Reabilitação oral em pacientes com bulimia

A principal consequência da bulimia nervosa, na cavidade oral, é a erosão dentária. Segundo a literatura cientifica, para a resolução desta manifestação oral, a técnica de três passos é o melhor plano de tratamento. Esta técnica tem como objetivo alcançar a máxima preservação da estrutura dentária e ter um ótimo resultado estético e funcional. São realizadas restaurações diretas em resina composta nos dentes posteriores superiores, inferiores e anteriores mandibulares. Bem como restaurações indiretas por palatino nos dentes anteriores e por fim facetas de cerâmica por vestibular nos dentes anteriores maxilares, uma vez que estas têm um excelente comportamento quando colocadas com um método de aplicação otimizado de adesivo dentinário. Este plano de tratamento tem uma sequência lógica dividida em três etapas. Esta abordagem apenas pode ter sucesso a longo prazo, caso os pacientes a serem tratados não continuem com os episódios de regurgitação, que tanto caracterizam este distúrbio alimentar.The main consequence of bulimia nervosa in the oral cavity is tooth erosion. According to the scientific literature, for the resolution of this oral manifestation, the three-step technique is the best treatment plan. This technique aims to achieve maximum preservation of tooth structure and it has a great esthetic and functional result. Direct composite resin restorations are performed on mandibular upper, lower, anterior and posterior teeth. As well as indirect restorations by palatine in the anterior teeth and finally facets of ceramic by vestibular in the maxillary anterior teeth, since these have an excellent behavior when placed with a method of optimized application of dentin adhesive. This treatment plan has a logical sequence divided into three steps. This approach can only be successful in long-term if the patients to be treated do not continue with episodes of regurgitation, which characterize this eating disorder

Continuous versus batch manufacturing of oral dosage forms: analysis of current worldwide implementation

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2021, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.Tradicionalmente, o fabrico de formas farmacêuticas orais é feito pela produção de lotes, mas nos últimos anos a indústria farmacêutica tem vindo a ser pressionada para melhorar a eficiência e qualidade de fabrico. Com o aumento da exigência por parte das autoridades reguladoras e a diminuição das margens de lucro fez com que as indústrias farmacêuticas explorassem novas tecnologias de fabrico A produção em continuo tem sido considerada uma opção alternativa à produção por lotes para muitos fabricantes, visto que, geralmente produz produtos farmacêuticos de melhor qualidade e de maior rendimento, com tempo e custos reduzidos. Apesar dos avanços consideráveis e do incentivo por parte das autoridades reguladoras (FDA, EMA) através da emissão de diretrizes adequadas, a utilização da produção em continuo na área farmacêutica ainda é limitada devido a uma série de desafios relativos ao desenvolvimento de processo e à garantia de qualidade que têm impedido os fabricantes de adotar esta tecnologia. Esta dissertação aborda as principais alterações relacionadas com a implementação da produção em continuo relativamente à produção por lotes e avalia o tipo de produção (produção em continuo vs produção por lotes) mais rentável tendo em conta vários fatores. São ainda apresentados e discutidos exemplos de empresas que já utilizam a produção em continuo, bem como alguns medicamentos fabricados com esta tecnologia.Traditionally, the manufacture of oral pharmaceutical forms is performed by batch manufacturing, but in recent years the pharmaceutical industry has come under pressure to improve manufacturing efficiency and quality. With increasing requirements from regulatory authorities and decreasing profit margins, pharmaceutical companies have been exploring new manufacturing technologies. Continuous manufacturing has been considered an alternative option to batch manufacturing for many manufacturers, as it generally produces better quality and higher yielding pharmaceutical products, with reduced time and costs. Despite considerable advances and encouragement from regulatory authorities (FDA, EMA) through the issuance of appropriate guidelines, the use of continuous manufacturing in pharmaceuticals is still limited due to a number of process development and quality assurance challenges that have prevented manufacturers from adopting this technology. This thesis is focused on the main changes related to the implementation of continuous manufacturing relative to batch manufacturing and the evaluation of the most cost-effective type of production. Examples of companies already using continuous manufacturing, as well as some drugs manufactured by using this technology will be presented and discussed

