Synthèse d'alcaloïdes pyrrolizidiniques via la chimie du cuivre et un réarrangement de Claisen : vers une nouvelle voie de synthèse de la xénovénine

Les pyrrolizidines, telles que la xénovénine, sont des alcaloïdes bicycliques retrouvés chez certains amphibiens et arthropodes. Ces composés servent généralement de défense contre les prédateurs, mais ils ont aussi des propriétés pharmacologiques intéressantes, surtout au niveau des récepteurs nicotiniques d'acétylcholine. Plusieurs méthodes de préparation de la xénovénine sont rapportées dans la littérature. Par contre, ces méthodes ne permettent souvent l'obtention que d'un seul composé, la xénovénine, car la cyclisation est effectuée en fin de synthèse. Ainsi, peu de ces méthodes ouvrent la voie à la préparation de pyrrolizidines analogues. Nous nous sommes donc intéressés à la synthèse de la xénovénine en élaborant une méthode permettant la préparation de différentes pyrrolizidines substituées en positions 3 et 5. Cette méthode se base sur une séquence réactionnelle développée dans notre laboratoire comportant deux couplages catalysés au cuivre successifs suivis d'un réarrangement de Claisen. Le premier couplage est intramoléculaire entre la portion amide d'une lactame et sa portion diiodure vinylique pour obtenir un β-iodoénamide. Le second couplage est intermoléculaire entre notre β-iodoénamide et un alcool allylique chiral pour obtenir un β-allyloxyénamide. La troisième étape est un réarrangement de Claisen du produit du second couplage pour former une cétone y,δ-insaturée. Cette séquence de trois réactions constitue notre outil de synthèse. Il a été développé dans notre laboratoire et a déjà été utilisé pour la synthèse d'acides aminés non naturels. Le but du présent projet est de démontrer la polyvalence de cette séquence réactionnelle en l'appliquant à la préparation de la xénovénine et à ses analogues. Nous avons optimisé la synthèse du β-iodoénamide issu de la première réaction de l'outil de synthèse. À notre connaissance, il s'agit d'un des premiers exemples de ce type de couplage catalysé par le cuivre. Nous avons aussi étudié la synthèse du β-allyloxyénamide. Cette étude nous a permis d'observer le produit de couplage et le produit de réarrangement de Claisen. Il s'agit aussi d'un des premiers exemples de ce type de couplage catalysé par le cuivre. Nous avons ainsi fabriqué le squelette bicyclique des pyrrolizidines à l'aide de la séquence réactionnelle proposée. Ce travail nous a donc permis de confirmer la polyvalence de notre outil de synthèse en démontrant son application à la préparation d'un précurseur de la xénovénine.\ud ______________________________________________________________________________ \ud MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : pyrrolizidines, xénovénine, couplage, cuivre, réarrangement de Claise

