MALDI-MS argininyl bufadienolide esters fingerprint from parotoid gland secretions of Rhinella arenarum : age, gender and seasonal variation

In many amphibians, the granular glands can be grouped in special regions forming macroglands. This is the case of toads, characterized by the presence of a pair of parotoid macroglands, strategically located to give protection by poison release in case of attacks. The product secreted consists of a wide variety of chemical compounds including proteins, peptides, biogenic amines, toxic steroidal bufadienolides, and various alkaloids, depending on the species. In this work, using Rhinella arenarum, we have performed, for the first time, the matrix assisted-ultraviolet laser desorption/ionization mass spectrometry and tandem mass spectrometry characterization of the components of the secretion used as crude material, just suspended in MeOH (or MeCN). The crude sample as a whole (whole suspension) was spotted on the matrix assisted-ultraviolet laser desorption plate for analysis. Electrospray ionization-Orbitrap was used for cross-checking experiments. The pattern of signals obtained at m/z ranges 600 to 800 and 1200 to 1600 could be assigned as the argininyl bufadienolide esters fingerprint characteristic of female and male. Variation patterns for gender (female, male), age (non-reproductive, reproductive), and season (non-reproductive, reproductive) are described.Fil: Petroselli, Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Raices, Marilina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Jungblut, Lucas David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; ArgentinaFil: Pozzi, Andrea Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; ArgentinaFil: Erra Balsells, Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; Argentin

Fotosensibilización de dGMP por pterina: rol del anión superóxido

La radiación solar es un agente genotóxico y está involucrada en la producción de cáncer de piel. Las bases nucleicas pueden sufrir excitación directa por absorción de luz UV-C y UV-B (λ<320 nm).3 Además la luz UV-A (320-400 nm) puede ser responsable de daños a las bases, a pesar de que no absorben a esa longitud de onda, a través de reacciones fotosensibilizadas. Estas pueden ocurrir mediante mecanismos de transferencia de un electrón (Tipo I) o por oxígeno singlete (Tipo II). En el presente trabajo se utiliza como sensibilizador a la molécula de pterina (PT). Las pterinas absorben luz UV-A y reaccionan con el oxígeno molecular produciendo oxígeno singlete, el cual es una especie altamente reactiva que puede causar daño a moléculas biológicas.Eje: QuímicaFacultad de Ciencias Exacta

Synthesis and characterization of conjugated olygomers by acetone self-condensation end-functionalized with 4-hydroxycoumarin

A conjugated olygomers with ending 4-hydroxycoumarin has been prepared by condensation of acetone using sulfuric acid as a catalyst. The resulting polymer was characterized by Matrix Assisted Laser desorption/ionization Time-of-flight (MALDI-Tof) and Fourier Transformation Infrared Spectroscopy (FT-IR) methods.Fil: Garro, Hugo Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Investigaciones En Tecnología Química; ArgentinaFil: Petroselli, Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Pungitore, Carlos Rodolfo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Investigaciones En Tecnología Química; ArgentinaFil: Tonn, Carlos Eugenio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Investigaciones En Tecnología Química; ArgentinaFil: Erra Balsells, Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; Argentin

Aphicidal activity of Bacillus amyloliquefaciens strains in the peach-potato aphid (Myzus persicae)