Dismissing a CFO

This Work Project presents a case-study to be used in Negotiation courses, both in Masters Programs and executive education workshops. The negotiation case is based on a real negotiation, between a Portuguese media company and its CFO, about the terms of his dismissal. This dismissal demonstrates that the better informed negotiator has a higher chance of achieving favorable results. It also illustrates the importance of being truthful in achieving positive outcomes. We conclude that gathering information and behaving ethically is fundamental in a negotiation context

Técnicas de recobrimento radicular

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Medicina DentáriaObjetivo: A realização deste trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia de diferentes tratamentos para a recessão gengival nomeadamente o retalho de reposicionamento coronal, o retalho de reposicionamento coronal combinado com enxerto de tecido conjuntivo e/ou proteínas de matriz de esmalte e procura-se responder à seguinte questão: qual a técnica que permite a obtenção de melhores resultados? Materiais e Métodos: Este trabalho foi realizado a partir da recolha de vários estudos publicados entre 2002 e Junho de 2013 em Português, Espanhol e Inglês utilizando a base de dados da Pubmed. A pesquisa para as recessões gengivais foi efetuada com a utilização das seguintes palavras chaves : “gingival recession”, “gengival recession AND theray”, “gingival recession AND surgery”, “tooth root AND surgery”. Os critérios de inclusão permitiram selecionar os ensaios clínicos randomizados referentes ao tratamento de recessões gengivais em humanos, que incluem-se a comparação de pelo duas modalidades terapêuticas e com um follow up mínimo de 6 meses. Resultados: A pesquisa realizada para o tratamento de recessões gengivais identificou inicialmente 302 estudos. Com base na leitura do título e do resumo dos trabalhos foram selecionados 70 estudos. No final do processo de triagem, foram incluídos 20 ensaios clínicos randomizados sobre o tratamento de recessões gengivais que obedeciam aos critérios de inclusão previamente estabelecidos, distribuídos pelas diferentes modalidades terapêuticas. Conclusão: A técnica de enxerto de tecido conjuntivo associado a um retalho de reposicionamento apical parece ser a técnica mais previsível e eficaz no tratamento de problemas associados a recessões gengivais. Por outro lado, a combinação de proteínas matriz de esmalte a um retalho de reposicionamento coronal parece ser uma alternativa terapêutica com vantagens significativas na melhoria dos resultados clínicos quando comparada com a utilização destes tratamentos de forma isolada. Aim: Compare and evaluated the clinical efficacy of a coronally advanced flap procedure, coronally advanced flap procedure with connective tissue graft with or without the use of enamel matrix proteins derivative, and it is expected answer the following question: what is the technique that allows to obtain better results? Materials and Methods: This study was carried out from the collection of several studies published between 2002 and June 2013 in Portuguese, Spanish and English through a search conducted in the PubMed database. The search for recession defects was performed using the following key words: "gingival recession", "gingival recession AND therapy", "gingival recession AND surgery", "tooth root AND surgery" limiting the search for randomized clinical trials for the treatment of gingival recession in humans, which include a comparison of the two therapeutic modalities and at least six months follow-up. Results: The initial research for recessions defects identified 302 studies. Based on the title and the summary of the studies, 70 studies were included. At the end of screening process we include 20 randomized clinical trials on the treatment of recession defects, which were according to the previous criteria established, distributed by different therapeutic modalities used. Conclusion: The connective tissue graft procedure with coronally positioned flap seems to be the most predictable and effective to treat gingival recession. The combination of enamel matrix proteins with coronally advanced flap procedures seems to provide good alternative therapy, with significant advantages in improving clinical outcomes when compared with the use of these treatments alone

Characterization of HIV-2 susceptibility to protease and entry inhibitors and identification of envelope determinants of coreceptor usage, cell tropism and antibody neutralization

