Mechanisms of resistance to neuraminidase inhibitors in influenza A viruses and evaluation of combined antiviral therapy

Les inhibiteurs de la neuraminidase (INAs) jouent un rôle central dans le contrôle des infections grippales, tant dans le cas des épidémies et des pandémies comme chez les patients immunosuprimés et d'autres patients à risque. Cependant, le développement et la dissémination de la résistance compromettent l'utilité à long terme de cette intervention. En fait, le problème de la résistance aux INAs a été mis en évidence pendant les épidémies de grippe annuelles de 2007-09, avec la dissémination globale d’une variante de la souche A(H1N1) saisonnière résistante à l'oseltamivir. Dans ce cas, les observations préliminaires ont spéculé avec l'existence d'un ensemble de mutations “permissives” qui auraient facilité cette transmission mondiale. Heureusement, l'émergence et la propagation mondiale de la souche pandémique en 2009 a mené au remplacement de la souche saisonnière A/Brisbane/59/2007 (H1N1) résistante à l'oseltamivir, par le virus A(H1N1)pdm09 naturellement sensible aux INA, et, par conséquent, l'oseltamivir a récupéré son utilité clinique. En fait, la plupart des virus A(H1N1)pdm09, A(H3N2) et B circulants à ce jour restent sensibles à l'oseltamivir, avec seulement 1-2% de souches résistantes. Néanmoins, le nombre croissant de souches résistantes récemment détectées en l’absence de traitement fait craindre que ce problème puisse encore augmenter. À cet égard, l'impact de l'émergence et la dissémination de la résistance sur le choix limité des antiviraux actuellement disponibles renforce la nécessité d’une meilleure compréhension des mécanismes sous-jacents à ce phénomène ainsi que de nouvelles approches thérapeutiques. Les différentes études présentées dans le cadre de cette thèse convergent vers l'objectif général de mieux décrire les mécanismes de développement de la résistance aux INAs dans les virus de la grippe. En outre, nous prévoyons que les thérapies combinées pourraient induire une meilleure réponse virologique et immunologique par rapport à la monothérapie antivirale. À la fin, nous nous attendons à ce que notre travail ait un impact sur la gestion des infections grippales en guidant la surveillance mondiale des marqueurs potentiels de résistance, ainsi qu’en proposant des traitements novateurs qui minimisent le développement de souches résistantes.Neuraminidase inhibitors (NAIs) play a central role in the control of influenza infections, with important implications in the management of outbreaks and pandemics as well as in immunocompromised and other at risk patients, with both prophylactic and therapeutic indications. However, the development and dissemination of antiviral drug resistance represents a major limitation that compromises the long-term usefulness of this intervention. Actually, the problem of resistance to NAIs was highlighted by the worldwide dissemination of the oseltamivir-resistant seasonal A(H1N1) neuraminidase H274Y variant during the 2007-09 annual influenza epidemics. In that case, preliminary observations speculated with the existence of a set of “permissive” mutations that could have facilitated this global transmission. Fortunately, the antigenic shift that enabled the emergence of and global spread of the 2009 pandemic strain meant the replacement of the oseltamivir-resistant seasonal A/Brisbane/59/2007 (H1N1) virus by the naturally NAI-susceptible A(H1N1)pdm09 virus, and, consequently, oseltamivir recovered its clinical utility. In fact, most of the circulating A(H1N1)pdm09, A(H3N2) and B viruses remain susceptible to oseltamivir with only 1-2% of tested strains exhibiting phenotypic or genotypic evidence of resistance. Nevertheless, the growing number of resistant strains recently detected in the absence of therapy raises concern that this problem could increase. In that regard, the impact of the emergence and dissemination of resistance on the limited choice of antivirals currently available underscores a better understanding of the mechanisms underlying this phenomenon as well as the necessity for innovative therapeutic approaches. The different studies presented in this thesis converge to the general objective of better describing the mechanisms underlying the development of resistance to NAIs in influenza viruses. Also, we anticipate that combination therapies will induce better virological and immunological responses compared to antiviral monotherapy. In the end, we expect that our work will have an impact on the management of influenza infections by guiding the global surveillance of potential drug resistance markers, as well as proposing innovative ways to improve the clinical outcome and minimizing the development of drug-resistant strains

A comparative in vitro assay of drug release performance of pyridostigmine bromide tablets

