Impacto do uso de antimicrobianos na microbiota intestinal de adultos hospitalizados

Gut microbiota plays a key role in human health, influencing immune system functioning, nutrient metabolization and protection against pathogens. The use of antimicrobials is a common practice in hospital settings for the treatment of bacterial infections, however, it can have significant consequences on the composition and function of the intestinal microbiota. In this narrative review article, we explore the impact of antimicrobial use on the gut microbiota of hospitalized adults. The review included studies published in the last ten years, obtained through searches in relevant electronic databases. Several studies suggest that the use of antimicrobials is associated with changes in the diversity and abundance of intestinal bacteria, resulting in an imbalance known as dysbiosis. Intestinal dysbiosis can lead to overgrowth of opportunistic pathogens, increasing the risk of nosocomial infections such as Clostridium difficile infection. Furthermore, prolonged exposure to antimicrobials can lead to long- lasting changes in the gut microbiota, negatively affecting the resilience and resilience of the bacterial community. Studies also suggest that antimicrobial use may be associated with systemic effects such as the development of antibiotic resistance, intestinal inflammation, and immune dysfunction. Despite the deleterious effects, strategies to mitigate the impact of antimicrobial use on the intestinal microbiota are being investigated. Among them, the concomitant administration of probiotics or prebiotics stands out, which can help restore and strengthen the intestinal microbiota during treatment with antimicrobials. In conclusion, antimicrobial use in hospitalized adults is associated with significant changes in gut microbiota composition and function. These changes can have negative health consequences, such as increasing the risk of nosocomial infections and promoting the development of antibiotic resistance. Therefore, it is essential to develop strategies that minimize these effects, promoting the preservation of the intestinal microbiota and the health of patients. Keywords: Gut microbiotia. Intestinal microbiotia. Gut microbiome. Nosocomial infection. Antimicrobials.A microbiota intestinal desempenha um papel fundamental na saúde humana, influenciando o funcionamento do sistema imunológico, a metabolização de nutrientes e a proteção contra patógenos. O uso de antimicrobianos é uma prática comum em ambientes hospitalares para o tratamento de infecções bacterianas, porém, pode ter consequências significativas na composição e na função da microbiota intestinal. Neste artigo de revisão narrativa, explora-se o impacto do uso de antimicrobianos na microbiota intestinal de adultos hospitalizados. A revisão englobou estudos publicados nos últimos dez anos, obtidos por meio de pesquisas em bases de dados eletrônicas relevantes. Diversos estudos sugerem que o uso de antimicrobianos está associado a alterações na diversidade e na abundância de bactérias intestinais, resultando em um desequilíbrio conhecido como disbiose. A disbiose intestinal pode levar ao crescimento excessivo de patógenos oportunistas, aumentando o risco de infecções hospitalares, como a infecção por Clostridium difficile. Além disso, a exposição prolongada a antimicrobianos pode levar a mudanças duradouras na microbiota intestinal, afetando negativamente a resiliência e a capacidade de recuperação da comunidade bacteriana. Estudos também sugerem que o uso de antimicrobianos pode estar associado a efeitos sistêmicos, como o desenvolvimento de resistência a antibióticos, inflamação intestinal e disfunção imunológica. Apesar dos efeitos deletérios, estratégias para mitigar o impacto do uso de antimicrobianos na microbiota intestinal estão sendo investigadas. Entre elas, destacam-se a administração concomitante de probióticos ou prebióticos, que podem auxiliar na restauração e no fortalecimento da microbiota intestinal durante o tratamento com antimicrobianos. Em conclusão, o uso de antimicrobianos em adultos hospitalizados está associado a alterações significativas na composição e na função da microbiota intestinal. Essas alterações podem ter consequências negativas para a saúde, como o aumento do risco de infecções hospitalares e a promoção do desenvolvimento de resistência a antibióticos, portanto, é fundamental o desenvolvimento de estratégias que minimizem esses efeitos, promovendo a preservação da microbiota intestinal e a saúde dos pacientes. Palavras-chave: Microbiota intestinal. Infecções Nosocomiais. Antimicrobianos

Fatores relacionados a colonização da cavidade bucal de indivíduos portadores do HIV por espécies de Candida

