Ankylosing spondylitis: genomic and functional characterization of candidate genes and their repercussion in clinical practice

RESUMO: Introdução: A espondilite anquilosante (EA) é uma doença inflamatória crónica caracterizada pela inflamação das articulações sacroilíacas e da coluna. A anquilose progressiva motiva uma deterioração gradual da função física e da qualidade de vida. O diagnóstico e o tratamento precoces podem contribuir para um melhor prognóstico. Neste contexto, a identificação de biomarcadores, assume-se como sendo muito útil para a prática clínica e representa hoje um grande desafio para a comunidade científica. Objetivos: Este estudo teve como objetivos: 1 - caracterizar a EA em Portugal; 2 - investigar possíveis associações entre genes, MHC e não-MHC, com a suscetibilidade e as características fenotípicas da EA; 3 - identificar genes candidatos associados a EA através da tecnologia de microarray. Material e Métodos: Foram recrutados doentes com EA, de acordo com os critérios modificados de Nova Iorque, nas consultas de Reumatologia dos diferentes hospitais participantes. Colecionaram-se dados demográficos, clínicos e radiológicos e colhidas amostras de sangue periférico. Selecionaram-se de forma aleatória, doentes HLA-B27 positivos, os quais foram tipados em termos de HLA classe I e II por PCR-rSSOP. Os haplótipos HLA estendidos foram estimados pelo algoritmo Expectation Maximization com recurso ao software Arlequin v3.11. As variantes alélicas dos genes IL23R, ERAP1 e ANKH foram estudadas através de ensaios de discriminação alélica TaqMan. A análise de associação foi realizada utilizando testes da Cochrane-Armitage e de regressão linear, tal como implementado pelo PLINK, para variáveis qualitativas e quantitativas, respetivamente. O estudo de expressão génica foi realizado por Illumina HT-12 Whole-Genome Expression BeadChips. Os genes candidatos foram validados usando qPCR-based TaqMan Low Density Arrays (TLDAs). Resultados: Foram incluídos 369 doentes (62,3% do sexo masculino, com idade média de 45,4 ± 13,2 anos, duração média da doença de 11,4 ± 10,5 anos). No momento da avaliação, 49,9% tinham doença axial, 2,4% periférica, 40,9% mista e 7,1% entesopática. A uveíte anterior aguda (33,6%) foi a manifestação extra-articular mais comum. Foram positivos para o HLA-B27, 80,3% dos doentes. Os haplótipo A*02/B*27/Cw*02/DRB1*01/DQB1*05 parece conferir suscetibilidade para a EA, e o A*02/B*27/Cw*01/DRB1*08/DQB1*04 parece conferir proteção em termos de atividade, repercussão funcional e radiológica da doença. Três variantes (2 para IL23R e 1 para ERAP1) mostraram significativa associação com a doença, confirmando a associação destes genes com a EA na população Portuguesa. O mesmo não se verificou com as variantes estudadas do ANKH. Não se verificou associação entre as variantes génicas não-MHC e as manifestações clínicas da EA. Foi identificado um perfil de expressão génica para a EA, tendo sido validados catorze genes - alguns têm um papel bem documentado em termos de inflamação, outros no metabolismo da cartilagem e do osso. Conclusões: Foi estabelecido um perfil demográfico e clínico dos doentes com EA em Portugal. A identificação de variantes génicas e de um perfil de expressão contribuem para uma melhor compreensão da sua fisiopatologia e podem ser úteis para estabelecer modelos com relevância em termos de diagnóstico, prognóstico e orientação terapêutica dos doentes. -----------ABSTRACT: Background: Ankylosing Spondylitis (AS) is a chronic inflammatory disorder characterized by inflammation in the spine and sacroiliac joints leading to progressive joint ankylosis and in progressive deterioration of physical function and quality of life. An early diagnosis and early therapy may contribute to a better prognosis. The identification of biomarkers would be helpful and represents a great challenge for the scientific community. Objectives: The present study had the following aims: 1- to characterize the pattern of AS in Portuguese patients; 2- to investigate MHC and non-MHC gene associations with susceptibility and phenotypic features of AS and; 3- to identify candidate genes associated with AS by means of whole-genome microarray. Material and Methods: AS was defined in accordance to the modified New York criteria and AS cases were recruited from hospital outcares patient clinics. Demographic and clinical data were recorded and blood samples collected. A random group of HLA-B27 positive patients and controls were selected and typed for HLA class I and II by PCR-rSSOP. The extended HLA haplotypes were estimated by Expectation Maximization Algorithm using Arlequin v3.11 software. Genotyping of IL23R, ERAP1 and ANKH allelic variants was carried out with TaqMan allelic discrimination assays. Association analysis was performed using the Cochrane-Armitage and linear regression tests as implemented in PLINK, for dichotomous and quantitative variables, respectively. Gene expression profile was carried out using Illumina HT-12 Whole-Genome Expression BeadChips and candidate genes were validated using qPCR-based TaqMan Low Density Arrays (TLDAs). Results: A total of 369 patients (62.3% male; mean age 45.4±13.2 years; mean disease duration 11.4±10.5 years), were included. Regarding clinical disease pattern, at the time of assessment, 49.9% had axial disease, 2.4% peripheral disease, 40.9% mixed disease and 7.1% isolated enthesopathic disease. Acute anterior uveitis (33.6%) was the most common extra-articular manifestation. 80.3% of AS patients were HLA-B27 positive. The haplotype A*02/B*27/Cw*02/DRB1*01/DQB1*05 seems to confer susceptibility to AS, whereas A*02/B*27/Cw*01/DRB1*08/DQB1*04 seems to provide protection in terms of disease activity, functional and radiological repercussion. Three markers (two for IL23R and one for ERAP1) showed significant single-locus disease associations. Association of these genes with AS in the Portuguese population was confirmed, whereas ANKH markers studied did not show an association with AS. No association was seen between non-MHC genes and clinical manifestations of AS. A gene expression signature for AS was established; among the fourteen validated genes, a number of them have a well-documented inflammatory role or in modulation of cartilage and bone metabolism. Conclusions: A demographic and clinical profile of patients with AS in Portugal was established. Identification of genetic variants of target genes as well as gene expression signatures could provide a better understanding of AS pathophysiology and could be useful to establish models with relevance in terms of susceptibility, prognosis, and potential therapeutic guidance