Myzus persicae Sulzer (Hemiptera: Aphididae), is a generalist cosmopolitan insect that infests more than 400 plant species of 40 different families and is one of the major pests infesting potato crops. It causes direct damage and also spread plant viruses. The intensive use of synthetic insecticide to control aphids has led to resistant populations. Therefore, there is a need to develop biopesticides for effective control that minimizes environmental hazards. The bacteria Bacillus amyloliquefaciens is recognized as a producer of a variety of bioactive compounds. The aim here was to evaluate the aphicidal effect of B. amyloliquefaciens strains, CBMDDrag3, PGPBacCA2, and CBMDLO3, and their metabolites on the mortality and fecundity of M. persicae. Cells suspensions, heat-killed cell suspensions, cell-free supernatants, or isolated lipopeptide fractions from B. amyloliquefaciens strains were offered to aphids through artificial diets. The isolated lipopeptide fractions composed mainly of kurstakins, surfactins, iturins, and fengycins, when were administrated through diets, had no aphicidal effect against M. persicae. However, aphids fed on diets with whole cell suspensions and its cell-free supernatant of all three bacteria strains resulted in 100% mortality of adult aphids and nymphs. Specially, B. amyloliquefaciens CBMDLO3, has an effective aphicidal effect on M. persicae, used both bacterial cells and their metabolites. Moreover, heat-killed cells of B. amyloliquefaciens CBMDLO3 also had aphicidal action, although the aphid mortality was lower than on diet with living bacteria. Therefore, these results propose that B. amyloliquefaciens, could function as a novel eco-friendly biopesticide for the control of M. persicae.Fil: López-Isasmendi,Guadalupe. Universidad Nacional de Salta. Facultad de Ciencias Naturales; ArgentinaFil: Alvarez, Adriana Elisabet. Universidad Nacional de Salta. Facultad de Ciencias Naturales; ArgentinaFil: Petroselli, Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Erra Balsells, Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Audisio, Marcela Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Salta. Instituto de Investigaciones para la Industria Química. Universidad Nacional de Salta. Facultad de Ingeniería. Instituto de Investigaciones para la Industria Química; Argentin

Estabilidad fotoquímica de ácidos hidroxinitrobenzoicos y sus unidades cromofóricas: preparándonos para completar el diagrama de Jablonsky, cuando lo permita el covid-19

Los ácidos hidroxi-nitrobenzoicos (HNBA), han sido propuestos como matrices MALDI oxidantes inductoras de fragmentación dentro de la cámara de ionización, generando fragmentos de estructura predecible (reordenamiento McLafferty), no detectados o de baja intensidad en MALDI-MS/MS empleando matrices clásicas (ácido sinapínico; ácido α-cianocinámico). En particular este fenómeno se observa en el análisis de moléculas peptídicas el que se iniciaría por un Photochemical Induced Single Hydrogen Transfer (PI-SHP) intramolecular involucrando un H de la unidad peptídica (-CO-NH-C-CO-NH-) que lo tomaría el ácido HNBA electrónicamente excitado generando la especie radicalaria (-CO-N(.)-C-CO-NH- ó -CO-NH-C-CO-N(.)H-) a fragmentarse. Al realizar experimentos con diferentes isómeros de posición del ácido HNBA como matrices MALDI, se observó que mostraron diferencias significativas en cuanto a su eficiencia, por ende surge como interrogante el rol que cumple la isomería de posición en la regulación de la competencia entre procesos intramoleculares e intermoleculares de PI-SHP (preponderancia del primero o del segundo) y su consecuencia en la eficiencia como matrices MALDI oxidantes. En este orden de ideas, resulta importante conocer las propiedades fotofísicas de estos compuestos y las posibles PI-SHP intramoleculares, por ello se ha realizado un estudio de la estabilidad fotoquímica (366 nm; 254 nm) en solución (MeCN; MeOH) de seis isómeros del HNBA (3H4NBA; 2H4NBA; 2H5NBA; 3H2NBA; 5H2NBA; 2H3NBA) y de las unidades cromofóricas constituyentes de los mismos orto-, meta- y para-nitrofenoles (NP), nitrobenzoicos (NBA) e hidroxibenzoicos (HBA), así como de su desactivación fluorescente. Se observó que esta es de baja eficiencia y probablemente se realizaría por la vía no radiativa sugiriendo que la energía absorbida se liberaría como calor rápido al medio. El estudio de este aspecto forma parte del plan de trabajo, pero el inicio de la pandemia no ha permitido abordarlo, como tampoco los experimentos de tipo flash fotólisis y la medición de sus potenciales de óxido/reducción.Fil: Silva Rodriguez Oscar E.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Petroselli, Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Erra Balsells Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaXI Encuentro de Estudiantes de Óptica y Fotónica (EEOF) y del XVI Taller de Óptica y Fotónica (TOPFOT)Buenos AiresArgentinaComité Territorial de Óptica de ArgentinaUniversidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturale

