Análise do transcriptoma de A. molluscorum Av27 após exposição ao TBT

Mestrado em BiotecnologiaO tributilestanho (TBT) é um composto tóxico com efeitos nefastos para o ambiente. Este composto foi utilizado durante vários anos como componente de tintas anti-vegetativas aplicadas nos cascos dos barcos sendo, por isso, reconhecido mundialmente como uma das fontes de contaminação de ambientes aquáticos. Atualmente, o uso destas tintas está proibido em alguns países, verificando-se uma diminuição na concentração de TBT no ambiente. Apesar disso, devido à estabilidade e persistência deste composto (principalmente nos sedimentos), a poluição por TBT continua a ser preocupante. Aeromonas molluscorum Av27 foi isolada no sedimento da Ria de Aveiro, num local contaminado por TBT. Esta bactéria é tolerante a concentrações elevadas de TBT (até 3 mM) e é capaz de degradar o composto nos seus derivados menos tóxicos, DBT e MBT. Com o intuito de conhecer o(s) mecanismo(s) molecular(es) que estão na base destas propriedades, procedeu-se à análise do transcriptoma desta estirpe por pirosequenciação. Para isso, para além da condição controlo (sem TBT), as células foram expostas a 5 e 50 μM de TBT até atingirem o meio da fase exponencial. A validação dos resultados de pirosequenciação foi feita por PCR em tempo real. De uma forma geral, a análise dos transcriptomas de A. molluscorum Av27 revelou a presença de diversos genes sobre-expressos após exposição ao TBT. Os genes que se relacionam com a atividade enzimática e o transporte/ligação de compostos foram aqueles que sofreram maiores alterações a nível de expressão, propondo-se desta forma o seu envolvimento nos mecanismos de resistência e degradação de TBT. Alguns dos genes sobre-expressos identificados codificam para bombas de efluxo e outras proteínas envolvidas na resistência a antibióticos e metais pesados, corroborando a relação entre a resistência a estes compostos e a resistência ao TBT. Para além disso, foi sugerido que proteínas envolvidas na resposta ao stress térmico podem também desempenhar um papel importante na resistência ao TBT. Tendo em conta a análise feita, não foi possível encontrar uma proteína responsável pela degradação do TBT. No entanto, foram detetadas várias proteínas sobre-expressas de função desconhecida. A anotação destas proteínas é de grande importância, uma vez que poderá contribuir para a elucidação do mecanismo de degradação de TBT nesta bactéria. Em estudos anteriores, demonstrou-se que o gene sugE está envolvido no mecanismo de resistência ao TBT em Av27 e que o seu nível de expressão está dependente da fase de crescimento das células. No presente estudo, foi possível confirmar que o gene sugE é sub-expresso na presença de TBT quando as células atingem a sua fase exponencial. Foi ainda possível notar que genes relacionados com a transcrição estão sub-expressos após exposição ao TBT, indicando que este composto afeta a transcrição genética. O estudo detalhado dos genes identificados neste trabalho, potencialmente envolvidos no mecanismo de resistência e/ou degradação do TBT, poderá contribuir para a compreensão destes mecanismos em A. molluscorum Av27, assim como noutros organismos procariotas.Tributyltin (TBT) is a toxic compound with a negative impact to the environment. This compound was used for several years as a component of antifouling paints applied to ship hulls, thus contaminating several aquatic environments worldwide. Currently, the use of these paints is prohibited in several countries, and there has been a consequent decrease of TBT concentration in the environment. However, due to the stability and persistence of the compound (mainly in the sediments), TBT pollution remains a serious problem. Aeromonas molluscorum Av27 was isolated in the sediments of Ria de Aveiro, in a TBT contaminated site. This bacterium is tolerant to high TBT concentrations (up to 3 mM) and is able to degrade it into the less toxic compounds DBT and MBT. In order to better understand the molecular mechanism(s) conferring these properties, a transcriptome analysis was carried out. In addition to the control (without TBT), the cells were grown to the mid-log phase in presence of different TBT concentrations (5 and 50 μM). Pyrosequencing analysis was performed in each of the samples. Validation of the transcriptome results was performed by quantitative real-time PCR. The analysis of the transcriptomes of A. molluscorum Av27 revealed that several genes were up-regulated following exposure to TBT. Genes responsible for enzymatic activities and transport/binding were the most affected by TBT exposure and thus, those genes seem to be involved in TBT resistance and degradation. Some efflux pumps and other proteins involved in resistance to antibiotics or heavy metals were found over-expressed when Av27 cells were exposed to TBT, supporting the relationship between the resistance to these compounds and resistance to TBT. Furthermore, a possible role of heat-shock proteins in TBT resistance in A. molluscorum Av27 was also suggested. So far, the analysis of the transcriptome didn’t allow the identification of the protein responsible for TBT degradation in A. molluscorum Av27. However, several proteins of unknown function were over-expressed in the presence of the toxic compound. The annotation of such proteins is important, since it might help to elucidate the TBT degradation mechanisms in this bacterium. Previous studies demonstrated that the sugE gene is involved in TBT resistance in Av27 strain, and that its’ expression levels depend on the growth phase. Likewise, in the present study, the sugE gene was over-expressed when the cells were grown to the mid-log phase. It was also verified that several transcription-related genes were under-expressed in A. molluscorum Av27 following exposure to TBT, suggesting that this compound negatively affects genetic transcription. Further investigation of the genes potentially involved in TBT resistance/degradation may contribute to a better understanding of these mechanisms in A. molluscorum Av27, as well as in other prokaryotes

