Influencia de los polimorfismos de MTNR1A en el efecto crioprotector de la melatonina en dosis seminales ovinas

La refrigeración y la congelación del semen provoca una serie de efectos perjudiciales para los espermatozoides conocidos como cold-shock, que podrían ser evitados parcialmente empleando agentes crioprotectores, entre ellos, la melatonina. Esta hormona puede llevar a cabo alguno de sus efectos uniéndose a sus receptores de membrana, MT1 y MT2. El gen del receptor de melatonina 1A (MNTR1A) presenta varios polimorfismos, pero se desconoce si podrían influir en el efecto de la melatonina durante la criopreservación de dosis seminales ovinas.Así, el objetivo de este trabajo fue estudiar la influencia de los polimorfismos de MTNR1A en el efecto crioprotector de la melatonina en espermatozoides ovinos. Para ello, muestras seminales de seis moruecos adultos, previamente genotipados para el polimorfismo RsaI del gen MTNR1A (2 C/C, 2 C/T y 2 T/T), se refrigeraron y congelaron sin y con melatonina 1 mM y 1 μM. Antes y después de este proceso se evaluó la motilidad, integridad de membrana, estado de capacitación y marcadores apoptóticos de los espermatozoides.<br /

Estudio de las rutas moleculares implicadas en la acción de la melatonina sobre la calcio-calmodulina kinasa II de los espermatozoides

La melatonina es una hormona sintetizada principalmente en la glándula pineal que está implicada en la regulación de muchos procesos biológicos, entre los que se encuentra la reproducción estacional en algunos mamíferos. A nivel celular, la melatonina puede llevar a cabo sus efectos regulatorios a través de dos vías: bien por la unión a receptores específicos de membrana, denominados MT1 y MT2, o bien atravesando directamente la membrana plasmática. En el espermatozoide ovino se ha descrito que la melatonina modula la capacitación espermática (conjunto de cambios bioquímicos y biofísicos que necesita sufrir un espermatozoide para adquirir capacidad fecundante), de forma que añadida a concentraciones altas (1 M) tiene un efecto descapacitante. Dado que la enzima calcio-calmodulina proteín-kinasa II (CaMKII) también está implicada en la capacitación espermática, el objetivo principal de este trabajo fue evaluar el efecto de la melatonina, y de un agonista y un antagonista de los receptores de la misma, sobre la capacitación espermática y sobre los niveles y la activación por modificaciones postraduccionales de la CaMKII en espermatozoides ovinos. Para ello, espermatozoides ovinos seleccionados por swim-up se incubaron durante 3 horas en condiciones capacitantes (39 C, 5 % de CO2 y 100 % humedad) en medio TALP (control), en un medio con agentes elevadores del AMPc (cocktail), en medio cocktail con melatonina a una concentración 1 M, y con un agonista (8M-PDOT) o un antagonista (4P-PDOT) de los receptores de melatonina añadidos a diferentes concentraciones (1 M y 10 nM). Tras la incubación se evaluó la motilidad, viabilidad y estado de capacitación mediante tinción con clorotetraciclina y fosforilación en residuos de tirosina evaluados por western-blot. El análisis de los cambios en los niveles de CaMKII y su isoforma CaMKIIα se realizaron mediante un inmunoensayo ELISA y la identificación y cuantificación de las modificaciones post-traduccionales en CaMKII se realizó mediante western-blot. Los resultados obtenidos mostraron que la incubación con melatonina o su agonista a una concentración 1 M aumentó el porcentaje de espermatozoides no capacitados (PEn conclusión, este trabajo sugiere que la melatonina ejercería su acción descapacitante a través de la unión a sus receptores de membrana, pero no modificaría los niveles o la activación de la enzima CaMKII por medio de modificaciones post-traduccionales, al menos mediante fosforilación.<br /

Efecto de la melatonina sobre la Ca2+/Calmodulina proteín-kinasa II de los espermatozoides ovinos