Muito além da diversão: reflexões sobre a gestão noturna de cidades

Enquanto grande parte das pessoas dorme, uma parcela da população segue acordada, se divertindo ou trabalhando. Importantes cidades do mundo (como Amsterdam, Londres, Nova York e Paris, por exemplo) já perceberam o valor estratégico que a “noite” possui – tanto para a organização da cidade para o dia seguinte, como para a geração de emprego e renda com atividades específicas – mas a administração pública brasileira segue dando pouca atenção para este período do dia. O artigo descreve a disciplina eletiva “Gestão Noturna de Cidades”, do curso de Graduação em Administração Pública da FGV-EAESP, cuja inspiração foi a proliferação desses “prefeitos noturnos” internacionais. Por meio de um estudo de caso, analisamos a disciplina que tem carga horária total de 50 horas e ocorre durante uma semana, com aulas começando às 19h e terminando às 6h do dia seguinte. Os resultados mostram uma mudança de percepção dos(as) estudantes em relação à noite e à importância da gestão pública nesse período

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Inovações e Desafios Metodológicos no Ensino de Administração Pública no Brasil: um Olhar com Base no Curso da FGV-EAESP

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Arterial Stiffness vs Sarcopenia in Portuguese Elderly Population

Aging often results in the appearance of sarcopenia, which is characterized by loss of muscle mass and strength. The incidence of sarcopenia in the elderly is a quite common and leads to weakness and disability, as well as a lower quality of life, also assuming a high social and economic impact. One previous study has shown an independent negative association between arterial stiffness and skeletal muscle mass decline [1], which suggest its relationship with sarcopenia. This work aims to evaluate the relation between sarcopenia and the arterial stiffness, in Portuguese elderly population A cohort of 38 elderly volunteers between 67 and 95 years, with and without Sarcopenia, were selected from nursing homes and day centers of Portuguese charity institution - Santa Casa da Misericórdia de Almada. All volunteers have the same living condition, meals and lifestyle routine, excepting the medications. The diagnosis and degree (severe or moderate) of sarcopenia were performed according to the European consensus on definition and diagnosis of sarcopenia [2] at the same day with arterial stiffnesses measurements assessed by carotid-femoral Pulse Wave Velocity (cfPWV). Our data show a positive correlation for cfPWV with the sarcopenia severity degree, which represents an increasing in arterial stiffness and might be explained by the fact that the loss of muscle mass is often associated with chronic inflammation [3]. Despite of the small cohort size, the male gender held a bigger mean value of cfPWV, with significant p-value (0.014), in comparison to the female gender, which estimates a higher CV risk for the male elders of the region of Almada and Greater Lisbon compared to the female gender. Further investigations would be desirable in order to obtain larger samples and ascertain the estimates for the respective groups.publishersversionpublishe

TRATAMENTO DE EFLUENTES AQUOSOS CONTENDO CÁDMIO, CHUMBO E COBRE, A PARTIR DA TÉCNICA DE ELETRODEPOSIÇÃO

No presente artigo foi aplicada a eletrodeposição para o tratamento de efluentes líquidos contendo íons de cádmio, chumbo e cobre. O cádmio, o chumbo e o cobre são metais amplamente utilizados pelo ser humano. Esses metais são classificados como metais pesados, sendo bioacumuláveis na natureza e podendo causar malefícios ao meio ambiente e à saúde humana. Nos ensaios de remoção, foi utilizada uma tela de aço carbono galvanizada como catodo e uma placa de platina como anodo. As eficiências de remoção foram obtidas pela análise das soluções antes e após o tratamento, utilizando-se um analisador voltamétrico. Os resultados obtidos demonstraram que a eletrodeposição é uma técnica eficiente para a remoção desses metais de efluentes aquosos