A novel conjugal donor strain for improved DNA transfer into Clostridium spp.

© 2019 The Authors Importance: The ability to transfer genetic material into a target organism is crucial for the development of a wide range of targeted genetic manipulation techniques. Overcoming the organisms’ native restriction systems which target foreign incoming DNA is one strategy that can increase the efficiency of genetic transfer. The novel E. coli donor strain described here employs this strategy, increasing the frequencies of conjugation into a range of clostridial strains, and therefore opening up the potential to implement novel gene manipulation techniques. Furthermore this novel donor strain has potential applications across a wide range of genetically recalcitrant organisms, and should be beneficial wherever the frequently occurring Type IV restriction systems are possessed by the target in question

O EIXO CENTRO-SUL DE EXPANSÃO DE BRASÍLIA: DISPERSÃO, VAZIOS E AS TRANSFORMAÇÕES NA PAISAGEM METROPOLITANA - 1984 a 2017

Unlike other Brazilian cities, Brasília was born dispersed, configured by several urban centers in addition to the Plano Piloto, perhaps even before the phenomenon of metropolitan dispersion started in other regions of the country. If Brasília was born dispersed by the territorial organization in satellite cities, this process has been accentuated and diversified in the last decades, when new areas were (or are being) urbanized, but with urban types very different from those originally planned, often in disagreement with the official guidelines established by territorial planning. Thus, Brasília, considered in this research as a unique municipality whose political territory corresponds to the Federal District, is historically related to urban dispersion, but also to contemporary processes of metropolization, followed by the occupation of territorial voids between the existing urban centers and, modifying deeply into the urban and social landscape. The object of study of this research is the central-south axis, a vector of urban expansion with rapid growth in the last decades, which has drastically modified the natural landscape with the proliferation of walled closed condominiums and new areas aimed at agricultural activities in areas of environmental relevance . The study debates these transformations of the landscape based on data on the history of urbanization provided by the Secretariat of Urbanization and Housing - SEDUH, available on the GEOportal platform and data on land cover provided by the Federal District Planning Company (CODEPLAN). When analyzing the transformations of the landscape in the centersouth axis, the work points out issues for the territorial planning of the area and the metropolis, being relevant in view of the revision works of the Master Plan for Territorial Planning of the DF - PDOT / DF, in progress since 2019 .Diferentemente de outras cidades brasileiras, Brasília nasceu dispersa, configurada por diversos núcleos urbanos para além do Plano Piloto, talvez antes mesmo do fenômeno de dispersão metropolitana iniciar-se em outras regiões do país. Se Brasília nasceu dispersa pela organização territorial em cidades-satélites, esse processo se acentuou e se diversificou nas últimas décadas, quando novas áreas foram (ou estão sendo) urbanizadas, mas com tipologias urbanísticas muito diferentes das originalmente planejadas, muitas vezes em desacordo com as diretrizes oficiais estabelecidas pelo planejamento territorial. Assim, Brasília, considerada nesta pesquisa como um município único cujo território político corresponde ao Distrito Federal, relaciona-se historicamente com a dispersão urbana, mas também aos processos contemporâneos de metropolização, seguidos da ocupação de vazios territoriais entre os núcleos urbanos existentes e, modificando profundamente a paisagem urbana e social. O objeto de estudo desta pesquisa é o eixo centro-sul, vetor de expansão urbana com rápido crescimento nas últimas décadas, que modificou drasticamente a paisagem natural com a proliferação de condomínios fechados murados e de novas áreas voltadas para atividades agropastoris em áreas de relevância ambiental. O estudo debate essas transformações da paisagem a partir de dados sobre o histórico da urbanização provindos da Secretaria de Urbanização e Habitação - SEDUH, disponibilizados na plataforma GEOportal e dados de cobertura da terra disponibilizados pela Companhia de Planejamento do Distrito Federal (CODEPLAN). Ao analisar as transformações da paisagem no eixo centro-sul, o trabalho aponta questões para o planejamento territorial da área e da metrópole, sendo relevante frente aos trabalhos de revisão do Plano Diretor de Ordenamento Territorial do DF - PDOT/DF, em curso desde 2019. &nbsp

