁液を遠心分離し単離肝細胞を収集した.これをリンパ球分離溶液であモノポリ分離溶液(mono-poly resolving medium: MPRM)を用いて,膵内分泌細胞を外分泌細胞および血管内皮細胞,血液細胞などより分離・精製した.得られた膵分泌細胞数を計測し,形態学的・機能的観察を行った.その結果,(1)得られた膵内分泌細胞数:3.40±1.32×10^5/gのうち,ジチゾン染色陽性細胞数は2.81±1.09×10^5/gで,純度は82.6±2.5%であった.(2)免疫組織化学染色では60%がB細胞であった.(3)電顕では,典型的な分泌顆粒を有するB細胞,A細胞が認められた.(4)グルコース負荷試験では,分離直後のインスリン分泌能低下は1週間の培養で改善し,また40日間の培養中インスリンの分泌が保たれた.成熟ブタ膵内分泌細胞径は,ヒトリンパ球径に類似しており,MPRMを用いた1回の遠心操作で,膵分泌細胞は明瞭に分離され安定した細胞数が得られた.また,膵内分泌細胞の構成は膵島におけるそれと類似しており,超微細構造も保たれていた.以上より,MPRMを用いた膵内分泌細胞の分離法は,簡便で安定した細胞数が得られ,その形態・機能とも良好で有用な方法であると考えられた.Adult pig pancreatic endocrine cells were harvested by auto-digestion without added enzymes. The isolated, crude cells were purified by Mono-poly resolving medium (MPRM). The purity of the harvested cells was determined by dithizone staining and the number of pancreatic endocrine cells was counted. A large number of the cells were stained red with dithizone and showed high viability and a good insulin secretory response to glucose stimulation. The average number of cells purified by MPRM was 3.40 ± 1.32 × 10^5 cells/g pancreas and the number of dithizone-stained cells was 2.81 ± 1.09 × 10^5 cells/g pancreas. The insulin secretion from the pancreatic endocrine cells was maintained throughout a 40-day observation period and high glucose stimulation induced an increase in insulin secretion from the cultured cells. In the cells purified by MPRM, light and electron microscopic studies showed the cells to be typical pancreatic endocrine cells. The present purification method using MPRM allowed us to obtain quickly a large amount of adult pig pancreatic endocrine cells from the unpurified preparations. This is useful for transplantation and biochemical or biological studies of adult pig pancreatic endocrine cells

簡便な成熟ブタ膵内分泌細胞分離法の検討

膵細胞移植に際しては,大量かつ高純度の膵内分泌細胞を得ることが重要である.本研究では,リンパ球分離溶液を用いた簡便な成熟ブタ膵内分泌細胞の分離法を検討した.屠殺場より入手した成熟ブタ膵を細切・攪拌した後,細胞懸濁液を遠心分離し単離肝細胞を収集した.これをリンパ球分離溶液であモノポリ分離溶液(mono-poly resolving medium: MPRM)を用いて,膵内分泌細胞を外分泌細胞および血管内皮細胞,血液細胞などより分離・精製した.得られた膵分泌細胞数を計測し,形態学的・機能的観察を行った.その結果,(1)得られた膵内分泌細胞数:3.40±1.32×10^5/gのうち,ジチゾン染色陽性細胞数は2.81±1.09×10^5/gで,純度は82.6±2.5%であった.(2)免疫組織化学染色では60%がB細胞であった.(3)電顕では,典型的な分泌顆粒を有するB細胞,A細胞が認められた.(4)グルコース負荷試験では,分離直後のインスリン分泌能低下は1週間の培養で改善し,また40日間の培養中インスリンの分泌が保たれた.成熟ブタ膵内分泌細胞径は,ヒトリンパ球径に類似しており,MPRMを用いた1回の遠心操作で,膵分泌細胞は明瞭に分離され安定した細胞数が得られた.また,膵内分泌細胞の構成は膵島におけるそれと類似しており,超微細構造も保たれていた.以上より,MPRMを用いた膵内分泌細胞の分離法は,簡便で安定した細胞数が得られ,その形態・機能とも良好で有用な方法であると考えられた.Adult pig pancreatic endocrine cells were harvested by auto-digestion without added enzymes. The isolated, crude cells were purified by Mono-poly resolving medium (MPRM). The purity of the harvested cells was determined by dithizone staining and the number of pancreatic endocrine cells was counted. A large number of the cells were stained red with dithizone and showed high viability and a good insulin secretory response to glucose stimulation. The average number of cells purified by MPRM was 3.40 ± 1.32 × 10^5 cells/g pancreas and the number of dithizone-stained cells was 2.81 ± 1.09 × 10^5 cells/g pancreas. The insulin secretion from the pancreatic endocrine cells was maintained throughout a 40-day observation period and high glucose stimulation induced an increase in insulin secretion from the cultured cells. In the cells purified by MPRM, light and electron microscopic studies showed the cells to be typical pancreatic endocrine cells. The present purification method using MPRM allowed us to obtain quickly a large amount of adult pig pancreatic endocrine cells from the unpurified preparations. This is useful for transplantation and biochemical or biological studies of adult pig pancreatic endocrine cells