Application of Comet assay to assess the effects of white bean meal on DNA of human lymphocytes

Este estudo foi realizado para avaliar o potencial de indução de efeitos genotóxicos da farinha de feijão branco utilizando o teste do Cometa. O ensaio foi realizado com linfócitos humanos presentes no sangue imediatamente após a coleta, por incubação com farinha de feijão branco em três concentrações (3,92, 9,52 e 18,18 mg/mL) a 37 ºC por 4 h, seguida de preparação das lâminas. As amostras foram consideradas positivas (acima de 20% de dano), quando os danos observados no DNA celular foram maiores do que o controle negativo. Verificou-se que as doses testadas não mostraram potencial genotóxico. No entanto, seria prematuro fazer recomendações sobre o padrão de riscos para a saúde humana resultantes de danos ao DNA já que exposição das células ao extrato foi restrito ao período de quatro horas e não durante um ciclo celular completo. Além disso, outras informações sobre a toxicologia devem ser obtidas no futuro.This study was conducted to evaluate the potential induction of genotoxic effects of white bean flour using the Comet assay. The test was conducted with human lymphocytes present in whole blood immediately after collection, by incubation with white bean flour in three concentrations (3.92, 9.52 and 18.18 mg/mL) at 37 ºC for 4 h followed by preparation of slides. Samples were considered positive (above 20% damage) when the damage observed to cellular DNA was higher than the negative control. No genotoxic potential was found at the doses tested. However, it would be premature to suggest absence of risk to human health of DNA damage since the exposure of cells to the extract was restricted to four hours rather than a whole cell cycle. Additionally, further information on toxicology should be obtained in future studies

Application of Comet assay to assess the effects of white bean meal on DNA of human lymphocytes

This study was conducted to evaluate the potential induction of genotoxic effects of white bean flour using the Comet assay. The test was conducted with human lymphocytes present in whole blood immediately after collection, by incubation with white bean flour in three concentrations (3.92, 9.52 and 18.18 mg/ mL) at 37 °C for 4 h followed by preparation of slides. Samples were considered positive (above 20% damage) when the damage observed to cellular DNA was higher than the negative control. No genotoxic potential was found at the doses tested. However, it would be premature to suggest absence of risk to human health of DNA damage since the exposure of cells to the extract was restricted to four hours rather than a whole cell cycle. Additionally, further information on toxicology should be obtained in future studies. Uniterms: Genotoxicity. White bean flour/genotoxic effects. Comet assay/toxicological analysis of food. Food/toxicological analysis. Este estudo foi realizado para avaliar o potencial de indução de efeitos genotóxicos da farinha de feijão branco utilizando o teste do Cometa. O ensaio foi realizado com linfócitos humanos presentes no sangue imediatamente após a coleta, por incubação com farinha de feijão branco em três concentrações (3,92, 9,52 e 18,18 mg/mL) a 37 °C por 4 h, seguida de preparação das lâminas. As amostras foram consideradas positivas (acima de 20% de dano), quando os danos observados no DNA celular foram maiores do que o controle negativo. Verificou-se que as doses testadas não mostraram potencial genotóxico. No entanto, seria prematuro fazer recomendações sobre o padrão de riscos para a saúde humana resultantes de danos ao DNA já que exposição das células ao extrato foi restrito ao período de quatro horas e não durante um ciclo celular completo. Além disso, outras informações sobre a toxicologia devem ser obtidas no futuro. Unitermos: Genotoxicidade. Farinha de feijão branco/efeitos genotóxicos. Teste do Cometa/análise toxicológica de alimentos. Alimentos/análise toxicológica

Inibição de enzimas digestivas por extratos de pó comercial de Hoodia gordonii utilizado no tratamento da obesidade

