A rare coding mutation in the MAST2 gene causes venous thrombosis in a French family with unexplained thrombophilia: The Breizh MAST2 Arg89Gln variant.

Rare variants outside the classical coagulation cascade might cause inherited thrombosis. We aimed to identify the variant(s) causing venous thromboembolism (VTE) in a family with multiple relatives affected with unprovoked VTE and no thrombophilia defects. We identified by whole exome sequencing an extremely rare Arg to Gln variant (Arg89Gln) in the Microtubule Associated Serine/Threonine Kinase 2 (MAST2) gene that segregates with VTE in the family. Free-tissue factor pathway inhibitor (f-TFPI) plasma levels were significantly decreased in affected family members compared to healthy relatives. Conversely, plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) levels were significantly higher in affected members than in healthy relatives. RNA sequencing analysis of RNA interference experimental data conducted in endothelial cells revealed that, of the 13,387 detected expressed genes, 2,354 have their level of expression modified by MAST2 knockdown, including SERPINE1 coding for PAI-1 and TFPI. In HEK293 cells overexpressing the MAST2 Gln89 variant, TFPI and SERPINE1 promoter activities were respectively lower and higher than in cells overexpressing the MAST2 wild type. This study identifies a novel thrombophilia-causing Arg89Gln variant in the MAST2 gene that is here proposed as a new molecular player in the etiology of VTE by interfering with hemostatic balance of endothelial cells

Recherche de biomarqueurs circulants de la survenue du vasospasme chez des patients souffrant d'hémorragie sous-arachnoïdienne

Subarachnoid hemorrhage (SAH) morbidity and mortality are not solely due to the aneurism rupture but also to the delayed neurological ischemic disorders (DNI) that could happen. Among these, vasospasm is a severe complication occurring between the 4th and 12th day after the bleeding for one third of the SAH patients. To date, there exists no predictive marker of its happening, which force physician to give any SAH patient a preventive treatment against its occurrence not exempt of severe side effects. VASOGENE cohort was built up to search by omic approaches biomarkers of vasospasm occurrence to identify at risk patients. The thesis' aim is to identify circulating biomarkers of vasospasm occurrence post SAH. Two groups of patients were present in this cohort: aSAH patients developing (VSP+) or not (VSP-) a vasospasm. A first study comparing whole blood microRNA between VSP+ and VSP- enabled us to identify has-miR-3177-3p and LHDA as good candidate biomarkers. A second work was performed on transcriptomic data comparing mRNA levels between VSP+ and VSP-. We identified another candidate gene that is currently submitted.L'hémorragie sous arachnoïdienne (HSA) par rupture d'anévrisme est une pathologie grave entraînant la mort dans 25 à 30% des cas. La mortalité n'est pas uniquement due à la rupture d'anévrisme mais peut également être la conséquence d'une de ses complications, le vasospasme, qui se développe, pour 30% des patients, de 4 à 12 jours après l'hémorragie. Cette complication correspond à une contraction prolongée d'une artère cérébrale qui va provoquer une réduction de la perfusion en oxygène et entraîner de graves séquelles neurologiques. Il n'existe à l'heure actuelle aucun facteur prédictif de sa survenue. De ce fait, tous les patients HSA entrant dans un service de neuro-anesthésie-réanimation sont soumis à un traitement préventif agressif, qu'ils développent ou non un vasospasme par la suite. Ce traitement peut provoquer de graves effets secondaires dans 20% des cas. Mme Sophie Garnier et le Dr. Vincent Degos ont donc constitué une cohorte prospective composée de patients caucasiens HSA qui développeront (VSP+) ou ne développeront pas (VSP-) de vasospasme durant la période à risque. L'objectif de cette thèse est donc d'identifier des biomarqueurs omics qui permettraient de prédire la survenue du vasospasme post HSA. Une première étude sur les miARNs circulant de ces patients m'a permis d'identifier hsa-miR-3177-3p et LDHA comme différentiellement exprimé entre les patients VSP+ et VSP- et a été publié dans Stroke 2018. La deuxième étude sur le transcriptome de ces patients, a mis en évidence un gène différentiellement exprimé entre ces patients et dans le temps qui est actuellement soumis

