Desenvolvimento e aplicação biológica de nanossistemas contendo o fotossensibilizante cloreto de alumínio ftalocianina

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2017.Sistemas de liberação de fármacos com base em nanossistemas tornou-se um campo de interesse nas últimas décadas devido à sua capacidade de transporte e entrega de fármacos, proteção contra a degradação do princípio ativo e redução de efeitos colaterais. Entretanto, elucidar como os componentes de nanossistemas se comportam quando expostos a sistemas biológicos, é um passo fundamental a ser dado para que possamos compreender melhor como fazer seu uso clínico. O fotossensibilizante hidrofóbico alumínio-cloro ftalocianina (AlClFt) já foi utilizado no tratamento de câncer de língua, na eliminação de cáries dentárias, câncer de pulmão, entre outros, associada a nanossistemas para superar a hidrofobicidade de AlClFt. Entretanto, pouco se sabe sobre a consequência biológica da exposição à AlClFt, tanto in vitro quanto in vivo. No presente estudo foram realizadas três abordagens visando esclarecer a dinâmica biológica de nanossistemas contendo AlClFt. Na primeira abordagem micelas de Pluronic® F-127 contendo AlClFt (F-127/AlClFt), foram preparadas, caracterizadas fotofísicamente e testadas quanto à geração de oxigênio singleto e sua eficiência terapêutica contra células de adenocarcinoma de pulmão foi confirmada. A segunda abordagem visou estudar por espectrometria de massa a molécula AlClFt antes e após exposição a tecidos biológicos, além de desenvolver e validar método de cromatografia líquida de ultra alta eficiência para detecção de AlClFt em nanossistemas e matrizes biológicas. O método foi validado quanto à seletividade, linearidade, limites de detecção e quantificação, precisão e recuperação. A massa molecular de AlClFt identificada experimentalmente por espectrometria de massa foi menor do que a massa esperada indicando a perda do átomo de cloro quando em solução e a formação de aduto com solvente eluente (metanol) quando associada a cromatografia líquida. O método bioanalítico desenvolvido apresentou aplicabilidade e robustez para uso em estudos de biodistribuição. A terceira abordagem apresentou uma nanoemulsão magnética contendo AlClFt, sua caraterização, efetividade terapêutica in vitro nas linhagens de carcinoma de pulmão de células não pequenas e em macrófagos murinos, assim como sua biodistribuição in vivo avaliada por tomografia computadorizada por emissão de fóton único, fluorescência por imagem e por cromatografia líquida de alta eficiência. A caracterização físico-química de NE-MAG indicou a presença de duas subpopulações compondo o produto final: uma nanoemulsão não-magnética e uma nanoemulsão magnética. A instabilidade decorrente do isolamento das subpopulações, levou à realização do presente trabalho com o nanossistema contendo a mistura das duas subpopulações. A terapia fotodinâmica das células expostas a NE-MAG resultou na identificação de concentração citotóxica que diminui a viabilidade em 50% mais baixa do que já descrito para outras linhagens com o mesmo fotossensibilizante. A biodistribuição de componente magnético por emissão de fóton único indicou captação majoritária pelo fígado e baço em todos os tempos estudados (até 72 horas). A análise de fluorescência por imagem de AlClFt no nanossistema, mostrou intensa captação por fígado e pulmão enquanto que a quantificação analítica de AlClFt por cromatografia líquida indicou maior quantidade de AlClFt recuperado de fígado e rins. A diversidade do encontrado nas diferentes técnicas é justificada pela complexidade do nanossistema utilizado e reforça a importância da associação de técnicas para estudos de