Langerin (CD207) represents a novel interferon-stimulated gene in Langerhans cells

Interferons (IFNs) are “warning signal” cytokines released upon pathogen sensing. IFNs control the expression of interferon-stimulated genes (ISGs), which are often crucial to restrict viral infections and establish a cellular antiviral state.1,2 Langerin (CD207), a well-known surface receptor on Langerhans cells (LC), belongs to the C-type lectin receptor (CLR) family and constitutes a major pathogen binding receptor able to regulate both innate and adaptive immune responses.3,4 Importantly, this CLR was reported as an antiviral receptor, notably able to bind and internalize incoming human immunodeficiency virus (HIV) virions in Birbeck granules for degradation.5,6 However, langerin was never viewed as a contributor to the interferon-mediated antiviral immune response. We now provide evidence that langerin is an ISG showing upregulated expression upon IFN treatment in monocyte-derived and ex vivo human skin-isolated LCs

Caractérisation des étapes précoces de l'entrée du VIH-1 dans les cellules dendritiques

The Human Immunodeficiency Virus type I (HIV-I) is mostly degraded in dendritic cells as soon as it enters. Previous work in the team shows that the mechanism of autophagy contributes to viral degradation (virophagy) and promotes innate and adaptive immune responses. Since this virophagy is subsequently inhibited by the virus in dendritic cells, a better understanding of the implementation of this antiviral autophagy is essential in order to promote and above all stabilize cellular defenses. Our results show that DC-SIGN, a C-type lectin receptor (CLR) that recognizes mannosylated or fucosylated carbohydrates, may be involved in the development of this antiviral autophagy. Thus, we show that after recognition of HIV, this receptor induces autophagy and interacts rapidly with several autophagic proteins, some of which are involved in the endosomal pathways. Indeed, we show for the first time the association of the protein Atg9 with the internalized DC-SIGN receptor. The Atg9 protein is an essential factor in the initiation of the autophagic pathway regulating in particular the supply of membranes originating from the plasma membrane for the nucleation of vesicles linked to the autophagic pathway. On the other hand, after a mass spectrometric study of the internalized DC-SIGN receptor interbody, we show that an E3 ligase belonging to the TRIM family, TRIM25, is recruited during endocytosis of the receptor. This protein has been reported to be involved in the regulation of antiviral innate responses from the RIG-I pathogen recognition receptor suggesting an essential function of TRIM25 in innate immune responses. Interestingly, some members of the TRIM family have recently been shown to be essential for the induction of a form of selective autophagy, sometimes antiviral, precision autophagy. In this sense, we show that a complex is formed between the DC-SIGN, Atg9 and TRIM25 receptors, suggesting that autophagy early on engagement of the DC-SIGN receptor could be selective. All these elements constitute a first step for a better understanding of the early stages of the entry of HIV into dendritic cells with the characterization of a selective virophagy induced when a receptor of the innate immunity And which represents a particularly interesting target in order to improve certain therapeutic strategies currently being developed.Le Virus de l’Immunodéficience Humaine de type I (VIH-I) est majoritairement dégradé dans les cellules dendritiques dès son entrée. Des travaux précédemment réalisés dans l’équipe montrent que le mécanisme de l’autophagie contribue à la dégradation virale (virophagie) et promeut les réponses immunitaires innées et adaptatives. Etant donné que cette virophagie est par la suite inhibée par le virus dans les cellules dendritiques, mieux comprendre la mise en place de cette autophagie antivirale est primordial afin de pouvoir favoriser et surtout stabiliser les défenses cellulaires. Nos résultats montrent que DC-SIGN, un récepteur lectine de type C (CLR) qui reconnait des carbohydrates mannosylés ou fucosylés, pourrait être impliqué dans la mise en place de cette autophagie antivirale. Ainsi, nous montrons qu’après reconnaissance du VIH, ce récepteur induit l’autophagie et interagit rapidement avec plusieurs protéines autophagiques dont certaines impliquées dans les voies endosomales. En effet, nous montrons pour la première fois l’association de la protéine Atg9 avec le récepteur DC-SIGN internalisé. La protéine Atg9 est un facteur essentiel de l’initiation de la voie autophagique régulant notamment l’apport de membranes issues de la membrane plasmique pour la nucléation de vésicules liées à la voie autophagique. D’autre part, après une étude par spectrométrie de masse de l’intéractome du récepteur DC-SIGN internalisé, nous montrons qu’une E3 ligase faisant partie de la famille des TRIM, TRIM25, est recrutée lors de l’endocytose du récepteur. Cette protéine a été rapportée comme étant impliquée dans la régulation des réponses innées antivirales issues du récepteur de reconnaissance de pathogène (PRR) RIG-I suggérant une fonction essentielle de TRIM25 dans les réponses immunes innées. De manière intéressante, certains membres de la famille TRIM ont été montrés récemment comme étant essentiels pour l’induction d’une forme d’autophagie sélective parfois antivirale, l’autophagie de précision. Dans ce sens, nous montrons qu’un complexe est formé entre le récepteur DC-SIGN, Atg9 et TRIM25, suggérant que l’autophagie mise en place très tôt lors de l’engagement du récepteur DC-SIGN pourrait s’avérer être sélective. L’ensemble de ces éléments constitue une première étape pour une meilleure compréhension des étapes précoces de l’entrée du VIH dans les cellules dendritiques avec la caractérisation d’une virophagie sélective induite lors de l’engagement d’un récepteur de l’immunité innée et qui représente une cible particulièrement intéressante afin d’améliorer certaines stratégies thérapeutiques développées actuellement