The colonization of the oral cavity is a prerequisite to the development of oropharyngeal candidiasis. Aims: The aims of this study were: to evaluate colonization and quantify Candida spp. in the oral cavity; to determine the predisposing factors for colonization; and to correlate the levels of CD4+ cells and viral load with the yeast count of colony forming units per milliliter (CFU/mL) in HIV-positive individuals treated at a University Hospital. Saliva samples were collected from 147 HIV patients and were plated on Sabouraud Dextrose Agar (SDA) and chromogenic agar, and incubated at 30 ºC for 72 h. Colonies with similar morphology in both media were counted and the result expressed in CFU/mL. Results: Of the 147 HIV patients, 89 had positive cultures for Candida spp., with a total of 111 isolates, of which C. albicans was the most frequent species (67.6%), and the mean of colonies counted was 8.8 × 10³ CFU/mL. The main predisposing factors for oral colonization by Candida spp. were the use of antibiotics and oral prostheses. The use of reverse transcriptase inhibitors appears to have a greater protective effect for colonization. A low CD4+ T lymphocyte count is associated with a higher density of yeast in the saliva of HIV patients.A colonização da cavidade oral pode ser considerada um pré-requisito para o desenvolvimento de candidíase orofaríngea. Os objetivos deste estudo foram: avaliar e quantificar espécies de Candidaisoladas da cavidade oral, para determinar os fatores predisponentes para a colonização, e correlacionar os níveis de células CD4+ e carga viral em indivíduos HIV-positivos atendidos em um hospital universitário. Foram coletadas amostras de saliva de 147 pacientes portadores do HIV, as quais foram semeadas em Ágar Sabouraud Dextrose (ASD) e ágar cromogênico e incubadas a 30 °C por 72 horas. As colônias com morfologia semelhante em ambos os meios foram contadas e o resultado expresso em unidade formadora de colônias por mililitro (UFC/mL). Dos 147 pacientes HIV positivos, 89 apresentaram culturas positivas para Candidaspp., totalizando 111 isolados, e C. albicansfoi a espécie mais frequente (67,6%). A contagem média de colônias foi de 8.8 × 10³ UFC/mL. Os principais fatores predisponentes para colonização oral por Candidaspp. foram a utilização de antibióticos e de próteses orais. O uso de antirretroviral da classe de inibidores da transcriptase reversa pareceu ter maior efeito protetor para a colonização. Baixa contagem de linfócitos T CD4+ está relacionada com maior densidade de leveduras na saliva de indivíduos HIV positivos

Microbiota Intestinal e sua influência nas Infecções Hospitalares: Uma revisão de literatura

This is a review of the scientific literature with research carried out in the Google Scholar and Pubmed databases with the objective of reporting the impact of the intestinal microbiota on the hospitalized patient, involving other exogenous microorganisms that affect the health of the intestinal microbiota and the process of health-disease in the human body. The microbiota of the gastrointestinal tract, with a diverse constitution and rich in commensal bacteria, has a great relationship with the development and installation of several pathogens in the patient, representing a material of immense importance due to its connection with several systems, such as respiratory and immunological. The hospital environment is identified as a potential for the spread of infections, a situation associated with health care, antibiotic therapy, invasive processes and the patient's condition. It is concluded that the relationship between unstable intestinal microbiota and the hospitalized patient is a problem for the individual's well-being, we hope that the understanding of the connection and the need for a balanced intestinal microbiota for the establishment of homeostasis of the human being completely, allow these microorganisms to be more vigorously protected by more careful treatments.  Trata-se de uma revisão de literatura científica com pesquisas efetuada nas bases de dados Google Scholar e Pubmed com o objetivo de relatar o impacto da microbiota intestinal para o paciente hospitalizado, envolvendo outros microrganismos exógenos que afetam a saúde da microbiota intestinal e o processo de saúde-doença no organismo humano.  A microbiota do trato gastrointestinal, com constituição diversa e rica em bactérias comensais, apresenta grande relação com o desenvolvimento e instalação de diversos patógenos no paciente, representando um material de imensa importância por sua ligação com diversos sistemas, como respiratório e imunológico. O ambiente hospitalar é apontado como potencial para a disseminação de infecções, situação associada à assistência em saúde, a terapia com antibióticos, processos invasivos e a condição do paciente. Conclui-se que a relação entre microbiota intestinal instável e o paciente hospitalizado configurando-se como uma problemática para o bem estar do indivíduo, esperamos que a compreensão sobre a conexão e a necessidade de uma microbiota intestinal equilibrada para o estabelecimento da homeostase do ser humano por completo, permita que esses microrganismos sejam protegidos com mais vigor por meio de tratamentos mais cuidadosos