Tese de doutoramento, Farmácia (Microbiologia), Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2018The main aim of this work was to characterize the susceptibility of HIV-2 to protease and entry inhibitors and to identify viral determinants of coreceptor usage, cellular tropism and antibody neutralization. The specific objectives were: 1) to determine the contribution of amino acids residues in the V3 loop involved in CCR5 and CXCR4 use, susceptibility to antibody neutralization and cellular tropism; 2) to develop a genotypic method for the prediction of HIV-2 coreceptor usage based on V3 loop; 3) to evaluate the antiviral activity of a new short-peptide fusion inhibitor in HIV-2 and 4) to characterize the evolution and diversity of protease (PR) in HIV-2 infected patients treated and untreated with protease inhibitors (PIs). In the first study (Chapter 3), site-directed mutagenesis was used to create amino acid substitutions in residues 18 and/or 29 and/or single deletions at positions 23 and 24 in V3 loop of pROD10, an infectious molecular clone of HIV-2ROD, the reference X4 isolate. Cellular assays demonstrated that: 1) conversion from X4 to R5 phenotype in HIV-2ROD10 requires H18L substitution and the deletion Δ(23,24); 2) H18L and H23Δ + Y24Δ mutants are more easily neutralized than HIV-2ROD and other mutated viruses by plasma from HIV-2 infected individuals; on the other hand, K29T substitution seems to contribute to increase resistance to neutralization; 3) K29T mutants acquire macrophage tropism without compromising replicative capacity in CD4+ T lymphocytes; 4) H18L + Δ(23,24) and (23,24) mutants gained the ability to replicate in macrophages albeit at the cost of some capacity to replicate in CD4+T cells. Structural analysis by homology modelling showed that: 1) H18L substitution disrupts the interaction of histidine with methionine at position 15 and with phenylalanine at position 20; 2) deletion of H23 and Y24 leads to the elimination of the parallel β sheets presented in the V3 loop and the loss of the aromatic system which can compromise the binding of cellular coreceptors or other molecules (e.g. antibodies); 3) K29T substitution reduces the charge of V3 and leads to the loss of the interactions with isoleucine at position 27. Collectively, these results demonstrated that V3 is an important determinant in HIV-2 coreceptor usage, susceptibility to antibody neutralization and replication capacity on CD4+ T cells and macrophages and that these phenotypic characteristics can be modulated by a single amino acid change in V3. These results support an important role for V3 in the pathogenesis of HIV-2 infection. In the second study (Chapter 4), a genotypic method was developed for the prediction of HIV-2 coreceptor usage from the V3 loop, similar to an existing tool created for HIV-1 (geno2pheno [coreceptor-hiv2]). The development and validation of this tool was based on a data set of 126 samples from HIV-2 infected patients, most of them from Portugal, with phenotypic coreceptor usage annotations. Predictive accuracy was also validated based on the V3 mutants produced and phenotypically characterized in the previous chapter. Overall, these findings indicated that geno2pheno [coreceptor-hiv2] can be a useful tool in clinical practice, allowing better management of HIV-2 infected patients eligible for maraviroc (MVC). In the third study (Chapter 5) a short-peptide named 2P23 was produced by combining a M-T hook structure, HIV-2 sequences and ‘salt-bridge’-based strategies. This peptide showed a potent antiviral activity against HIV-2 and HIV-1 isolates (mean 50% inhibitory concentration- IC50: 20.17 nM and 5.57 nM, respectively) and SIV (IC50: 1.8 nM for SIVpbj and 3.29 for SIV239). This new fusion inhibitor also demonstrated a strong activity against the V3 variants (Chapter 3) (IC50:15.38 nM), irrespectively of the coreceptor phenotype. Thus, 2P23 is an ideal candidate for further clinical development due to its broad antiviral activity against several HIV-2 isolates, with different coreceptor tropism. The last study (Chapter 6), involved the characterization of PR diversity and genotypic resistance to PIs of HIV-2 infected individuals living in Portugal and the evaluation of the impact of resistance mutations to PIs in treatment outcome eight years post-therapy. A high prevalence of PR mutations (e.g. I54M, I82F, L90M) associated to saquinavir (SQV), darunavir (DRV) and lopinavir (LPV) resistance, were detected in proviral DNA from these patients at baseline. Eight years after study entry, the genotypic analysis identified: 1) loss of resistance mutations in two patients, that were initially detected at baseline, presumably as a consequence of treatment interruption; 2) long term persistence of resistance mutations in one individual as a result of virologic and immunologic failure, which might raise concern about transmission of drug resistance in the future and 3) development of new resistance mutations in three patients due to previous treatment failures. The analysis of genetic diversity in PR showed an increase in this parameter in two treated patients, with undetectable viral loads and higher CD4+ T counts, comparing with the baseline. On the other hand, a reduction in PR genetic diversity was exhibited in three patients (two treated and one untreated), who presented detectable viral loads in at least one time point during the follow up. Due to small sample size it was not possible to investigate a potential relationship between PR genetic diversity and CD4+ T cell counts, presence of resistance mutations or/and treatment status. However, these results seem to indicate a persistent viral replication during long term highly active antiretroviral therapy (HAART), regardless of plasma viral load. The maintenance of viral replication can act as a source of new proviral quasispecies, resulting in the gradual substitution of the ancestral variants over time. Most importantly, we found two potential cases of transmitted drug resistance. However, due to the small sample size, additional studies with a higher number of patients are required to determine if primary drug resistance is a major problem in HIV-2 infected patients in Portugal. Our findings suggest that proviral DNA may be useful in resistance testing in HIV-2 patients with low or suppressed viremia and in untreated patients, and that early resistance analysis of these archived viruses may predict treatment response