La melatonina es una hormona que se sintetiza principalmente en la glándula pineal y que regula muchos procesos fisiológicos, como la reproducción estacional. A nivel celular es capaz de aumentar los niveles de calcio intracelular en células somáticas y unirse a la proteína calmodulina. Esto inhibe la formación del complejo calcio/calmodulina, que regula la actividad de la enzima calcio/calmodulina proteín-quinasa II (CaMKII). Dado que tanto el aumento de los niveles de calcio como la actividad de CaMKII están implicados en la capacitación espermática (conjunto de cambios que debe sufrir un espermatozoide para adquirir capacidad fecundante), en el presente trabajo se planteó la hipótesis de que la melatonina podría modular la capacitación espermática ovina a través de la enzima CaMKII. Así, los objetivos de este estudio fueron investigar el efecto de la melatonina sobre los niveles y distribución del calcio intracelular, identificar la presencia de la proteína CaMKII en el espermatozoide ovino y evaluar los cambios en la concentración de la misma en espermatozoides ovinos incubados en condiciones capacitantes. Para ello, espermatozoides ovinos seleccionados por swim-up se incubaron durante 3 horas en condiciones capacitantes (39 °C y 5% de CO2) en medio TALP (control), y con dos concentraciones de melatonina (100 pM y 1 µM). Tras la incubación se evaluó la motilidad, viabilidad, y estado de capacitación de las muestras. Los cambios en la concentración y distribución de calcio intracelular se evaluaron mediante citometría de flujo con las sondas Fluo-4 AM y Rhod-5N AM. Finalmente, la identificación y cuantificación de CaMKII se realizó mediante Western Blot en proteínas espermáticas extraídas tras la capacitación in vitro. Los resultados obtenidos indican que la melatonina a una concentración 1 µM es capaz de aumentar el porcentaje de espermatozoides vivos con altos niveles de calcio tras tres horas de incubación en condiciones capacitantes, sin afectar negativamente a la funcionalidad espermática. Además, la presencia de melatonina en el medio parece aumentar los niveles de CaMKII y de una de sus isoformas (CaMKIIα) en el espermatozoide de morueco. En conclusión, este trabajo sugiere que la melatonina podría regular el proceso de capacitación espermática aumentando los niveles de la enzima CaMKII, aunque las implicaciones que puede tener esto en su activación o actividad todavía no están esclarecidas

Tremor Control Devices for Essential Tremor: A Systematic Literature Review

Background: There is a growing interest in nonpharmacological approaches for essential tremor (ET), including tremor cancelation devices. However, the true efficacy of such devices in ET remains unclear. Methods: A systematic literature review was conducted using standardized criteria regarding efficacy and comfortability. Devices focused on design or experimental testing in which tremor was simulated in a robot were excluded. Results: Out of 324 articles initially identified, 12 articles were included. Orthoses using biomechanical loading and neuromodulation with electrical stimulation, and external tremor cancelation devices, were the main interventions used to suppress tremor. All devices were designed to control tremor of the upper limbs at different anatomical locations. Overall, an average tremor attenuation of 50–98% was reported (level of evidence III). Interference with voluntary movements and portability was described as the main drawback. Discussion: In conclusion, this review highlights the growing interest in emerging tremor control devices and the importance of assessing comfort without affecting voluntary movements. However, the level of evidence regarding the efficacy of these tremor control devices remains low. An integrated multidisciplinary combination approach of engineering, robotics, physiology, physiotherapy, and clinical assessment is needed to improve the quality of non-pharmacological interventions for ET

Protocolo del estudio: Demanda y práctica farmacéutica en afección bucofaríngea en España. Estudio ACTUA

Introducción y justificación: La afección bucofaríngea, y más concretamente el dolor de garganta, por su prevalencia y relación con el uso inadecuado de medicamentos tiene una alta importancia en salud, el farmacéutico contribuye a que el usuario alcance una automedicación adecuada a través de los servicios de atención farmacéutica. Sin embargo, se conoce poco en el ámbito de la farmacia comunitaria sobre los usuarios que demandan esta atención, así como las consultas e intervenciones de los farmacéuticos.Aplicabilidad de los resultados: Conocer las características de la demanda y la práctica farmacéutica en afección bucofaríngea permitirá establecer estrategias sanitarias destinadas a optimizar la asistencia sanitaria.Objetivos: Caracterizar la práctica farmacéutica en afección bucofaríngea realizada en farmacias comunitarias españolas.Material y métodos: Estudio observacional descriptivo transversal. En farmacias comunitarias voluntarias del territorio español. La población de estudio serán los usuarios que acudan a las farmacias por una afección bucofaríngea. La duración del trabajo de campo será de tres meses. Las variables contempladas en el estudio serán aquellas que caracterizan al usuario, a la consulta realizada, y a la intervención del farmacéutico. Se realizará un análisis estadístico descriptivo de los datos (univariante y multivariante por la técnica de correspondencias múltiples). Se garantizará la confidencialidad y el consentimiento informado de los participantes