O papel dos micronutrientes na microbiota intestinal

The gut microbiota primarily consists of prokaryotic microorganisms, playing a pivotal role in influencing the host's nutrient metabolism, regulating the immune system against infectious agents, and affecting the nervous system. So, we propose a narrative literature review aiming to discuss the importance of gut microbiota supplementation with micronutrients.Omega-3 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) modulate it by influencing the type and abundance of intestinal microorganisms, altering levels of pro-inflammatory mediators, and regulating short-chain fatty acid levels or their salts. Vitamin D, synthesized through skin exposure to ultraviolet B rays, has shown changes in the gut microbiota after supplementation (e.g., increased Enterobacteriaceae) and remained unchanged in HIV positive individuals. Vitamin C significantly influences the microbiota, being absorbed in the proximal small intestine, and its supplementation increases essential bacteria like Lachnospiraceae and Blautia. Vitamin A, involved in multiple physiological processes, regulated the gut microbiota upon supplementation by increasing bacteria like Bifidobacterium, Bacteroidetes, and Prevotella. Vitamin B12 supplementation, solely sourced from animal-derived foods, also shifted the microbiota, raising the abundance of Bacteroidetes and Firmicutes. Based on the analyzed studies, various factors influence the role of micronutrients in the gut microbiota, including lifestyle habits, diet, region and country, nutritional status, and the presence of chronic diseases.A microbiota intestinal é composta principalmente por microrganismos procariontes, sendo de extrema importância para o organismo por influenciar no metabolismo de nutrientes do hospedeiro, atuar na regulação do sistema imunológico e de sua defesa contra agentes infecciosos e no sistema nervoso. Os ácidos graxos poli-insaturados ômega-3(PUFAs ômega-3) a influenciam, modulando o tipo e a abundância de microrganismos intestinais, alterando os níveis de mediadores pró-inflamatórios, como também na regulação dos níveis de ácidos graxos de cadeia curta ou sais de ácidos graxos de cadeia curta. A vitamina D é sintetizada através da exposição da pele aos raios ultravioleta B; foram observadas mudanças na microbiota intestinal após sua suplementação (aumento de Enterobacteriaceae, por exemplo) como também inalteração em indivíduos soropositivos. A vitamina C apresenta grande influência na modulação da microbiota uma vez que é absorvida no intestino delgado proximal, apresentando através de sua suplementação o aumento de bactérias importantes como Lachnospiraceae e Blautia. A vitamina A está envolvida em vários processos fisiológicos e mostrou-se como um micronutriente regulador da microbiota intestinal pela sua suplementação, aumentando bactérias como Bifidobacterium, Bacteroidetes e Prevotella. A suplementação da vitamina B12, obtida somente através do consumo de alimentos de origem animal, também modificou a microbiota, aumentando a abundância de Bacteroidetes e Firmicutes. Com base nos estudos analisados, observa-se que há vários fatores que influenciam no papel dos micronutrientes na microbiota intestinal, como os hábitos de vida, a dieta, a região e o país, o estado nutricional e a ocorrência de doenças crônicas

CORRELAÇÃO ENTRE O SONO E A MICROBIOTA INTESTINAL: IMPACTO NA SAÚDE

Goal: the review aims to gather scientific evidence regarding the correlation between sleep and intestinal microbiota and pointing out how a state of imbalance between these two factors may be capable of impacting human health. Method: The development of this review was carried out using research articles present in the Google Scholar Pubmed, Embase, Lilacs and Cochrane Library databases, between the years 2012 and 2022, with the assistance of Descriptors in Sciences and Health (Decs). Results: 9 articles that met all inclusion criteria were found. These address evidence from the last ten years regarding the link between sleep quality and the human intestinal microbiota, bringing to light a subject of interest for health. Therefore, this discovery may be important for understanding how dysbiosis affects the organism. Final Consideration: The selected literature points to the existence of a link between sleep and the intestinal microbiota, in addition to indicating that dysbiosis is a protagonist in the emergence of several chronic non-communicable diseases (CNCD), neurological and psychiatric.Objetivo: a presente revisão objetiva reunir evidências científicas a respeito da correlação entre sono e microbiota intestinal e apontar como um estado de desequilíbrio entre estes dois fatores pode ser capaz de impactar na saúde humana. Método: para construção desta revisão foram utilizados artigos de pesquisa presentes nas bases de dados Google Scholar, Pubmed, Embase, Lilacs e Cochrane Library, entre os anos de 2012 a 2022, utilizando os Descritores em Ciências e Saúde (Decs). Resultados: foram selecionados 9 artigos que correspondiam a todos critérios de inclusão, abordando evidências dos últimos dez anos quanto a ligação existente entre a qualidade do sono e a microbiota intestinal humana, trazendo à tona um assunto de interesse para a saúde, dado que essa descoberta pode ser importante para entender como os quadros de disbiose afetam o organismo. Considerações Finais: a literatura selecionada aponta a existência de uma ligação entre o sono e a microbiota intestinal, além de indicar que a disbiose é protagonista no surgimento de diversas doenças crônicas não transmissíveis (DCnT), neurológicas e psiquiátricas