Characterization of early events of HIV-1 entry into dendritic cells

Le Virus de l’Immunodéficience Humaine de type I (VIH-I) est majoritairement dégradé dans les cellules dendritiques dès son entrée. Des travaux précédemment réalisés dans l’équipe montrent que le mécanisme de l’autophagie contribue à la dégradation virale (virophagie) et promeut les réponses immunitaires innées et adaptatives. Etant donné que cette virophagie est par la suite inhibée par le virus dans les cellules dendritiques, mieux comprendre la mise en place de cette autophagie antivirale est primordial afin de pouvoir favoriser et surtout stabiliser les défenses cellulaires. Nos résultats montrent que DC-SIGN, un récepteur lectine de type C (CLR) qui reconnait des carbohydrates mannosylés ou fucosylés, pourrait être impliqué dans la mise en place de cette autophagie antivirale. Ainsi, nous montrons qu’après reconnaissance du VIH, ce récepteur induit l’autophagie et interagit rapidement avec plusieurs protéines autophagiques dont certaines impliquées dans les voies endosomales. En effet, nous montrons pour la première fois l’association de la protéine Atg9 avec le récepteur DC-SIGN internalisé. La protéine Atg9 est un facteur essentiel de l’initiation de la voie autophagique régulant notamment l’apport de membranes issues de la membrane plasmique pour la nucléation de vésicules liées à la voie autophagique. D’autre part, après une étude par spectrométrie de masse de l’intéractome du récepteur DC-SIGN internalisé, nous montrons qu’une E3 ligase faisant partie de la famille des TRIM, TRIM25, est recrutée lors de l’endocytose du récepteur. Cette protéine a été rapportée comme étant impliquée dans la régulation des réponses innées antivirales issues du récepteur de reconnaissance de pathogène (PRR) RIG-I suggérant une fonction essentielle de TRIM25 dans les réponses immunes innées. De manière intéressante, certains membres de la famille TRIM ont été montrés récemment comme étant essentiels pour l’induction d’une forme d’autophagie sélective parfois antivirale, l’autophagie de précision. Dans ce sens, nous montrons qu’un complexe est formé entre le récepteur DC-SIGN, Atg9 et TRIM25, suggérant que l’autophagie mise en place très tôt lors de l’engagement du récepteur DC-SIGN pourrait s’avérer être sélective. L’ensemble de ces éléments constitue une première étape pour une meilleure compréhension des étapes précoces de l’entrée du VIH dans les cellules dendritiques avec la caractérisation d’une virophagie sélective induite lors de l’engagement d’un récepteur de l’immunité innée et qui représente une cible particulièrement intéressante afin d’améliorer certaines stratégies thérapeutiques développées actuellement.The Human Immunodeficiency Virus type I (HIV-I) is mostly degraded in dendritic cells as soon as it enters. Previous work in the team shows that the mechanism of autophagy contributes to viral degradation (virophagy) and promotes innate and adaptive immune responses. Since this virophagy is subsequently inhibited by the virus in dendritic cells, a better understanding of the implementation of this antiviral autophagy is essential in order to promote and above all stabilize cellular defenses. Our results show that DC-SIGN, a C-type lectin receptor (CLR) that recognizes mannosylated or fucosylated carbohydrates, may be involved in the development of this antiviral autophagy. Thus, we show that after recognition of HIV, this receptor induces autophagy and interacts rapidly with several autophagic proteins, some of which are involved in the endosomal pathways. Indeed, we show for the first time the association of the protein Atg9 with the internalized DC-SIGN receptor. The Atg9 protein is an essential factor in the initiation of the autophagic pathway regulating in particular the supply of membranes originating from the plasma membrane for the nucleation of vesicles linked to the autophagic pathway. On the other hand, after a mass spectrometric study of the internalized DC-SIGN receptor interbody, we show that an E3 ligase belonging to the TRIM family, TRIM25, is recruited during endocytosis of the receptor. This protein has been reported to be involved in the regulation of antiviral innate responses from the RIG-I pathogen recognition receptor suggesting an essential function of TRIM25 in innate immune responses. Interestingly, some members of the TRIM family have recently been shown to be essential for the induction of a form of selective autophagy, sometimes antiviral, precision autophagy. In this sense, we show that a complex is formed between the DC-SIGN, Atg9 and TRIM25 receptors, suggesting that autophagy early on engagement of the DC-SIGN receptor could be selective. All these elements constitute a first step for a better understanding of the early stages of the entry of HIV into dendritic cells with the characterization of a selective virophagy induced when a receptor of the innate immunity And which represents a particularly interesting target in order to improve certain therapeutic strategies currently being developed