biodistribuição devido às diversas vantagens e limitações de cada técnica. Desta forma, as três abordagens utilizadas contribuem para a elucidação da dinâmica biológica de nanossistemas contendo AlClFt.Nanosystem-based drug delivery systems have become a field of interest in recent decades due to their ability to transport and deliver drugs, avoid degradation of the active principle and prevent side effects. However, elucidating how components of a nanosystem behave once exposed to biological systems is a fundamental step to be taken so that we can understand how to use them in living beings. The hydrophobic photosensitizer aluminum-chlorine phthalocyanine (AlClFt) has already been used in the treatment of tongue cancer, against dental caries, lung cancer, among others, associated with nanosystems to overcome the hydrophobicity of AlClFt. However, little is known about the biological consequence of exposure to AlClFt, both in vitro and in vivo. In the present study three approaches were made to clarify the biological dynamics of nanosystems containing AlClFt. In the first approach, Pluronic F-127 micelles containing AlClFt (F-127/AlClFt) were produced, photophysically characterized and tested for singlet oxygen generation and their therapeutic efficacy against lung adenocarcinoma was confirmed. The second approach was to study by mass spectrometry AlClFt molecule before and after exposure to biological tissues and to develop and validate an ultra-high performance liquid chromatography method for detection of AlClFt in nanosystems and in biological matrices. The method was validated for selectivity, linearity, limits of detection and quantification, accuracy and recovery. The mass of AlClFt experimentally identified by mass spectrometry was lower than the predicted mass indicating the loss of the chlorine atom when in solution and the formation of aducts with eluting solvent (methanol) when combined with liquid chromatography. The developed bioanalytical method presented applicability and robustness for use in biodistribution studies. The third approach presented magnetic nanoemulsion containing AlClFt, its characterization, in vitro therapeutic effectiveness in non-small cell lung carcinomas and murine macrophages, as well as its in vivo biodistribution evaluated by single photon emission computed tomography, fluorescence imaging and by high performance liquid chromatography. The physico-chemical characterization indicated the presence of two subpopulations composing the final product: a non-magnetic nanoemulsion and a magnetic nanoemulsion containing AlClFt (NE-MAG-Ft). The instability resulting from the isolation of the subpopulations led to the use in the present work of nanosystem containing the mixture of the two subpopulations. Photodynamic therapy of cells with NE-MAG-Ft yielded a cytotoxic concentration that decreases viability by 50% lower than previously described for other strains with the same photosensitizer. The biodistribution of the magnetic component by single photon emission demonstrated a major uptake by the liver and spleen at all studied times (up to 72 hours). Fluorescence analysis of AlClFt in the nanosystem demonstrated intense liver and lung uptake while analytical quantification of AlClFt by liquid chromatography indicated more AlClFt in liver and kidneys. The diversity of the different techniques is justified by the complexity of the nanosystem used and reinforces the importance of the association of techniques for biodistribution studies due to the different advantages and limitations of each technique. In this way, the three approaches used contribute to the elucidation of the biological dynamics of AlClFtcontaining nanosystems

