In vitro activity of essential oil of Origanum vulgare L. in clinical isolates from Aspergillus spp

Aspergillus fumigatus, A. flavus e A. niger são os mais importantes agentes etiológicos da aspergilose, relevante micose aviária, com tratamento ineficaz e altas taxas de mortalidade. Em vista da importância da aspergilose, da necessidade de prospectar novos fármacos e do potencial terapêutico do óleo essencial de Origanum vulgare L. (OEO), o orégano, objetivou-se avaliar a sensibilidade in vitro de isolados clínicos de Aspergillus spp. em relação ao OEO. O óleo foi obtido por hidrodestilação em Clevenger, e a análise química realizada por cromatografia de massa (GC/MS). Observaram-se 15 diferentes compostos ativos, sendo 4-terpineol, hidrato de sabinene e timol os majoritários. Nos testes de microdiluição em caldo (Reference..., 2008), todos os isolados (n= 23) foram sensíveis ao OEO: A. fumigatus teve CIM entre 28,125mg/mL (0,1875%) e 450mg/mL (3,0%), A. flavus entre 112,5mg/mL (0,75%) e 450mg/mL, e A. niger 112,5mg/mL. CFM variou de 112,5mg/mL a 450mg/mL nos isolados de A. fumigatus, de 225mg/mL (1,5%) a 450mg/mL em A. flavus, e foi de 450mg/mL em A. niger. CIM e CFM foram idênticos em 6/14 isolados, o que demonstra que o óleo com a mesma concentração pode ter capacidade fungistática e fungicida. CIM 90 correspondeu à CIM máxima. Os resultados demonstram a atividade anti-Aspergillus do OEO, com CIM 90 de 450mg/mL (3%).Aspergillus fumigatus, A. flavus and A. niger are the most important etiological agents of aspergillosis, a relevant avian mycosis, with innefective treatment and high mortality rates. Due the importance of aspergillosis, the necessity of prospection of new drugs and the therapeutic potential of the essential oil of Origanum vulgare L. (OEO), popularly known as oregano, aims to evaluate the in vitro sensitivity of Aspergillus spp. opposing to OEO. The oil was obtained by hydrodistillation in Clevenger, and the chemical analysis performed by mass chromatography (GC/MS). 15 different active compounds were observed, being 4-terpineol (18.4%), sabinene hydrate (15.6%) and thymol (13.6%), the majority components. In the in vitro susceptibility test, all strains showed sensitivity to OEO, MIC of Aspergillus fumigatus ranged from 28,125mg/mL (0,1875%) to 450mg/mL (3,0%), A. flavus 112,5mg/mL (0,75%) to 450mg/mL, and A. niger 112,5mg/mL. MFC ranged from 112,5mg/mL to 450mg/mL in the A. fumigatus isolates, 225mg/mL (1,5%) to 450mg/mL in A. flavus, and 450mg/mL for A. niger. The MIC and FMC values were identical in 6/14 of the isolated subjects, demonstrating that the oil with the same concentration can have fungistatic and fungicidal capacity. The results demonstrates anti-Aspergillus activities of OEO with CIM90 de 450mg/mL (3%)

Análises químicas e citotóxicas de três variedades de própolis brasileiras (própolis verde, própolis jataí e própolis marrom) e sua atividade in vitro anti-Sporothrix brasiliensis

