Virulence Genes and Resistance Profile of Escherichia coli Isolated in Meat Meal Samples

Background: Feed is the main route of transmission of pathogenic microorganisms and is responsible for a large part of the cost of poultry production, so the inclusion of alternative foods in diets for monogastrics has been a constant. Among alternative foods most used in modern poultry farming are animal meal, however, when contaminated they constitute a route of transmission of several pathogenic agents, including Escherichia coli. In addition, there is a zoonotic potential, as poultry products are intended for human consumption. The objective of this research was to detect virulence genes, as well as to evaluate the resistance profile of Escherichia coli isolates from meat meal samples.  Materials, Methods & Results: A total of 40 Escherichia coli isolates were analyzed and the virulence genes surveyed iss, ompT, hlyF, iutA, and fimA identified by Polymerase Chain Reaction (PCR). The antimicrobial agents tested were: amoxycillin (30 μg), ceftiofur (30 μg), ciprofloxacin (5 μg), doxycycline (30 μg), florfenicol (30 μg), fosfomycin (200 μg), gentamicin (10 μg), norfloxacin (10 μg) and oxacillin (1 μg). It was possible to observe the occurrence of the iss resistance gene in 100% of Escherichia coli isolates, followed by hlyF (85%), fimA (75%), ompT (17.5%) and iutA (5%). Regarding the simultaneous detection for the genes, a greater association between the genes iss, hlyF and fimA (60%) was verified. All isolates showed resistance to oxacillin (100%), followed by doxycycline (25%), amoxicillin (22.5%), norfloxacin (17.5%), ceftiofur (15%), florfenicol (12.5%), fosfomycin (12.5%), ciprofloxacin (10%) and gentamycin (2.5%). In this study, a variation of the multiple antimicrobial resistance index (IRMA) was observed between 0.22 and 0.77. Discussion: The indiscriminate use of of antimicrobials as performance enhancers in production animals, may have contributed to the increase in antimicrobial resistance, with the occurrence of multiresistant Escherichia coli carrying virulence genes. Virulence genes present in Escherichia coli isolates are studied to understand the degree of influence they exert in the establishment of the disease, one of the most researched genes is the iss gene, involved in the processes that promote serum resistance. In this study, iss (100%) was present in all the isolates analyzed, although it is not the only mechanism used by these bacteria to reach internal organs and trigger an infection, this gene encodes an important mechanism associated with high levels of virulence. The second highest prevalence found was of the hlyF gene (85%), the high prevalence of hlyF suggests virulence potential, involved with the production of hemolysin and improvement of outer membrane vesicles associated with the release of toxins. The fimA gene (75%) was detected in a slightly lower percentage when compared to iss and hlyF. With the second lowest prevalence, the ompT gene (17.5%), is involved in a process that includes the proteolytic degradation of antimicrobial peptides and with the lowest prevalence the iutA gene (5%). Certain combinations of virulence genes make the strains easier to survive, adhere to, colonize and even the ability to develop septicemic conditions. Multiresistant E. coli strains, is a fact of concern for both animal and human health, since the presence of multiresistant strains, originating from poultry, can be transmitted from chicken carcasses.  In this sense, the importance of sanitary control of the inputs used in animal feed is emphasized, as well as the prudent use of antimicrobials in animal production, with a view to producing a safe food, minimizing not only the economic losses, but also the risks to human health. Keywords: antimicrobial, bacterial resistance, colibacillosis, poultry.