Nouvelle thérapie épigénétique dans le traitement du neuroblastome pédiatrique

Le neuroblastome pédiatrique est un des cancers extra-crâniens des plus fréquents chez les enfants. Malgré une amélioration du taux de survie avec les thérapies actuellement disponibles, les stades avancés de neuroblastome ou en rechute présentent un très mauvais pronostic. De nouvelles approches thérapeutiques doivent donc être développées afin d'augmenter la survie des patients. Une de ces approches est la thérapie épigénétique. Le neuroblastome, comme plusieurs autres cancers pédiatriques, contient plusieurs altérations épigénétiques au niveau de la méthylation de l'ADN et des modifications des histones. Lors d'un criblage de médicaments déjà approuvés par la FDA, nous avons découvert quelques molécules ayant des caractéristiques de médicaments épigénétiques jusqu’alors jamais découvertes. Notre étude cherche donc à démontrer l'efficacité de ces molécules dans le traitement de lignées cellulaires de neuroblastome. Suite à des tests préliminaires, une des molécules approuvées par la FDA s'est démarquée : le disulfirame, un médicament approuvé pour le traitement de l’alcoolisme chronique. Nous avons donc traité des lignées cellulaires de neuroblastomes (IMR-32, N91, SK-N-DZ, SK-N-SH et SK-N-AS ) pendant 48 heures avec du disulfirame à des concentrations pertinentes sur le plan clinique (10nM à 50 µM). Nos résultats démontrent une inhibition de croissance de 50 % (IC50) d'environ 80 nM pour les lignées cellulaires testées. De plus, après analyse par cytométrie de flux, on observe un blocage du cycle cellulaire en G2/M. Nous avons également observé une diminution du facteur de transcription MYCN ainsi qu’une baisse d’acétylation de plusieurs marques d’histones (H3K9ac, H3K14ac, H3K27ac). Une analyse par séquençage d'ARN a confirmé le bloc en G2/M par une baisse d'expression de gènes associés à cette phase ainsi que la diminution de MYCN par une baisse de gènes cible de MYC. Des travaux sont en cours afin de déterminer le mécanisme d’action du disulfirame. Cette recherche permettra d’évaluer l’efficacité du disulfirame dans le traitement du neuroblastomePediatric neuroblastoma is one of the most common extracranial cancer in children. Despite an improvement in survival with the currently available therapies, neuroblastoma with an amplification of the transcription factor MYCN has a very poor prognosis. New therapeutic approaches must be developed to increase the survival of patients. One such approach is epigenetic drug therapy. Neuroblastoma, like many other pediatric cancers, contains several epigenetic alterations at the level of DNA methylation and histone modifications. In a screening of FDA-approved drugs, we discovered some molecules having characteristics of epigenetic drugs that were unknown until now. Our study seeks to demonstrate the efficacy of these molecules in the treatment of neuroblastoma cell lines. Following preliminary tests, one of the molecules approved by the FDA stood out: disulfiram, a medication approved for the treatment of chronic alcoholism. We treated neuroblastoma cell lines (MYCN amplified: IMR-32, N91 and SK-N-DZ; MYCN non-amplified: SK-N-AS and SK-N-SH) for 48 hours with disulfiram at clinically relevant concentrations (from 10 nM to 20 µM). Our results demonstrate a 50% growth inhibition (IC50) of 80nM for the cell lines tested. In addition, after analysis by flow cytometry, we found a cell cycle block in G2/M. RNA sequencing also revealed that disulfiram affects a many genes (downregulated n=508, upregulated n=207). We also observed a decrease in the transcription factor MYCN and a reduction in acetylation of several histone marks by Western blot’s analysis. Further studies are underway to determine the mechanism of action of disulfiram. This study shows the potential of disulfiram in the treatment of neuroblastoma

RANCANG BANGUN APLIKASI TIKET ONLINE KONSER MUSIK UNIKA SOEGIJAPRANATA BERBASIS WEB

Dalam penelitian ini dilatar belakangi adanya acara konser musik yang diselengarakan oleh mahasiwa, untuk mahasiswa yang tak jarang ada setiap tahunnya di Universitas Katolik Soegijapranata. Acara konser music diselenggarakan dengan bermacam-macam latar belakang sebagai hiburan, penggalangan dana maupun sebagai ceremonial bagi mahasiwa baru yang telah melaksanakan pmb di Universitas Katolik Soegijapranata. Tak jarang bahwa pelaksaan kegiatan ini memiliki peserta yang hadir melebihi kuota dari batas yang diperkirakan oleh penyelenggara acara. Melihat bahwa pelaksanaan kegiatan ini banyak disukai oleh mahasiswa Universitas Katolik Soegijapranata maupun mahasiwa dari luar, karena itu diperlukan media untuk mendapatkan informasi yang dapat mengelola acara sekaligus tempat untuk melakukan pemesanan tiket yang nantinya hasil dari pemesanan atau penjualan tiket yang telah dibeli oleh peserta langsung dapat dicetak oleh penyelenggara. Tujuan dari penelitan ini adalah untuk membuat suatau aplikasi yang dapat mengelola kegiatan dari membuat acara, proses hingga pada pasca acara, sehingga di dalam aplikasi tersebut tersebut nantinya akan memiliki fitur-fitur yang dapat melakukan dari membuat acara, melihat ketersediaan dan informasi acara, menjual dan membeli tiket acara, mencetak tiket, mencetak jumlah penjualan tiket, serta mendata datar kehadiran peserta. Media ini akan dirancang menggunakan aplikasi web serta penggunaan bootstrap responsive untuk dapat digunakan di segala jenis platform