insights from the coding and non-coding transcriptomes

"In a context of increasing wood demand from the forest industry worldwide, maritime pine (Pinus pinaster) breeding programs have been putting their focus on wood traits, resilience to abiotic stresses and to biotic agents. Ultimately, one of the main goals is to produce large numbers of clonal trees from the ones selected with the improved traits. Currently, the clonal propagation of the genotypes selected in breeding programs is already being applied to several forest tree species for commercial purposes, namely by using a type of vegetative propagation technology called somatic embryogenesis. P. pinaster is not yet among the forest tree species which have been successfully clonally propagated on a large commercial scale by somatic embryogenesis.(...)

In vivo and in real-time mechanisms of synaptic bouton formation

Tese de mestrado, Biologia Molecular e Genética, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2017A functional nervous system relies on the communication between neurons via highly specialized structures, called synapses. During development, neuronal morphology and wiring establishment are genetically determined but neuronal structural and function can be altered by changing levels of activity, a process known as synaptic plasticity. Adult neuronal circuits remain plastic and this feature is what allows us to store information and adapt to the environment. Defects in synaptic connectivity and activity-dependent plasticity are characteristic of neurodevelopmental and neurodegenerative disorders. Notoriously, recent studies highlight a link between functional defects in the presynaptic elements of neurons, called synaptic boutons, and the origin of several of these diseases. Presynaptic boutons, round varicosities conserved from invertebrates to man, are highly dynamic structures where synapses are located and where neurotransmission occurs. Despite being one of the main synaptic compartments, very little is known about the mechanism and dynamics of their genesis. Several studies contributed to the understanding of this question, but detailed mechanistic information regarding bouton outgrowth is still lacking. The purpose of this work is to acquire fundamental knowledge regarding how presynaptic boutons are formed and integrated into wired neurons. The powerful model synapse of Drosophila neuromuscular junction (NMJ) was adopted to dissect the details of bouton outgrowth in vivo and in real-time since it exhibits robust structural plasticity and the synapses formed on particular muscles have characteristic shapes and discernible boutons. The analysis was performed on the 3rd instar larvae because developmental bouton addition is nearly complete, and at this stage acute structural plasticity can be induced by patterned stimulation of motor neurons (MNs) using a variety of stimuli (high K+ solution, electrical activity and optogenetics). Well-established protocols using spaced high K+ paradigms were adopted to induce the rapid addition of synaptic boutons at this synapse. Neuronal migration and growth are critical events for the correct development and wiring of the nervous system. To date, the mechanisms described to give rise to presynaptic boutons involve the formation of filopodia or lamellipodia structures. However, performing high temporal resolution time-lapse imaging of unanesthetized Drosophila larval NMJs revealed a new, unreported, mechanism of presynaptic bouton addition into mature neurons. It was found that addition of synaptic boutons in response to acute activity does not occur like in the embryonic stage, where a growth cone differentiates into round boutons. Instead, new boutons rapidly emerge in a manner strongly resembling a mechanism known-to-be used by some cells in migration and tissue invasion. Considering that the NMJ is deeply inserted into the muscle, for the MN to include new boutons it must further invade the muscle, which mechanistically is not very different from migration across other tissues. It is suggested that MNs have possibly adopted a strategy that combines this form of migration with activity-dependent signaling pathways to modulate the formation of synaptic boutons during intense muscular activity. Additionally, manipulating the pathways that regulate this mechanism exposed an intricate interplay between MNs and the muscle in the regulation of the number of activity-dependent boutons. Interestingly, the movies also showed a strong correlation between muscle contraction and bouton formation. This finding implied that the muscle mechanics probably has an active role on the MN, that can be either by setting up de formation of new boutons in primed sites or by increasing the dynamics of this process in situations of increased stress. It is proposed that a balance of mechanical forces and biochemical signaling are probably coordinated during structural plasticity upon intense muscle activity. This research