Myasthenia gravis is an autoimmune disease that destroys key components of the neuromuscular system. The most common therapy uses reversible inhibitors of cholinesterase activity, such as pyridostigmine bromide (PB). The nature of this illness implies that we must be sure that all available PB immediate-release tablets produce the same therapeutic response. The aim of this study was to analyze PB immediate-release formulations provided by pharmacies in MERCOSUR countries A, B, and C. The formulations, which were produced in different manufacturing plants of the same multinational company, were analyzed following USP 29 specifications. The products fulfilled the assay, uniformity of dosage units, and dissolution test in S2 stage. Dissolution profiles were carried out following EMEA and FDA regulations, and the similarity factor (f2) was applied to A and C but not B, as this one did not fulfill the dissolution requirements. Pyridostigmine bromide tablets from countries A and C are considered to be similar and could be interchangeable. Formulation B exhibited such different dissolution behavior that its interchangeability is discouraged, as well as its introduction in countries A and C from the manufacturing country B.Fil: Pizzorno, Maria Teresa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Zubata, Patricia D.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Simionato, Laura Daniela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Ercolano, Irma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Pizzorno, Maria Teresa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentin

A Symmetric Dual Encoding Dense Retrieval Framework for Knowledge-Intensive Visual Question Answering

Knowledge-Intensive Visual Question Answering (KI-VQA) refers to answering a question about an image whose answer does not lie in the image. This paper presents a new pipeline for KI-VQA tasks, consisting of a retriever and a reader. First, we introduce DEDR, a symmetric dual encoding dense retrieval framework in which documents and queries are encoded into a shared embedding space using uni-modal (textual) and multi-modal encoders. We introduce an iterative knowledge distillation approach that bridges the gap between the representation spaces in these two encoders. Extensive evaluation on two well-established KI-VQA datasets, i.e., OK-VQA and FVQA, suggests that DEDR outperforms state-of-the-art baselines by 11.6% and 30.9% on OK-VQA and FVQA, respectively. Utilizing the passages retrieved by DEDR, we further introduce MM-FiD, an encoder-decoder multi-modal fusion-in-decoder model, for generating a textual answer for KI-VQA tasks. MM-FiD encodes the question, the image, and each retrieved passage separately and uses all passages jointly in its decoder. Compared to competitive baselines in the literature, this approach leads to 5.5% and 8.5% improvements in terms of question answering accuracy on OK-VQA and FVQA, respectively

Una dictadura con forma de ley. Lecturas antiperonistas tras el triunfo de Perón (1946-1948)

Tras el triunfo de Perón en las elecciones de 1946, las fuerzas opositoras intentaron dar una explicación de su inesperada derrota. La interpretación predilecta se basó en el llamado “fraude preelectoral”, entendido como cooptación demagógica de las masas y como distribución inequitativa de recursos entre oficialismo y oposición. De allí surgiría una caracterización que, si bien tácitamente admitía el carácter legal del flamante gobierno, afirmaba que su legitimidad de origen nacía gravemente herida. En ese sentido, este trabajo repasa los posicionamientos de las principales fuerzas antiperonistas durante los primeros dos años de Perón en el poder.</p

Impacto herético y reacción jerarquizadora: nota sobre los orígenes del clivaje peronismo-antiperonismo

El presente trabajo indaga en los elementos políticos y culturales que acompañaron la estructuración del clivaje peronismo-antiperonismo. Para ello se rastrea la noción de “impacto herético”, referida al efecto subversivo que ejerció sobre los valores y jerarquías de la época el ascenso del movimiento plebeyo que representó el peronismo. En consecuencia, dicho movimiento debió lidiar con una “reacción jerarquizadora” de carácter antiperonista, de diversa extracción social y orientación política, que principalmente se opuso al trastrocamiento de determinadas normas culturales habituales. A su vez, la constitución de las clases populares en un sujeto político unificado, a través del peronismo, mantuvo una relación compleja con el aparato ideológico oficial y con los intentos de contención desde el Estado a las expresiones de movilización popular que el propio peronismo había inaugurado.Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educació

El CRUB en la mesa 6 de septiembre. Construyendo redes con jóvenes y adolescentes entorno a la problemática del consumo problemático de alcohol.

