Alteração da expressão gênica e das respostas fisiológicas de macrófagos peritoneais de camundongos pelo canova

Orientadora : Dorly de Freitas BucchiCo-orientador: Marco Aurélio KriegerTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 2006Inclui bibliografia e anexosÁrea de concentração: Biologia celular e molecularCanova (CA) é um medicamento derivado das tinturas de: Aconitum, Bryonia, Thuya, Lachesis e Arsenicum diluídos em água destilada e menos de 1% de álcool. Preparado a partir de técnicas homeopáticas, não apresenta toxicidade nem efeitos colaterais. CA tem sido indicado a pacientes onde o sistema imunitário está debilitado, e vem apresentando bons resultados na clínica. Experimentos anteriores em nosso laboratório comprovaram que macrófagos tratados com CA apresentam-se ativados. Portanto, com esse trabalho pretendemos elucidar algumas modificações celulares ocorridas durante o tratamento com CA. Foram utilizados dois tipos de tratamento: camundongos tratados (in vivo) e macrófagos peritoneais de camundongos tratados com CA (in vitro). Os macrófagos foram coletados e processados para experimentos de detecção da atividade enzimática, assim como seus produtos (microscopia eletrônica de transmissão – MET, leitura de absorbância e marcação com laranja de acridina), detecção de CD74 (Ii) através de citometria de fluxo e MET, produção de citocinas através de citometria de fluxo e expressão gênica, através do isolamento de RNA e sua hibridização em Gene Chips®. Os macrófagos tratados com CA apresentaram aumento da atividade da NADH oxidase e da óxido nítrico sintase induzível (iNOS), aumentando conseqüentemente a produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e óxido nítrico (NO) respectivamente. Observou-se o aumento da quantidade de vesículas ácidas e a diminuição da expressão do CD74 (Ii). Foram observadas diminuições na produção das interleucinas 2 (IL-2) e 4 (IL-4). Genes diferencialmente expressos (DEGs) foram observados nas células de camundongos tratados com CA. Esses genes estão principalmente relacionados com: processos de transcrição/tradução, estrutura/ dinâmica celular, resposta imunitária, citoproteção, processos enzimáticos e receptores/ligantes. A partir dessas análises podemos concluir que o CA provoca reações celulares que envolvem desde ativação da produção de determinadas moléculas até alterações no perfil de expressão de genes relacionados com a ativação de macrófagos.Canova (CA) is a medication composed of Aconitum, Bryonia, Thuya, Lachesis and Arsenicum in distilled water containing less than 1% ethanol. It is produced with homeopathic techniques and is neither toxic nor presents collateral effects. CA is being used by patients where the immune system is depressed, presenting good clinical results. Previous studies demonstrated that CA activates macrophages. Therefore with this work we try to elucidate some cellular modifications triggered by CA. Two treatment types were performed: mice treated (in vivo) and mice macrophages treated with CA (in vitro). Peritoneal cells were collected and processed to enzymatic activity detection and release of its products (transmission electron microscopy – MET, absorbance reading, and acridine orange staining), CD74 (Ii) expression by flow citometry and MET, cytokine production by flow cytometry and gene expression, by RNA isolation and its hybridization into Gene Chips®. Macrophages triggered with CA increased NAD(P)H oxidase activity as well as that of inducible nitric oxide syntase (iNOS), consequently producing reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) respectively. We observed an increase in acid vesicles and a decrease in CD74 (Ii) expression. We also found a decrease in interleukin 2 (IL-2) and 4 (IL-4) production. Differently expressed genes (DEGs) were observed in cells from the treated group. These genes are mainly involved in transcription/translation, cell structure and dynamics, immune response, cytoprotection, enzymatic process and receptors/ligands. From these analyses we can conclude that CA triggers cellular reactions that involve activation of specific molecules production and alterations in gene expression profile related with macrophages activation

Deteçao de produtos reativos intermediários de oxigenio em macrófagos tratados com o medicamento homeopático método Canova®

