Determination of 24 primary aromatic amines in aqueous food simulants by combining solid phase extraction and salting-out assisted liquid?liquid extraction with liquid chromatography tandem mass spectrometry

Carcinogenic primary aromatic amines (PAAs) can be released from improperly manufactured food packaging materials. The limit for the sum of PAAs is set to 10 ?gkg- 1 in Commission Regulation No. 10/2011 (FCM Regulation). However, a lower individual limit, 2 ?gkg- 1 has been recently introduced for the carcinogenic PAAs in Commission Regulation No. 2020/1245. As the majority of the previously published methods are no longer compliant with the current regulation, a UHPLC-MS/MS method was developed to enable food packaging compliance testing for PAAs not only from 3% (w/v) acetic acid, but also from 10% (v/v) ethanol food simulant. Since the latest amendment of the FCM Regulation refers to the list of the 22 restricted PAAs of EU Regulation No. 1907/2006, these PAAs were selected as target compounds along with aniline and p-toluidine, the most common impurities of azo colorants and isocyanates. An enrichment factor of 20 could be achieved combining solid phase extraction with salting-out assisted liquid?liquid extraction. The method was successfully validated and applied on real samples. Limit of quantitation (LOQ) and limit of detection (LOD) values were 0.15 ?gL-1 and 0.05 ?gL-1 for both food simulants, respectively; except for 2,4-diaminotoluene, aniline and 4,4?-oxydianiline. However, even these compounds had lower LOD values than the new individual limit of 2 ?gkg- 1. Cumulative LOD values for both food simulants (1.6 ?gL-1 and 1.5 ?gL-1 for 3% (w/v) acetic acid and 10% (v/v) ethanol, respectively) were lower than the 10 ?gkg- 1 specified in the FCM Regulation. Accuracy values were between 70 and 118% for both food simulants for the majority of PAAs. Both within-day and between-day precision values were below 20%. This method proved to be suitable for daily routine analysis enabling compliance testing of food packaging materials according to the latest regulations. The method was successfully applied for the analysis of plastic kitchenware samples

A májpótló kezelés mai lehetőségei = Liver support systems today

A májelégtelenség – akár korábbi májbetegség fennállása nélkül alakult ki (akut májelégtelenség), akár krónikus májbetegség akut dekompenzációja („akut a krónikuson” májelégtelenség) következménye – magas halálozással jár. A végállapotú májbetegségek következtében kialakult májelégtelenség egyetlen kuratív megoldása ma a májtranszplantáció. Ennek fő gátját a rendelkezésre álló donorszervek hiánya képezi, emiatt sok, várólistán szereplő beteg exitál. A transzplantáció korlátai tették szükségessé olyan májtámogató rendszerek kifejlesztését, amelyek alkalmasak a beteg életben tartására a szervátültetésig vagy a máj regenerációjáig. A korai próbálkozások (hemodialízis, hemoperfúzió, cseretranszfúzió, kereszthemodialízis, keresztkeringés, plazmaferézis stb.) elégtelennek bizonyultak. Napjainkban a májpótló kezelésnek két fő iránya alakult ki: a sejtalapú, úgynevezett bioarteficiális és a nem sejtalapú, úgynevezett arteficiális rendszerek. A bioarteficiális rendszerek élő állati májsejteket vagy emberi májtumorsejteket tartalmaznak. Jellegzetességük, hogy a beteg vérét vagy szeparált plazmáját a májsejteket tartalmazó bioreaktoron áramoltatják át. Elviekben a májműködést ezek a metodikák modellezik a legtökéletesebben, mert a máj szintetizáló- és detoxikálófunkcióját egyaránt pótolják. Jelenlegi formájukban azonban még távol állnak az ideális megoldástól, alkalmazásuk számos immunológiai, infektológiai, onkológiai és financiális problémát vet fel, ezért egyelőre csak kísérleti célra állnak rendelkezésre. Az arteficiális rendszerek a klinikum számára már elérhetőek, bár széles körben még nem terjedtek el. Csak a máj detoxikálófunkcióját pótolják, a szintetikus funkció részben a hiányzó anyagok (plazmaproteinek, alvadási faktorok) szubsztitúciójával pótolható. Idetartozik a hemodiabszorpció, amely az Amerikai Egyesült Államokban terjedt el (liver dialysis unit), valamint a főleg Európában használatos albumindialízis és a legújabban kifejlesztett frakcionált plazmaszeparáció és -adszorpció (FPSA). Az albumindialízis egyszerű módszere a „single pass albumin dialysis” (SPAD), ennek továbbfejlesztett változata a „molecular adsorbent recirculating system” (MARS). Az FPSA high-flux hemodialízissel kiegészített változata a Prometheus-rendszer. Bár a felsorolt módszerek hatásosságát számos kísérleti és klinikai tanulmány támasztja alá, a konzervatív kezeléssel szemben a túlélésre kifejtett előnyös hatásuk bizonyítására még nagy esetszámot felölelő, randomizált, kontrollált vizsgálatok elvégzésére van szükség. | Liver failure carries a high mortality, both the acute type with no pre-existing liver disease (acute liver failure) and the acute decompensation superimposed on a chronic liver disorder (acute on chronic liver failure). Today, liver transplantation still represents the only curative treatment for liver failure due to end-stage liver diseases. Donor organ shortage is still the major limitation and many patients die while awaiting transplantation. Due to the scarcity of donor organs, liver support technologies are being developed to support patients with severe liver failure until either an organ becomes available for transplantation or their livers recover from injury. Early devices including hemodialysis, hemoperfusion, exchange transfusion, cross-hemodialysis, cross-circulation and plasmapheresis appeared inefficient. In the present day, liver support systems’ designs fall into two main categories: cell-based, so-called bioartificial and non-cell-based, also known as artificial systems. Bioartificial liver support systems use either porcine hepatocytes or human hepatoma cell lines housed within a hollow-fiber bioreactor. The system perfuses the patient’s whole blood or separated plasma through the luminal space in the bioreactor. Theoretically, these methods should optimally resemble normal hepatic tissue structure and function. However, the existing bioartificial systems are far from ideal solution in terms of immunological, infectological, oncological and financial problems and must still be thought of as experimental. The artificial systems are already available for the clinicians in limited quantities. These non-cell-based devices are intended to remove protein-bound and water-soluble toxins without providing synthetic function, which can be partially replaced with substitution of the failing substances (plasma proteins, coagulation factors). These systems include the hemodiabsorption (Liver Dialysis Unit) which is commercially available in the United States, the albumin dialysis which is available in Europe and the newly developed fractionated plasma separation and adsorption (FPSA) system. The simple method of albumin dialysis is “single pass albumin dialysis” (SPAD), which evolved into the so-called “molecular adsorbent recirculating system”(MARS). Prometheus system combines the FPSA method with high-flux hemodialysis. Although the results of many experimental and clinical trials prove the efficacy of the above mentioned methods, large randomized controlled trials are mandatory to establish the impact on survival benefit of artificial and bioartificial support systems versus standard therapy