Circulating biomarkers search for vasospasm occurrence in subarachnoid hemorrhage patients

L'hémorragie sous arachnoïdienne (HSA) par rupture d'anévrisme est une pathologie grave entraînant la mort dans 25 à 30% des cas. La mortalité n'est pas uniquement due à la rupture d'anévrisme mais peut également être la conséquence d'une de ses complications, le vasospasme, qui se développe, pour 30% des patients, de 4 à 12 jours après l'hémorragie. Cette complication correspond à une contraction prolongée d'une artère cérébrale qui va provoquer une réduction de la perfusion en oxygène et entraîner de graves séquelles neurologiques. Il n'existe à l'heure actuelle aucun facteur prédictif de sa survenue. De ce fait, tous les patients HSA entrant dans un service de neuro-anesthésie-réanimation sont soumis à un traitement préventif agressif, qu'ils développent ou non un vasospasme par la suite. Ce traitement peut provoquer de graves effets secondaires dans 20% des cas. Mme Sophie Garnier et le Dr. Vincent Degos ont donc constitué une cohorte prospective composée de patients caucasiens HSA qui développeront (VSP+) ou ne développeront pas (VSP-) de vasospasme durant la période à risque. L'objectif de cette thèse est donc d'identifier des biomarqueurs omics qui permettraient de prédire la survenue du vasospasme post HSA. Une première étude sur les miARNs circulant de ces patients m'a permis d'identifier hsa-miR-3177-3p et LDHA comme différentiellement exprimé entre les patients VSP+ et VSP- et a été publié dans Stroke 2018. La deuxième étude sur le transcriptome de ces patients, a mis en évidence un gène différentiellement exprimé entre ces patients et dans le temps qui est actuellement soumis.Subarachnoid hemorrhage (SAH) morbidity and mortality are not solely due to the aneurism rupture but also to the delayed neurological ischemic disorders (DNI) that could happen. Among these, vasospasm is a severe complication occurring between the 4th and 12th day after the bleeding for one third of the SAH patients. To date, there exists no predictive marker of its happening, which force physician to give any SAH patient a preventive treatment against its occurrence not exempt of severe side effects. VASOGENE cohort was built up to search by omic approaches biomarkers of vasospasm occurrence to identify at risk patients. The thesis' aim is to identify circulating biomarkers of vasospasm occurrence post SAH. Two groups of patients were present in this cohort: aSAH patients developing (VSP+) or not (VSP-) a vasospasm. A first study comparing whole blood microRNA between VSP+ and VSP- enabled us to identify has-miR-3177-3p and LHDA as good candidate biomarkers. A second work was performed on transcriptomic data comparing mRNA levels between VSP+ and VSP-. We identified another candidate gene that is currently submitted

Whole blood microRNAs sequencing profiling for vasospasm in patients with aneurysmal subarachnoid hemorrhage

International audienceBackground and Purpose : Arterial vasospasm is a well-known delayed complication of aneurysmal subarachnoid hemorrhage (aSAH). However, no validated biomarker exists to help clinicians discriminating patients with aSAH who will develop vasospasm (VSP+) and identifying those who then deserve aggressive preventive therapy. We hypothesized that whole-blood miRNAs could be a source of candidate biomarkers for vasospasm.Methods : Using a next-generation sequencing approach, we performed whole-blood miRNA profiling between VSP+patients with aSAH and patients who did not develop vasospasm (VSP−) in a prospective cohort of 32 patients. Profiling was performed on the admission day and 3 days before vasospasm.Results : Four hundred forty-two miRNAs were highly expressed in whole blood of patients with aSAH. Among them, hsa-miR-3177-3p demonstrated significant (P=5.9×10−5; PBonferronicorrected=0.03) lower levels in VSP− compared with VSP+ patients. Looking for whole-blood mRNA correlates of hsa-miR-3177-3p, we observed some evidence that the decrease in hsa-miR-3177-3p levels after aSAH was associated with an increase in LDHA mRNA levels in VSP− (P<10–3) but not in VSP+ (P=0.66) patients.Conclusions : Whole-blood miRNA levels of hsa-miR-3177-3p could serve as a biomarker for vasospasm