Orientador: Dorly de Freitas BuchiMonografia(Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias BiológicasResumo : O organismo humano é constantemente ameaçado pela invasão de vários tipos de microrganismos. Para combater essas infecções foi desenvolvido um sistema imune dedicado especificamente a eliminar qualquer invasor. Macrófagos são células do sistema imune que possuem várias funções, incluindo a fagocitose através da qual um invasor é ingerido, morto e digerido. Depois de englobados, a maioria dos microrganismos é morta rapidamente utilizando moléculas tóxicas, algumas derivadas de oxigénio e outras não. Para isso o oxigénio molecular é reduzido a anion superóxido (O2'), via NAD(P)H oxidase. O O2' pode ser convertido a peróxido de hidrogénio (H2O2) ou, antes disso, se combinar com óxido nítrico formando nitrato. Experimentos anteriores em nosso laboratório comprovaram que macrófagos tratados com o medicamento homeopático Método Canova® apresentam-se ativados. Visando detectar a atividade da enzima NAD(P)H oxidase através de marcações eletrondensas, foi realizado experimento in vitro, onde macrófagos peritoneais de camundongos foram cultivados durante 48 horas. No grupo tratado foram adicionados 10% de Método Canova® após duas horas de cultivo em estufa à 37°C 5% CO2 e após 24 horas mais 1%. Seguiu-se então 0 protocolo para NAD(P)H oxidase. Após a incubação as células foram processadas para microscopia eletrônica de transmissão, ultramicrotomadas e observadas sem contrastação no Microscópio Eletrônico de Transmissão Jeol 1200 EXII do Centro de Microscopia Eletrônica da UFPR. A mensuração da produção de H2O2 baseia-se na oxidação dependente de peroxidase do vermelho de fenol pela H2O2. Os animais utilizados para esses ensaios foram tratados in vivo durante sete dias, com doses subcutâneas de 0,2 ml de cada substância testada. A produção do reativo intermediário de oxigénio por macrófagos tratados com o Método Canova® foi determinada segundo o método descrito por PICK & MIZEL (1981). A leitura da produção foi feita em leitor de ELISA utilizando filtro com comprimento de onda de 620 nm. Os resultados foram analisados estatisticamente através da análise de variância (ANOVA: fator duplo sem repetição) e do teste de Tukey. As células tratadas mostraram reação eletrondensa positiva mais intensa para a enzima NAD(P)H oxidase quando comparadas com as do grupo controle. No grupo controle da enzima não foi observado marcação, confirmando a especificidade dessa. Os macrófagos tratados com o medicamento homeopático Método Canova® não sofreram alterações estatisticamente significativas na produção de H2O2 nos tempo analisados, na ausência de moléculas patógenas

Efeitos de diferentes inclusões de óleo de soja em rações para frangos de corte

Resumo: Os processos de digestão e absorção dos nutrientes da dieta são fatores determinantes dos índices de desempenho zootécnico dos animais. Em dietas de frango de corte, óleos e gorduras são a principal escolha em formulações que necessitam de elevada densidade energética, pois são ricos em energia possibilitando assim atender o potencial genético das aves e consequentemente alcançar o melhor desempenho zootécnico. Visando estudar esses aspectos foi conduzido um experimento para verificar o impacto zootécnico e o metabolismo lipídico de frangos de corte alimentados com dietas contendo diferentes inclusões de óleo de soja e criados de 1 a 19 dias de idade. Foram alojados 1600 frangos de corte, machos, linhagem Cobb, distribuídos em quatro tratamentos. O delineamento utilizado foi inteiramente ao acaso sendo cada tratamento composto por dezesseis repetições de vinte e cinco aves cada. Os tratamentos foram divididos em quatro níveis de inclusão de óleo: controle sem óleo, com 1,7; 3,4 e 5,1% de inclusão de óleo na ração. Os resultados possibilitam concluir que o consumo de dietas com inclusão de óleo influenciaram de forma quadrática o consumo de ração aos 6, 13 e 19 dias de idade e o ganho de peso aos 13 e 19 dias de idade. A maior inclusão do óleo de soja nas formulações proporcionou redução linear nos valores de colesterol total e triglicerídeos. Não foi observada diferença significativa nos valores de HDL. Pode-se concluir que a inclusão de óleo de soja na dieta de frangos de corte melhora ganho de peso e consumo de ração para aves na fase inicial de criação. O aumento da inclusão do óleo de soja às dietas reduz os níveis de lipídios séricos em frangos de corte aos 16 dias de idade. A conversão alimentar não foi influenciada pela dieta (P>0,05)