Terapia Empírica Inapropriada no Tratamento de Infecções de Corrente Sanguínea na Era da Multirresistência Antimicrobiana

Background and objectives: Bloodstream infection (BSI) by multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa is a severe infection. This study aimed to evaluate and identify the predictors of mortality in patients who had bloodstream infection by carbapenem-resistant P. aeruginosa. Methods: This is a retrospective cohort study, approved by Committee of Ethics in Research with Human Participants, which included 87 consecutive patients hospitalized in a referral hospital in Brazil. Clinical and demographic information about each patient were obtained from hospital records. The Student’s T-test was used to compare continuous variables and x2 or Fisher’s exact tests to compare categorical variables. To determine independent risk factors for 30-day mortality, a multiple logistic regression model was used. A survival curve was constructed using the Kaplan–Meier method. Results: Among the patients, 87.3% use antibiotics previously, 60.9% received inadequate empirical treatment, and the 30-day mortality rate was 57.5%. Inappropriate antibiotic empirical therapy was independently associated with a 30-days death and mortality rate. Conclusion: These findings can show some insights about the relationship between higher mortality and inappropriate empirical therapy for patients with BSI by P. aeruginosa. There is a need for better diagnostic tests and infection control programs should focus on de-escalation the antibiotic inappropriate therapy, mainly in BSI caused by carbapenem-resistant P. aeruginosa.Justificación y objetivos: La infección del torrente sanguíneo por Pseudomonas aeruginosa multirresistente es grave. Este estudio tuvo como objetivo evaluar e identificar predictores de mortalidad en pacientes ingresados ​​en una Unidad de Cuidados Intensivos que presentaban infección del torrente sanguíneo por P. aeruginosa resistente a carbapenémicos. Métodos: Se trata de un estudio de cohorte retrospectivo, aprobado por el Comité de Ética en Investigación con Participantes Humanos, que incluyó 87 pacientes consecutivos ingresados ​​en un hospital de referencia en Brasil. La información clínica y demográfica de cada paciente se obtuvo mediante el análisis de las historias clínicas de los pacientes. Se utilizó la prueba t de Student para comparar variables continuas y x2 o prueba exacta de Fisher para comparar variables categóricas. Para determinar los factores de riesgo independientes para la mortalidad a los 30 días, se utilizó un modelo de regresión logística múltiple. Se construyó una curva de supervivencia utilizando el método de Kaplan-Meier. Resultados: Del total de pacientes, el 87,3% utilizaba antibióticos previamente, el 60,9% recibió tratamiento empírico inadecuado y la tasa de mortalidad a los 30 días fue del 57,5%. La terapia empírica inadecuada fue un factor de riesgo independiente de mortalidad. Conclusión: Estos hallazgos revelan algunos conocimientos sobre la relación entre el aumento de la mortalidad y la terapia empírica inadecuada para los pacientes con infección del torrente sanguíneo por P. aeruginosa. Además, destacan la necesidad de mejores pruebas de diagnóstico y los programas de control de infecciones deben centrarse en reducir la terapia con antibióticos inapropiados, particularmente en infección del torrente sanguíneo causados ​​por P. aeruginosa resistente a carbapenémicos.Justificativa e objetivos: Infecção da corrente sanguínea (ICS) por Pseudomonas aeruginosa multirresistente é grave. Este estudo teve como objetivo avaliar e identificar os preditores de mortalidade em pacientes admitidos em uma Unidade de Terapia Intensiva que apresentaram infecção da corrente sanguínea por P. aeruginosa resistente aos carbapenêmicos. Métodos: Trata-se de um estudo de coorte retrospectivo, aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa com Seres Humanos, que incluiu 87 pacientes consecutivos internados em um hospital de referência no Brasil. As informações clínicas e demográficas de cada paciente foram obtidas através de análise dos prontuários dos pacientes. O teste T de Student foi usado para comparar variáveis contínuas e o teste x2 ou exato de Fisher para comparar variáveis categóricas. Para determinar fatores de risco independentes para mortalidade em 30 dias, foi utilizado um modelo de regressão logística múltipla. Uma curva de sobrevida foi construída pelo método de Kaplan-Meier. Resultados: Do total de pacientes, 87,3% faziam uso prévio de antibióticos, 60,9% receberam tratamento empírico inadequado e a mortalidade em 30 dias foi de 57,5%. A terapia empírica inadequada foi fator de risco independente para mortalidade. Conclusão: Esses achados revelam alguns insights sobre a relação entre maior mortalidade e terapia empírica inadequada para pacientes com ICS por P. aeruginosa. Além disso, destacam a necessidade de melhores testes diagnósticos e os programas de controle de infecção devem se concentrar na redução da terapia inadequada com antibióticos, principalmente na ICS causada por P. aeruginosa resistente a carbapenêmicos