La problemática del consumo abusivo de alcohol por parte de adolescentes y jóvenes crece día a día en función de la relevancia que los actores políticos le brinden  al tema y que por medio de esas decisiones sus derechos como ciudadanos no se tengan en cuenta por ejemplo por no propiciarse espacios creativos y saludables de encuentro para que puedan intentar llevarse adelante proyectos significativos y con sentido social entre los jóvenes y los adultos. La idea delproyecto surge en función de la tarea de articulación entre los integrantes de la Mesa 6 de Septiembre con algunos Centros de Estudiantes y Equipos Directivos de Colegios que interesados en la propuesta han puesto a disposición el espacio para el debate, la reflexión y la generación de ideas que los mismos estudiantes puedan proponer y llevar adelante acompañados por los adultos, para su concreción. A su vez para la Mesa se constituiría en otras variadas y permanentes acciones dando sentido a una mayor presencia en la sociedad barilochense.Los antecedentes son las siete noches sin alcohol realizadas desde el año 2008, las actividades alcanzadas a través de la Fundación GEB y el proyecto Participación Juvenil y la participación activa y crítica reflexiva de los estudiantes de las instituciones participantes del curso “Diversión y Alcohol. Construyendo con otros espacios de encuentro saludables” Res. CPE 02294-13Se pretende brindar a los jóvenes la posibilidad de profundizar el conocimiento de su contexto sociocultural, apoyarlos en la detección de sus problemáticas y necesidades, y promover el desarrollo de iniciativas plausibles de realizar y con incidencia directa sobre su calidad de vida, convencidos de que la participación es la vía para la transformación; y que el ejercicio de la ciudadanía brinda las herramientas necesarias para influir en políticas publicas que logrencambiar la realidad. Se propone intervenir con la juventud para contribuir a la ruptura del círculo de desesperanza y apatía y reemplazarlo por uno de participación y transformación. La idea clara de que la realidad social es susceptible de ser transformada y la convicción de que la participación ciudadana es la vía para esa transformación buscando revertir la indiferencia cívica incorporando en los jóvenes la necesidad de tomar contacto con la realidad y actuar en consecuencia.Integrantes: Lic. BERTACHI Graciela, Lic. TOBIN Beatriz, Prof. ORTEGA Marita, Lic. MASTROCELLO Adrian

Satisfacción del cliente de obras particulares de la Municipalidad de La Plata

Evaluación del nivel de satisfacción de los clientes del servicio de Obras Particulares de la Municipalidad de La Plata en relación a: - El grado de conocimiento de los servicios que brinda el municipio. - La imagen que tiene el ciudadano del municipio. - La importancia de cada atributo del servicio: en relación a la atención al público, a la infraestructura y equipamiento y a los procesos para la realización de trámites. - El grado de satisfacción del servicio en general. - Motivos de satisfacción e insatisfacción.Facultad de Ciencias Económica

Tradiciones en crisis: los debates antiperonistas en torno a la abstención electoral (1952-1955)

Opposition forces in first Peronism are still relatively unexplored by historical research. This is most evident in the second presidency of Perón, when the polarization between officialism and opposition increases. This work traces the discussions within the Radical Civic Union and the Democratic Party, which were crossed transversally by a debate about how to face politically the Peronist government. In both parties there were sectors that demanded to adopt electoral abstention and to leave parliamentary seats in order to deny the legality of the government, while other internal groups, for different reasons, decided to preserve institutional participation. These tensions anticipate the divisions on anti-Peronist parties after the fall of Peronism in 1955. This work relates the debates of both parties with the radicalization process between Peronism and anti-Peronism in their last years of government, either in the increasing governmental restrictions or in the growing preference of the opposition parties for extra-institucional strategies.El accionar de las fuerzas opositoras durante el primer peronismo constituye un área de estudios relativamente poco explorada por la investigación histórica. Esta vacancia se agudiza en el período relativo a la segunda presidencia de Perón, caracterizada por una intensificación de la polarización entre oficialismo y oposición. Este trabajo rastrea las discusiones al interior de la Unión Cívica Radical y el Partido Demócrata, fuerzas atravesadas transversalmente por un debate en torno al modo de ejercer la oposición al gobierno peronista. En ambos partidos surgieron sectores que llamaron a adoptar la abstención electoral y a abandonar las bancas parlamentarias para desconocer la legalidad del gobierno, mientras otros grupos internos, por diferentes motivos, decidieron sostener la participación en el ámbito institucional. La mayoría de estas tensiones anticiparon las rupturas partidarias que se extendieron por todo el espectro opositor tras la caída del peronismo en 1955. Este trabajo reconstruye los debates al interior de ambas fuerzas antiperonistas y los vincula con los modos que asumió el proceso de radicalización entre peronismo y oposición en sus últimos años de gobierno, tanto en las crecientes restricciones oficiales por parte del Ejecutivo como en la progresiva inclinación opositora por las estrategias extra-institucionales

Formación Corporal Motora en Educación Física.