DELIRIUM E TEMPO DE PERMANÊNCIA EM UNIDADE DE TERAPIA INTENSIVA

Objetivo: analisar a associação entre delirium e tempo de permanência na Unidade de Terapia Intensiva. Método: estudo de coorte prospectivo conduzido na terapia intensiva de um hospital universitário de São Paulo, Brasil, entre outubro e dezembro de 2017. Participaram todos os pacientes acima de 18 anos. As variáveis independentes foram os dados clínicos, demográficos e o tempo de permanência. A variável dependente foi o delirium, medido pelo instrumento Confusion Assessment Method (ICU). Na análise dos dados, foi realizada a estatística descritiva, correlação de Spearman, teste V Cramer e o modelo de regressão logística para o teste de associação. Resultados: o delirium foi identificado em 48,5% dos pacientes graves e correlacionado com número de doses de medicamento e tempo de permanência. A condição de saída apresentou diferença significativa entre pacientes com e sem delirium. Conclusão: o tempo de permanência aumentou em quase 10,0% a chance de delirium na Unidade de Terapia Intensiva.Descritores: Enfermagem. Unidades de Terapia Intensiva. Cuidados Críticos. Delirium. Tempo de Internação. Avaliação em Enfermagem

MINI-CUTTINGS ROOTING OF Sequoia sempervirens AT DIFFERENT IBA CONCENTRATIONS AND CLONES

Sequoia is a species that provides large volumes of wood, is resistant to decomposition and has seedling production by mini-cutting as a viable alternative. The aim of this work was to evaluate the rooting of mini-cuttings of different clones of Sequoia sempervirens and subsequent use of different concentrations of IBA in clones with low adventitious rooting. Mini-cuttings of different clones were used, from clonal mini-garden. In the experiment with the growth regulator, different concentrations of IBA (from 0 mg L-1 to 3000 mg L-1) were used. The material was placed to be rooted in a mini-tunnels and evaluate at 90 days. All experiments were installed in a completely randomized design, with a subsequent evaluation of survival (%), mini-cuttings with calluses (%), mini-cuttings rooted (%) and number of roots (only in the experiment with different concentrations of IBA). In the first experiment, the survival of mini-cuttings was high (close to 95%) and rooting showed great variation among the clones (22.8 to 100%). In the second experiment, using clones that previously presented rooting less than 50%, submitted to IBA application, high survival (88.1 to 99.4%) was observed. The clones presented different responses among themselves, but with improve in the rooting using growth regulator

Efeitos da Legislação Ambiental na Proteção da Área de Proteção Ambiental do Guariroba, Mato Grosso do Sul

This paper discusses the application of environmental legislation in an Environmental Protection Area in the Guariroba Basin, Campo Grande, Mato Grosso do Sul, which accounts for 50% of water used in urban water supply in the city. The methodology of the research included a review of the bibliography related to public policies adopted in the area of Environmental Preservation and local analyses, assessing the validity and the effectiveness of enforcement in this area of environmental protection, considering legal, social and environmental points of view.The results indicate that environmental legislation is not being enforced and that there is a failure of public power, which does not monitor compliance with the standards that should govern this type of conservation unit, which suffers from erosion, silting of water resources, and continuous substitution of native vegetation by exotic species, such as pasture and eucalyptus, which threatens the region's biodiversity and the water resources of the area.O presente trabalho discute a aplicação da legislação ambiental em uma Área de Proteção Ambiental (APA), na Bacia do Guariroba, Campo Grande, Mato Grosso do Sul, responsável por 50% da água utilizada no abastecimento urbano da cidade. Este estudo foi desenvolvido por meio de levantamento bibliográfico relacionado às políticas públicas adotadas na APA e de análises feitas in loco, avaliando a validade e eficácia da aplicação da legislação nesta área de proteção ambiental, através dos pontos de vista jurídico, social e ambiental. Os resultados indicam que a legislação ambiental não está sendo aplicada e que ocorre uma omissão do poder público, que não fiscaliza o cumprimento das normas que deveriam reger esse tipo de unidade de conservação, que sofre com processos de erosão, assoreamentos, além da substituição contínua da vegetação nativa por espécies exóticas, tais como braquiária e eucalipto, o que ameaça a biodiversidade da região e os recursos hídricos da área