In this study, we described the antifungal activity of three Brazilian propolis extracts: brown, green and from jataí bees against Sporothrix brasiliensis. The extracts were obtained from ethanolic extraction and their chemical composition was determined by high-performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry. The cellular toxicity was measured in MDBK (Madin-Darby Bovine Kidney) cells and quantified by the MTT assay (3- (4,5 dimethylthiazol-2yl -2,5-diphenyl-2H bromine tetrazolato). For antifungal activity, the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) were determined by broth microdilution. The results showed that cell toxicity was not observed at lower concentrations (0.097 to 0.39μg/ml) for all extracts in comparison to cell control. Among the chemical compounds identified, caffeic acid, p-coumaric acid, chlorogenic acid, ferulic acid and rutin were quantified. In antifungal activity, green and jataí did not exhibit activity against the isolates (MIC and MFC greater than 0.78mg/ml). However, all isolates of S. brasiliensis were sensitive to brown propolis (MIC of 0.09 to 0.78mg/ml), including the standard strain (P<0.001). Among the Brazilian propolis studied, the brown propolis showed activity against the S. brasiliensis isolates and more studies should be undertaken in order to evaluate its promising use in the treatment of sporotrichosis.Neste estudo, descreveu-se a atividade antifúngica de três extratos de própolis brasileiras: marrom, verde e de abelhas jataí (Tetragonisca angustula), contra Sporothrix brasiliensis. Os extratos foram obtidos de extração etanólica, e a sua composição química foi determinada por cromatografia líquida de alta eficiência, acoplada à espectrometria de massa. A toxicidade celular foi medida em células MDBK (Madin-Darby Bovine Kidney), avaliada por observação microscópica e quantificada pelo ensaio MTT (3- (4,5-dimetiltiazol-2-ilo -2,5-difenil-2H bromo tetrazolato). Para a atividade antifúngica, determinou-se a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração fungicida mínima (CFM) por meio de microdiluição em caldo. Os resultados mostraram que a toxicidade celular não foi observada em concentrações menores (0,097 a 0,39μg/ml). Entre os compostos químicos identificados, foram quantificados o ácido cafeico, ácido p-cumárico, ácido clorogênico, ácido ferúlico e a rutina. Na atividade antifúngica, as própolis verde e jataí não apresentaram atividade contra os isolados (CIM e CFM maior que 0,78mg/ml), porém todos os isolados de S. brasiliensis foram sensíveis à própolis marrom (CIM de 0,09 a 0,78mg/ml), incluindo a cepa padrão (P<0,001). Entre as própolis brasileiras estudadas, a marrom mostrou atividade contra S. brasiliensis, e mais estudos devem ser realizados para avaliar seu uso promissor no tratamento da esporotricose

Actividad in vitro de extractos de las variedades Arbequina y Picual de Olea europaea L. en contra Candida sp., Microsporum gypseum y Sporothrix brasiliensis

