Pepino mosaic virus

Pepino mosaic virus (PepMV) is a relatively new plant virus that has become a signifi cant agronomical problem in a relatively short period of time. It is a member of the genus Potexvirus within the family Flexiviridae and is readily mechanically transmissible. It is capable of infecting tomato (Solanum lycopersicum) and other Solaneceous host plants. Since its description in 1980 from pepino plants (Solanum muricatum) collected in 1974 in Peru, the virus remained unknown for a long time until it manifested itself in commercial tomato crops in Europe in 1999. Since then the virus has been reported worldwide and the disease it causes has become important in commercial tomato production. Since 1999, new strains of the virus have been described which diff er from the original pepino isolate. The fast spread of the virus and the appearance of mixed infections with the new strains may play an important role in the increase of the agricultural importance of this viral diseas

Neural codes formed by small and temporally precise populations in auditory cortex

The encoding of sensory information by populations of cortical neurons forms the basis for perception but remains poorly understood. To understand the constraints of cortical population coding we analyzed neural responses to natural sounds recorded in auditory cortex of primates (Macaca mulatta). We estimated stimulus information while varying the composition and size of the considered population. Consistent with previous reports we found that when choosing subpopulations randomly from the recorded ensemble, the average population information increases steadily with population size. This scaling was explained by a model assuming that each neuron carried equal amounts of information, and that any overlap between the information carried by each neuron arises purely from random sampling within the stimulus space. However, when studying subpopulations selected to optimize information for each given population size, the scaling of information was strikingly different: a small fraction of temporally precise cells carried the vast majority of information. This scaling could be explained by an extended model, assuming that the amount of information carried by individual neurons was highly nonuniform, with few neurons carrying large amounts of information. Importantly, these optimal populations can be determined by a single biophysical marker—the neuron's encoding time scale—allowing their detection and readout within biologically realistic circuits. These results show that extrapolations of population information based on random ensembles may overestimate the population size required for stimulus encoding, and that sensory cortical circuits may process information using small but highly informative ensembles