ABORDAGEM DA IMPORTÂNCIA DA BIODIVERSIDADE NO CONTEXTO ESCOLAR

Biodiversidade é definida como a variedade de seres vivos e ambientes, onde a realização de vários processos ecológicos dependem dos seres vivos e de suas relações. As árvores urbanas têm um aspecto ecológico bastante relevante para a fauna, pois garantem abrigo e diversificação de alimento. A manutenção da biodiversidade é imprescindível para a estabilidade dos processos ecológicos, onde para conservar e respeitar, é preciso conhecer. Para isso, através de ações pedagógicas pautadas na Educação Ambiental e partindo do elemento vegetal como foco norteador, pretende-se contribuir com a construção da consciência ambiental mais sólida de alunos e educadores de escolas públicas de São Gabriel (RS). O projeto iniciou em 2017, contemplando crianças de uma escola de educação infantil e de duas escolas municipais do ensino fundamental. Em 2019, as ações estão sendo desenvolvidas na EMEF Marechal Deodoro, contemplando alunos do segundo ao sexto ano, totalizando aproximadamente 80 crianças. Em cada escola, as ações são realizadas durante um ano (dois semestres letivos). Através de palestras educativas utilizando o recurso Datashow e de atividades pedagógicas complementares, como realização de gincana ambiental, montagem de herbário e germinação de sementes, é que se pretende atingir os objetivos preestabelecidos. Para fins de avaliação do conhecimento prévio dos alunos sobre as temáticas escolhidas, foi aplicado um questionário no início das atividades, a ser reaplicado no final das ações. A análise dos resultados do questionário apontou maior déficit de conhecimento na área de Ecologia, onde 56% dos alunos não possuem conhecimento básico sobre polinização, e 54%, não sabem o que é dispersão. O mesmo déficit foi constatado nos alunos da EMEF José Lima, trabalhada em 2018, portanto, com o andamento das atividades ao longo do ano, constatou-se uma evolução no conhecimento dos alunos, que mostraram resultados mais positivos na reaplicação do questionário

Biological and physicochemical stability of ceftazidime and aminophylline on glucose parenteral solution