Ethnopharmacological evidence supporting the inhibitory effect of appetite and weight loss Hoodia gordonii (Apocynaceae) native to Africa and sold worldwide for the treatment of obesity. However, such effects have been demonstrated only by its active ingredient, the glycoside P57. There are no studies related to the presence of compounds such as enzyme inhibitors, in commercial samples of the plant, which may participate or even be responsible for the proposed effects. The objective of this study was to test the inhibition of digestive enzymes with commercial samples of H. gordonii powder (PHG). Analysis was performed, inhibition of the enzymes α-amylase, α and β-glycosidases, lipase and trypsin in the presence and absence of a simulated gastric fluid. Inhibitions were detected (expressed in units of enzyme inhibited, UEI) only the α and β glucosidases, with differences between samples. For α-glycosidase inhibition was greater in the presence (50.5 and 29.8) in the absence (10.4 and 16.7) of gastric fluid samples for HA and HB, respectively. As for β-glycosidase inhibition was not detected (25.5 and 12.9) in the absence of gastric fluid, for both samples. The results indicate that the samples PHG are only able to inhibit the digestive enzymes α and β glycosides in satisfactory levels according to the literature, especially for the first one. The presence of this inhibitory activity may therefore explain part of the slimming effect of the PHG, attributed so far only the action of the active glycoside P57. Despite the inhibition assays have shown the same answers qualitatively for the two samples, quantitative differences are found, raising questions about the standardization of commercial extracts.Evidências etnofarmacológicas sustentam o efeito inibidor do apetite e emagrecedor da Hoodia gordonii (Apocynaceae) nativa do continente africano e comercializada no mundo todo para o tratamento da obesidade. Porém, tais efeitos foram demonstrados apenas pelo seu princípio ativo, o glicosídeo P57. Não há estudos relacionados à presença de inibidores enzimáticos em amostras comerciais da planta, que podem participar ou mesmo serem responsáveis pelos efeitos propostos. O objetivo deste trabalho foi realizar ensaios de inibição de enzimas digestivas com amostras comerciais do pó de H. gordonii (PHG). Foram realizadas análises de inibição das enzimas α-amilase, α e β-glicosidases, lipase e tripsina na presença e ausência de um fluído gástrico simulado. Foram detectadas inibições (expressas em unidades de enzima inibida, UEI) apenas das α e β glicosidases, com diferenças entre as amostras. Para α-glicosidase, a inibição foi maior na presença (50,5 e 29,8) que na ausência (10,4 e 16,7) do fluido gástrico para as amostras HA e HB, respectivamente. Já para β-glicosidase, a inibição só foi detectada (25,5 e 12,9) na ausência do fluído gástrico, para ambas as amostras. Os resultados indicam que as amostras de PHG são capazes de inibir somente as enzimas digestivas α e β-glicosidases, em níveis considerados satisfatórios segundo a literatura, especialmente para a primeira. A presença dessa atividade inibitória pode explicar, portanto, parte do efeito emagrecedor dos PHG, até então atribuído somente à ação do glicosídeo ativo P57. Apesar dos ensaios de inibição terem mostrado qualitativamente as mesmas respostas para as duas amostras, quantitativamente diferenças são encontradas, levantando questionamentos quanto à padronização dos extratos comerciais

Evidence-Based Discussion (EBD): an alternative teaching and assessment methodology in the context of remote teaching

With the advent of Emergency Remote Teaching (ERT), in 2020, in a discipline of Medical Biochemistry and Pharmacokinetics offered by a Medical School, the Evidence-Based Discussion (DBE) was conceived, in order to replace the traditional assessment methods and approach allusive topics to the COVID-19 pandemic, in light of Evidence-Based Medicine (EBM). For this purpose, groups of students should research the metabolism and pharmacology of a drug: azithromycin, chloroquine/hydroxychloroquine, dexamethasone, ivermectin or remdesivir; as well as drawing up a conclusion about the use of the drug in the treatment of COVID-19. Although the need to improve its research systematization, it is inferred that the DBE is an innovative assessment method, once, it not only reinforces the knowledge acquired in the discipline, but also approaches to clinical practice and promotes the scientific basis and critical reasoning for the evaluation of the reliability of the materials