PRIMEIRO REGISTRO DE SPINITECTUS RODOLPHIHERINGI VAZ & PEREIRA, 1934 (SPIRURIDA: CYSTIDICOLIDAE) EM AUCHENIPTERUS NUCHALIS (SPIX & AGASSIZ, 1829) (SILURIFORMES: AUCHENIPTERIDAE) DOS LAGOS DE VÁRZEA DA AMAZÔNIA

Fish are the vertebrates that have the greatest number and diversity of parasitic species. Auchenipterus nuchalis (Spix & Agassiz, 1829) is a small fish that occurs in South America, popularly known as “Peruvian mandi”. It has twilight habits and its diet is basically composed of aquatic insects and microcrustaceans, which are intermediate hosts of several parasitic species. Although fish are the vertebrate group with the highest number of parasitic species, most of these species are still unknown, therefore, the main objective of this study was to know and identify the Nematoda species that parasitize A. nuchalis and calculate the parasitological indices of each species. 38 A. nuchalis were captured in four expeditions in September, October, November and December 2016, in the Catalão lake complex in the municipality of Iranduba, Amazonas, on the left bank of the Solimões river and on the right bank of the Negro river, Brazil. The fish measured, on average, 11.8 - 18 (15.1 ± 1.35) cm in standard length and weighed 30.1 – 71.0 (47 ± 10.66) g. The individuals' digestive tract was preserved in 70% ethanol and transported to the laboratory for analysis. Of the total fish collected and examined, 31 were parasitized. Temporary and permanent slides were mounted to identify the parasitic specimens. The measurements of the individuals were made with the aid of a micrometric eyepiece, coupled to an optical microscope. Eighteen individuals of Spinitectus rodolphiheringi Vaz & Pereira, 1934 parasitizing the intestine and stomach of the hosts were collected. Presenting an infection prevalence rate of 26.3%, which characterizes it as a satellite species. Furthermore, this is an unpublished record of this parasite for A. nuchalis and for the Amazon region.Los peces son los vertebrados que cuentan con mayor número y diversidad de especies parasitarias. Auchenipterus nuchalis (Spix & Agassiz, 1829) es un pequeño pez que se encuentra en América del Sur, conocido popularmente como “mandi peruano”. Tiene hábitos crepusculares y su dieta está compuesta básicamente por insectos acuáticos y microcrustáceos, que son huéspedes intermediarios de varias especies parasitarias. Si bien los peces son el grupo de vertebrados con mayor número de especies parasitarias, la mayoría de estas especies aún se desconocen, por lo que el objetivo principal de este estudio fue conocer e identificar las especies de Nematodos que parasitan A. nuchalis y calcular los índices parasitológicos de cada especie. 38 A. nuchalis fueron capturados en cuatro expediciones en septiembre, octubre, noviembre y diciembre de 2016, en el complejo del lago Catalão en el municipio de Iranduba, Amazonas, en la margen izquierda del río Solimões y en la margen derecha del río Negro, Brasil. Los peces midieron, en promedio, 11,8 - 18 (15,1 ± 1,35) cm de longitud estándar y pesaron 30,1 - 71,0 (47 ± 10,66) g. El tracto digestivo de los individuos se conservó en etanol al 70% y se transportó al laboratorio para su análisis. Del total de peces recolectados y examinados, 31 fueron parasitados. Se montaron portaobjetos temporales y permanentes para identificar los especímenes parásitos. Las medidas de los individuos se realizaron con la ayuda de un ocular micrométrico, acoplado a un microscopio óptico. Se recolectaron dieciocho individuos de Spinitectus rodolphiheringi Vaz & Pereira, 1934 que parasitan el intestino y el estómago de los hospedadores. Presentando una prevalencia de infección del 26,3%, lo que la caracteriza como especie satélite. Además, este es un registro inédito de este parásito para A. nuchalis y para la región amazónica.Os peixes são os vertebrados que apresentam a maior quantidade e diversidade de espécies parasitas. Auchenipterus nuchalis (Spix & Agassiz, 1829) é um peixe de pequeno porte que ocorre na América do Sul, popularmente conhecido como “mandi peruano”. Tem hábitos crepusculares e sua dieta é basicamente composta por insetos aquáticos e microcrustáceos, que são hospedeiros intermediários de várias espécies parasitas. Apesar de os peixes serem o grupo de vertebrados com maior número de espécies parasitas, a maioria dessas espécies ainda é desconhecida, desse modo, o objetivo principal desse estudo foi conhecer e identificar as espécies de Nematoda que parasitam A. nuchalis e calcular os índices parasitológicos de cada espécie. Foram capturados 38 A. nuchalis, em quatro expedições, nos meses de setembro, outubro, novembro e dezembro de 2016, no complexo de lagos do Catalão no município de Iranduba, Amazonas, margem esquerda do rio Solimões e direita do rio Negro, Brasil. Os peixes mediam, em média, 11,8 - 18 (15,1 ± 1,35) cm de comprimento padrão e pesavam 30,1 – 71,0 (47 ± 10,66) g. O trato digestivo dos indivíduos foi conservado em etanol 70% e transportado ao laboratório para análise. Do total de peixes coletados e examinados, 31 estavam parasitados. Lâminas temporárias e permanentes foram montadas para a identificação dos espécimes parasitas. As medidas dos indivíduos foram feitas com o auxílio de ocular micrométrica, acoplada a um microscópio óptico. Foram coletados 18 indivíduos de Spinitectus rodolphiheringi Vaz & Pereira, 1934 parasitando o intestino e estômago dos hospedeiros. Apresentando um índice de prevalência de infecção de 26,3%, o que a caracteriza como uma espécie satélite. Além disso, este é um registro inédito deste parasita para A. nuchalis e para a região Amazônica

Primeiro registro de Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus travassos, Artigas & Pereira, 1928 e contracaecum sp. Para Auchenipterus nuchalis (Spix & Agassiz 1829) (Siluriformes: Auchenipteridae) na Amazônia