AVALIAÇÃO DA VIABILIDADE DE BACTÉRIAS ESTOCADAS EM CALDO BHI-GLICEROL A -20ºC HÁ QUATRO ANOS

With the biotechnological and scientific advancements, the need for preserving microorganisms in laboratories for diagnostic, research, or educational purposes arises. Thus, this study aims to analyze the viability of bacteria stored for four years using the cryopreservation technique. The viability of 70 bacterial isolates was evaluated, including 17 species of Gram-positive bacteria and 53 species of Gram-negative bacteria stored in cryogenic tubes containing Brain Heart Infusion (BHI) broth and glycerol, maintained in a -20ºC freezer since 2019. To reactivate the isolates, bacterial suspensions were thawed and plated on Mueller Hinton Agar plates, while the remaining material was added to tubes containing BHI broth and incubated in a bacteriological incubator at 35ºC for 24 hours. The results demonstrated that 84.3% (59) of the samples showed satisfactory growth without contamination, with Gram-negative bacteria achieving a higher viability rate (84.9% - 45) compared to Gram-positive bacteria (82.3% - 14). Therefore, this study demonstrates that freezing bacteria in BHI-glycerol broth at -20ºC is an effective technique for the long-term conservation of Gram-negative bacteria.Con el desarrollo biotecnológico y científico, existe la necesidad de preservar los microorganismos en el laboratorio con fines de diagnóstico, investigación o enseñanza. Por lo tanto, este trabajo tiene como objetivo analizar la viabilidad de las bacterias almacenadas durante cuatro años, utilizando la técnica de criopreservación. Se evaluó la viabilidad de 70 aislados bacterianos, 17 especies de bacterias Gram-positivas y 53 bacterias Gram-negativas, almacenadas en tubos criogénicos que contienen caldo de Infusión Cerebral Corazón (IHB) y glicerol mantenido en un congelador a -20ºC desde 2019. Para reactivar los aislamientos, las suspensiones bacterianas se descongelaron y se sembraron en placas de Agar Mueller Hinton y el resto del material en tubos que contenían caldo BHI y se incubaron en un horno bacteriológico a 35ºC durante 24 horas. Los resultados mostraron que el 84,3% (59) de las muestras mostraron un crecimiento satisfactorio y ninguna contaminación, y las bacterias Gram-negativas alcanzaron la mayor tasa de viabilidad (84,9% - 45) en comparación con las Gram-positivas (82,3% - 14). Así, el presente estudio demostró que la congelación de bacterias en caldo de BHI-glicerol a -20ºC es una técnica eficaz para la conservación de bacterias Gram-negativas durante largos períodos.Com o desenvolvimento biotecnológico e científico, surge a necessidade da preservação de micro-organismos em laboratório para fins de diagnóstico, pesquisa ou ensino. Dessa forma, este trabalho objetiva analisar a viabilidade de bactérias estocadas há quatro anos, utilizando a técnica de criopreservação. Foi avaliada a viabilidade de 70 isolados bacterianos, sendo 17 espécies de bactérias Gram positivas e 53 bactérias Gram negativas, estocadas em tubos criogênicos contendo caldo Brain Heart Infusion (BHI) e glicerol mantidos em freezer a -20ºC desde 2019. Para reativação dos isolados, as suspensões bacterianas foram descongeladas e semeadas em placas de Ágar Mueller Hinton e o restante do material em tubos contendo caldo BHI e incubado em estufa bacteriológica a 35ºC por 24 horas. Os Resultados demonstraram que 84,3% (59) das amostras apresentaram crescimento satisfatório e sem contaminação, sendo que as bactérias Gram negativas alcançaram a maior taxa de viabilidade (84,9% - 45) em comparação com as Gram positivas (82,3% - 14). Sendo assim, o presente estudo demonstrou que o congelamento de bactérias em caldo BHI-glicerol a -20ºC é uma técnica eficaz para a conservação de bactérias Gram negativas por longos períodos.Com o desenvolvimento biotecnológico e científico, surge a necessidade da preservação de micro-organismos em laboratório para fins de diagnóstico, pesquisa ou ensino. Dessa forma, este trabalho objetiva analisar a viabilidade de bactérias estocadas há quatro anos, utilizando a técnica de criopreservação. Foi avaliada a viabilidade de 70 isolados bacterianos, sendo 17 espécies de bactérias Gram positivas e 53 bactérias Gram negativas, estocadas em tubos criogênicos contendo caldo Brain Heart Infusion (BHI) e glicerol mantidos em freezer a -20ºC desde 2019. Para reativação dos isolados, as suspensões bacterianas foram descongeladas e semeadas em placas de Ágar Mueller Hinton e o restante do material em tubos contendo caldo BHI e incubado em estufa bacteriológica a 35ºC por 24 horas. Os Resultados demonstraram que 84,3% (59) das amostras apresentaram crescimento satisfatório e sem contaminação, sendo que as bactérias Gram negativas alcançaram a maior taxa de viabilidade (84,9% - 45) em comparação com as Gram positivas (82,3% - 14). Sendo assim, o presente estudo demonstrou que o congelamento de bactérias em caldo BHI-glicerol a -20ºC é uma técnica eficaz para a conservação de bactérias Gram negativas por longos períodos