A oliveira (Olea europaea L.) é uma planta frutífera, nativa das regiões tropicais e temperadas e uma das mais antigas cultivadas. O uso de extratos vegetais de conhecida atividade antimicrobiana podem adquirir significado nos tratamentos terapêuticos. O objetivo do trabalho é avaliar a atividade antifúngica dos resíduos da indústria de Oliveiras (bagaço) na variedade Picual e de partes vegetativas de cultivares de oliveira (Olea europaea L.) das variedades Arbequina e Picual, frente à Candida spp., Microsporum gypseum e Sporothrix brasiliensis. A metodologia para os testes in vitro foi referenciada pelo documento M27-A3 preconizado pelo CLSI para as leveduras e M38-A2 para fungos filamentosos, adaptados para uso de fitoterápicos. A atividade antifúngica dos extratos hidroalcoólicos de folhas de Olea europaea L. se sobressaíram no resultado final, apresentando ação inibitória nas concentrações de 50 mg/ml, 100 mg/ml e 200 mg/ml, seguido do extrato aquoso de decocção nas mesmas concentrações. Os extratos hidroalcoólicos do bagaço da variedade Picual e das folhas das variedades Picual e Arbequina apresentaram atividade fungistática promissora frente aos isolados de Microsporum gypseum, apresentando CIM que variaram de 100 mg/ml a 200 mg/ml. Os resultados demonstram potencial desses extratos no tratamento da dermatofitose, porém mais estudos devem ser realizados frente as demais espécies de dermatófitos para comprovação de sua efetividade, além de testes de citotoxidade. Os extratos de infusão e hidroalcoólicos das folhas da variedade Picual apresentaram maior ação inibitória frente aos isolados de Candida spp. e Sporothrix brasiliensis apresentando parâmetros importantes para apontar os produtos como uma alternativa terapêutica.The olive tree (Olea europaea L.) is a fruit-bearing plant, native to tropical and temperate regions and one of the oldest cultivated. The use of plant extracts with known antimicrobial activity can acquire meaning in therapeutic treatments. The objective of this work is to evaluate the antifungal activity of residues from the olive industry (bagasse) in the Picual variety and of vegetative parts of olive cultivars (Olea europaea L.) of the Arbequina and Picual varieties, against Candida spp., Microsporum gypseum and Sporothrix brasiliensis. The methodology for the in vitro tests was referenced by the document M27-A3 recommended by the CLSI for yeasts and M38-A2 for filamentous fungi, adapted for the use of phytotherapics. The antifungal activity of the hydroalcoholic extracts of leaves of Olea europaea L. stood out in the final result, presenting inhibitory action at concentrations of 50 mg/ml, 100 mg/ml and 200 mg/ml, followed by the aqueous decoction extract at the same concentrations. The hydroalcoholic extracts of the bagasse of the Picual variety and the leaves of the Picual and Arbequina varieties showed promising fungistatic activity against the isolates of Microsporum gypseum, with CIM ranging from 100 mg/ml to 200 mg/ml. The results demonstrate the potential of these extracts in the treatment of dermatophytosis, but more studies should be carried out against other species of dermatophytes to prove their effectiveness, in addition to cytotoxicity tests. The infusion and hydroalcoholic extracts from the leaves of the Picual variety showed greater inhibitory action against Candida spp. and Sporothrix brasiliensis presenting important parameters to point out the products as a therapeutic alternative.El olivo (Olea europaea L.) es una planta frutal, originaria de las regiones tropicales y templadas y una de las más antiguas cultivadas. El uso de extractos de plantas con conocida actividad antimicrobiana puede adquirir significado en tratamientos terapéuticos. El objetivo de este trabajo es evaluar la actividad antifúngica de residuos de la industria del olivo (bagazo) en la variedad Picual y de partes vegetativas de cultivares de olivo (Olea europaea L.) de las variedades Arbequina y Picual, frente a Candida spp., Microsporum gypseum y Sporothrix brasiliensis. La metodología para los ensayos in vitro estuvo referenciada por el documento M27-A3 recomendado por el CLSI para levaduras y M38-A2 para hongos filamentosos, adaptados para el uso de fitoterapéuticos. En el resultado final se destacó la actividad antifúngica de los extractos hidroalcohólicos de hojas de Olea europaea L., presentando acción inhibitoria a las concentraciones de 50 mg/ml, 100 mg/ml y 200 mg/ml, seguido del extracto acuoso en decocción al mismas concentraciones. Los extractos hidroalcohólicos del bagazo de la variedad Picual y de las hojas de las variedades Picual y Arbequina mostraron una prometedora actividad fungistática frente a los aislados de Microsporum gypseum, con CIM que oscilaron entre 100 mg/ml y 200 mg/ml. Los resultados demuestran el potencial de estos extractos en el tratamento de la dermatofitosis, pero se deben realizar más estudios contra otras especies de dermatofitos para comprobar su eficacia, además de pruebas de citotoxicidad. La infusión y los extractos hidroalcohólicos de las hojas de la variedad Picual mostraron mayor acción inhibidora frente a Candida spp. y Sporothrix brasiliensis presentando parâmetros importantes para señalar los productos como alternativa terapéutica

Dados epidemiológicos da esporotricose felina na região Sul Do Rio Grande do Sul: uma abordagem em saúde pública / Epidemiological data on feline sporotrichosis in Southern Rio Grande Do Sul: a public health approach