Dissection génétique des caractères par analyse de liaison et d'association (aspects méthodologiques et application à la sensibilité à l'ostéochondrose chez les Trotteurs Français)

Diverses lésions ostéochondrales peuvent affecter les articulations des jeunes chevaux et réduire leurs futures performances en course. L objectif de cette thèse est d identifier les régions du génome, appelées locus à caractère quantitatif (QTL), associées avec des caractères mesurant l ostéochondrose (OC) enregistrés dans le programme GENEQUIN sur une population de Trotteurs Français. Le génotypage a été réalisé à l aide de la puce SNP Illumina BeadChip EquineSNP50, qui est dense et permet d exploiter le déséquilibre de liaison par des analyses d association. Ces analyses sont sujettes à certains problèmes en présence d une structure familiale des données. Dans la première partie de la thèse, une comparaison de la puissance et de la robustesse d un choix restreint de méthodes d analyses est effectuée. L originalité de ce travail réside dans la dérivation algébrique des moments des distributions des statistiques de test comparées, donnant ainsi plus de généralité à nos résultats et permettant une meilleure compréhension des différences. Les résultats peuvent notamment servir à l optimisation du dispositif expérimental. La deuxième partie est consacrée à la cartographie des régions QTL des caractères mesurant l OC en différents sites articulaires dans une population de 583 Trotteurs Français. Cette étude a permis de mettre en évidence plusieurs régions QTL d effets moyens et faibles à un niveau significatif mais pas hautement significatif. Nous montrons que l OC est un caractère polygénique et qu aucun QTL, ayant un effet à la fois sur l OC du jarret et l OC du boulet, n est détectable dans ce protocole QTL, ce qui infirme l hypothèse simple d une cause génétique commune de la sensibilité à cette maladie sur les différents sites anatomiques. Suite à ces travaux, l identification des gènes candidats et des mutations causales devrait clarifier la physiopathologie moléculaire de l OC et ainsi permettre de développer des stratégies efficaces pour l évaluation des risques. Pendant ce temps, les marqueurs peuvent être utilisés dans un contexte de sélection assistée par marqueurs afin d améliorer la santé et le bien-être du cheval.Osteochondral lesions are commonly observed in young horses and may be responsible for reduced performances in racing. The purpose of the PhD thesis was to identify genome regions, called quantitative trait loci (QTL), associated with various traits measuring osteochondrosis (OC) and recorded in the GENEQUIN program in a population of French Trotters horses. Genotyping was performed using the EquineSNP50 Illumina high density chip, which allows to exploit the linkage disequilibrium with genome-wide association studies. These analyses are subject to several problems in presence of family structure. We hence first proposed a comparison of power and robustness of a limited choice of models for this type of analysis. The originality of this work lies in the algebraic derivation of the distribution moments of the test statistics compared, making the outcome of this comparison more general and allowing a better understanding of differences. The results can be used to establish an experimental design. The second part was devoted to the QTL fine mapping of traits that measure OC in different joint sites. This study highlighted several significant QTL with low and medium effects but none of them were highly significant. We showed that OC is a polygenic trait and we were not able to identify QTL affecting both OC on the hock and the fetlock, rejecting the hypothesis of a single genetic determinism of susceptibility to this desease accross anatomical sites. Further studies will now focus on the identification of candidate genes and screening for mutation in an attempt to clarify the molecular physiopathology of OC and develop efficient strategies for risk assessment. Meanwhile, markers could be used in a marker-assisted selection context to improve horse health and welfare.TOULOUSE-ENSAT-Documentation (315552324) / SudocSudocFranceF