Comments on Ekino et al. Cloning and Characterization of a Unique Cytotoxic Protein Parasporin-5 Produced by Bacillus thuringiensis A1100 Strain. Toxins 2014, 6, 1882–1895

Ekino et al. [1] reported the cloning and characterization of a novel cytotoxic protein (Parasporin-5) produced by Bacillus thuringiensis strain A1100. The 33.8-kDa inactive precursor protein exhibited strong cytocidal activity upon proteinase K activation against several mammalian (cancer) cell lines, and showed slight homology with Cry and aerolysin-type -pore-forming toxins. Most research concerning parasporins has mainly been performed in order to demonstrate their use as potential therapeutic agents against cancer, but they are lacking additional research supporting the absence of activity against invertebrates; especially, taking into account that these toxins are not expected to evolve to kill cancer cells. Therefore, it is reasonable to think that they should have another (unknown) target in nature. Despite the fact that in this work, the authors demonstrated the toxic activity of this protein against several types of cancer cells, further complementary studies against a minimum number of insects would be of great interest in order to determine the potential insecticidal activity of this protein and understand its natural role. For example, Palma and collaborators [2] reported the molecular and insecticidal characterization of a novel Cry-related protein closely related to parasporins 2 and 4, (Cry41Aa1 and Cry41Ab1). This protein did not show any toxic activity against five species of Lepidoptera but, after more extensive testing, this protein was found to demonstrate a specific toxic activity against the green-peach aphid Myzus persicae. Nowadays, parasporin proteins are commonly known in the literature to be produced by “non-insecticidal” B. thuringiensis strains and because they exhibit significant and preferential cytocidal activity against cancer cells of various origins [3]. However, the absence of insecticidal activity deserves to be more deeply investigated since a single B. thuringiensis toxin has shown to have a narrow host range while, in general, they are active against a wide range of invertebrates [4,5]. Therefore, the determination of the activity against a minimum number of insects (preferably from different taxonomic orders) is highly desirable and might change the non-insecticidal concept we currently have about parasporins proteins produced by non-insecticidal B. thuringiensis strains.Fil: Palma, Leopoldo. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentin

Aislamiento de una cepa agresiva de Nomuraea rileyi desde larvas muertas de Anticarsia gemmatalis en Esperanza, Argentina

The biological control of agricultural pests by using differententomopathogenic microorganisms has been significantlyincreased in the last years, due to the need of reducing theamount of chemical insecticides in agricultural ecosystems.Fil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: del Valle, Eleodoro Eduardo. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentin

Actividad antagónica de una cepa de Bacillus sp. aislada en Córdoba, Argentina contra Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid

The antifungal activity of Bacillus spp.strains has been already reported against a different number of phytopathogenicfungi3. Some species belonging to thisgenus (i.e. B. subtilis, B. pumilus and B. licheniformis) are considered GRAS (generally regarding as safe) microorganisms and exhibit potential to enhance plant growth by the production of an amplenumber of beneficial substances1,portraying these species as an environmentally friendly alternative tochemical fungicides. Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid is a wide range soil-bornephytopathogenic fungus causing charcoal rot to several significant plant crops in Argentina (i.e. soybean, common bean,peanuts and corn)5,6 and is also capableto affect more than five hundred plant species worldwide4. Its ability to infect these hostplants is commonly correlated to the production of viable sclerotia, anon-sporic resistance structure constituted by a mass of densely packed hyphae, in the field5. In this work, we report theisolation of a Bacillus sp. strain 11.1 obtained from soil samples from Córdoba Province,Argentina2exhibiting a strongantagonistic activity against M. phaseolina. In order to analyse thepotential antagonistic effect of strain 11.1, both microorganisms were grown on dual culture platescontained potato dextrose agar (PDA) and tryptone soya agar (TSA) (1:1 v/v) and incubated for 48-72hours at 28ºC (Figure 1). An important and irreversible inhibition of the fungal growth was showed (Figure1A). In addition, the fungal mycelium located at the edge of the inhibited region was analysed bymicroscopic examination. The most evident antagonistic effect over the fungus was depicted by the lack ofblack pigmentation and the reduced size of formed sclerotiain comparison with the control (Figure 1B and C).Fil: Felipe, Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Yaryura, Pablo Marcelo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentin

Influência da consociação com diferentes trevos, da rega e da variedade na produção e qualidade do azevém italiano.