A esporotricose é a micose subcutânea mais importante do Brasil, causada por fungos do Complexo Sporothrix schenckii, e frequentemente acomete humanos, cães e, principalmente, gatos. Atualmente o felino atua como o maior disseminador da doença, tanto para outros animais quanto para os seres humanos, devido a características peculiares da espécie. Assim, torna-se importante monitorar a epidemiologia da esporotricose felina, principalmente em regiões endêmicas, como é o caso da região sul do Rio Grande do Sul (RS). O objetivo deste estudo foi atualizar os dados epidemiológicos da esporotricose felina. Foi conduzido este estudo através de questionamentos aplicados aos tutores de felinos com esporotricose. Os resultados demonstraram que os casos de esporotricose felina são predominantemente representados por adultos, machos, não castrados, com livre acesso à rua, semidomiciliados, com hábito de se envolver em brigas, com contato com humanos, cães e gatos. Além disso, este trabalho evidencia de maneira inédita e alarmante os fatos de que a maioria dos felinos acometidos por esporotricose já estão sob a guarda de um tutor quando contraem a doença; que a maioria dos felinos acometidos recebe tratamento antifúngico sem orientação veterinária, e quando ocorre à orientação os pacientes já estão com seis a 12 meses do início do desenvolvimento das lesões. Conclui-se que o perfil dos animais acometidos não sofreu alterações relevantes, com isso enfatiza-se a necessidade de conscientização da população sobre essa enfermidade, principalmente no que diz respeito às medidas de controle e prevenção e sobre o manejo adequado dos animais doentes e a guarda responsável. 

Avaliação do potencial genotóxico do óleo essencial de Origanum vulgare L. em ratos Wistar por meio do teste de micronúcleos

In this work the genotoxic potential of oregano essential oil was tested using the micronucleus test in bone marrow of Wistar rats (Rattus norvegicus). Groups of 5 male and 5 female rats were treated with the essential oil orally, in acute treatment, in three doses: 2000, 1000 and 500 mg.kg-1 respectively, a negative control using the vehicle of administration, Tween 80, using a positive control cyclophosphamide  and a positive control using the majority compounds found in the oil tested. Cytotoxicity was assessed by the ratio of polychromatic erythrocytes and normochromatic erythrocytes (PCE/NCE) and the frequency of micronucleated erythrocytes. The results revealed by the ratio of PCE/NCE, the essential oil of oregano and positive control compounds majority caused a slight toxicity in the bone marrow in Wistar rats. There was a statistically significant increase (Kruskal-Wallis test p &gt; 0.01) frequency of micronuclei in polychromatic erythrocytes in 3 doses of essential oil of oregano, but increased the frequency of the positive control PCEMN with the majority compounds thus inducing genotoxicity in erythrocytes of rats. Based on the results is possible to suggest that through this cytogenetic test the essential oil of oregano used in this experiment, does not have genotoxic activity at the doses used.No presente trabalho o potencial genotóxico do óleo essencial do orégano foi testado por meio do teste de micronúcleos em medula óssea de ratos Wistar (Rattus norvergicus). Grupos de 5 ratos machos e 5 fêmeas foram tratados com o óleo essencial, por via oral, em tratamento agudo, em três doses: 2000, 1000 e 500 mg.kg-1 respectivamente, um controle negativo utilizando o veículo da administração do óleo, Tween 80, um controle positivo utilizando ciclofosfamida e um controle positivo utilizando os compostos majoritários encontrados no óleo testado. A citotoxicidade foi avaliada pela relação entre eritrócitos policromáticos e eritrócitos normocromáticos (EPC/ENC) e a frequência de eritrócitos micronucleados. Os resultados revelaram através da proporção de EPC/ENC, que o óleo essencial do orégano e o controle positivo com os compostos majoritários causaram uma leve toxicidade na medula óssea de ratos Wistar. Não houve um aumento estatisticamente significativo (Kruskal-Wallis p &gt; 0,01) de frequência de micronúcleos em eritrócitos policromáticos nas três doses do óleo essencial do orégano, mas aumentou a frequência de EPCMN do controle positivo com os compostos majoritários induzindo assim genotoxicidade nos eritrócitos dos ratos. Com base nos resultados é possível sugerir que através deste teste citogenético o óleo essencial do orégano utilizado neste experimento, não apresenta atividade genotóxica nas doses utilizadas

Evaluation of the in vitro and in vivo anti-Aspergillus activities of Origanum vulgaris essential oil in poultry