The sustainability and continuity of joint networks: the case of Iluminar Campinas

Este trabalho analisa a trajetória de uma política pública municipal de saúde que organizou e sustentou uma rede complexa e intersetorial de cuidados a pessoas em situação de violência sexual no município de Campinas - SP. A partir da perspectiva de que, para cuidar das pessoas que sofreram violência sexual, faz-se necessário utilizar os diversos serviços públicos existentes, a rede foi articulada envolvendo vários segmentos, como saúde, segurança pública, educação, assistência social, sociedade civil organizada e universidades. O texto apresenta e discute os diferentes momentos desse processo durante o período de 2001 a 2014, desde a inclusão do tema de cuidado às pessoas que sofreram violência na agenda governamental local até as ações de disseminação da política para outros municípios. Busca-se analisar as estratégias-chave que garantiram a conectividade da rede e a sustentabilidade ao longo do tempo, bem como demonstrar a potencialidade do local na elaboração e desenvolvimento de politicas de saúde.This paper discusses the trajectory of a municipal public health policy that organized and sustained a complex and intersectorial network of support for victims of sexual violence in the city of Campinas. From the perspective that using the existing public services is appropriate to take care of victims of sexual violence, the network was articulated involving various segments, such as health, public safety, education, social welfare, civil society organizations and universities. This paper presents and discusses some of the key moments of the program during 2001-2014, from the inclusion of the issue on the local government agenda to the transference to other municipalities. We aim to analyze the key strategies that ensured network connectivity and sustainability over time and to demonstrate the local capability in the design and development of health policies

Neuronal deletion of GSK3beta increases microtubule speed in the growth cone and enhances axon regeneration via CRMP-2 and independently of MAP1B and CLASP2

BACKGROUND: In the adult central nervous system, axonal regeneration is abortive. Regulators of microtubule dynamics have emerged as attractive targets to promote axonal growth following injury as microtubule organization is pivotal for growth cone formation. In this study, we used conditioned neurons with high regenerative capacity to further dissect cytoskeletal mechanisms that might be involved in the gain of intrinsic axon growth capacity. RESULTS: Following a phospho-site broad signaling pathway screen, we found that in conditioned neurons with high regenerative capacity, decreased glycogen synthase kinase 3β (GSK3β) activity and increased microtubule growth speed in the growth cone were present. To investigate the importance of GSK3β regulation during axonal regeneration in vivo, we used three genetic mouse models with high, intermediate or no GSK3β activity in neurons. Following spinal cord injury, reduced GSK3β levels or complete neuronal deletion of GSK3β led to increased growth cone microtubule growth speed and promoted axon regeneration. While several microtubule-interacting proteins are GSK3β substrates, phospho-mimetic collapsin response mediator protein 2 (T/D-CRMP-2) was sufficient to decrease microtubule growth speed and neurite outgrowth of conditioned neurons and of GSK3β-depleted neurons, prevailing over the effect of decreased levels of phosphorylated microtubule-associated protein 1B (MAP1B) and through a mechanism unrelated to decreased levels of phosphorylated cytoplasmic linker associated protein 2 (CLASP2). In addition, phospho-resistant T/A-CRMP-2 counteracted the inhibitory myelin effect on neurite growth, further supporting the GSK3β-CRMP-2 relevance during axon regeneration. CONCLUSIONS: Our work shows that increased microtubule growth speed in the growth cone is present in conditions of increased axonal growth, and is achieved following inactivation of the GSK3β-CRMP-2 pathway, enhancing axon regeneration through the glial scar. In this context, our results support that a precise control of microtubule dynamics, specifically in the growth cone, is required to optimize axon regrowth

Relations between short-term memory and the within-subject variability of experimental pain intensity reports

While factors contributing to between-subjects differences in pain have been studied extensively, factors contributing to the within-subjects variability of pain reports are yet unexplored. The aim of this investigation was to assess possible associations between short-term memory and the within-subjects variability of pain reports in healthy and chronic pain patients. Healthy participants were recruited at the University of Haifa, Israel, and Fibromyalgia patients were recruited at a rheumatology department in a central hospital in Lisbon, Portugal. Following consent, both cohorts underwent the same procedures, including the digit-span test, assessing short-term memory, and the FAST procedure, assessing within-subject variability of pain intensity reports in response to experimental pain. One-hundred twenty-one healthy volunteers and 29 Fibromyalgia patients completed the study. While a significant correlation was found between the within-subjects variability and the total score of the short-term memory task (Spearman’s r = 0.394, P = 0.046) in the Fibromyalgia group, a marginal correlation emerged in the healthy cohort (r = 0.174, P = 0.056). A possible interpretation of these results is that in the patients’ group, at least some of the within-subjects variability of pain intensity reports might be due to error measurement derived by poorer short-term memory, rather than true fluctuations in perception.info:eu-repo/semantics/publishedVersio