In vitro evaluation of the efficacy of commercial disinfectants used in pre and post-dipping against Staphylococcus spp. isolated from bovine mastitis

Objetivou-se com este estudo avaliar a sensibilidade in vitro de Staphylococcus spp.frente a alguns desinfetantes comerciais utilizados no pré e pós-dipping em vacas leiteiras. Foram testados um total de 60 isolados de Staphylococcus spp. identificados como S. aureus (50) e Staphylococcus coagulase positiva (10) recuperados de glândulas mamárias de vacas com mastite subclínica procedentes das regiões Metropolitana do Recife, Agreste e Zona da Mata do Estado de Pernambuco. O estudo da eficácia dos desinfetantes utilizados no pré e pós-dipping foi realizado utilizando-se os seguintes princípios ativos: cloro (2,5%), iodo (0,57%), clorexidine (2,0%), amônia quaternária (4,0%) e ácido lático (2,0%) em quatro tempos distintos (15", 30", 60" e 300"). Observou-se que 100% de S. aureus foram sensíveis ao iodo, 93,3% sensíveis a clorexidine, 80% sensíveis a amônia, 35,6% sensíveis ao ácido lático e 97,8% resistentes ao cloro no tempo de 60". Com relação a Staphylococcus coagulase positiva (SCP), 100% dos isolados foram sensíveis ao iodo, 81,8% sensíveis a amônia quaternária, 99,9% sensíveis ao ácido lático, 72,7% sensíveis a clorexidine e 100% resistentes ao cloro no tempo de 60". Conclui-se que a maior atividade desinfetante in vitro foi verificada para o iodo e clorexidine frente a S. aureus e do iodo e ácido lático frente aos SCP e que há necessidade de avaliação periódica dos desinfetantes utilizados nas propriedades leiteiras nas regiões estudadas, pois, existem variações no perfil de sensibilidade e resistência aos desinfetantes que podem comprometer os programas de controle da mastite bovina causada por Staphylococcus spp.The objective of this investigation was to evaluate the in vitro sensibility of Staphylococcus spp. to several commercially available disinfectants used for pre and post dipping. A total of 60 isolates of Staphylococcus spp., identified as Staphylococcus aureus (50) and Positive coagulase Staphylococcus (10) were obtained from the mammary glands of dairy cows with subclinical mastitis in the regions of Metropolitan Recife, the Agreste and the Zona da Mata of the State of Pernambuco, Brazil. As active ingredients were used a chlorine base (25%), iodine (0.6%), chlorhexidine (2.0%), quaternary ammonium (4.0%), and lactic acid (2.0%) at four specific intervals (15", 30", 60", and 300"). One hundred percent of S. aureus was found to be sensitive to iodine, 93.3% to chlorhexidine, 80% to ammonia, 35.6% to lactic acid, and 97.8% were resistant to chlorine at a 60-minute interval. With respect to the Positive coagulase Staphylococcus (SCP), 100.0% of the isolates were sensitive to iodine, 81.8% to quaternary ammonium, 99.9% to lactic acid, 72.7% to chlorhexidine, and 100% was resistant to chlorine at an interval of 60 minutes. It can be concluded that the highest disinfectant activity in vitro was found to be with iodine and chlorhexidine for S. aureus, and with iodine and lactic acid for SCP. A further conclusion was that it is important to undertake a periodic evaluation of the disinfectants used on the dairy properties in the regions studied, given the variety of sensibilities and resistance to disinfectants used, which may prejudice the control of bovine mastitis caused by Staphylococcus spp

Análise dos acidentes de trânsito ocasionados por animais nas rodovias federais do estado de Pernambuco, Brasil

Objetivou-se analisar durante o triênio 2012-2014 as ocorrências de acidentes de trânsito ocasionados por animais nas rodovias federais do estado de Pernambuco, com base em informações obtidas no banco de dados do sistema operacional da Polícia Rodoviária Federal, o Siger2. Foram analisadas as variáveis: quantitativo de acidentes por ano, tipo de veículo, rodovia de ocorrência, tipo de pista, traçado da via, condições meteorológicas, fase do dia, tipo do solo (perímetro da via), sexo, idade dos condutores e estado físico das vítimas. No triênio de 2012 a 2014 foram registrados 1.013 acidentes do tipo atropelamento animal. Constatouse maior ocorrência de acidentes no ano de 2012 (40,1%), ocasionados por automóveis (46,9%), na BR 232 (37,5%), em pista simples (72,8%) com trechos em linha reta (92,8%), em céu claro (67,4%), fase de plena noite (65,7%), e no perímetro rural (72,2%). Predominaram os condutores do sexo masculino (86,3%), com idade entre 18 a 40 anos (54,5%) e 63,3% das vítimas foram classificadas como ilesas. Considera-se fundamental a implementação de políticas públicas e medidas mitigatórias que forneçam subsídios para melhorias na conservação e sinalização das rodovias, bem como a elaboração de programas destinados a minimizarem o acesso dos animais as rodovias e campanhas educativas direcionadas aos tutores de animais e condutores, sendo a participação do médico veterinário essencial na elaboração e implementação dessas medidas