O Origannum vulgare L. (orégano) é uma erva com potencial terapêutico, havendo, entre seus extratos, maior atividade detectada no óleo essencial (OEO). Dentre os constituintes estudados neste extrato estão monoterpenos responsáveis por atividades farmacológicas, incluindo ação antibiótica sobre diversos organismos, entre os quais, Aspergillus spp, os mais importantes fungos em medicina veterinária. A aspergilose é a micose de maior morbimortalidade em aves, e a principal doença respiratória nesses animais. A espécie mais envolvida em casos clínicos é o A. fumigatus, devido principalmente à sua ampla capacidade de disseminação ambiental, ao reduzido tamanho de seus propágulos e à produção de metabólitos secundários. O tratamento da micose é considerado pouco eficiente, devido, entre outros fatores, ao número limitado de antifúngicos, à alta toxicidade destes fármacos, e à resistência por parte do Aspergillus spp. Em vista desta realidade o presente estudo objetivou avaliar o potencial terapêutico do OEO no tratamento e prevenção da aspergilose crônica experimental por A. fumigatus em frangos (Gallus gallus). Para tanto realizou-se, primeiramente testes de sensibilidade in vitro de Aspergillus spp. frente ao OEO; de toxicidade do óleo e desenvolvimento experimental de aspergilose em frangos. Os testes de sensibilidade in vitro foram ensaiados com A. fumigatus, A. flavus e A. niger, iniciando com OEO na concentração 900mg/mL (6%) passando por dez diluições seriadas com base log2. Foram realizados testes de toxicidade aguda sistêmica (24h de exposição) e toxicidade subcrônica sistêmica (30 dias de exposição) com OEO nas concentrações 225mg/mL (1,5%), 450mg/mL (3,0%) e 675mg/mL (4,5%). A infecção experimental foi realizada em três etapas, utilizando para tanto diferentes concentrações, volumes e números de inoculações. E tanto para tratamento quanto para profilaxia da aspergilose utilizou-se grupo tratado com OEO (O), com o antifúngico padrão itraconazol (I), com ambos os produtos associados (I+O), e grupo sem tratamento (C). A partir da análise química do óleo foram observados 15 diferentes compostos ativos, sendo 4-terpineol (18.4%), hidrato de sabinene (15,6%) e timol (13,6%), os componentes majoritários. No teste de sensibilidade in vitro o óleo essencial apresentou tanto atividade fungicida quanto fungistática frente a Aspergillus spp., com CIM variando entre 28,125mg/mL (0,1875%) e 450mg/mL (3,0%) e CFM entre 112,5mg/mL (0,75%) e 450mg/mL (3,0%). E CIM 50 de 112,5 mg/mL (0,75%) e CIM 90 de 450mg/mL (3,0%). Observouse que em todas as concentrações testadas, o óleo essencial de O. vulgare não causou nenhuma alteração clínica nem anatomopatológica. Para reproduzir aspergilose experimental crônica A. fumigatus em frangos de 15 dias definiu-se que deve-se utilizar concentração de 12x108 UFC/mL em três inoculações seriadas, com intervalos de 24h. O primeiro dia de infecção foi considerado o dia três. Na avaliação do uso d OEO para tratamento e profilaxia da aspergilose, I+O apresentou melhores resultados, com menos sinais clínicos, anatomopatológicos, microscópicos e menor contagem de Unidades Formadoras de Colônia/g/órgão. I e O apresentaram resultados, de forma geral, inferiores à I+O, porém superiores à C, não sendo possível avaliar qual grupo obteve maior eficácia no tratamento e/ou profilaxia da micose.Origannum vulgare L. (oregano) is a herb with therapeutic properties. In its extract, higher activity is detected on the essential oil (OEO). Among the extract components are monoterpenes with pharmacological properties, e.g. antibiotic action over several microorganisms, including Aspergillus spp., which are fungi of great importance in veterinary medicine. Avian aspergillosis is a mycosis causing the highest morbidmorbidity in captive birds. It is also the main respiratory disease observed on this group. A. fumigatus is the pathogen more commonly detected in clinical cases, mainly due to its high capacity of being environmentally disseminated and producing secondary metabolites, as well as due to its reduced propagule size. The mycosis treatment is inefficient mainly due to the limited availability of antifungal compounds, the high toxicity found on these compounds and the resistance of Aspergillus species. Thus, the aim of this work was to evaluate the therapeutic potential of OEO in both the treatment and prevention of experimental chronic aspergillosis, caused by A. fumigatus in poultry (Gallus gallus). Initial experiments were carried out to test the in vitro OEO-sensitivity of Aspergillus spp., oil toxicity, and the experimental progression of disease in poultry. In vitro sensitivity testes were carried out with A. fumigatus, A. flavus and A. niger, starting with a concentration of 900mg/mL (6%) OEO, going through ten serial dilutions (log2 scale). Systemic acute toxicity (24h of exposure) and systemic subchronic toxicity (30h of exposure) tests were carried out, with OEO concentrations of 225mg/mL (1.5%), 450mg/mL (3.0%) and 675mg/mL (4.5%). The experimental infection was accomplished in three stages, with diverse inoculation concentrations, volumes and frequencies being tested. Both in aspergillosis treatment and prevention, groups tested were either treated with OEO (O), with the standard anti-fungal itraconazol (I), with both products combined (I+O), or with none of them (C). Fifteen different active compounds were observed in the chemical analysis of the oil, being 4- terpineol (18.4%), sabinene hydrate (15.6%) and thymol (13.6%) the major components found. At the in vitro sensitivity test, the essential oil displayed both fungicide and fungistatic effect towards Aspergillus spp., with MIC varying between 28.125mg/mL (0.1875%) and 450mg/mL (3%) and MFC varying between 112.5mg/mL (0.75%) and 450mg/mL (3%). In all concentrations tested, the essential oil from O. vulgare did not cause any clinical or anatomopathologic alteration. Experimental reproduction of chronic A. fumigatus aspergillosis in 15 day-old poultry was achieved by using an inoculum concentration of 12x108 Colonies Forming Units/mL (CFU) in three serial inoculations at 24h intervals, being day three considered the first day of infection. The use of OEO in aspergillosis treatment and prevention was best observed in I+O, resulting in less clinical, anatomopathologic and microscopic signs, as well as a smaller count of CFU/g/organ. Overall, I and O were less effective than I+O, but more effective than C. Nevertheless, it was not possible to evaluate which group increased the mycosis treatment and/or prevention efficacy

