Evaluación in vitro de la sensibilidad de Malassezia spp. frente a antifúngicos de uso clínico

Fil: Rojas, Florencia Dinorah. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, Argentina.Las levaduras del género Malassezia han sido reconocidas como miembros de la microbiota cutánea normal del hombre y otros animales. Se caracterizan por ser lipofílicas y la mayoría de ellas lipo-dependientes, razón por la cual requieren de una fuente externa de ácidos grasos para su crecimiento. Estas levaduras son agente etiológico de pitiriasis versicolor y foliculitis por Malassezia y puede participar como agente secundario o exacerbador de otras afecciones dérmicas. Además han sido asociadas a infecciones sistémicas en pacientes inmunosuprimidos. Los métodos disponibles para determinar la sensibilidad antifúngica in vitro de las levaduras son aplicables solo a especies de Candida y Cryptococcus neoformans. Debido a los requerimientos nutricionales y condiciones de cultivos especiales de Malassezia sp., su estudio de sensibilidad antifúngica es complejo.\nEl objetivo de esta investigación fue determinar la sensibilidad antifúngica de aislados de Malassezia de origen clínico frente a antifúngicos de uso tópico y sistémico. Se estudiaron cepas de Malassezia depositadas en la colección de cultivos, aisladas de muestras clínicas de pacientes con afecciones dérmicas y sistémicas. La sensibilidad se determinó por las técnicas de microdilución en caldo y de difusión en agar. Para asegurar el crecimiento de estas levaduras, se modificó densidad del inóculo, temperatura y tiempo de incubación y se suplementó el medio base de cultivo. Se evaluaron fluconazol, ketoconazol, itraconazol, voriconazol, miconazol, anfotericina B y terbinafina. Para correlacionar ambos métodos, se aplicó análisis de regresión lineal y se determinó acuerdo categórico. Se procesaron un total de 120 aislados de Malassezia spp. Las modificaciones realizadas a la técnica permitieron el desarrollo de todas las especies estudiadas. Las CIM y los halos de inhibición pudieron ser leídos a las 72 h de incubación. En general, las levaduras fueron inhibidas a bajas concentraciones de ketoconazol, itraconazol y voriconazol. Las sensibilidades frente al fluconazol, el miconazol, la anfotericina B y la terbinafina resultaron ser más variables y se obtuvieron altas CIM, especialmente frente a M. furfur y M. globosa. Con respecto a la difusión, la mayor dispersión de los halos de inhibición se observó para fluconazol, voriconazol y miconazol. En cambio, frente al ketoconazol y el itraconazol se observó menor variabilidad de los resultados. El análisis de regresión lineal no pudo ser realizado para el itraconazol, el ketoconazol y la terbinafina porque no existió, en estos casos, relación lineal entre las variables CIM y halo de inhibición. La concordancia más elevada fue observada para el itraconazol y la más baja para la anfotericina B y el fluconazol.\nLas modificaciones realizadas a las metodologías de referencia permitieron el desarrollo de las especies de Malassezia y la obtención de valores de sensibilidad en iguales condiciones de densidad de inóculo, temperatura y tiempo de incubación. M. furfur, M. sympodialis y M. globosa mostraron perfiles de sensibilidad variables frente a los antifúngicos probados, M. furfur demostró ser la especie menos sensible y M. sympodialis la más sensible. Este comportamiento diferente observado entre las especies de mayor prevalencia, enfatiza la necesidad de realizar la identificación de especies. El ketoconazol, el itraconazol y el voriconazol fueron las drogas más efectivas, observándose poca variabilidad de la sensibilidad intra-especie. Sin embargo las sensibilidades fueron muy variables frente al fluconazol, miconazol, anfotericina B y terbinafina, y esto es importante considerando que estas son drogas de uso frecuente. El análisis de correlación lineal no es aplicable para comparar ambas metodologías, debido a que las variables CIM y halo de inhibición no se relacionan linealmente. Debido a estos resultados y a la poca concordancia obtenida, el método de difusión en agar no sería adecuado para determinar la sensibilidad antifúngica de levaduras de Malassezia