further expands our understanding of the mechanisms that control presynaptic growth and assembly in mature neurons. Further dissection of this phenomenon will contribute to uncover general principles that link normal development and function to dysfunction and disease, providing new insights into neuronal disease etiology and opening new avenues for the development of strategies to promote neuronal complexity and possibly delay symptoms associated with neuronal diseases.O funcionamento do sistema nervoso depende do estabelecimento da associação e comunicação entre neurónios, que ocorre através de estruturas altamente especializadas, designadas de sinapses. Durante o desenvolvimento, a morfologia dos neurónios e a estrutura das redes neuronais são geneticamente programados, mas a estrutura e a função dos neurónios pode ser remodelada em resposta a alterações nos níveis de atividade, um processo conhecido como plasticidade sináptica. No adulto, os circuitos neuronais retêm características plásticas e é esta maleabilidade do tecido nervoso que nos permite adquirir e armazenar informação e adaptar a alterações no ambiente. Defeitos na conectividade sináptica e na plasticidade dependente da atividade são característicos de doenças neurodegenerativas, como a Doença de Alzheimer e a Esclerose Lateral Amiotrófica, e, usualmente precedem a morte neuronal, que é a última causa dos sintomas molestos que acompanham este tipo de doenças. Adicionalmente, alterações na plasticidade estrutural também são um mecanismo comum a contribuir para os defeitos cognitivos e funcionais observados em doenças do desenvolvimento neuronal, como o Autismo e a Deficiência intelectual. Notoriamente, estudos recentes salientam uma ligação entre defeitos funcionais observados nos elementos pré-sinápticos dos neurónios e a origem de várias doenças destes tipos. As sinapses consistem em junções intercelulares assimétricas nas quais é possível distinguir, morfológica e funcionalmente, dois compartimentos, um pré-sináptico e um pós-sináptico. Os terminais pré-sinápticos dos neurónios são constituídos por varicosidades redondas conhecidas como botões sinápticos, que são estruturas altamente conservadas desde os invertebrados até ao homem. Os botões sinápticos são o local onde as sinapses são organizadas e onde a transmissão nervosa ocorre. Estas estruturas são muito dinâmicas e estruturalmente plásticas, alterando o tamanho e o número em resposta a modificações na atividade. Apesar de constituírem um dos principais compartimentos sinápticos, pouco se sabe acerca dos mecanismos que regulam a sua formação. Durante o desenvolvimento, os axónios dos neurónios, que ainda não estabeleceram contactos sinápticos, têm estruturas altamente dinâmicas e móveis na sua extremidade distal designadas de cones de crescimento. Morfologicamente, os cones de crescimento têm uma forma cónica e formam dois tipos de protrusões celulares: filopódios e, entre estes, lamelipódios. Os cones de crescimento guiam os axónios até ao seu alvo-sináptico, que pode ser outro neurónio ou outro tipo de célula, e após chegada ao seu destino final os cones de crescimento diferenciam-se em botões redondos. Mas, durante o crescimento, os axónios pré-conectados devem continuar a alongar para acompanhar a mudança de tamanho do animal. Além disso, no adulto a formação de circuitos neuronais funcionais e a ocorrência de plasticidade sináptica são processos que dependem criticamente da montagem e desmontagem de sinapses. Assume-se que durante o crescimento dos organismos e durante a plasticidade sináptica a formação de novos botões segue os princípios do crescimento neuronal. Contudo, a visualização detalhada e informação sobre o mecanismo e a dinâmica do crescimento dos botões no adulto é quase inexistente. Este trabalho tem como propósito a aquisição de conhecimento básico, mas fundamental, acerca do mecanismo de formação e integração de novos botões pré-sinápticos em neurónios maduros e pré-conectados. Um dos exemplos mais estudados de uma sinapse química, a forma predominante de comunicação entre os neurónios, é a sinapse formada entre um neurónio motor e o músculo, a qual é designada de junção neuromuscular. As junções neuromusculares são estruturas especializadas para proporcionar excitação transiente e à prova de falhas da célula muscular pós-sináptica assegurando contração muscular sempre que o neurónio motor estiver ativo para suportar a geração de movimento, uma qualidade importante dos animais. Adotou-se a junção neuromuscular da Drosophila para estudar o mecanismo de formação dos botões sinápticos dado que esta sinapse exibe plasticidade estrutural robusta e as sinapses formadas em músculos particulares apresentam formas bem características e botões claramente discerníveis. A análise foi efetuada no terceiro estadio larvar uma vez que neste estadio a adição de botões que acompanha o desenvolvimento da junção neuromuscular está quase completa e é possível induzir plasticidade