Evaluation of the in vitro and in vivo anti-Aspergillus activities of Origanum vulgaris essential oil in poultry

O Origannum vulgare L. (orégano) é uma erva com potencial terapêutico, havendo, entre seus extratos, maior atividade detectada no óleo essencial (OEO). Dentre os constituintes estudados neste extrato estão monoterpenos responsáveis por atividades farmacológicas, incluindo ação antibiótica sobre diversos organismos, entre os quais, Aspergillus spp, os mais importantes fungos em medicina veterinária. A aspergilose é a micose de maior morbimortalidade em aves, e a principal doença respiratória nesses animais. A espécie mais envolvida em casos clínicos é o A. fumigatus, devido principalmente à sua ampla capacidade de disseminação ambiental, ao reduzido tamanho de seus propágulos e à produção de metabólitos secundários. O tratamento da micose é considerado pouco eficiente, devido, entre outros fatores, ao número limitado de antifúngicos, à alta toxicidade destes fármacos, e à resistência por parte do Aspergillus spp. Em vista desta realidade o presente estudo objetivou avaliar o potencial terapêutico do OEO no tratamento e prevenção da aspergilose crônica experimental por A. fumigatus em frangos (Gallus gallus). Para tanto realizou-se, primeiramente testes de sensibilidade in vitro de Aspergillus spp. frente ao OEO; de toxicidade do óleo e desenvolvimento experimental de aspergilose em frangos. Os testes de sensibilidade in vitro foram ensaiados com A. fumigatus, A. flavus e A. niger, iniciando com OEO na concentração 900mg/mL (6%) passando por dez diluições seriadas com base log2. Foram realizados testes de toxicidade aguda sistêmica (24h de exposição) e toxicidade subcrônica sistêmica (30 dias de exposição) com OEO nas concentrações 225mg/mL (1,5%), 450mg/mL (3,0%) e 675mg/mL (4,5%). A infecção experimental foi realizada em três etapas, utilizando para tanto diferentes concentrações, volumes e números de inoculações. E tanto para tratamento quanto para profilaxia da aspergilose utilizou-se grupo tratado com OEO (O), com o antifúngico padrão itraconazol (I), com ambos os produtos associados (I+O), e grupo sem tratamento (C). A partir da análise química do óleo foram observados 15 diferentes compostos ativos, sendo 4-terpineol (18.4%), hidrato de sabinene (15,6%) e timol (13,6%), os componentes majoritários. No teste de sensibilidade in vitro o óleo essencial apresentou tanto atividade fungicida quanto fungistática frente a Aspergillus spp., com CIM variando entre 28,125mg/mL (0,1875%) e 450mg/mL (3,0%) e CFM entre 112,5mg/mL (0,75%) e 450mg/mL (3,0%). E CIM 50 de 112,5 mg/mL (0,75%) e CIM 90 de 450mg/mL (3,0%). Observouse que em todas as concentrações testadas, o óleo essencial de O. vulgare não causou nenhuma alteração clínica nem anatomopatológica. Para reproduzir aspergilose experimental crônica A. fumigatus em frangos de 15 dias definiu-se que deve-se utilizar concentração de 12x108 UFC/mL em três inoculações seriadas, com intervalos de 24h. O primeiro dia de infecção foi considerado o dia três. Na avaliação do uso d OEO para tratamento e profilaxia da aspergilose, I+O apresentou melhores resultados, com menos sinais clínicos, anatomopatológicos, microscópicos e menor contagem de Unidades Formadoras de Colônia/g/órgão. I e O apresentaram resultados, de forma geral, inferiores à I+O, porém