Risk factors for Toxoplasma gondii infection in sheep in the northeastern region of Brazil

Toxoplasma gondii e um parasita cuja infecção leva a desordens reprodutivas como aborto, mumificação fetal, nascimento de cordeiros fracos e natimortos, provocando perdas econômicas na produção ovina. A região nordeste do Brasil possui aproximadamente 171 milhões de pequenos ruminantes, dos quais 5,4% são ovinos. Este estudo tem como objetivo determinar a ocorrência de T. gondii nos rebanhos ovinos de 60 propriedades de 19 municípios de três mesorregiões (leste, semiárido e sertão) do estado de Sergipe, Brasil, e os fatores de risco associados a essa infecção. Amostras de soro foram coletadas entre 2011 e 2012, em 60 propriedades localizadas em 19 municípios das três mesorregiões: 680 na região leste, 280 no semiárido e 240 no sertão, totalizando 1.200 amostras (990 fêmeas e 210 machos). Anticorpos anti-T.gondii foram detectados por reação de imunofluorescência indireta (RIF ≥ 64). A maior ocorrência foi detectada na região leste (45,3%, p = 0.001). Em propriedades com produção de subsistência, o risco de animais infectados por T. gondii e aproximadamente duas vezes maior que nas de cria/recria/engorda (OR = 3.03/ IC: 1.97-4.68). A ausência de cuidados sanitários, como ausência de esterqueira (p = 0.000/ OR: 1.60; CI: 1.26-2.03); quarentena (p = 0.000/ OR: 1.87; CI: 1.45-2.41) e desinfecção (p = 0.003/ OR: 1.46; CI: 1.13-1.88) foram significantes. Em relação a alimentação, o risco de infecção aumenta 1.74 e 1.37 em locais que utilizam cocho ou com presença de gatos, respectivamente. Este estudo permite concluir que o T. gondii e encontrado em propriedades das mesorregiões do estado de Sergipe e fatores ambientais e de manejo estão influenciando nas infecções em ovinos.Toxoplasma gondii is an infective parasite that causes reproductive disorders such as abortion, fetal mummification, birth of weak offspring, and stillbirth, thereby causing economic losses to sheep production. The northeastern region of Brazil has approximately 171 million small ruminants, of which 5.4% are sheep. The present study aimed at determining the rate of occurrence of T. gondii in sheep flocks on 60 farms in 19 municipalities in the three mesoregions (eastern, semi-arid, and sertão or backlands) of the state of Sergipe, Brazil, and the risk factors associated with this infection. Serum samples were collected between 2011 and 2012, from 60 farms located in 19 municipalities in the three mesoregions: 680 in the eastern region, 280 in the semi-arid region, and 240 in the backlands, totaling 1,200 samples (990 females and 210 males). Anti-T. gondii antibodies were detected by means of the indirect fluorescence antibody test (IFAT ≥ 64). The highest occurrence was detected in the eastern region (45.3%, p = 0.001). On farms with subsistence production, the risk of having animals infected by T. gondii was approximately twice as high as on breeding/rebreeding/fattening farms (OR: 3.03; CI: 1.97-4.68). There was a significant lack of sanitary care, such as absence of a dunghill (p = 0.000; OR: 1.60; CI: 1.26-2.03), quarantine (p = 0.000; OR: 1.87; CI: 1.45-2.41) and disinfection (p = 0.003; OR: 1.46; CI: 1.13-1.88). Regarding feeding, the risk of infection was 1.74 and 1.37 times higher in places that used a trough and/or that cats could access, respectively. The presente study allows the conclusions that T. gondii is found on farms in the three mesoregions of the state of Sergipe and that environmental and management factors have an influence on sheep infection