Padronização da Extração do Inibidor Proteico de Alfa-Amilase de Feijão Branco

The Alpha-Amylase inhibitors have been indicated as auxiliariesto loss of weight and to the management of diabetes mellitus type 2through the reduction of starch absorption. This work standardized theprocess of extraction of white beans alpha-amylase inhibitor determiningthe extractor, the time of agitation and the conditions for thermal treatment.The results indicate that the methodology used the water as extracting, inthe ratio of 1:5, followed for 3 consecutives extractions under agitation for15 minutes and 70°C thermal treatment for 5 minutes as faster and moreefficient option in the extraction of inhibitor.Pesquisas indicam os inibidores de ?-amilase como auxiliares na perda de peso e no controle do diabetes mellitus tipo 2 pela redução da absorção do amido. Este trabalho padronizou o processo de extração de inibidor ?-amilase do feijão branco utilizando como parâmetros a escolha e proporção de extrator, tempo de agitação e o tratamento térmico 70 ° C. Os resultados indicam a metodologia utilizando a água como extrator, na proporção de 1:5 seguido de 3 reextrações consecutivas, sob agitação por 15 minutos e tratamento de 70 ° C por 5 minutos como a opção mais rápida e eficiente na extração de inibidor

Inibição de enzimas digestivas por extratos de pó comercial de Hoodia gordonii utilizado no tratamento da obesidade

Ethnopharmacological evidence supporting the inhibitory effect of appetite and weight loss Hoodia gordonii (Apocynaceae) native to Africa and sold worldwide for the treatment of obesity. However, such effects have been demonstrated only by its active ingredient, the glycoside P57. There are no studies related to the presence of compounds such as enzyme inhibitors, in commercial samples of the plant, which may participate or even be responsible for the proposed effects. The objective of this study was to test the inhibition of digestive enzymes with commercial samples of H. gordonii powder (PHG). Analysis was performed, inhibition of the enzymes α-amylase, α and β-glycosidases, lipase and trypsin in the presence and absence of a simulated gastric fluid. Inhibitions were detected (expressed in units of enzyme inhibited, UEI) only the α and β glucosidases, with differences between samples. For α-glycosidase inhibition was greater in the presence (50.5 and 29.8) in the absence (10.4 and 16.7) of gastric fluid samples for HA and HB, respectively. As for β-glycosidase inhibition was not detected (25.5 and 12.9) in the absence of gastric fluid, for both samples. The results indicate that the samples PHG are only able to inhibit the digestive enzymes α and β glycosides in satisfactory levels according to the literature, especially for the first one. The presence of this inhibitory activity may therefore explain part of the slimming effect of the PHG, attributed so far only the action of the active glycoside P57. Despite the inhibition assays have shown the same answers qualitatively for the two samples, quantitative differences are found, raising questions about the standardization of commercial extracts.Evidências etnofarmacológicas sustentam o efeito inibidor do apetite e emagrecedor da Hoodia gordonii (Apocynaceae) nativa do continente africano e comercializada no mundo todo para o tratamento da obesidade. Porém, tais efeitos foram demonstrados apenas pelo seu princípio ativo, o glicosídeo P57. Não há estudos relacionados à presença de inibidores enzimáticos em amostras comerciais da planta, que podem participar ou mesmo serem responsáveis pelos efeitos propostos. O objetivo deste trabalho foi realizar ensaios de inibição de enzimas digestivas com amostras comerciais do pó de H. gordonii (PHG). Foram realizadas análises de inibição das enzimas α-amilase, α e β-glicosidases, lipase e tripsina na presença e ausência de um fluído gástrico simulado. Foram detectadas inibições (expressas em unidades de enzima inibida, UEI) apenas das α e β glicosidases, com diferenças entre as amostras. Para α-glicosidase, a inibição foi maior na presença (50,5 e 29,8) que na ausência (10,4 e 16,7) do fluido gástrico para as amostras HA e HB, respectivamente. Já para β-glicosidase, a inibição só foi detectada (25,5 e 12,9) na ausência do fluído gástrico, para ambas as amostras. Os resultados indicam que as amostras de PHG são capazes de inibir somente as enzimas digestivas α e β-glicosidases, em níveis considerados satisfatórios segundo a literatura, especialmente para a primeira. A presença dessa atividade inibitória pode explicar, portanto, parte do efeito emagrecedor dos PHG, até então atribuído somente à ação do glicosídeo ativo P57. Apesar dos ensaios de inibição terem mostrado qualitativamente as mesmas respostas para as duas amostras, quantitativamente diferenças são encontradas, levantando questionamentos quanto à padronização dos extratos comerciais