Auchenipterus nuchalis (Spix & Agassiz 1829) or Peruvian mandi is a small catfish that occurs in South America, has crepuscular habits and feeds basically on aquatic insects and microcrustaceans. Thirty-eight A. nuchalis were captured in four expeditions during the ebb and dry periods of 2016, in the Catalão lake complex, in the municipality of Iranduba, in the interior of the state of Amazonas, Brazil. Fish averaged 11.8 - 18 (15.1 ± 1.35) cm in standard length and weighed 30.1 - 71.0 (47 ± 10.66) g. The individuals' digestive tract was conserved in 70% ethanol until the analyzes were carried out. Of the total number of fish collected and examined, 21 were parasitized. Temporary and permanent slides were mounted for the identification of parasitic specimens. The measurements of the individuals were made with the aid of a micrometric eyepiece, coupled to an optical microscope. We collected 53 individuals of Procamallanus (S.) inopinatus Travassos, Artigas & Pereira, 1928 with an infection prevalence rate of 52.6% and 17 individuals in the larval stage of Contracaecum sp., with a prevalence of 2.63%. Thus, the species were classified as secondary and satellite species, respectively. Furthermore, this is an unprecedented record of these parasites for A. nuchalis in the Amazon region, Brazil.Auchenipterus nuchalis (Spix & Agassiz 1829) o mandi peruano es un pequeño bagre que se encuentra en América del Sur, tiene hábitos crepusculares y se alimenta básicamente de insectos acuáticos y microcrustáceos. 38 A. nuchalis fueron capturados en cuatro expediciones durante los períodos de vaciante y secos de 2016, en el complejo lacustre de Catalão, municipio de Iranduba, en el interior del estado de Amazonas, Brasil. Los peces medían, en promedio, 11,8 - 18 (15,1 ± 1,35) cm de longitud estándar y pesaban 30,1 - 71,0 (47 ± 10,66) g. El tracto digestivo de los individuos se conservó en etanol al 70% hasta la realización de los análisis. Del total de peces recolectados y examinados, 21 estaban parasitados. Se montaron portaobjetos temporales y permanentes para identificar especímenes parásitos. Las mediciones de los individuos se realizaron con la ayuda de un ocular micrométrico acoplado a un microscopio óptico. Se recolectaron 53 individuos de Procamallanus (S.) inopinatus Travassos, Artigas & Pereira, 1928 con una prevalencia de infección del 52,6% y 17 individuos en estado larvario de Contracaecum sp., con una prevalencia del 2,63%. De esta forma, las especies fueron clasificadas en secundarias y satélites, respectivamente. Además, este es un registro sin precedentes de estos parásitos para A. nuchalis en la región amazónica.Auchenipterus nuchalis (Spix & Agassiz 1829) ou mandi peruano é um pequeno bagre que ocorre na América do Sul, possui hábitos crepusculares e alimenta-se basicamente de insetos aquáticos e microcrustáceos. Foram capturados 38 A. nuchalis, em quatro expedições nos períodos de vazante e seca do ano de 2016, no complexo de lagos do Catalão, município de Iranduba, interior do estado do Amazonas, Brasil. Os peixes mediam, em média, 11,8 - 18 (15,1 ± 1,35) cm de comprimento padrão e pesavam 30,1 – 71,0 (47 ± 10,66) g. O trato digestivo dos indivíduos foi conservado em etanol 70% até a realização das análises. Do total de peixes coletados e examinados, 21 estavam parasitados. Foram montadas lâminas temporárias e permanentes para a identificação dos espécimes parasitas. As medidas dos indivíduos foram feitas com o auxílio de ocular micrométrica, acoplada a um microscópio óptico. Foram coletados 53 indivíduos de Procamallanus (S.) inopinatus Travassos, Artigas & Pereira, 1928 com índice de prevalência de infecção de 52,6% e 17 indivíduos em estágio larval de Contracaecum sp., com prevalência de 2,63%. Dessa forma, as espécies foram classificadas com espécie secundária e satélite, respectivamente. Além disso, este é um registro inédito destes parasitos para A. nuchalis na região Amazônica

HPLC-FLD method for itraconazole quantification in poly lactic-co-glycolic acid nanoparticles, plasma and tissue

Itraconazol, um antifúngico de amplo espectro, possui muitos efeitos colaterais e o uso de nanossistemas para a entrega de fármacos tem sido proposto como um método para otimizar a farmacocinética da droga e reduzir os efeitos colaterais. Um procedimento de cromatografia líquida de alta performance (HPLC) utilizando detecção fluorimétrica foi desenvolvido para a determinação de itraconazol em nanopartículas do copolímero de ácido láctico e glicólico, plasma e tecidos. A linearidade, limites de detecção e quantificação, recuperação, precisão, seletividade e estabilidade do método foram estabelecidas. O método desenvolvido foi testado na detecção e quantificação de itraconazol na biodistribuição de nanopartículas administrados intraperitonealmente em camundongos fêmeas Balb/C. Neste estudo foi desenvolvido um método analítico de HPLC com detecção fluorimétrica para quantificação de itraconazole em nanopartículas poliméricas, tecidos e plasma, sendo ele sensível, de baixo custo, viável para uso de rotina e com potencial para aplicação na biodistribuição e estudos farmacocinéticos de itraconazole em nanossistemas.Itraconazole, a broad-spectrum anti-fungal, has many side effects, and nanosystems for drug delivery have been proposed as a method to optimize the drug's pharmacokinetics and reduce side effects. An high performance liquid chromatography (HPLC) procedure using fluorometric detection was developed for determination of itraconazole in polymeric poly(lactic-co-glycolic acid) nanoparticles, plasma and tissue. Linearity, limits of detection and quantification, recovery, precision, selectivity and stability were established. The developed method was tested in itraconazole detection and quantification of biodistribution of nanoparticles administered intraperitoneally to Balb/C female mice. This study developed an analytical method for HPLC with fluorometric detection for quantification of itraconazole in polymeric nanoparticles, tissue and plasma, which is sensitive, low cost, viable for routine usage and with potential for application in itraconazole biodistribution and pharmacokinetics studies