Avaliação da frequência, atividade enzimática e sensibilidade a antifúngicos de leveduras do gênero Candida isoladas da cavidade bucal de pacientes portadores do HIV

The prevalence of Candida spp. as commensal of the oral cavity can reach 70%. However, oral cavity colonization not always culminates in oral candidiasis, however it can be considered a preliminary condition for the development of it. Oral candidiasis is the most common fungal infection among individuals with HIV, due the result of immune deficiency. Considering the importance of this type of infection in HIV-positive, we proposed to carry out this work with the following objectives: determine the frequency of HIV positive individuals colonized by Candida spp., Candida species isolated; determine the main predisposing factors for oral colonization by Candida spp., to relate the microbial load of colonization with the count of lymphocytes TCD4+, viral load and antiretroviral therapy used at the time of collection; determine the sensitivity of isolates of Candida spp. antifungal fluconazole, itraconazole, voriconazole, amphotericin B and nystatin, by the methodology of disk diffusion and search for the exoenzymes proteinases, phospholipases, hemolysin and DNase in isolates of Candida spp. From May to October 2012 saliva samples from HIV patients attended at Clinical Hospital - Federal University of Uberlândia and HIV negative individuals were collected, which were seeded onto plates containing Sabouraud Dextrose Agar and CHROMagar Candida plates and incubated in a bacteriological incubator at 30ºC for 72 hours. The identification of the isolates was done by classical methodology, using chromogenic agar and assimilation of carbon sources and nitrogen, the differentiation between C. dubliniensis and C. albicans was made by PCR. Candida spp. were isolated from 89 of the 147 patients studied, a total of 111 isolates, C. albicans the most common species among the isolates (67.6%). The average colony count was 8.8x10³ CFU/mL. In the control group 51 of the 150 saliva samples were positive for Candida, obtained 57 isolates, of which 77.2% were C. albicans. The average of CFU/mL was 9.8x10². The predisposing factors for oral colonization were use of antibiotics and oral prosthesis and a low CD4 + cells count and high viral load. The combined use of antiretroviral class of reverse transcriptase inhibitors had a greater protective effect on the colonization than the use of these drugs associated with protease inhibitors. The nystatin antifungal, voriconazole and amphotericin B showed the highest number of samples of Candida spp. sensitive in both groups followed by fluconazole and itraconazole. The phospholipase production was observed in 69.3% and 72.6% of the isolates from the group of patients and HIV negative, respectively. The production of haemolysin by isolates of HIV positive and non-positive patients, respectively, was to 98.2% and 96.5%, DNAse was produced by 27% and 21% of the isolates from patients and non-patients of HIV. Finally, with the exception of DNAse, there was no statistically significant difference between isolates from the two study groups in the characters studied.