superiores à C, não sendo possível avaliar qual grupo obteve maior eficácia no tratamento e/ou profilaxia da micose.Origannum vulgare L. (oregano) is a herb with therapeutic properties. In its extract, higher activity is detected on the essential oil (OEO). Among the extract components are monoterpenes with pharmacological properties, e.g. antibiotic action over several microorganisms, including Aspergillus spp., which are fungi of great importance in veterinary medicine. Avian aspergillosis is a mycosis causing the highest morbidmorbidity in captive birds. It is also the main respiratory disease observed on this group. A. fumigatus is the pathogen more commonly detected in clinical cases, mainly due to its high capacity of being environmentally disseminated and producing secondary metabolites, as well as due to its reduced propagule size. The mycosis treatment is inefficient mainly due to the limited availability of antifungal compounds, the high toxicity found on these compounds and the resistance of Aspergillus species. Thus, the aim of this work was to evaluate the therapeutic potential of OEO in both the treatment and prevention of experimental chronic aspergillosis, caused by A. fumigatus in poultry (Gallus gallus). Initial experiments were carried out to test the in vitro OEO-sensitivity of Aspergillus spp., oil toxicity, and the experimental progression of disease in poultry. In vitro sensitivity testes were carried out with A. fumigatus, A. flavus and A. niger, starting with a concentration of 900mg/mL (6%) OEO, going through ten serial dilutions (log2 scale). Systemic acute toxicity (24h of exposure) and systemic subchronic toxicity (30h of exposure) tests were carried out, with OEO concentrations of 225mg/mL (1.5%), 450mg/mL (3.0%) and 675mg/mL (4.5%). The experimental infection was accomplished in three stages, with diverse inoculation concentrations, volumes and frequencies being tested. Both in aspergillosis treatment and prevention, groups tested were either treated with OEO (O), with the standard anti-fungal itraconazol (I), with both products combined (I+O), or with none of them (C). Fifteen different active compounds were observed in the chemical analysis of the oil, being 4- terpineol (18.4%), sabinene hydrate (15.6%) and thymol (13.6%) the major components found. At the in vitro sensitivity test, the essential oil displayed both fungicide and fungistatic effect towards Aspergillus spp., with MIC varying between 28.125mg/mL (0.1875%) and 450mg/mL (3%) and MFC varying between 112.5mg/mL (0.75%) and 450mg/mL (3%). In all concentrations tested, the essential oil from O. vulgare did not cause any clinical or anatomopathologic alteration. Experimental reproduction of chronic A. fumigatus aspergillosis in 15 day-old poultry was achieved by using an inoculum concentration of 12x108 Colonies Forming Units/mL (CFU) in three serial inoculations at 24h intervals, being day three considered the first day of infection. The use of OEO in aspergillosis treatment and prevention was best observed in I+O, resulting in less clinical, anatomopathologic and microscopic signs, as well as a smaller count of CFU/g/organ. Overall, I and O were less effective than I+O, but more effective than C. Nevertheless, it was not possible to evaluate which group increased the mycosis treatment and/or prevention efficacy