Chemical Modifications of Globular Proteins Phototriggered by an Endogenous Photosensitizer

[EN] The main goal of the present work was to investigate the damages photoinduced by pterin (Ptr), an endogenous photosensitizer present in human skin under pathological conditions, on a globular protein such as ubiquitin (Ub). Particular attention has been paid on the formation of covalent adducts between Ptr and the protein that can behave as photoantigen and provoke an immune system response. Here, a multifaceted approach including UV-visible spectrophotometry, fluorescence spectroscopy, electrophoresis, size exclusion chromatography, and mass spectrometry is used to establish the Ub changes triggered by UV-A irradiation in the presence of Ptr. Under anaerobic conditions, the only reaction corresponds to the formation of a covalently bound Ptr-Ub adduct that retains the spectroscopic properties of the free photosensitizer. A more complex scheme is observed in air-equilibrated solutions with the occurrence of three different processes, that is, formation of a Ptr-Ub adduct, dimerization, and fragmentation of the protein.The present work was partially supported by Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas (CONICET-Grants PIP 112-200901-0304 and PIP 11220120100072CO), Agencia de Promocion Cientifica y Tecnologica (ANPCyT-Grants PICT-2015-1988 and PICT 2016-00130), Universidad Nacional de La Plata (UNLP-Grant X712 and X840), and Universidad de Buenos Aires (UBA-Grant 000110BA). Funding from the Programa CSIC de Cooperacion Cientifica para el Desarrollo (iCOOPLight project ref 20105CD0017) and Spanish government (PGC2018-096684-B-I00) is gratefully acknowledged. The Ultraflex II (Bruker) TOF/TOF mass spectrometer was supported by a grant from ANPCYT, PME2003 No. 125, and the ESI-MS Q Exactive, Thermo Scientific, by a grant from ANPCYT, PME2011-PPL2-0009, CEQUIBIEM, DQB, FCEN, UBA. The proteomic analysis was performed in the proteomics facility of SCSIE University of Valencia. This proteomics laboratory is a member of Proteored, PRB3 and is supported by grant PT17/0019, of the PE I+D+i 2013-2016, funded by ISCIII and ERDF. L.O.R. thanks CONICET for doctoral research fellowships. RE-B, G.P., M.L.D., and A.H.T are research members of CONICET.Reid, LO.; Dántola, ML.; Petroselli, G.; Erra-Balsells, R.; Miranda Alonso, MÁ.; Lhiaubet, VL.; Thomas, AH. (2019). Chemical Modifications of Globular Proteins Phototriggered by an Endogenous Photosensitizer. Chemical Research in Toxicology. 32(11):2250-2259. https://doi.org/10.1021/acs.chemrestox.9b00286S22502259321

Electron Transfer Initiated Reactions Photoinduced by Pterins

Interest in the photochemistry and photophysics of pterins has increased since the participation of this family of compounds in different photobiological processes has been suggested or demonstrated in recent decades. Pterins participate in relevant biological processes, such as metabolic redox reactions, and can photoinduce the oxidation of biomolecules through both electron transfer mechanisms (Type I) and singlet oxygen production (Type II). This article describes recent findings on electron transfer-initiated reactions photoinduced by the triplet excited state of pterins and connects them in the context of photosensitized processes of biological relevance.Instituto de Investigaciones Fisicoquímicas Teóricas y Aplicada

Norharmane rhenium(I) polypyridyl complexes: synthesis, structural and spectroscopic characterization