estrutural de forma aguda. A rápida adição de botões pré-sinápticos pode ser induzida em resposta a determinados padrões de atividade utilizando uma variedade de estímulos (solução com K+ elevado, atividade elétrica e optogenética). Neste estudo, para induzir plasticidade estrutural na junção neuromuscular adotou-se protocolos baseados em paradigmas de despolarização espaçada usando uma solução com K+ elevado. A observação dos novos botões (designados botões dependentes-da-atividade) foi efetuada em amostras vivas e em amostras fixadas de forma a extrair não só a dinâmica como também informação quantitativa a partir de larvas sujeitas a plasticidade estrutural A migração e o crescimento neuronal são eventos críticos para o desenvolvimento correto e estabelecimento dos circuitos neuronais. Até à data, os mecanismos descritos que participam na formação dos botões pré-sinápticos, envolvem a formação de filopódios ou lamelipódios. No entanto, a realização de microscopia confocal com lapso de tempo em junções neuromusculares de larvas de Drosophila submetidas a plasticidade estrutural revelou um novo mecanismo de adição de botões pré-sinápticos em neurónios maduros. Alterando dois parâmetros em relação a outros estudos, nomeadamente a taxa de aquisição em segundos e não bloquear a contração muscular, foi possível observar a formação de botões sinápticos in vivo e em tempo-real. Descobriu-se que a adição de botões pré-sinápticos em resposta a atividade aguda não ocorre como no período embrionário e não requer uma estrutura de crescimento especializada. Em vez disso, observou-se que os botões dependentes-da-atividade emergem de uma forma muito semelhante a um tipo de migração usado por algumas células na invasão de tecidos. Considerando que a junção neuromuscular não assenta apenas superficialmente no músculo, mas encaixa neste tecido, significa que os botões sinápticos estão embebidos no músculo. Assim, para que o neurónio motor forme botões funcionais é necessário que “invada” o músculo, o que não é muito diferente de mecanismos de migração através de outros tecidos. É possível que os neurónios motores tenham adotado uma estratégia em que combinam este mecanismo de migração com vias de sinalização dependentes-de-atividade para modular a adição de novos botões sinápticos durante a atividade muscular. Adicionalmente, observou-se a existência de uma elevada correlação entre a emergência de novos botões e a contração muscular, o que aponta para um possível papel mecânico do músculo durante este processo. Os vídeos analisados mostram pelo menos dois tipos de formação de botões: eventos rápidos associados com contração muscular intensa (“botão explosivo”) e fenómenos lentos que acompanham movimentos mais subtis (“botão gradual”). Notavelmente, ao manipular a via que regula este tipo de migração, possivelmente usado também pelos neurónios motores, expôs uma interação complexa entre os neurónios motores e o músculo na regulação do número de botões dependentes-da-atividade. Considerando a proximidade entre os dois tipos de células bem como as propriedades contractivas do músculo é plausível propor que a ação mecânica do músculo possa ter um papel ativo no neurónio motor para a formação de novos botões a partir de locais determinados ou mesmo acelerar o processo em situações de maior tensão. Sugere-se que a atividade do músculo pode ter um papel importante na modelação da frequência e dinâmica dos botões que emergem dos neurónios motores em resposta à atividade. Este estudo descreve um novo modo de crescimento neuronal, nomeadamente de formação de botões pré-sinápticos, que ainda não foi reportado em neurónios, mas que é bastante usado em migração em outros tipos celulares. De mencionar que as vias que levam à iniciação deste mecanismo são diversas sendo pouco provável que todas participem neste tipo de plasticidade, especialmente se o neurónio motor adaptar partes do mecanismo ou usar diferentes moléculas para atingir um resultado equivalente. Assim, o conhecimento dos genes ligados à formação de botões dependentes-da-atividade é necessário para compreender plenamente e de forma integrada o mecanismo de formação de botões num neurónio maduro. Por outro lado, este trabalho sugere que um balanço entre forças mecânicas e sinalização bioquímica são provavelmente coordenados durante a plasticidade estrutural em resposta a atividade muscular e expande a nossa compreensão dos mecanismos que regulam o crescimento e organização do terminal pré-sináptico. Uma análise mais aprofundada deste fenómeno, bem como das vias dependentes-da-atividade com papel no crescimento neuronal, irá contribuir para desvendar os princípios gerais que ligam o desenvolvimento e funcionamento normal à disfunção e à doença. Este conhecimento permitirá uma nova perceção e discernimento da etiologia da doença neuronal e o desenvolvimento de novas estratégias para promover a complexidade neuronal e possivelmente retardar os sintomas associados com doenças neuronais