Bumblefoot s (pododermatitis) study in Magellanic Penguins in rehabilitation center

Penguins are seabirds that spends about 75% of their life on the sea, and when they are found weak, this birds are sent to rehabilitation centers. Although, their extensive adaptations to sealife can become limiting issues to their life in captive, occurring, often, bumblefoot, or pododermatitis, cases: a foot disease that can evolve to septicemia and death. The Centro de Recuperação de Animais Marinhos (CRAM Marine Animals Recovery Center) is the place that, in Brazil, recieve more penguins to rahabilitation. Given the CRAM s importance in the national matter in penguin rehabilitation, the research objective was to evaluate the bumlefoot epidemiology in the birds kept captive in CRAM, trying to minimize the injuries that accompany the syndrome during rehabilitation period. Were observed 129 penguins in CRAM, where the syndrome incidence were 75%, presenting, the abrasive surface as main predisposing factor for development. The research presented the bumblefoot usually as a bilateral disease and with a progressive course. Every foot pads where qualified according the injury level to clinic evaluation, showing, by creating a method of biometric measurement of edema between each lesion score. The fungal microorganisms were related to the penguin s foot pad s transitory microbiota, being more isolated the C. albicans e Rhodotorula spp.The bacteria were related as transitory and permanent s microbiotas compounds, as well the pododermatitis epidemiology, being the more isolated genres the Staphylocossus and Corybacterium. The antibiotic that inhibited most the bacterial development against all strain tested was cefalosporina, followed by enrofloxacina, estreptomicina and penicillin. Was possible through this study highlight the syndrome s importance about penguin rehabilitation, and understand its epidemiology, enabling the implementation of precise forms of management, prophylaxis and treatment.Pinguins são aves que dispensam cerca de 75% das vidas no mar, e quando encontrados debilitados são encaminhados a centros de. Porém, suas amplas adaptações à vida marinha atuam como fatores limitantes em cativeiro, sendo freqüentes os casos de bumblefoot, ou pododermatite, afecção podal que pode evoluir para septicemia e óbito. O Centro de Recuperação de Animais Marinhos (CRAM) é o local no Brasil que mais recebe mais pinguins para reabilitação. Em vista da importância do CRAM no cenário Nacional no que tange a reabilitação de pinguins, o estudo objetivou avaliar a epidemiologia do bumlefoot nessas aves mantidas em cativeiro no Centro, a fim de minimizar os prejuízos que acompanham a síndrome durante o período de recuperação. Foram acompanhados 129 pinguins no CRAM, onde a incidência da síndrome foi de 75%, apresentando-se, o piso abrasivo como o principal fator predisponente ao seu desenvolvimento. O estudo demonstrou o bumblefoot como doença geralmente bilateral e de curso progressivo. Todos os coxins plantares foram classificados de acordo com o grau da lesão à avaliação clínica, demonstrando-se através da criação de método de biometria a mensuração de edema entre cada escore de lesão. Os microorganismos fúngicos foram relacionados à microbiota transitória do coxim plantar de pinguins, sendo mais isolados a C. albicans e Rhodotorula spp., As bactérias foram relacionadas como componentes das microbiotas transitória e permanente, bem como com a epidemiologia da pododermatite, sendo os gêneros mais isolados o Staphylococcus e o Corynebacterium. O antibiótico que melhor inibiu o crescimento bacteriano frente a todas as cepas testadas foi a cefalosporina, seguida de enrofloxacina, estreptomicina e penicilina. Foi possível através deste estudo salientar a importância da síndrome no que tange a reabilitação de pinguins, e entender sua epidemiologia, o que permite aplicar formas precisas de manejo, profilaxia e tratamento