Temperature and seston quantity and quality effects on field reproduction of farmed oysters,

The proliferation of the voluntarily-introduced cupped oyster, Crassostrea gigas, has attained the proportions of species invasion in many intertidal habitats in Europe, presumably resulting from successful reproduction of farmed individuals. It is thus imperative to better understand the reproductive characteristics of farmed oysters, since they are directly under human control. We quantified the dry tissue mass (DTM), gametosomatic index (GSI), and reproductive cycle of farmed oysters at two sites in Bourgneuf Bay, France, in relation to environmental parameters using continuously-recording probes in 2005 and 2006. The GSI was developed for this study, based on the actual area occupied by gametes, rather than the area of the gonad previously used for quantitative histological estimation of reproductive effort. The two sites, intermediate – (IT) and high-turbidity (HT), differed markedly in the amount and quality of particulate suspended matter, and also in fine-scale temperature variations. Oysters at both sites presented two spawning periods in both 2005 and 2006; Bourgneuf Bay is thus near the northernmost European limit for a 2-spawning cycle in Crassostrea gigas. Gonad maturation was initiated when spring water temperature reached 8–10 °C, and gamete atresia occurred when water temperatures transiently dipped to 15–18 °C. Spawns, which occurred above 18 °C, were timed by fine-scale water temperature variations. Particulate organic matter quality peaks, coinciding with gonad maturation, were related to DTM variations before spawning periods, for the IT oysters in both years, and for the HT oysters in 2006. The reproductive effort (GSI) of oysters was similar at both sites; however, the fates of the gametes differed according to site. At the first spawning, the IT oyster gamete emissions were +1 month delayed, as were peak water temperatures greater than 18 °C, and more pronounced, compared to the HT site. Although the second spawning showed high proportions of atretic oocytes at both sites in both years, the IT oysters evacuated twice as many gametes as the HT oysters in 2005. The IT conditions therefore appear more suited to Crassostrea gigas gamete evacuation than the HT conditions

Development of pyrene-based fluorescent ether lipid as inhibitor of SK3 ion channels

International audienceWe report the synthesis of three bioactive pyrene-based fluorescent analogues of Ohmline which is the most efficient and selective inhibitor of SK3 ion channel. The interaction of these Ohmline-pyrene (OP1-3) with liposomes of different composition reveals that only OP2 and OP3 are readily integrated into liposomes. Fluorescence measurements indicate that, depending on their concentration, OP2 and OP3 exist either as monomer or as a mixture of monomer and excimers within the liposome bilayer. Among the three Ohmline Pyrene compounds (OP1-3) only OP2 is able to reduce SK3 currents and is the first efficient fluorescent modulator of SK3 channel as revealed by patch clamp measurements (- 71.3 ± 13.3% at 10 mM) and by its inhibition of SK3-dependent cancer cell migration at (32.5% ± 4.8% at 1 mM). We also report the first fluorescence study on living breast cancer cells (MDA-MB-231) showing that OP2 is rapidly integrated in bio-membranes followed by cell internalization.Nous décrivons la synthèse d’analogues de l’Ohmline comportant au niveau de la partie lipidique une sonde fluorescente de type pyrène. Nous montrons que l’un d’entre eux (le composé OP2) est capable de réduire les courants potassiques SK3 de 71% et de réduire la migration cellulaire SK3-dépendante de 32%. Il s’agit, à notre connaissance, du premier inhibiteur des canaux ioniques SK3 de nature amphiphile et fluorescent