Soroprevalência e fatores de risco associados ao herpesvírus bovino tipo 1 e ocorrência da infecção pelo vírus da diarreia viral bovina em vacas leiteiras no estado de Pernambuco

Objetivou-se, com este estudo, determinar a soroprevalência para a infecção pelo herpesvírus bovino tipo 1 (HVB-1) e vírus da diarreia viral bovina (VDVB-1) e identificar os fatores de risco associados à infecção HVB-1 em vacas leiteiras na bacia leiteira do estado de Pernambuco. Foram analisadas 358 amostras de soro sanguíneo provenientes de vacas leiteiras em idade reprodutiva, não vacinados para os referidos agentes, procedentes de 18 propriedades, distribuídas em seis municípios na microrregião do Vale do Ipanema, Pernambuco. Para o diagnóstico sorológico foi utilizada a técnica de vírusneutralização. A ocorrência de anticorpos anti-HVB-1 em bovinos foi 52,8% (188/356), enquanto que para VDVB-1 foi 99,4% (355/357). Observou-se uma variação da ocorrência de anticorpos, por propriedade, de 5 a 90,9% para HVB-1 e 93,5 a 100% para VDVB-1, destacando-se que 100% das propriedades possuíam ao menos um animal positivo para as duas infecções. Os fatores de risco associados à infecção por HVB-1 foram: compartilhamento de pastos (OR = 2,9; p = 0,004); não utilização de inseminação artificial (OR = 2,3; p < 0,001); não realização de transferência de embriões (OR = 13,6; p < 0,001); aquisição de animais destinados à reprodução (OR = 4,2; p < 0,001); reposição de animais da mesma região (OR = 3,0; p = 0,001) e fetos abortados deixados no pasto (OR= 4,0; p < 0,001). É possível concluir que a infecção por ambos os agentes está distribuída nos bovinos da área do estudo, sendo necessária a implementação de medidas preventivas a partir dos fatores de risco identificados no presente estudo

Detecção molecular, análise epidemiológica e de fatores de risco associados à infecção pelo vírus da cinomose canina em Recife, Pernambuco

Objetivou-se realizar detecção molecular, análise epidemiológica e de fatores de risco associados à infecção pelo vírus da cinomose canina (CDV) em cães em um Hospital Veterinário Escola em Recife, Pernambuco. Foram avaliados 146 cães suspeitos de diferentes sexos, variadas idades e raças. Após a autorização de cada tutor, foi realizada entrevista, sendo utilizada uma ficha própria que continham dados epidemiológicos e clínicos. Foi coletado sangue por venopunção da jugular externa para a realização da pesquisa de inclusão viral e para a detecção molecular do CDV pela técnica de transcrição reversa seguida pela reação em cadeia pela polimerase (RT-PCR). A prevalência da infecção pelo CDV foi de 27,4% (40/146) na RT-PCR, 7,5% (11/146) pela pesquisa de inclusão viral e o teste Kappa não apresentou concordância entre a presença do corpúsculo de Lentz e os resultados da RT-PCR. As cadelas com até seis meses, com definição racial, que se alimentavam exclusivamente com alimento caseiro, com acesso à rua, semi-domiciliadas, criadas dentro de casa e com vacinação incompleta foram mais acometidas pelo CDV. Conclui-se que o vírus da cinomose canina encontrase presente em Recife, PE e que apesar de nenhuma variável epidemiológica ter sido considerada como fator de risco, torna-se necessário que à prática da vacinação regular aos animais sejam reforçadas e pesquisas desta natureza sejam realizadas para controle desta infecção na população canina