Functional endothelium on tissue engineered small diameter vascular grafts

Er zijn veel mensen die beschadigde of verstopte kransslagaderen of perifere vaten hebben. Bij deze patiënten is het noodzakelijk om de bloeddoorstroming te herstellen. Het uitvoeren van een bypass operatie is de voornaamste behandeling hiervoor. Een andere groep patiënten die ook afhankelijk kunnen zijn van vasculaire grafts zijn patiënten met een nierziekte die afhankelijk zijn van dialyse. Tegenwoordig worden voor bypass operaties vaak patiënt-eigen (slag)aders of synthetische grafts gebruikt. Sommige van deze grafts hebben een beperkte levensduur en functioneren niet optimaal. Wanneer bijvoorbeeld een ader uit het onderbeen wordt gebruikt om een kransslagader te vervangen zit na 10 jaar ongeveer 57% van deze bypasses dicht. Tevens is het zo dat voor vaatvervangingen grafts steeds vaker nodig zijn, aangezien een toenemend aantal patiënten een heroperatie moet ondergaan en geen geschikte vaten meer over heeft. Het kweken van bloedvaten in het laboratorium (tissueengineering) zou een goed alternatief kunnen zijn om de beperkingen van de huidige grafts te verhelpen. Zulke bloedvaten bestaan uit levend patiënt-eigen weefsel en hebben daardoor de eigenschap om zich te herstellen en te remodelleren. Recentelijk zijn er grote vooruitgangen geboekt in de ontwikkeling van sterke humane getissue-engineerde grafts met een kleine diameter. Er is echter minder onderzoek gedaan aan de ontwikkeling van een functionele endotheelcel (EC) laag op die grafts. De EC laag is een zeer actieve cellaag die betrokken is bij weefsel homeostase en de regulering van vaatwandspanning. Verder is deze cellaag ook betrokken bij de regulering van groei van andere celtypen. Daarnaast wordt trombose, wat een belangrijke oorzaak is van het falen van grafts, actief voorkomen door de aanwezigheid van een intacte EC laag. Daarom was het doel van dit proefschrift om een functionele EC laag te creëren op humane getissue-engineerde grafts. Deze grafts zijn gebaseerd op een scaffold van polyglycolic acid met een poly-4-hydroxybutyrate coating, die gezaaid wordt met humane myofibroblasten (MF) afkomstig van de vena saphena. Om een getissue-engineerde graft te endothelialiseren is het noodzakelijk de twee celtypen (ECs en MFs) samen te kweken. Dit is niet triviaal, aangezien de twee celtypen normaal verschillende kweekomstandigheden vereisen. In dit proefschrift is een 3D co-cultuur ontwikkeld, waarin de omstandigheden om de MFs en ECs samen te kweken konden worden geoptimaliseerd. Er is aangetoond dat ECs niet overleven in standaard kweekmedium (DMEM), maar dat deze cellen een speciaal EC medium nodig hebben. Wanneer dit medium gebruikt wordt en de ECs pas na 3 of 4 weken kweken op de vasculaire constructen gezaaid worden, resulteert dit in mooie volle EC laag. Het is bekend dat ECs het fenotype van de cellen in hun omgeving kunnen beïnvloeden wanneer deze cellen samen gekweekt worden. Het is in dit proefschrift aangetoond dat zowel de groei als de expressie van een gladde spiercel marker van MFs beïnvloed wordt door het samen kweken met ECs. Het is ook aangetoond dat een laag ECs de weefselcompositie van de vasculaire constructen beïnvloedt. Een functionele EC laag dient ook niet trombogeen te zijn. Om dit te onderzoeken zijn de vasculaire constructen blootgesteld aan een bloedstroming en hiermee is aangetoond dat ECs inderdaad de trombogeniciteit van de constructen verlaagd. Als laatste is er een bioreactor ontwikkeld om getissue-engineerde bloedvaten met een kleine diameter te kweken en waarmee ook een EC laag aangebracht kan worden. Eén dag na het zaaien van de ECs is de cellaag bijna vol en hebben de cellen een ronde vorm. De gezaaide ECs worden vervolgens geconditioneerd door kweekmedium door de grafts te laten stromen, wat een afschuifspannig op de cellen veroorzaakt. De viscositeit van het kweekmedium is verhoogd tot de waarde van bloed door middel van xanthaan gom. Xanthaan gom is een stabiel verdikkingsmiddel en zorgt al bij lage concentraties voor hoge viscositeiten. Het gebruik van xanthaan gom zorgt ervoor dat, wanneer we een fysiologische stroming aanbrengen in het vat, ook een fysiologische afschuifspanning ontstaat. Het is in dit proefschrift aangetoond dat xantaan gom geen invloed heeft op de groei van ECs, hun oriëntatie in de richting van de vloeistofstroming en hun bloedvatverwijdende eigenschappen. De afschuifspanning op de ECs van de getissue-engineerde vaten zorgt ervoor dat de ECs wel een volle laag vormen. Tevens oriënteren de ECs zich in de richting van de stroming en krijgen ze een langgerekte vorm, in tegenstelling tot de ongeconditioneerde ECs, die geen volle cellaag vormen. Samenvattend kan gesteld worden dat in dit proefschrift verschillende EC functies zijn onderzocht met behulp van verschillende modelsystemen. Er is tevens een bioreactor systeem ontwikkeld waarmee bloedvaten met een kleine diameter gekweekt zijn. Na optimalisatie van de kweekomstandigheden is op deze vaten een functionele EC laag gecreëerd, die fysiologische afschuifspanningen kan weerstaan. Deze functionele EC laag is een belangrijke stap voor de klinische toepasbaarheid van deze vaten

Recht of Schade: Een geschiedenis van particuliere ziektekostenverzekeraars en hun positie in het Nederlandse zorgverzekeringsbestel 1900-2006

Houwaart, E.S. [Promotor]Companje, K.P. [Copromotor

The use of attenuated isolates of Pepino mosaic virus for cross-protection

Pepino mosaic virus (PepMV) has recently emerged as a highly infectious viral pathogen in tomato crops. Greenhouse trials were conducted under conditions similar to commercial tomato production. These trials examined whether tomato plants can be protected against PepMV by a preceding infection with an attenuated isolate of this virus. Two potential attenuated isolates that displayed mild leaf symptoms were selected from field isolates. Two PepMV isolates that displayed severe leaf symptoms were also selected from field isolates to challenge the attenuated isolates. The isolates with aggressive symptoms were found to reduce bulk yields by 8 and 24% in single infections, respectively. Yield losses were reduced to a 0–3% loss in plants that were treated with either one of the attenuated isolates, while no effects were observed on the quality of the fruits. After the challenge infection, virus accumulation levels and symptom severity of the isolates with aggressive symptoms were also reduced by cross-protection. Infection with the attenuated isolates alone did neither affect bulk yield, nor quality of the harvested tomato fruits