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorMestre em Ciências da SaúdeA prevalência de Candida spp. como comensal da cavidade oral pode chegar a 70%. Entretanto, a colonização da cavidade oral nem sempre culmina na candidíase bucal, porém pode ser considerada uma condição preliminar para o desenvolvimento da mesma. A candidiase bucal é a infecção fúngica mais comum entre os indivíduos portadores do HIV, resultado do comprometimento imunológico dos mesmos. Considerando a importância desse tipo de infecção em HIV positivos, propusemos a realização do presente trabalho com os seguintes objetivos: determinar a frequência de indivíduos HIV positivos colonizados por Candida spp., bem como as espécies de Candida isoladas; determinar os principais fatores predisponentes para a colonização oral por Candida spp., relacionar a carga microbiana de colonização com a contagem de linfócitos T CD4+, carga viral e terapia antirretroviral utilizada no momento da coleta; determinar a sensibilidade dos isolados de Candida spp. aos antifúngicos fluconazol, itraconazol, voriconazol, anfotericina B e nistatina, pela metodologia de difusão de disco e pesquisar as exoenzimas proteinases, fosfolipases, DNAse e hemolisina nos isolados de Candida spp. No período de maio a outubro de 2012 foram coletadas amostras de saliva de portadores do HIV atendidos no HC-UFU e de indivíduos HIV negativos, as quais foram semeadas em placas contendo Ágar Sabouraud Dextrose e em placas com CHROMágar Candida e incubadas em estufa bacteriológica à 30ºC por 72 horas. A identificação dos isolados foi feita pela metodologia clássica, utilização de ágar cromogênico e assimilação de fontes de carbono e nitrogênio, sendo a diferenciação de C. albicans e C. dubliniensis feita através de PCR. Os testes de sensibilidade e pesquisa de fatores de virulência foram feitos conforme descrito no documento da CLSI (2009) e na literatura. Candida spp. foram isoladas de 89 dos 147 pacientes estudados, totalizando 111 isolados, sendo C. albicans a espécie mais freqüente entre os isolados (67,6%). A contagem média de colônias foi de 8,8x103 UFC/mL. Já no grupo controle 51 das 150 amostras de saliva foram positivas para gênero Candida, obtendo 57 isolados, dos quais 77,2% eram C. albicans. A média de UFC/mL foi de 9,8x10². Os fatores predisponentes para colonização bucal foram uso de antibióticos e prótese oral, bem como uma baixa contagem de CD4+ e alta carga viral. O uso combinado de antirretrovirais da classe dos inibidores de trancriptase reversa apresentou um maior efeito protetor para a colonização do que o uso desses medicamentos associados com inibidores de protease. Os antifúngicos nistatina, voriconazol e anfotericina B apresentaram o maior número de amostras de Candida spp. sensíveis em ambos os grupos, seguidos pelo fluconazol e itraconazol. A produção de fosfolipase foi observada em 69,3% e 72,6% dos isolados provenientes do grupo de pacientes e de HIV negativos, respectivamente. Proteinase foi produzida por 77,5% e 90,7% das espécies de Candida obtidas do grupo de pacientes e de HIV negativos, respectivamente. A produção de hemolisina pelos isolados do grupo de HIV positivos e não portadores, respectivamente, foi igual a 98,2% e 96,5%. DNAse foi produzida por 27% e 21% dos isolados proveniente dos pacientes e dos não HIV. Por fim, com exceção da DNAse, não houve diferença estatisticamente significativa entre os isolados dos dois grupos de estudo em relação às características estudadas