Dietary assessment of the western Lowland gorilla (Gorilla gorilla gorilla) group in Zoo Basel, Switzerland

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaWhile free-ranging gorilla populations are declining, captive gorillas face serious health issues such as obesity and heart disease. A proper dietary management is crucial to maintain healthy and thriving populations, but in captivity it can be difficult to provide diets that are both nutritionally and functionally equivalent to wild diets. During this study in Zoo Basel were evaluated two male gorillas, one silverback (16 years) and one blackback (12 years), two late-stage pregnant females (25 and 32 years) and two geriatric females (47 and 55 years). Diet adequacy was assessed through the analysis of the diet composition, individual nutrient intake, dietary enrichment program, anthropometric features and previous clinical records. Overall, the diet offered at Zoo Basel was complete and mostly adequate to the gorillas’ behavioural and nutritional needs. Some significant differences were observed between individual diets, linked to management options, individual preferences and physiologic, ageor hierarchy-related specific requirements. A list of recommendations was compiled and a sample diet was created to help correct the identified nutrient imbalances. An integrated individual analysis of diet adequacy is particularly important in a species like the gorilla, due to its complex social interactions and the need to group-feed to maintain proper levels of welfare.RESUMO - Enquanto a população de gorilas selvagens diminui, os que estão em cativeiro deparam-se com graves problemas de saúde como a obesidade e a doença cardíaca. Uma dieta adequada é essencial para manter estas populações saudáveis, mas em cativeiro é difícil oferecer dietas nutricionalmente e funcionalmente análogas às naturais. Durante este estudo, no Jardim Zoológico da Basileia, foram avaliados dois gorilas machos, de dorso-prateado (16 anos) e de dorso-negro (12 anos), duas fêmeas em final de gestação (25 e 32 anos) e duas fêmeas geriátricas (47 e 55 anos). A adequação da dieta foi avaliada através da análise da sua composição, do consumo individual de nutrientes, do programa de enriquecimento ambiental, das características antropométricas e de registos clínicos prévios. No geral, a dieta fornecida foi completa e adequada às necessidades comportamentais e nutricionais dos gorilas. Foram observadas algumas diferenças significativas entre indivíduos, ligadas a opções de maneio, preferências individuais e requisitos específicos do estado fisiológico, idade ou hierarquia. Foi elaborada uma lista de recomendações e criada uma dieta-amostra para ajudar a corrigir os desequilíbrios identificados. Uma análise dietética integrada e individual é particularmente importante numa espécie como o gorila, devido às suas complexas interações sociais e à necessidade de serem alimentados em grupo para manter níveis adequados de bem-estar