Ceftazidima é um antimicrobiano administrado por via parenteral, que apresenta amplo espectro de ação, principalmente contra Pseudomonas aeruginosa. O tempo em que a concentração sérica de ceftazidima permanece acima da concentração mínima inibitória (MIC) é um importante parâmetro farmacodinâmico para a determinação da eficácia antimicrobiana e pode ser potencializado através da utilização de infusão contínua em soluções parenterais (PS). Este artigo visa a avaliar a estabilidade da ceftazidima em solução de glicose 5%, na presença e na ausência do fármaco aminofilina, através de cromatografia líquida de alta eficiência HPLC e MIC durante o período de 24 horas. Os microorganismos selecionados para a determinação do MIC foram Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. Os ensaios em cromatógrafo líquido confirmaram a estabilidade dos fármacos ceftazidima e aminofilina quando são individualmente associados em PS, enquanto os valores de MIC ficaram maiores que os valores encontrados na literatura. Quando ambos os fármacos foram associados na mesma solução parenteral a concentração de ceftazidima obtida por HPLC diminuiu 25% depois de 24 horas. Os valores de MIC mostraram maior decaimento da atividade antimicrobiana neste mesmo período e também valores de MIC alterados nas soluções preparadas no tempo zero, decaimento este que não foi detectado em HPLC. Os resultados indicaram incompatibilidade na associação dos fármacos em PS, enfatizando a importância dos resultados de MIC para interações de fármacos.Ceftazidime is a broad spectrum antibiotic administered mainly by the parenteral route, and it is especially effective against Pseudomonas aeruginosa. The period of time in which serum levels exceed the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) is an important pharmacodynamic parameter for its efficacy. One of the forms to extend this period is to administer the antibiotic by continuous infusion, after prior dilution in a Parenteral Solution (PS). The present work assessed the stability of ceftazidime in 5% glucose PS for 24 hours, combined or not with aminophylline, through High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The physicochemical evaluation was accompanied by in vitro antimicrobial activity compared MIC test in the 24-hour period. Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa were the microorganisms chosen for the MIC comparison. The HPLC analysis confirmed ceftazidime and aminophylline individual stability on PS, while the MIC values were slightly higher than the mean described in the literature. When both drugs were associated in the same PS, the ceftazidime concentration by HPLC decreased 25% after 24 hours. Not only did the MIC values show high loss of antibiotic activity within the same period, but also altered MIC values immediately after the preparation, which was not detected by HPLC. Our results indicate that this drug combination is not compatible, even if used right away, and that PS might not be the best vehicle for ceftazidime, emphasizing the importance of the MIC evaluation for drug interactions

A violência sexual infanto-juvenil sob a ótica dos informantes-chave

doi: 10.5216/ree.v12i4.11699 A violência sexual infanto-juvenil apresenta-se como problema de saúde pública por se tratar de um fenômeno complexo e de difícil enfrentamento. Para caracterizar os casos de abuso e exploração sexual infanto-juvenil na região do Triângulo Mineiro/Minas Gerais, realizou-se este estudo de natureza descritiva, transversal e exploratória, por meio de entrevistas com os informantes-chave, no período de julho de 2008 a dezembro de 2009. Dos 26 municípios investigados, houve relato de ocorrência de abuso e exploração sexual infanto-juvenil em 21 municípios (80,8%). A maioria das vítimas é do sexo feminino (83,2%), chegando a quase 90% em algumas microrregiões. As vítimas mais frequentes foram as crianças e os adolescentes, da faixa etária entre 13 e 17 anos de idade (51,0%). O seio familiar é o lócus mais comum destes casos de violência (68,6%). Os resultados apontam que o abuso e exploração sexual infanto-juvenil é uma realidade preocupante na região pesquisada indicando a urgência em se buscar estratégias que possam dar maior visibilidade ao fenômeno e traçar mecanismos para sua prevenção, em uma ação conjunta entre profissionais de diversas áreas de atuação, mormente os da saúde, em razão de se tratar de um complexo problema de saúde pública. Descritores: Abuso sexual da criança; Violência sexual; Assistência integral à saúde da criança e do adolescente

Percepção de familiares e profissionais de saúde sobre a violência institucional à criança hospitalizada

Objetivo: Compreender a percepção de familiares e profissionais de saúde sobre a Violência Institucional à criança hospitalizada. Método: Estudo qualitativo, exploratório-descritivo, de aproximações com o pensamento foucaultiano, realizado em unidade pediátrica de hospital de grande porte em Salvador/Bahia. Participaram 10 mães e 39 profissionais de saúde. A coleta de dados ocorreu entre novembro/2018 e outubro/2019 através de entrevista semiestruturada. Foi realizada análise de conteúdo dos dados, com auxílio do software NVIVO12. O estudo foi aprovado por um comitê de ética e respeitou a Resolução 466/2012. Resultados: A Violência Institucional foi compreendida pelos participantes como: práticas de cuidado abusivas; problemas nas relações entre profissionais, criança e família; precarização da estrutura hospitalar. Conclusão: A percepção de familiares e profissionais de saúde sobre a presença da Violência Institucional no cuidado hospitalar infantil demonstra a necessidade de estabelecer ações para o seu enfrentamento para assegurar a dignidade da criança durante a hospitalização. Palavras-chave: Maus-tratos infantis. Criança hospitalizada. Cuidado da criança