Music and software piracy : issues and solutions for music teachers and media intensive educators

The rampant piracy of digital materials is not just a problem for the individual home user. In today\u27s world it is increasingly a concern for educators and their school district as a whole. Many recent court actions have been brought against school districts based the illegal use of unlicensed software and other copyrighted materials. This project presents the issues of music and software piracy and the legalities of the United States Copyright Act. It presents common examples for use in the music or media intensive classroom, as well as legal usage requirements including the payment of royalties and purchase of recording or distribution licenses. Also covered are methods and suggestions on how faculty members can ensure that their school is compliant with current law and beyond the scope of legal actions that can adversely affect the district both financially and in the realm of public relations

AVALIAÇÃO DA COMUNICAÇÃO VERBAL EQUIPE-PACIENTE COMATOSO NO CENTRO DE TERAPIA INTENSIVA (CTI)

Introdução: O coma é um estado clínico de inconsciência no qual o paciente não está ciente de si mesmo ou do ambiente por períodos prolongados. Mesmo nesta condição é fundamental que a equipe comunique aos pacientes os procedimentos médicos a serem realizados. Objetivo: Verificar se os profissionais da área de saúde atuantes em um hospital universitário sul mineiro comunicavam verbalmente aos pacientes comatosos os procedimentos realizados. Material e Métodos: O estudo foi conduzido em um hospital universitário sul mineiro, fundamentado em uma análise da comunicação verbal durante assistência a pacientes comatosos por diversos profissionais da área de saúde, seguindo o protocolo de CARDIM et al. (2004). Resultados: Verificou-se que 20,4% dos procedimentos foram comunicados aos pacientes comatosos e 79,60% foram executados sem comunicação. Conclusão: A equipe médica e os demais profissionais não estão utilizando comunicação verbal para informar ou explicar os procedimentos a serem realizados no paciente em coma, tornando-se fundamental a humanização da assistência