Improvement of the Seminal Characteristics in Rams Using Agri-Food By-Products Rich in Phytomelatonin

The aim of this study was to evaluate the effect of a phytomelatonin-rich diet, including by-products from the food industry, on ram sperm quality and seminal plasma composition. Melatonin content in several by-products before and after in vitro ruminal and abomasal digestion was determined by HPLC-ESI-MS/MS. Finally, 20% of a mix of grape pulp with pomegranate and tomato pomaces was included in the rams’ diet, constituting the phytomelatonin-rich diet. Feeding the rams with this diet resulted in an increase in seminal plasma melatonin levels compared with the control group (commercial diet) in the third month of the study. In addition, percentages higher than those in the control group of morphologically normal viable spermatozoa with a low content of reactive oxygen species were observed from the second month onwards. However, the antioxidant effect does not seem to be exerted through the modulation of the antioxidant enzymes since the analysis of the activities of catalase, glutathione reductase and glutathione peroxidase in seminal plasma revealed no significant differences between the two experimental groups. In conclusion, this study reveals, for the first time, that a phytomelatonin-rich diet can improve seminal characteristics in ram

SORL1 polymorphisms in Mexican patients with Alzheimer\u27s disease

The present study evaluated the risk effect of 12 Single Nucleotide Polymorphisms in the SORL1 gene in the Mexican population using Late-Onset Alzheimer\u27s Disease (LOAD) and control subjects. Considering APOE as the strongest genetic risk factor for LOAD, we conducted interaction analyses between single nucleotide polymorphisms (SNPs) and the APOE genotype. METHODS: Patients were interviewed during their scheduled visits at neurologic and geriatric clinics from different institutions. The LOAD diagnosis included neurological, geriatric, and psychiatric examinations, as well as the medical history and neuroimaging. Polymorphisms in RESULTS: The A/A genotype in rs1784933 might be associated with an increased LOAD risk. Two blocks with high degree linkage disequilibrium (LD) were identified. The first block composed by the genetic variants rs668387, rs689021 and rs641120 showed a positive interaction (mainly the rs689021) with rs1784933 polymorphism. Moreover, we found a significant association between the CONCLUSION: The rs1784933 polymorphism is associated with LOAD in Mexican patients. In addition, the presence o

The Chalcolithic necropolis of Los Millares: Radiocarbon dating and an assessment of the diet and the environment from stable isotope analysis

Se presentan en este estudio los resultados de los análisis isotópicos realizados sobre una muestra de restos humanos de la necrópolis calcolítica de Los Millares. Para proceder a su discusión se ha realizado previamente su contextualización cronológica a partir de una serie de dataciones radiocarbónicas y la revisión de la cronología relativa de los sepulcros. Las dataciones muestran el uso de la necrópolis megalítica durante todo el periodo de ocupación de Los Millares, al menos desde 3100/3000 hasta 2200/2100 cal AC. Los resultados del análisis isotópico apoyan las propuestas sobre un incremento en la aridez desde el 2400/2300 cal AC. Además, en una dieta dominada por los recursos terrestres en la que las proteínas suelen proceder del consumo de herbívoros, existe una cierta variabilidad con individuos que pueden haber consumido otros recursos.The results of the isotopic analyses performed on human remains from the Chalcolithic necropolis of Los Millares are presented in this paper. These are contextualized chronologically by a series of radiocarbon dates and, a review of the graves’ relative chronology. The dates show the megalithic necropolis was in use all along the occupation period of Los Millares, at least from 3100/3000 to 2200/2100 cal BC. The isotopic analysis results support the proposals for increasing aridity from 2400/2300 cal BC onwards. Diet is mainly based on land resources, proteins being usually taken from herbivores. However, a certain variability is found among sampled individuals because some of them may have consumed others products.Este trabajo se ha realizado en el marco de los proyectos: “Dieta y movilidad en la Prehistoria Reciente de Andalucía. Un estudio de la jerarquización social a partir del registro funerario (P12-HUM-1510, Consejería de Economía, Innovación, Ciencia y Empleo de la Junta de Andalucía) y “Estrategias agropecuarias y consumo en la Edad del Bronce del sur de la península ibérica. Análisis de plantas, animales y restos humanos” (HAR2016- 80057-P, Ministerio de Economía y Competitividad)

Late gadolinium enhancement distribution patterns in non-ischemic dilated cardiomyopathy: Genotype-phenotype correlation.