Havendo alguma evidência de que as leguminosas podem beneficiar as gramíneas pela transferência de azoto fixado seria de todo o interesse utilizar consociações em vez de azevém em estreme fertilizado com azoto. Como conclusões gerais, podemos referir que a utilização do trevo squarroso, em consociação com o azevém anual, se mostrou vantajosa, comparativamente aos outros trevos, pois mostrou tendência para apresentar valores mais elevados de produção total de matéria seca, proteína bruta e matéria seca digestível. Porém, as máximas produções foram obtidas com o azevém em estreme fertilizado com 100 kg/ha de azoto à sementeira e após cada corte. No ensaio comparativo entre diferentes dotações de rega e sequeiro verificou-se que mesmo a dotação mais baixa (25% da CC) permitiu duplicar o número de cortes. Em face dos resultados desta actividade, pode concluir-se que a rega pode contribuir, de forma muito significativa, para aumentar a produção e melhorar a qualidade da forragem produzida. A existência de regadio na região, ainda que com pouca água, é fundamental para regularizar a curva de produção de erva nas explorações pecuárias pois além de maiores produções, em quantidade e qualidade, o número de cortes também pode duplicar. A decisão de regar ou não vai depender da viabilidade económica. Relativamente à utilização da variedade bianual em vez da anual, parece não haver vantagem em condições de regadio pois, além de se ter revelado menos eficiente a utilizar a água, cresce pouco no Verão devido às elevadas temperaturas não se justificando, por isso, continuar a regar. Sem humidade no solo, a sua persistência é afectada pelo que não se torna viável continuar a explorá-la no ano seguinte. Assim, uma vez que a água é um recurso cada vez mais escasso e caro, parece que a melhor escolha é o azevém anual com o tratamento de rega mais baixo. No entanto, caso não exista água disponível para regar, a variedade bianual parece mais vantajosa

Draft genome sequence of Photorhabdus luminescens strain DSPV002N isolated from Santa Fe, Argentina

Here, we report the draft genome sequence of Photorhabdus luminescens strain DSPV002N, which consists of 177 contig sequences accounting for 5,518,143 bp, with a G+C content of 42.3% and 4,701 predicted protein-coding genes (CDSs). From these, 27 CDSs exhibited significant similarity with insecticidal toxin proteins from Photorhabdus luminescens subsp. laumondii TT01.This research was supported by the Spanish Ministry of Economy and Competitiveness (grant AGL2015-70584-C2-2-R)

Bacillus thuringiensis se hace mayor, más de medio siglo como alternativa a los insecticidas de síntesis

Las pérdidas económicas causadas en la agricultura por las plagas de insectos han servido de inspiración para el desarrollo de distintos métodosdiseñados para combatirlos. Con los primeros insecticidas químicos de síntesis se lograba una reducción sustancial de los daños causados por estosinsectos perjudiciales, pero con la consecuente contaminación de los agroecosistemas. Surgió entonces la necesidad de contar con métodos eficien-tes para el control de plagas agrícolas y que, a su vez, éstos fueran más amigables con el medio ambiente. Bacillus thuringiensis (Bt) es una bacteriagram positiva y esporulante, capaz de producir, durante la fase de esporulación y de crecimiento vegetativo, una serie de proteínas con actividadtóxica contra insectos de importancia agronómica. Esta bacteria y sus toxinas han formado parte de la materia activa de formulados bioinsecticidasdesde el año 1928, comercializándose por primera vez en el año 1938 en Francia. Más tarde, hacia la década de los 90, los genes de estas toxinas fueronintroducidos en plantas transgénicas, otorgándoles resistencia a los insectos plaga y revolucionando así a la agricultura moderna. De esta manera, Btse ha convertido en el insecticida ecológico por excelencia demostrando su eficacia e inocuidad por ya más de 60 años.Fil: Areco, Vanessa Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Peralta, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentin

Aislamiento de cepas de Bacillus spp. inhibitorias de patógenos bacterianos causantes de mastitis bovina

La mastitis bovina es una enfermedad infecciosa que afecta a las vacas lecheras provocando una reducción en la producción de leche. Para prevenir la enfermedad se utilizan actualmente diferentes procedimientos, como la desinfección de los pezones después del ordeño, el mantenimiento e higiene adecuados del equipo de ordeño, terapia con antibióticos y el sacrificio de animales con infecciones crónicas.Trabajo publicado en Cagliada, Maria del Pilar Lilia y Galosi, Cecilia Mónica (comps.). I Congreso de Microbiología Veterinaria. Libro de resúmenes. La Plata: Facultad de Ciencias Veterinarias, 2021.Facultad de Ciencias Veterinaria

Análisis metagenómico 16s comparativo del compost de dos lecherías de la provincia de Córdoba