A legújabb extracorporalis eliminációs eljárás (Prometheus®-kezelés) terápiás hatékonysága mérgezés okozta akut májelégtelenségben = The therapeutical efficiency of the newest extracorporal elimination procedure (Prometheus® treatment) in acute liver failure caused by intoxication

Az akut májelégtelenség mortalitása az intenzív terápia ellenére májtranszplantáció nélkül 60–90%. Az átültethető szervek korlátozott száma miatt azonban a betegek jelentős része a várólistán exitál. A mortalitás csökkentése érdekében számos próbálkozás történt a májelégtelenségben felhalmozódó albuminhoz kötött és vízoldékony méreganyagok eltávolítására, elősegítve ezzel a máj spontán regenerációját, illetve a beteg életben tartását a májtranszplantációig. A Prometheus®-kezelés egy viszonylag új technika, a frakcionált plazmaszeparáció és -adszorpció (FPSA) és egy high-flux dialízis kombinációja. Az eljárás során a beteg saját, szeparált, albuminban gazdag plazmája speciális adszorbereken halad keresztül, lehetővé téve az albuminhoz kötött toxinok eliminációját, miközben a vízoldékony toxinok eltávolítása hemodialízissel történik. Célkitűzés: A szerzők szándéka az volt, hogy a Prometheus®-kezelés hatékonyságát igazolják mérgezés okozta akut májelégtelenségben. Betegek és módszer: A Prometheus®-kezelést három, konzervatív kezeléssel nem uralható akut májelégtelenségben szenvedő, súlyos, paracetamol-, káliumpermanganát- és Amanita phalloides-mérgezett beteg esetében alkalmazták. Eredmények: A három nőbetegnél 10 kezelés történt. Súlyos szövődményt nem észleltek. A kezelések során az albuminhoz kötött (indirekt bilirubin p = 0,048; epesav p = 0,001) és a vízoldékony (direkt bilirubin p = 0,002; kreatinin p = 0,007) toxinok szignifikáns csökkenését tapasztalták. Az ammónia, a karbamid, a fibrinogén és az antitrombin III szint szignifikánsan nem változott. Mindhárom beteg májtranszplantáció nélkül meggyógyult. Következtetés: A Prometheus®-kezelés hatékonyan távolítja el az akut májelégtelenségben akkumulálódó toxinokat. Biztonságos eljárás. Konzervatív terápiával nem uralható esetekben lehetővé teszi a beteg életben tartását a máj spontán regenerációjáig vagy a májtranszplantációig. Introduction: Despite intensive therapy the mortality of acute liver failure without organ transplantation is 60–90%. Because of organ shortage in liver transplantation, a significant number of patients dies while being on the waiting list. In order to diminish the mortality various trials were introduced to remove the albuminbound and water-soluble toxins in liver failure with the aim to support the spontaneous regeneration of the liver and maintaining the patients alive until liver transplantation. Prometheus® treatment is a relatively new technique combining Fractionated Plasma Separation and Adsorption (FPSA) with a high-flux dialysis. During the procedure the patient’s own separated albumin-rich plasma passes through special adsorbents making possible the elimination of albumin-bound toxins, while hemodialysis gets rid of water-soluble toxins. Aim: The authors’ intention was to demonstrate the efficiency of Prometheus® treatment in acute liver failure caused by intoxication. Patients and method: Prometheus® treatment was indicated in three patients who suffered from severe intoxication with paracetamol, potassium permanganate and Amanita phalloides, which resulted in a hepatic failure incurable with conservative therapy. Results: Ten treatments were performed in the three female patients. No serious complication was observed. Due to the treatment the albumin-bound (indirect bilirubin p = 0.048; bile acid p = 0.001) and water-soluble (direct bilirubin p = 0.002; creatinine p = 0.007) toxins were significantly decreased. The level of ammonia, urea nitrogen, fibrinogen and antithrombin III did not change significantly. All the three patients were cured without liver transplantation. Conclusion: Prometheus® treatment removes efficiently the accumulating toxins in acute liver failure. It is a safe elimination technique. In cases untreatable with conservative therapy it makes possible maintaining the patients alive until the liver regenerates spontaneously, or liver transplantation is feasible