Two novel Re(I) complexes with the general formula fac-[Re(CO)3(L)(nHo)]CF33SO3, where L = 2,2’-bipyridine (bpy) or 1,10 phenanthroline (phen) and nHo (9H-pyrido[3,4-b]indole; norharmane) have been synthesized. The Re(I)–nHo complexes were characterized by structural X-ray diffraction, 1H and 13C NMR, UV-vis absorption and FT-IR spectroscopy, and by a combination of two mass spectrometry techniques, namely ESI-MS and UV-MALDI-MS. All characterizations showed that nHo is coordinated to the metal atom by the pyridine nitrogen of the molecule. X-ray structural analysis revealed that the crystal lattices for both complexes are further stabilized by a strong >N–H⋯O bond between the pyrrole NH group of the pyridoindole ligand and one oxygen atom of the trifluoromethanesulfonate counter-ion. Ground state geometry optimization by DFT calculations showed that in fluid solution the nHo ligand may rotate freely. The nature of the electronic transitions of Re(CO)3(bpy)(nHo)⁺ were established by TD-DFT calculations. The set of the most important electronic transitions present in this complex are comprised of π → π* electronic transitions centered on bpy and nHo moieties, LLCTnHo→COs, MLLCTRe(CO)3→bpy and LLCTnHo→bpy transitions. Additionally, TD-DFT calculations predict the existence of another two intense MLLCTRe(CO)3→nHo electronic transitions. Calculated UV-vis absorption spectra are in good agreement with the corresponding experimental data for the bpy-containing complex.Facultad de Ciencias ExactasInstituto de Investigaciones Fisicoquímicas Teóricas y AplicadasInstituto de Física La Plat

Identification of an intermediate for 1,8-dihydroxynaphthalene-melanin synthesis in a race-2 isolate of Fulvia fulva (syn. Cladosporium fulvum)

Fulvia fulva (syn. Cladosporium fulvum, Mycosphaerellaceae) is a dematiaceous fungus that causes tomato leaf mould. It is characterized by its biotrophic lifestyle and the synthesis of the bianthraquinone secondary metabolite, cladofulvin. The aim of the study was to characterize the dark pigment photochemically synthesized by F. fulva and to elucidate its biochemical pathway. We isolated a black pigment from in vitro cultures of the fungus. We determined the pigment to be 1,8-dihydroxynaphthalene (DHN)-melanin based on its chemical and photochemical characteristics, as well as the presence of flaviolin, when fungal reductases were inhibited by tricyclazole. Furthermore, the pks1 gene involved in pigment synthesis has a KS domain already associated with DHN-melanin. Our findings support the relevance of studying melanization in F. fulva.Centro de Investigaciones de FitopatologíaInstituto de Investigaciones Fisicoquímicas Teóricas y AplicadasInstituto de Fisiología VegetalInstituto de Botánica "Dr. Carlos Spegazzini

Identification of an intermediate for 1,8-dihydroxynaphthalene-melanin synthesis in a race-2 isolate of Fulvia fulva (syn. Cladosporium fulvum)

Fulvia fulva (syn. Cladosporium fulvum, Mycosphaerellaceae) is a dematiaceous fungus that causes tomato leaf mould. It is characterized by its biotrophic lifestyle and the synthesis of the bianthraquinone secondary metabolite, cladofulvin. The aim of the study was to characterize the dark pigment photochemically synthesized by F. fulva and to elucidate its biochemical pathway. We isolated a black pigment from in vitro cultures of the fungus. We determined the pigment to be 1,8-dihydroxynaphthalene (DHN)-melanin based on its chemical and photochemical characteristics, as well as the presence of flaviolin, when fungal reductases were inhibited by tricyclazole. Furthermore, the pks1 gene involved in pigment synthesis has a KS domain already associated with DHN-melanin. Our findings support the relevance of studying melanization in F. fulva.Fil: Medina, Rocio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales. Departamento de Ciencias Biológicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lucentini, Cesar Gustavo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales. Departamento de Ciencias Biológicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología; ArgentinaFil: Franco, Mario Emilio Ernesto. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales. Departamento de Ciencias Biológicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología; ArgentinaFil: Petroselli, Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Rosso, Janina Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Fisicoquímicas Teóricas y Aplicadas. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Investigaciones Fisicoquímicas Teóricas y Aplicadas; ArgentinaFil: Erra Balsells, Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Balatti, Pedro Alberto. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales. Departamento de Ciencias Biológicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigaciones de Fitopatología; ArgentinaFil: Saparrat, Mario Carlos Nazareno. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Fisiología Vegetal. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Instituto de Fisiología Vegetal; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Instituto de Botánica Spegazzini; Argentin