ACESSO À REDE DE ATENÇÃO A GESTAÇÃO, PARTO E NASCIMENTO NA PERSPECTIVA DAS USUÁRIAS

Analisam-se as facilidades e as barreiras de acesso das mulheres usuárias do SUS-DF aos serviços de pré-natal e de parto na Rede de Atenção Materna e Infantil em uma Região de Saúde. Objetivos: Mapear o fluxo assistencial das mulheres nos serviços de pré-natal e parto da Região Sudoeste de Saúde; analisar as potencialidades e as limitações de acesso das gestantes egressas das duas maternidades locais. Método: Pesquisa descritiva e exploratória de abordagem qualitativa. Entrevista com 30 mulheres na fase puerperal. Análise estatística descritiva, análise de conteúdo e aplicação do fluxograma analisador. Resultados: As mulheres realizaram seis ou mais consultas de pré-natal e os exames de rastreamento de risco. Poucas são orientadas sobre o local onde vão parir e o início do trabalho de parto. O deslocamento até a maternidade é precário e ocorre peregrinação antes do parto. Há desarticulação entre os pontos de atenção, deficiências na qualidade da atenção ao parto e práticas profissionais sem consonância com as recomendações internacionais. Conclusão: O acesso das mulheres é facilitado para os serviços de pré-natal, mas elas enfrentam dificuldades no recebimento de exames, na vinculação aos serviços e na atenção recebida no momento do parto

Composição química e atividade antifúngica do óleo essencial de Zanthoxylum petiolare A. St. -Hil. & Tul (RUTACEAE) / Chemical composition and antifungal activity of the essential oil of Zanthoxylum petiolare A. St.-Hil. & Tul (RUTACEAE)

O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil químico e a atividade antifúngica do óleo essencial das folhas da espécie Zanthoxylum petiolare A.St.-Hil. & Tul. (Rutaceae). Para isso foram realizados estudo fitoquímico e antifúngico. A extração do óleo foi realizada utilizando aparelho Clevenger e a composição química foi determinada por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas (CG-EM). Os testes de sensibilidade foram realizados por microdiluição em caldo em cepas de fungos dermatófitos e leveduriformes. A análise do óleo essencial identificou 20 compostos químicos, onde o espatulenol (19,85%), geranial (16,31%), cis-Citral (12,54%) foram compostos majoritário. O óleo essencial mostrou atividade antifúngica contra as cepas de Trichophytom rubrum, apresentando 0, 156 mg/ml e 0,312 mg/ml para CIM e CFM, respectivamente, não manifestando ação contra Candida spp. Este é o primeiro estudo a investigar a atividade antifúngica de Z. petiolare que se mostrou uma espécie promissora para estudos posteriores com o propósito de se identificar novos metabólitos com ações farmacológicas

Capacitação de Agentes Comunitários de Saúde (ACS) para diagnóstico, prevenção e orientação ao uso de drogas

Trabalho apresentado no II Congresso Nacional do PROJETO RONDON, realizado em Florianópolis, SC, no período de 23 a 25 de setembro de 2015 - Universidade Federal de Santa Catarina.INTRODUÇÃO: O Agente Comunitário de Saúde (ACS) é considerado um “vigilante” da comunidade, uma vez que está sempre em alerta, a fim de manter a qualidade de vida da comunidade. Dessa forma, a função do Agente Comunitário de Saúde é atender aos princípios das estratégias de organização da Atenção Primária de Saúde. Esse modelo prioriza o serviço de saúde fornecendo cuidados para a pessoa e não para a doença, integrando ações curativas, preventivas e a atenção aos indivíduos da comunidade. Desta forma, o presente trabalho trata-se de um relato de experiência realizada no município de Nortelândia-MT, através do Projeto Rondon (Operação Bororos – Conjunto A). Para a capacitação dos ACS, foram necessários três dias da semana, durante o período matutino. O minicurso ocorreu na Escola Municipal Júlio Praxe de Duarte, tendo sido trabalhado de forma expositiva através de recursos audiovisuais (Power Point e filmes), além de atividades dinâmicas para interação do grupo. Com o minicurso foi possível perceber a aprendizagem dos ACS acerca do tema e, principalmente, a necessidade local de ações que visam melhor orientação e prevenção sobre álcool e drogas. Também por meio do tema explanado, os ACS puderam sanar dúvidas e levantaram questões do cotidiano para serem debatidas durante o minicurso para melhor abordagem da comunidade. O papel do ACS deve ser entendido como uma extensão da Atenção Primária da Saúde, o qual pode adentrar as casas das famílias e oferecer medidas e informações com o intuito de contribuir para a prevenção, além de promover o tratamento direto das doenças. Dessa forma, a capacitação de agentes comunitários de saúde proporciona melhor qualidade de vida para a comunidade em geral