Sertaconazole antifungal profile determined by a microdilution method versus nine topical substances against dermatophyte fungi

Antifungal activity and in vitro inhibition time for sertaconazole (STZ) and 9 other topical drugs, namely amorolfine, bifonazole, clotrimazole, econazole, ketoconazole, miconazole, oxiconazole, terbinafine, and tioconazole were determined against 124 clinical isolates of dermatophyte (12 species) fungi by the microdilution method in a liquid medium and the measurement of optical density. STZ's antifungal activity was not always affected by the tested dermatophyte genus, as was the case with the remaining antifungals. In vitro antifungal activity was at the same level for all the studied azole derivatives, but, in terms of partial inhibitory concentrations, STZ starts its in vitro inhibitory activity in a shorter time than the other tested substances, particularly in those incubation periods when the growth of the dermatophyte fungi was more developed.Fil: Carrillo Muñoz, A. J.. No especifíca;Fil: Tur Tur, C.. No especifíca;Fil: Cárdenes, D.. No especifíca;Fil: Rojas, Florencia Dinorah. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentin

Hepatic failure and malnutrition as predisposing factors of cutaneous mucormycosis in a pediatric patient

The genus Lichtheimia is the third-most frequent genus isolated in mucormycosis. We report a cutaneous case caused by Lichtheimia ramosa, localized on the face of a pediatric patient, in the context of acute liver failure and caloric malnutrition. Several surgeries and treatment with liposomal amphotericin B enabled the patient's favorable evolution.Fil: Colman, Silvia. Provincia de Chaco. Hospital Pediátrico Dr. Avelino Castelán; ArgentinaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Colman, Carmen. Provincia de Chaco. Hospital Pediátrico Dr. Avelino Castelán; ArgentinaFil: Sosa, Maria de Los Angeles. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Rojas, Florencia Dinorah. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentin

Otomicosis por Aspergillus niger

El 15% al 20% de las otitis externas son atribuidas a una etiología fúngica, aunque en los últimos años esto parece ir en aumento debido a la utilización de antibióticos de amplio espectro, alteraciones de la inmunidad y uso de corticosteroides, entre otros factores.Fil: Cattana, Maria Emilia. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fernández, M, S.. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Rojas, Florencia Dinorah. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Sosa, M. A.. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Perfil de sensibilidad antifúngica in vitro de Scopulariopsis brevicaulis aislados de onicomicosis

Se ha estudiado el perfil de actividad antifúngica in vitrode amorolfina (AMR), bifonazol (BFZ), clotrimazol (CLZ), econazol(ECZ), fluconazol (FNZ), itraconazol (ITZ), ketoconazol(KTZ), miconazol (MNZ), oxiconazol (OXZ), tioconazol (TCZ) yterbinafina (TRB) frente a 26 aislamientos clínicos de Scopulariopsisbrevicaulis obtenidos de muestras clínicas de pacientescon onicomicosis, por medio de un método estandarizado demicrodilución. A pesar de que este hongo filamentoso ha sidodescrito como resistente frente a un amplio espectro de antifúngicos,los datos obtenidos muestran una mejor actividadfungistática in vitro de AMR, OXZ y TRB (0,08; 0,3 y 0,35 mg/L,respectivamente) en comparación con la de CLZ (0,47 mg/L),ECZ (1,48 mg/L), MNZ (1,56 mg/L, BFZ (2,8 mg/L), TCZ (3,33mg/L), KTZ (3,73 mg/L). FNZ (178,47 mg/L) e ITZ (4,7 mg/L) mostraronuna reducida actividad antifúngica in vitro. Las CMIs obtenidasmuestran la reducida sensibilidad in vitro en general deS. brevicaulis a los antifúngicos utilizados y que son de posibleuso para el tratamiento de las onicomicosis con la excepción deAMR, OXZ y TRB.Fil: Carrillo Muñoz, Alfonso Javier. ACIAM; EspañaFil: Tur Tur, Cristina. Cap Manso; EspañaFil: Cárdenes, Délia. ACIAM; EspañaFil: Rojas, Florencia Dinorah. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentin

In vitro activities of amphotericin B, terbinafine, and azole drugs against clinical and environmental isolates of apergillus terreus Sensu Stricto

The antifungal susceptibilities of 40 clinical and environmental isolates of A. terreus sensu stricto to amphotericin B, terbinafine, itraconazole, and voriconazole were determined in accordance with CLSI document M38-A2. All isolates had itraconazole and voriconazole MICs lower than epidemiologic cutoff values, and 5% of the isolates had amphotericin B MICs higher than epidemiologic cutoff values. Terbinafine showed the lowest MICs. No significant differences were found when MICs of clinical and environmental isolates were compared.Fil: Fernández, Mariana Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Rojas, Florencia Dinorah. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cattana, Maria Emilia. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Sosa, Maria de Los Angeles. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Iovannitti, Cristina A.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Lass Flörl, Cornelia. Medical University Of Innsbruck; AustriaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Antifungal activity of silver nanoparticles in combination with ketoconazole against Malassezia furfur

Malassezia furfur is lipophilic and lipid-dependent yeast, inhabitant of human skin microbiota associated with several dermal disorders. In recent years, along with the advances in nanotechnology and the incentive to find new antimicrobialdrugs, there has been a growing interest in the utilization of nanoparticles for the treatment of skin microbial infections. This work aimed to study the in vitro inhibitory activity of silver nanoparticles (AgNP) against 41 M. furfurclinical isolates, visualize the interaction between AgNP-Malassezia, evaluate the synergism with ketoconazole (KTZ) and to produce an antimicrobial gel of AgNP?KTZ. The synthesized AgNP were randomly distributed around the yeastsurface and showed a fungicidal action with low minimal inhibitory concentration values. AgNP showed no antagonistic effect with KTZ. The broad-spectrum antimicrobial property with fungicidal action of AgNP and its accumulationin affected areas with a sustained release profile, added to the great antifungal activity of KTZ against Malassezia infections and other superficial mycoses, allowed us to obtain a gel based on carbopol formulated with AgNP?KTZwith the potential to improve the topical therapy of superficial malasseziosis, reduce the number of applications and, also, prevent the recurrence.Fil: Mussin, Javier Esteban. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Roldan, Maria Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Física de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Física de Rosario; ArgentinaFil: Rojas, Florencia Dinorah. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Sosa, Maria de Los Angeles. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Pellegri, Nora Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Física de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Física de Rosario; ArgentinaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentin

Modulatory effect of Origanum vulgare essential oil and carvacrol on Malassezia spp. virulence factors

Malassezia sympodialis and Malassezia furfur are recognized as an important part of the human and animals healthy skin microbiota, but also as an opportunistic fungus due to their association with a broad spectrum of skin and systemic infections. Human skin infections associated with Malassezia spp. are often chronic, recurrent, and topical or oral azole treatments are challenging with not always successful outcomes. A wide inter and intraspecies antifungal susceptibility variability that may suggest a combination of wild-type strains and resistant mutants was reported. The essential oils are complex hydrophobic mixtures of different compounds extracted from plants by distillation and have demonstrated antimicrobial activity. In this study, toxicity in the larvae model and the ability of Origanum vulgare essential oil (OVEO) and carvacrol to inhibit virulence factors such as hydrophobicity, adherence, and biofilm formation of M. sympodialis and M. furfur was evaluated. We have demonstrated the antifungal activity of OVEO and carvacrol against both species. Carvacrol was more active and less toxic than OVEO at low concentrations (< 1 mg/ml). Malassezia sympodialis showed a significant decrease in adherence and its ability to form biofilms when OVEO or carvacrol is present. Both Malassezia species showed reduced hydrophobicity in the presence of carvacrol. Further studies will have to be carried out to understand how these substances act, but the inhibition of some virulence factors could represent a new target to overcome the problem of drug resistance.Fil: Angiolella, Letizia. Università degli Studi di Roma "La Sapienza"; ItaliaFil: Rojas, Florencia Dinorah. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; ArgentinaFil: Mussin, Javier Esteban. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentin

Identification of Virulence Factors in Isolates of Candida haemulonii, Candida albicans and Clavispora lusitaniae with Low Susceptibility and Resistance to Fluconazole and Amphotericin B

Emerging life-threatening multidrug-resistant (MDR) species such as the C. haemulonii species complex, Clavispora lusitaniae (sin. C. lusitaniae), and other Candida species are considered as an increasing risk for human health in the near future. (1) Background: Many studies have emphasized that the increase in drug resistance can be associated with several virulence factors in Candida and its knowledge is also essential in developing new antifungal strategies. (2) Methods: Hydrophobicity, adherence, biofilm formation, lipase activity, resistance to osmotic stress, and virulence ‘in vivo’ on G. mellonella larvae were studied in isolates of C. haemulonii, C. albicans, and C. lusitaniae with low susceptibility and resistance to fluconazole and amphotericin B. (3) Results: Intra- and interspecies variability were observed. C. haemulonii showed high hydrophobicity and the ability to adhere to and form biofilm. C. lusitaniae was less hydrophobic, was biofilm-formation-strain-dependent, and did not show lipase activity. Larvae inoculated with C. albicans isolates displayed significantly higher mortality rates than those infected with C. haemulonii and C. lusitaniae. (4) Conclusions: The ability to adhere to and form biofilms associated with their hydrophobic capacity, to adapt to stress, and to infect within an in vivo model, observed in these non-wild-type Candida and Clavispora isolates, shows their marked virulence features. Since factors that define virulence are related to the development of the resistance of these fungi to the few antifungals available for clinical use, differences in the physiology of these cells must be considered to develop new antifungal therapies.Fil: Angiolella, Letizia. Università degli Studi di Roma "La Sapienza"; ItaliaFil: Rojas, Florencia Dinorah. Universidad Nacional del Nordeste; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Giammarino, Andrea. Università degli Studi di Roma "La Sapienza"; ItaliaFil: Bellucci, Nicolò. Università degli Studi di Roma "La Sapienza"; ItaliaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Universidad Nacional del Nordeste; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentin

Chemical characterization and antifungal activity of Origanum vulgare, Thymus vulgaris essential oils and carvacrol against Malassezia furfur

The composition of the essential oils (EOs) of O. vulgare L. EO and T. vulgaris EO, were analyzed by GC and GC–MS. Antifungal activities of the EOs and its main component, carvacrol, were evaluated against 27 clinical isolates of Malassezia furfur. Minimum inhibitory concentrations (MICs) were measured according to the broth microdilution protocols by Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) modified for Malassezia spp. EOs and carvacrol showed low MIC values ranged 450–900 μg/ml against M. furfur. No differences in EOs antifungal activity were observed in sensitive to resistant fluconazole isolates. The antifungal activity obtained showed O. vulgare EO, T. vulgaris EO and carvacrol, their compound, as potential antimicrobial agents against M. furfur, yeast associated with human mycoses.Fil: Vinciguerra, Vittorio. Università degli Studi della Tuscia; ItaliaFil: Rojas, Florencia Dinorah. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Tedesco, Viviana. Università degli studi di Roma "La Sapienza"; ItaliaFil: Giusiano, Gustavo Emilio. Universidad Nacional del Nordeste. Instituto de Medicina Regional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Angiolella, Letizia. Università degli studi di Roma "La Sapienza"; Itali