Salmonella spp. em Cebus spp. mantidos em Centros de Triagem de Animais Silvestres no Nordeste do Brasil

Objetivou-se com esse estudo isolar e identificar os sorovares de Salmonella spp. em Cebus spp. mantidos em cativeiro. Foram investigados 28 animais mantidos em Centros de Triagem de Animais Silvestres (CETAS) do Nordeste do Brasil. Foram realizados suabes retais que foram processados para o isolamento da bactéria em meios seletivos seguido da identificação dos sorovares por meio de provas bioquímicas. Das 28 amostras analisadas, cinco (17,9%) foram positivas para Salmonella spp. e os sorovares identificados foram Infantis (40%), Panama (40%) e Newport (20%). Ocorreu associação significativa (p<0.05) para as variáveis: instituição (p=0,026), armazenamento de frutas, verduras e hortaliças (p=0,026), fornecimento de carne crua (p=0,026), tipo de bebedouro (p=0,026) e higienização diária de bebedouros (p=0,026). Esse estudo demonstrou que infecções por Salmonella spp. ocorrem em populações de Cebus mantidos em cativeiro e apontou para a necessidade de se realizar investigações periódicas em todo o plantel, assim como implantar medidas de controle para evitar riscos à saúde dos animas e pública

Biofilm Production and In Vitro Susceptibility to Disinfectants of Staphylococcus Coagulase Positive Isolated from Bovine Milk

Background: Mastitis is one of the diseases that cause damage to dairy cattle, and coagulase positive Staphylococcus (CPS), are its main etiological agents. The production of biofilms gives these microorganisms a physiological advantage, being an important virulence factor, as it confers their resistance to the action of disinfectants used in hygiene procedures. Therefore, the objective of this study was to evaluate the capacity of CPS, isolated from milk samples from cases of bovine subclinical mastitis in the Alagoas dairy basin, biofilm production and its sensitivity to disinfectant agents used before and after dipping.Materials, Methods & Results: In the Alagoas Milk Basin Region, 10 properties were selected from the municipalities of Batalha, Cacimbinhas, Major Isidoro and Minador do Negrão, which used a mechanical milking system and supplied milk to a dairy under federal inspection. The California Mastitis Test (CMT) was performed on 1155 cows. The animals diagnosed with subclinical mastitis were classified as: mild (+); moderate (++) and severe (+++). CMT positive samples were collected from 2+, totaling 891 samples. After cleaning the papillary ostium, 2 to 5 mL of milk was collected from each fourth breast before milking began. Subsequently, 0.5 µL of each sample was streak plated by exhaustion on 5% Sheep Blood Agar and incubated at 37°C, with readings at 24 and 48 h. The macroscopic and microscopic characteristics of the colonies, catalase and coagulase test were evaluated. Biofilm formation was determined by the microplate adhesion test. The efficacy of the sanitizers was evaluated with the active ingredients: lactic acid (2%), allantoin (0.05%), iodine (0.5%), chlorhexidine (2.0%), chlorine (2.5%), at times 15, 30 and 60 seconds. It was observed that 91.2% of the samples were able to form biofilm; Of these, 22.2%, 29.6% and 48.2% were strong, moderate and weak producers, respectively. The sensitivity profile of chlorhexidine isolates was 79.73%, 80.41% and 83.78%; iodine was 59.46%, 65.54% and 66.22% sensitivity over the evaluated time. For allantoin, the isolates presented sensitivity of 22.30%, 27.03% and 37.74%, for lactic acid, 18.92%, 20.95% and 22.30% of the samples were sensitive, and to chlorine, 12.6%, 15.58% and 17.57% of the isolates were sensitive. Moreover, it was observed that the longer the exposure to the disinfectant, the greater the effectiveness of the same.Discussion: The results are in line with literature data. Staphylococcus spp. from milk samples of animals with subclinical mastitis are able to form biofilm, thus being an important virulence factor. The heterogeneity regarding the biofilm production potential of the isolates is due to the different species of Staphylococcus spp. that, through distinct mechanisms, triggers a greater or lesser formation of this virulent factor, as well as having their adhesion tested, end up becoming more strongly attached to the plate. Among the disinfectants tested, it was confirmed that chlorhexidine and iodine are more effective than SCP, which tend to have high levels of sensitivity to these disinfectants. However, although chlorhexidine was more sensitive to SCP, its use in the field should be done with caution, as its effectiveness may be reduced in the presence of chlorinated water or excess organic matter. It is concluded that SCP isolates from bovine milk from subclinical mastitis mammary quarters were able to produce biofilms. These isolates were also in vitro sensitive to chlorhexidine and iodine, but periodic evaluation of the efficacy of disinfectants used before and after milking is necessary