Según el Plan de estudios 435/03 del Profesorado en Educación Física que se dicta en el Centro Regional Universitario Bariloche dependiente de la Universidad Nacional del Comahue existe, en los trayectos formativos de primer, segundo y tercer año, una asignatura cuya denominación es Formación Corporal Motora en adelante (FCM). En la misma se ha intentado, durante estos años, articular disciplinas deportivas como el Atletismo, la Gimnasia y la Natación.En esta comunicación se pretende resignificar el concepto FCM al interior de la Educación Física reflexionando sobre los conceptos y las prácticas que la sustentan en el trayecto formativo del profesorado en Educación Física. Se intenta plantear un espacio diferente y alternativo respecto a la construcción de corporeidad y motricidad desde la enseñanza de las destrezas atléticas y acuáticas en los sujetos de aprendizaje. En este sentido interesa desarrollar la pregunta central que formulan los estudiantes entorno a la construcción de sentido respecto alconcepto Formación Corporal Motora: ¿cómo se visibiliza esta formación corporal motora del sujeto desde la enseñanza?, ¿Cómo ponerlo en práctica?Siguiendo a Zerbino el reto es preguntarse ¿qué estamos sosteniendo con aquello que hacemos? Por ello es que, nada de lo que se lleve adelante en la enseñanza es ni neutral ni inocente, está teñido de sentido, de significado, de poder y de utopía.Fecha de recepción del trabajo: 11/8/2016. Aceptado para publicar el 21/8/201

Role of Permissive Neuraminidase Mutations in Influenza A/Brisbane/59/2007-like (H1N1) Viruses

Neuraminidase (NA) mutations conferring resistance to NA inhibitors were believed to compromise influenza virus fitness. Unexpectedly, an oseltamivir-resistant A/Brisbane/59/2007 (Bris07)-like H1N1 H275Y NA variant emerged in 2007 and completely replaced the wild-type (WT) strain in 2008–2009. The NA of such variant contained additional NA changes (R222Q, V234M and D344N) that potentially counteracted the detrimental effect of the H275Y mutation on viral fitness. Here, we rescued a recombinant Bris07-like WT virus and 4 NA mutants/revertants (H275Y, H275Y/Q222R, H275Y/M234V and H275Y/N344D) and characterized them in vitro and in ferrets. A fluorometric-based NA assay was used to determine Vmax and Km values. Replicative capacities were evaluated by yield assays in ST6Gal1-MDCK cells. Recombinant NA proteins were expressed in 293T cells and surface NA activity was determined. Infectivity and contact transmission experiments were evaluated for the WT, H275Y and H275Y/Q222R recombinants in ferrets. The H275Y mutation did not significantly alter Km and Vmax values compared to WT. The H275Y/N344D mutant had a reduced affinity (Km of 50 vs 12 µM) whereas the H275Y/M234V mutant had a reduced activity (22 vs 28 U/sec). In contrast, the H275Y/Q222R mutant showed a significant decrease of both affinity (40 µM) and activity (7 U/sec). The WT, H275Y, H275Y/M234V and H275Y/N344D recombinants had comparable replicative capacities contrasting with H275Y/Q222R mutant whose viral titers were significantly reduced. All studied mutations reduced the cell surface NA activity compared to WT with the maximum reduction being obtained for the H275Y/Q222R mutant. Comparable infectivity and transmissibility were seen between the WT and the H275Y mutant in ferrets whereas the H275Y/Q222R mutant was associated with significantly lower lung viral titers. In conclusion, the Q222R reversion mutation compromised Bris07-like H1N1 virus in vitro and in vivo. Thus, the R222Q NA mutation present in the WT virus may have facilitated the emergence of NAI-resistant Bris07 variants