Szénkalitka (fullerén) és hosszú szénláncú, (C30) fordított fázisú szorbensek és szorpciós viszonyok a folyadékkromatográfiában = Carbon-cage (fullerene) and long chain reversed phase adsorbents (C30) and investigation of the sorption equilibrium in liquid chromatography

A kutatás negyedik évében a fullerén kutatások területén két területen értünk el jelentős előrelépést. Fullerének, mint kromatográfiás állófázisok vizsgálatában kimutattuk, hogy szilikagél alapú, fullerén C60 borított szorbensek kiválóan alkalmazhatók hidrofil biomolekulák (foszfopeptidek, glikált peptidek, flavonoidok) koncentrálására, sómentesítésére, frakcionálására. Vizsgáltuk ezen újszerű szorbensek terhelhetőségét, alkalmasságát fehérjeszerkezet meghatározásában. Megállapítottuk, hogy a szokásos fordított fázisú szorbensekhez hasonlítva hidrofil biomolekulák prekoncentrálására sokkal hatásosbban alkalmazhatóak. Fullerének, mint a MALDI-TOF tömegspekrometriában alkalmazható mátrixvegyületek vizsgálatánál bizonyítottuk, hogy a MALDI Tof eljárással csak nehezen analizálható szteroidhormonok (ösztrogének, androgének) ionizálására kitűnően felhasználhatók. C30-as tölteteinket további alkalmazásokban vörösboranalitikában alkalmaztuk. Nagyszámú borminta analízisével kimutattuk, hogy a vörösborok polifenoltartalma erősebben függ a borkészítés technológiájától (a borásztól), mint földrajzi, vagy időjárási körülményektől. Kísérletesen, a C30 állófázisok hatékony elválasztási tulajdonságát kihasználva, elsőként bizonyítottuk, hogy a transz rezveratrol (mely a vörösborok fő kardioprotektív hatóanyaga) oxidádációs terméke közeli UV fény hatására az eddig ismert cisz-rezveratrol mellett egy a szénláncban hármas kötéssel rendelkező polifenol (3,4',5-trihidroxidifenilacetilén). | In the fourth year of our investigations we achieved new results in two fields of fullerene research. It has been demonstrated, that C60 fullerene coated silica stationary phases are excellent for the preconcentration, desalting, fractionating of hydrophilic biomolecules (flavonoids, phosphopeptides, glycopeptides). The loadability of these new phases has been studied. The new phases were found to be excellent for sequence coverage studies of proteins and tryptic digest of proteins. Fullerenes have been used for matrix materials in MALDI TOF mass spectrometry. The ionization of estrogens and androgens were more affective by using C60 or C70 fullerenes as matrices, than any other commonly used matrix material. Our new C30 packings have been extensively used for red wine analysis. It has been found that the most important factor in wine making for high polyphenol contentof wine is the oenologist, rather than geographic or meteorological factors. Exploiting the high separation power of the new C30 phase a new oxidation product of trans-resveratrol has been found. By irradiation of trans resveratrol not only the well known cis-resveratrol has been formed but we detected and described a new tripe-bond polyphenol: 3,4',5-trihydroxy-diphenylacetylene

Új mechanizmusok azonosítása az oxidatív stressz indukálta mitokondrium-függő nekrotikus sejthalálban = Identification of novel mechanisms in the oxidative stress induced mitochondria-related necrotic cell death

Oxidatív stress körülményei között kimutattuk, hogy a PARP enzim gátlása növeli az MKP-1 expresszióját (ez a foszfatáz felelős elsődlegesen a JNK és p38 MAPK inaktivációjáért), ezért szerepet játszhat a PARP gátlás mediálta mitokondriális védelem folyamatában. LPS indukálta szeptikus shock modell rendszeren vizsgáltuk az Akt kináz mitokondriális targetjeit. Normál állatokban nem, míg a szeptikus shockban az MPT (mitochondrial permeability transition) előfordul, így azonosítani tudtuk a folyamatban részt vevő fehérjéket. Először írtuk le, hogy az Akt foszforilálni tudja a ciklofillin D-t, ezzel csökkentve az MPT folyamatát. Különböző technikákkal igazoltuk, hogy a PARP-1 direkt módon (ADP-ribozilálva) képes befolyásolni transzkripciós faktorokat, melyek az MKP-1, 2 illetve 3 expresszió szabályozásában vesznek részt. | In oxidative stress, we provided evidence that PARP inhibition increase the oxidative stress dependent expression of MKP-1 which is the main phosphatase responsible for the inactivation of JNK and p38 MAP kinase, and so it can play a role in the PARP inhibition mediated mitochondrial protection. Using control mouse liver and liver from LPS induced secptic shock models we isolated mitochondria, and isolated proteins by anti-Akt substrate antibodies. That way we could isolate mitochondrial targets of Akt kinase, and comparing the data we could detect which proteins are phosphorylated in septic shock. Since septic shock model animals mitochondrial permeability transition is taking place while in normal liver it is not, therefore these data may show which protein phosphorylation can contribute to mitochondrial permeability transition. Our data firstly indicated that Akt can phosphorylate cyclophilin D and thereby can prevent cyclophilin D dependent mitochondrial permeability transition. We identified the mechanism by which PARP-1 directly modulated (poly-ADP-ribosylates) nuclear transcription factors involved in the regulation of MKP-1, 2 & 3 expression

Investigation of Phenolic Components of Hungarian Wines

Ninety-two wines from the southernmost wine-producing region in Hungary(Villány) were analyzed for their polyphenolic content by high performance liquidchromatography (HPLC). Our results show that wine variety or vintage year could not bedistinguished based on polyphenol content, but winery origin could be. Resveratrolconcentration is mainly dependent on variety and vintage year. The “human factor†(i.e.,winemaking style and technology) seems to be more decisive for the polyphenoliccomposition of red wines than other factors, such as variety and vintage year