Poster y resumenEl compostaje permite convertir residuos orgánicos a inorgánicos asimilables para las plantas por la acción de un consorcio microbiológico de organismos mesófilos y termófilos. La identificación de sus componentes es importante para la caracterización de nuevas bacterias y enzimas termoestables que podrían aplicarse en la industria para la degradación de la biomasa. El objetivo de este trabajo es comparar la comunidad microbiana de las camas de compost (CC) de dos lecherías de la provincia de Córdoba mediante secuenciación metagenómica 16s e inferir diferencias según cada sistema de compostaje. Las dos lecherías (MB y AT) se muestrearon en julio de 2019. MB tenía 30 meses desde su inicio, piso de concreto en el área donde la vaca para a alimentarse, y una carga (CA) de 14,5 vacas/m2 sobre área de la cama. La cama de compost MB se inició sobre el suelo natural, siempre ha sido laboreada con cincel en profundidad dos veces por día y sin adición de sustrato. La cama AT tenía 20 meses desde su inicio, no cuenta con piso de concreto donde la vaca se alimenta (establo 100% cama) y la carga era de 13,75 vacas/ m2. AT inició con 40 cm de cáscara de maní, y luego se continúo adicionando para mantenimiento con laboreo siempre a cincel más rotocultivador a razón de dos veces por día. Se recogieron dos muestras por lechería a 30 cm de profundidad, se liofilizaron y homogeneizaron con un desintegrador universal de alta velocidad (modelo FW100). El ADN total se purificó con el kit PureLink Microbiome (ThermoFisher) y se secuenció en INDEAR (Rosario, Santa Fe). Las lecturas crudas Illumina se filtraron eliminando duplicaciones y lecturas quiméricas. El análisis metagenómico se realizó utilizando el pipeline QIIME (http://qiime.org/). Las curvas de rarefacción obtenidas en los dos tratamientos alcanzaron sus asíntotas, por tanto, las unidades taxonómicas operativas (OTUs) observadas son representativas del conjunto de la diversidad bacteriana. La biodiversidad filogenética (PD) es levemente mayor en MB, aunque el índice de diversidad de Shannon indicó un 97% de similitud entre los tratamientos. Los phyla predominantes en ambos tratamientos fueron Actinobateria, Proteobateria y Bacteroidetes. Se observaron diferencias en los phyla Planctomicetes, (AT = 0,2% y MB = 7%), y Firmicutes, (AT entre 11 y 18% y MB 24%). Algunos géneros que podrían jugar un papel importante en la degradación de la biomasa son Clostridum, Symbiobacterium, Thermobacter, Geobacillus, Bacillus, Ureibacillus, Theropolyspora, Thermobispora, Thermospora. De éstos, en las muestras analizadas se identificaron Clostridium (aproximadamente 7% en AT y 1% en MB) y Bacillus que sólo se identificó en AT con una frecuencia de 1,3%. Nuestros resultados indican que hay diferencias entre los tratamientos. Si bien AT llevó un menor tiempo de compostaje se identificó una mayor frecuencia de géneros de interés y que posiblemente este tratamiento, sea más eficiente en la degradación de materia orgánica.Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola (IMYZA)Fil: Marozzi, Antonela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente (INIBIOMA); Argentina. Universidad Nacional del Comahue. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente (INIBIOMA); ArgentinaFil: Monge, Juan Leandro. Universidad Nacional de Villa María; ArgentinaFil: Sauka, Diego Herman. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Peralta, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Universidad Nacional de Villa María; ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); Argentin

Insecticidal activity of microencapsulated Vip3Ag4 protein in Bacillus megaterium

Bacillus thuringiensis (Bt) produces, during its vegetative growth, some insecticidal proteins that are secreted and diluted into the culture medium. These proteins are commonly known as vegetative insecticidal proteins (Vips), and include binary Vpb/Vpa proteins (formerly known as Vip1/Vip2) with coleopteran activity; Vip (formerly Vip3) with activity against lepidopterans; and Vpb4 proteins (formerly Vip4), also with coleopteran activity. Vip proteins are highly toxic to different species of lepidopteran pests; however, the difficulty in producing them in a concentrated form has not allowed their development as formulated biopesticides, and they are relegated to only being produced in transgenic crops. In this work, we demonstrated that the gene encoding the Vip protein Vip3Ag4 could be successfully expressed in an asporogenic strain of Bacillus megaterium using (D)-xylose as a low-cost inductor. Under certain conditions (37 °C and induction with 0.5% w/v xylose), active Vip3Ag4 protein was primarily produced in soluble form, remaining encapsulated within the cell wall of B. megaterium. After treatment with lugol (1% for 4 h), induced cells were completely killed (fixed) but maintained the functional Vip3Ag4 protein, which resulted in above 95% mortality against first-instar larvae of Chrysodeixis chalcites, Helicoverpa armigera, Spodoptera exigua, S. frugiperda, S. littoralis and Trichoplusia ni. The fact that the recombinant Vip3Ag4 protein was successfully produced in a soluble and an active form in this bacterium (with a low-cost inductor) suggests that B. megaterium is one of the hosts of choice for the production of sprayable formulations in “killed-microbial pesticides”, based on Vip3 proteins from Bt