AIMS Late gadolinium enhancement (LGE) is frequently found in patients with dilated cardiomyopathy (DCM), there is little information about its frequency and distribution pattern according to underlying genetic substrate. We sought to describe LGE patterns according to genotype and to analyze the risk of major ventricular arrhythmias (MVA) according to patterns. METHODS AND RESULTS Cardiac magnetic resonance findings and LGE distribution according to genetics was performed in a cohort of 600 DCM patients followed at 20 Spanish centers. After exclusion of individuals with multiple causative gene variants or with variants in infrequent DCM-causing genes, 577 patients (34% females, mean age 53.5 years, LVEF 36.9 ± 13.9%) conformed the final cohort. A causative genetic variant was identified in 219 (38%) patients and 147 (25.5%) had LGE. Significant differences were found comparing LGE patterns between genes (P < 0.001). LGE was absent or rare in patients with variants in TNNT2, RBM20 and MYH7 (0%, 5% and 20%, respectively). Patients with variants in DMD, DSP and FLNC showed predominance of LGE subepicardial pattern (50%, 41% and 18%, respectively) whereas patients with variants in TTN, BAG3, LMNA and MYBPC3 showed unspecific LGE patterns. Genetic yield differed according to LGE pattern. Patients with subepicardial, lineal midwall, transmural, right ventricular insertion points or with combination of LGE patterns showed increased risk of MVA compared with patients without LGE. CONCLUSION LGE patterns in DCM has a specific distribution according to the affected gene. Certain LGE patterns are associated with increased risk of MVA and with increased yield of genetic testing.This study has been funded by Instituto Salud Carlos III (ISCIII) through the projects ‘PI18/0004, PI19/01283, and PI20/0320’ (co-funded by the European Regional Development Fund/European Social Fund ‘A way to make Europe’/‘Investing in your future’). The Hospital Universitario Puerta de Hierro, the Hospital Universitario Vall Hebrón, the Hospital General Universitario Gregorio Marañón, and the Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca are members of the European Reference Network for Rare, Low Prevalence, and Complex Diseases of the Heart (ERN GUARD-Heart). F.d.F. receives grant support from ISCIII (CM20/00101). R.B. receives funding from the Obra Social la Caixa Foundation. M.B. receives funding from ISCIII (PI19/01283). The CNIC is supported by the ISCIII, Ministerio de Ciencia e Innovación of the Spanish Government (MCIN), and Pro CNIC Foundation.S

Impact of SARS-Cov-2 infection in patients with hypertrophic cardiomyopathy : results of an international multicentre registry

To describe the natural history of SARS-CoV-2 infection in patients with hypertrophic cardiomyopathy (HCM) compared with a control group and to identify predictors of adverse events. Three hundred and five patients [age 56.6 ± 16.9 years old, 191 (62.6%) male patients] with HCM and SARS-Cov-2 infection were enrolled. The control group consisted of 91 131 infected individuals. Endpoints were (i) SARS-CoV-2 related mortality and (ii) severe clinical course [death or intensive care unit (ICU) admission]. New onset of atrial fibrillation, ventricular arrhythmias, shock, stroke, and cardiac arrest were also recorded. Sixty-nine (22.9%) HCM patients were hospitalized for non-ICU level care, and 21 (7.0%) required ICU care. Seventeen (5.6%) died: eight (2.6%) of respiratory failure, four (1.3%) of heart failure, two (0.7%) suddenly, and three (1.0%) due to other SARS-CoV-2-related complications. Covariates associated with mortality in the multivariable were age {odds ratio (OR) per 10 year increase 2.25 [95% confidence interval (CI): 1.12-4.51], P = 0.0229}, baseline New York Heart Association class [OR per one-unit increase 4.01 (95%CI: 1.75-9.20), P = 0.0011], presence of left ventricular outflow tract obstruction [OR 5.59 (95%CI: 1.16-26.92), P = 0.0317], and left ventricular systolic impairment [OR 7.72 (95%CI: 1.20-49.79), P = 0.0316]. Controlling for age and sex and comparing HCM patients with a community-based SARS-CoV-2 cohort, the presence of HCM was associated with a borderline significant increased risk of mortality OR 1.70 (95%CI: 0.98-2.91, P = 0.0600). Over one-fourth of HCM patients infected with SARS-Cov-2 required hospitalization, including 6% in an ICU setting. Age and cardiac features related to HCM, including baseline functional class, left ventricular outflow tract obstruction, and systolic impairment, conveyed increased risk of mortality