Collagen type IV nephropathy: Genetic heterogeneity examinations in affected Hungarian families

I ett introducerande avsnitt presenteras vårdvetenskap, det ämne som forskningenvilar på. Därpå följer en kortfattad filosofisk och psykologisk betraktelse av människans så unika språkliga förmåga. Efter en kort översikt av hjärnskador som kan ledatill afasi följer ett kapitel där rapportens hermeneutiska forskningsansats beskrivs.Därefter ägnas resten av utrymmet åt de verkliga experterna, de afasidrabbade ochderas familjer. Resultaten av två intervjustudier presenteras i tre kapitel med fokus på afasins existentiella innebörd, att bistå vid afasi, samt att vara närstående. Personliga berättelser tolkas i ett försök att hitta både individuella variationer och gemensamma mönster i en tillvaro där vardagen präglas av ett allvarligt funktionshinder med varierandebehov av hälso- och sjukvård eller kommunala stödinsatser

Efficient Targeted Next Generation Sequencing-Based Workflow for Differential Diagnosis of Alport-Related Disorders

<div><p>Alport syndrome (AS) is an inherited type IV collagen nephropathies characterized by microscopic hematuria during early childhood, the development of proteinuria and progression to end-stage renal disease. Since choosing the right therapy, even before the onset of proteinuria, can delay the onset of end-stage renal failure and improve life expectancy, the earliest possible differential diagnosis is desired. Practically, this means the identification of mutation(s) in <i>COL4A3-A4-A5</i> genes. We used an efficient, next generation sequencing based workflow for simultaneous analysis of all three <i>COL4A</i> genes in three individuals and fourteen families involved by AS or showing different level of Alport-related symptoms. We successfully identified mutations in all investigated cases, including 14 unpublished mutations in our Hungarian cohort. We present an easy to use unified clinical/diagnostic terminology and workflow not only for X-linked but for autosomal AS, but also for Alport-related diseases. In families where a diagnosis has been established by molecular genetic analysis, the renal biopsy may be rendered unnecessary.</p></div

List of the identified mutations in our Hungarian AS/FBH cohort.

<p>List of the identified mutations in our Hungarian AS/FBH cohort.</p

Pedigree of investigated AS/FBH Hungarian families.

<p>A, Families with X-linked AS. B, Families with autosomal AS. C, Families with FBH. Open squares indicate males and open circles indicate females. An oblique bar indicates a deceased individual. White symbols indicate individuals without clinical sings of the AS/FBH disease. Filled black symbols denote individuals with hematuria and/or proteinuria, hypoacusis or renal failure. The segment shaded circles and squares indicate carriers for a Chromosome 2 (<i>COL4A3</i> or <i>COL4A4</i>) mutation. A circle that has a dot inside indicates a <i>COL4A5</i> mutation carrier. The plus signs indicate the index patients whose DNA was analyzed by NGS. The identified mutation(s) for each family is shown.</p

Clinical and pathological details of the investigated Hungarian AS/FBH families.

<p>Clinical and pathological details of the investigated Hungarian AS/FBH families.</p