Atividades amilolíticas identificadas em bibliotecas metagenômicas da microbiota do solo do Cerrado

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2010.As amilases são enzimas que degradam o amido e encontram diversas aplicações nas indústrias de alimentos, de bebidas, de detergentes, têxteis e de papel. Esta enzima é produzida por diversos organismos incluindo a microbiota do solo. O solo tem sido uma excelente fonte para o isolamento de microrganismos produtores de novas biomoléculas, entretanto, estima-se que menos de 1% da microbiota do planeta é cultivável em laboratório. Técnicas recentes permitem a extração de DNA total de uma amostra ambiental, seguida da sua clonagem em microrganismos cultiváveis. O Cerrado é o segundo maior bioma da América do Sul sendo que sua biodiversidade é considerada a mais rica dentre regiões similares no mundo. Duas bibliotecas metagenômicas foram construídas a partir da microbiota do solo do Cerrado: uma de grandes insertos (~30 kb) e a segunda contendo pequenos insertos (~7 kb). O objetivo do presente trabalho foi realizar a análise de clones amilolíticos obtidos a partir destas bibliotecas e identificar os genes responsáveis por atividades detectadas em placas. Foi realizada a extração de plasmídio de clones previamente identificados nas duas bibliotecas metagenômicas citadas e estes foram utilizados para realizar a retransformação da célula em que a biblioteca foi construída, para confirmação de fenótipo. Foi realizado ensaio para detecção de atividade dextrinizante em meio líquido com os clones que apresentaram o perfil amilolítico em placa. Os fragmentos de interesse foram diretamente sequenciados ou subclonados para posterior sequenciamento. Foi realizada a montagem e análise das sequências e estas foram comparadas com sequências depositadas no GenBank e submetidas a alinhamentos e análises filogenéticas. Identificou-se em um clone ORF relacionada com a superfamília das α-amilases, com domínios da família Glicosil hidrolase e com similaridade a sequências depositadas do gênero Acidobacterium. O sequenciamento parcial de um segundo clone identificou ORFs que indicam uma relação com o gênero Burkholderia. A utilização de ferramentas metagenômicas permitiu acessar enzimas hidrolíticas presentes na microbiota do solo do Cerrado contornarndo a necessidade do cultivo dos microrganismos para explorar o potencial que este ambiente possui. Portanto, estas ferramentas podem e devem ser utilizadas como forma de identificarmos genes que dificilmente seriam descobertos de outra forma. O presente estudo identificou o gene de uma glicosil hidrolase. Para confirmar a aplicabilidade desta enzima em processos biotecnológicos, será realizada a clonagem do gene de interesse em vetor de expressão apropriado e realização de caracterização bioquímica. _________________________________________________________________________________ ABSTRACTAmylases are starch-degrading enzymes which encounter several applications in the food, beverage, detergent, textile and paper industries. This enzyme is produced by several organisms including the soil microbiote. The soil has been used as an excellent source of new microorganism that produce novel biomolecules, however, current estimates indicate that less the 1% of the planet’s microorganisms are culturable in laboratory conditions. Recent techniques permit the extraction of total DNA from an environmental sample followed by cloning of its DNA in culturable microorganisms. Cerrado is South America’s second biggest biome and is considered to be the most biodiverse amongst similar regions in the world. Two metagenomic libraries were built from Cerrado’s soil microbiome: one of large inserts, (~30 kb) and another comprising small inserts (~7 kb). The goal of this work was to analyze amylolytic clones detected in these libraries and identify genes responsible for amylytic activity detected on plates. Plasmid extraction from positively identified clones from both libraries was accomplished and plasmids were utilized for retransformation of cells used in library constructions to confirm phenotypes. Liquid dextrinizing assays were performed of clones with positive activity on plates for detection of amylolytic profile. Cloned fragments of interest were either directly sequenced or subcloned and then sequenced. Contigs were assembled, analyzed and compared with sequences in GenBank database as well as used in alignments and phylogenetic analysis. An ORF was identified with similarities to sequences of the amylase superfamily with domains of glycosyl hydrolase family similar to sequences of Acidobacterium. Parcial sequencing of second clone identified ORFs with similarities to sequences of Burkholderia. The use of metagenomic techniques permitted access to hydrolytic enzymes present in Cerrado’s microbiome soil dispensing culturing of microorganisms to explore the potential this environment possesses. Therefore, these techniques can and should be used as a form of identification of novel genes that would difficultly be accessed in another manner. This work identified a glycosyl hydrolase gene. To confirm the applicability of this enzyme in biotechnological processes, cloning of gene in appropriate expression vector and biochemical characterizations will be carried out