Invasive candidiasis in critical neonates: etiology, pathogenesis and molecular profile

The increase in survival of preterm infants admitted to Neonatal Intensive Care Units (NICUs) is associated with an increase in the occurrence of invasive infections. The colonization of the hands of health professionals by pathogenic microorganisms capable of expressing virulence factors, such as Candida spp., Is worrisome due to the constant contact between patients and professionals in NICU. The objectives of this study were: to verify the rate of bacterial and fungal infections in a NICU of the Clinical Hospital of Federal University of Uberlândia, to characterize phenotypically isolated Candida spp. from the hands of health professionals in the neonatology department. The newborns included in the study were monitored daily through the NHSN system, with information such as: gestational age (GI), birth weight, use of invasive and antimicrobial devices, infections and length of hospital stay. Isolates from the hands of health professionals were evaluated for the production of virulence factors and antifungal susceptibility. The hemolytic activity and DNAse were investigated using blood agar and DNAse, respectively. Biofilm production was evaluated through the XTT sodium salt reduction ability and the evaluation of the susceptibility of the isolates to the antifungals was done through the broth microdilution methodology. The results of this study were: the hospital infection rate equals 12/1000 patient-days. GI, weight, SNAPPE> 24 and use of devices such as catheters, mechanical ventilation and parenteral nutrition were statistically significant for bacterial and fungal infections. Death was 2.6 times higher in those with fungal infection compared to those with bacterial infection. Fifty isolates of Candida spp. of which 19 were C. parapsilosis stricto sensu, three C. metapsilosis, one C. orthopsilosis, seven C. albicans, six C. famata, five C. lusitaniae, three C. krusei, two C. kefyr, two C. tropicalis, a C. glabrata and a C. guilliermondii. 49 isolates were able to express at least one of the three virulence factors studied, and 17 simultaneously expressed all 3 factors. Seventy-eight percent of the isolates were sensitive to the three antifungals. These results demonstrated the importance of constant epidemiological surveillance and measures of effective control of infections in the neonatology sector and that isolates of Candida from colonization of the hands of health professionals are able to express important factors of virulence.Tese (Doutorado)O aumento da sobrevida de neonatos prematuros admitidos em Unidades de Terapia Intensiva Neonatal (UTIN) está associado à elevação da ocorrência de infecções invasivas. A colonização das mãos de profissionais de saúde por micro-organismos patogênicos, capazes de expressar fatores de virulência, como Candida spp., é preocupante devido ao máximo contato entre pacientes e profissionais em UTIN. Os objetivos deste estudo foram: verificar a taxa de infecções bacterianas e fúngicas da UTIN do Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia, bem caracterizar fenotipicamente isolados de Candida spp. provenientes das mãos dos profissionais de saúde dessa unidade. Os neonatos incluídos no estudo foram acompanhados diariamente através do sistema NHSN, sendo coletadas informações como idade gestacional (IG), peso ao nascer, uso de dispositivos invasivos e de antimicrobianos, ocorrência de infecções e tempo de internação. Os isolados provenientes das mãos dos profissionais de saúde foram avaliados quanto a produção de fatores de virulência e susceptibilidade aos antifúngicos. A pesquisa de atividade hemolítica e de DNAse foi feita utilizando ágar sangue e DNAse, respectivamente. A produção de biofilme foi avaliada através da capacidade de redução do sal de sódio XTT e a avaliaçãoda susceptibilidade dos isolados aos antifúngicos foi feita através da metodologia de microdiluição em caldo. Os resultados deste estudo foram: a taxa de infecção hospitalar igual a 12/1000 pacientes-dia. IG, peso, SNAPPE>24 e uso de dispositivos como cateteres, ventilação mecânica e nutrição parenteral foram estatisticamente significativos para ocorrência de infecções bacterianas e fúngicas. O óbito foi 2,6 vezes maior naqueles neonatos com infecção fúngica, em relação aqueles com infecção bacteriana. Foram estudados 50 isolados de Candida spp. dos quais 19 foram C. parapsilosis stricto sensu, três C. metapsilosis, um C. orthopsilosis, sete C. albicans, seis C. famata, cinco C. lusitaniae, três C. krusei, dois C. kefyr, dois C. tropicalis, um C. glabrata e um C. guilliermondii. 49 isolados foram capazes de expressar pelo menos um dos três fatores de virulência pesquisados, sendo que 17 expressaram simultaneamente todos os 3 fatores. Setenta e oito por cento dos isolados foram sensíveis aos três antifúngicos. Esses resultados ressaltam a importância da vigilância epidemiológica constante e de medidas de controle efetivo de infecções na unidade e que isolados de Candida provenientes de colonização das mãos de profissionais de saúde são capazes de expressar importantes fatores de virulência

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ABSTRACT Introduction: Melanin production by species of Cryptococcus is widely used to characterize C. neoformans complex in mycology laboratories. This study aims to test the efficacy of methyldopa from pharmaceutical tablet as a substrate for melanin production, to compare the production of melanin using different agar base added with methyldopa, and to compare the melanin produced in those media with that produced in Niger seed agar and sunflower seed agar by C. neoformans, C. laurentii, and C. albidus. Two isolates of each species, C. neoformans, C. laurentii, and C. albidus, and one of Candida albicans were used to experimentally detect conditions for melanin production. Methods: The following media were tested: MuellerHinton agar (MHA), brain and heart infusion agar (BHIA), blood agar base (BAB), and minimal medium agar (MMA), all added with methyldopa, and the media Niger seed agar (NSA) and sunflower seed agar (SSA). Results: All isolates grew in most of the culture media after 24h. Strains planted on media BAB and BHIA showed growth only after 48h. All isolates produced melanin in MMA, MHA, SSA, and NSA media. Conclusions: Methyldopa in the form pharmaceutical tablet can be used as a substrate for melanin production by Cryptococcus species; minimal medium plus methyldopa was more efficient than the BAB, MHA, and BHIA in the melanin production; and NSA and SSA, followed by MMA added with methyldopa, were more efficient than other media studied for melanin production by all strains studied