Perfil epidemiológico das intoxicações exógenas no município de Moreno-PE no período de 2012 a 2015

Objetivou-se descrever as características do perfil epidemiológico das intoxicações exógenas, no Município de Moreno, Estado de Pernambuco, no período de 2012 a 2015. Foi realizado um estudo epidemiológico do tipo descritivo, onde foram analisadas a faixa etária, sexo, tipo de agente tóxico, utilização de agrotóxicos e motivo de exposição dos indivíduos acometidos pelas intoxicações exógenas registradas no Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN). Foram notificados 109 casos de intoxicação exógena no período de 2012 a 2015, sendo as maiores frequências, encontradas em adultos (51,1%), e os principais agentes tóxicos corresponderam aos medicamentos (41,3%) e agrotóxicos agrícolas (12%). Em 94,5% dos casos, o agrotóxico utilizado não foi informado. Dos 109 casos de intoxicação exógena, 37 (33,9%) ocorreram pela tentativa de suicídio. Os dados analisados permitem concluir que o quantitativo de dados em branco, nas fichas de notificação dificulta o desenvolvimento de estratégias de prevenção das intoxicações pela Vigilância em Saúde, bem como a instituição de tratamentos específicos para os pacientes intoxicados pela Atenção Primária a Saúde

Prevalência da tuberculose bovina no Arquipélago de Fernando de Noronha e sua importância para o direcionamento das ações de Defesa Sanitária Animal

Recentes estudos epidemiológicos sobre tuberculose bovina foram conduzidos no Brasil, mas não em seus territórios insulares. O objetivo deste trabalho foi descrever a prevalência da tuberculose bovina no Arquipélago de Fernando de Noronha, Brasil, a fim de colaborar na adoção das estratégias de sua prevenção, controle e/ou erradicação. Em cada uma das dez propriedades existentes no arquipélago, todos os 74 bovinos acima de 24 meses de idade foram submetidos ao teste tuberculínico cervical comparativo. As informações epidemiológicas sobre a ocorrência da doença foram obtidas do banco de dados da Agência de Defesa e Fiscalização Agropecuária de Pernambuco - ADAGRO. As prevalências encontradas para rebanhos e animais foram 10% e 1,35%, respectivamente. A análise dos fatores de risco foi inviabilizada pelos resultados obtidos, já que o número de casos não permitiu fazer este tipo de análise. Este é o primeiro relato sobre prevalência da tuberculose bovina no Arquipélago de Fernando de Noronha. Várias características favorecem a implantação de estratégias que visem à erradicação da tuberculose bovina em Fernando de Noronha tais como: área territorial e característica insular; restrição da importação de animais de produção; reduzido número de bovinos e de propriedades; bem como pela baixa prevalência de animais positivos. Desta forma, o Serviço Veterinário Estadual (SVE) poderá otimizar as ações de vigilância nas espécies domésticas, estimulando a colaboração interdisciplinar entre os órgãos competentes para erradicar a tuberculose animal e alcançar melhoria da saúde humana por meio da saúde animal