Exploring the pH Sensitivity of Poly(allylamine) Phosphate Supramolecular Nanocarriers for Intracellular siRNA Delivery

Silencing RNA (siRNA) technologies emerge as a promising therapeutic tool for the treatment of multiple diseases. An ideal nanocarrier (NC) for siRNAs should be stable at physiological pH and release siRNAs in acidic endosomal pH, fulfilling siRNA delivery only inside cells. Here, we show a novel application of polyamine phosphate NCs (PANs) based on their capacity to load negatively charged nucleic acids and their pH stability. PANs are fabricated by complexation of phosphate anions from phosphate buffer solution (PB) with the amine groups of poly­(allylamine) hydrochloride as carriers for siRNAs. PANs are stable in a narrow pH interval, from 7 to 9, and disassemble at pH’s higher than 9 and lower than 6. siRNAs are encapsulated by complexation with poly­(allylamine) hydrochloride before or after PAN formation. PANs with encapsulated siRNAs are stable in cell media. Once internalized in cells following endocytic pathways, PANs disassemble at the low endosomal pH and release the siRNAs into the cytoplasm. Confocal laser scanning microscopy (CLSM) images of Rhodamine Green labeled PANs (RG-PANs) with encapsulated Cy3-labeled siRNA in A549 cells show that siRNAs are released from the PANs. Colocalization experiments with labeled endosomes and either labeled siRNAs prove the translocation of siRNAs into the cytosol. As a proof of concept, it is shown that PANs with encapsulated green fluorescence protein (GFP) siRNAs silence GFP in A549 cells expressing this protein. Silencing efficacy was evaluated by flow cytometry, CLSM, and Western blot assays. These results open the way for the use of poly­(allylamine) phosphate nanocarriers for the intracellular delivery of genetic materials

Self-nanoemulsifying drug-delivery systems improve oral absorption and antischistosomal activity of epiisopiloturine

To develop a self-nanoemulsifying drug-delivery system (SNEDDS) able to improve oral absorption of epiisopiloturine (EPI), and test the antischistosomal activity in a mice model.; SNEDDS had a nanoscopic size and was able to enhance EPI bioavailability after oral administration, and SNEDDS-EPI (40 mg.kg; -1; ) improved the in vivo antischistosomal activity of EPI, demonstrating that SNEDDS was able to improve the pharmacokinetics of EPI, and to maintain the pharmacodynamic activity against Schistosoma mansoni in vivo.; Taken together, these results indicate that SNEDDS-EPI is efficient in reducing worm burden in comparison to treatment with the free version of EPI. [Formula: see text]

Nanocapsules for the co-delivery of selol and doxorubicin to breast adenocarcinoma 4T1 cells <i>in vitro</i>

<p>Nanocapsules (NCS-DOX) with an oily core of selol and a shell of poly(methyl vinyl ether-co-maleic anhydride) covalently conjugated to doxorubicin were developed. These nanocapsules are spherical, with an average hydrodynamic diameter of about 170 nm, and with negative zeta potential. NCS-DOX effectively co-delivered the selol and the doxorubicin into 4T1 cells and changed the intracellular distribution of DOX from the nuclei to the mitochondria. Moreover, a significantly increased cytotoxicity against 4T1 cells was observed, which is suggestive of additive or synergic effect of selol and doxorubicin. In conclusion, PVM/MA nanocapsules are suitable platforms to co-deliver drugs into cancer cells.</p