Development of a "green process" for the isolation of natural functional extracts with anti-cancer activity - Application of high-pressure technology

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Engenharia Química e BioquímicaThe knowledge of the healing power of some species of plants is ancient. Nowadays, the preference for natural products has increased, and with it, the interest in recover and isolate bioactive phytochemicals with potential health benefits. The main goal of this thesis was to isolate anticancer bioactive compounds, namely terpenes and fatty acids, from Portuguese Lavandula (L. angustifolia and L. stoechas) and Mentha species (M. spicata, M. piperita var. citrata and M. pulegium), using supercritical fluid extraction (SFE). All extractions were performed at 50ºC and 250 bar in a two step methodology: a first step with supercritical CO2, during 60 minutes, followed by a second step, with a mixture of CO2 and ethanol (90:10 %v/v), for 180 minutes. Different fractions of the extracts were recovered every 30 minutes, and the resulting samples were characterized in terms of global yield (% g/g), screened for the presence of terpenes, by thin layer chromatography (TLC) and analyzed by gas chromatography coupled with mass spectrometry detection (GC-MS). Furthermore, ORAC, HORAC and HOSC assays were conducted for the determination of antioxidant activity. Cell-based assays in human HT-29 colorectal adenocarcinoma cells were also performed, in order to determine the potential of the extracts as cancer cell-growth inhibitors. The fractions of the extract of M. piperita var. citrata presented the highest antioxidant activity, whereas the fractions of L. angustifolia, L. stoechas and M. spicata extracts revealed to be the most promising colorectal cancer cell-growth inhibitors. The bioactive responses were correlated with the phytochemical composition of the extracts, and the main compounds, such as camphor, fenchone, carvone, linoleic acid, among others, were highlighted. However, it is possible that the bioactivities were due to synergistic effects between several compounds. Results of this thesis demonstrated that SFE is a reliable tool to extract anticancer bioactive components from some Lavandula and Mentha plants

How to optimize Lipton’s business model in order to stimulate tea consumption in Portugal and increase Lipton Leaf tea market share?: The importance of distribution and sales channels management in a B2B2C market

Field Lab Entrepreneurial Innovative VenturesTea is globally one of the most popular beverages, next only to water (Hicks 2008). Lipton, the world’s leading tea brand (IDH 2012), is unable to keep growing in Portugal due to the lack of tea consumption; hence, the path to success for Lipton is now making the category grow. But how can Lipton’s business model be optimized in order to stimulate tea consumption and increase its market share? After a survey conducted to 300 people and interviews made to retailers, it was possible to conclude that tea drinking is not grounded in the Portuguese culture. However, consumers are increasingly valuing taste and diversity and willing to drink tea in more occasions, especially due to the growing concerns about health, aligned with the fact that tea is being more and more associated with well-being, thanks to the emergent studies grounding its benefits.1 Hence, Lipton is able of catalyzing tea consumption in Portugal: collaborative supply chain integration with retailers and higher expenditures with marketing can create awareness for Lipton tea and help in educating customers.NSBE - UN